基于金纳米团簇的比率型pH荧光探针制备及表征

在合成牛血清白蛋白(BSA)修饰的金纳米团簇(金簇)的基础上,将荧光素异硫氰酸酯(FITC)与金簇偶联,构建一种新型比率型p H荧光探针。当体系p H值在4.0~10.0之间变化时,FITC的荧光强度逐渐增加,而金簇的荧光强度基本保持不变。在p H为5.5~8.0之间,该探针对于p H具有良好的线性关系,线性方程为Y=1.72X-8.8,相对标准偏差为0.994,同时该探针在p H为6.0~9.0之间还具有良好的可逆性。此外,将此p H荧光探针与PK15细胞共培养,通过MTT实验证明该比率型p H荧光探针对细胞几乎没有毒性。     

HRP/Au/Cys/GCE的制备及其电化学行为

采用循环伏安法将巯基乙胺共价修饰至玻碳电极表面,巯基再键合纳米金,用循环伏安法表征了该纳米金修饰电极.纳米金吸附辣根过氧化物酶,将其固载于电极表面,酶与电极之间直接传递电子且能催化还原H2O2,可用于H2O2的测定.     

基于链替代扩增-纳米金比色直观检测单链核酸方法的研究

[目的]将链替代扩增技术与核酸修饰纳米金积聚变色的光学特性相结合,设计了一种新型的直观检测3′端暴露单链核酸的方法,实现对单链核酸的高灵敏度检测。[方法]设计一条含有硫代修饰酶切位点的单链核酸（ZDNA）,其酶切位点5′端是能将核酸修饰纳米金变色的Linker序列,3′端是能与Target单链核酸3′端完全互补的H序列。当无Target存在时,Linker会充分暴露,能使核酸修饰纳米金积聚呈现紫色;但是当Target存在时,会与H序列完全互补,作为ZDNA的引物进入链替代扩增循环,形成的新链不断与Linker序列互补,不能使核酸修饰纳米金积聚呈现红色,从而间接检测了Target单链核酸。[结果]通过一系列试验确定检测体系,具体为：40μl修饰纳米金溶液（0.52 nmol/L）加入10μl酶循环体系（ZDNA20 nmol/L,33 mmol/L Tris-HCl（pH值7.9）;10 mmol/L MgCl2;66 mmol/LNaCl;0.5 mmol/LdNTP;0.1 mg/ml BSA;0.05 U/μl klenow;1 U/μl Hinc II）,直观或紫外检测并绘制Target浓度与纳米金积聚程度的标准曲线,表明Target浓度在1~200 pmol/L的范围内呈现良好的线性关系,R2=0.946,最低检测限是1 pmol/L。[结论]链替代扩增-纳米金比色检测单链核酸方法简便、直观、成本低,与传统修饰纳米金比色检测DNA方法相比,灵敏度提高了104倍。     

朊病毒病生物标记microRNA-142-3p可视化快速检测

为了更快捷、方便的检测朊病毒病,根据已有报道确定micro RNA-144-3p作为朊病毒病的生物标记,通过mi RBase数据库公布的micro RNA-142-3p的核酸序列,设计特异性标记有生物素的俘获探针和标记有FAM的检测探针,从而建立了纳米金偶联核酸试纸条的高效,快捷,可视化检测方法。结果表明:该检测方法具有良好的特异性和较高的灵敏度(0.005 nmol·L-1)。该检测试纸条的建立在朊病毒病预防,控制,诊断过程中具有一定实际意义。     

基于Au@Ag/碳纳米管的SERS-荧光双模探针癌细胞成像应用研究

报告了一种基于Au@Ag/碳纳米管(CNTs)的SERS-荧光双模细胞成像探针,其可以产生表面增强拉曼散射(SERS)和荧光信号。在这种探针中,金/银核壳纳米粒子(Au@Ag NPs)作为SERS增强基底首先通过静电作用组装到碳纳米管表面,然后标记4-巯基苯甲酸(4MBA)以产生SERS信号,接着通过氨基与硫碳胺键作用将异硫氰酸荧光素(FITC)和碳纳米管连接以产生荧光信号。使用HeLa细胞作为模型癌细胞,通过荧光和SERS成像结果证实了所提出的探针可以实现细胞成像功能。     

三维结构金纳米粒子/微过氧化物酶-11薄膜电极对过氧化氢的电化学催化

将氨基苯硫酚修饰在金纳米粒子和微过氧化物酶-11上,再将金丝电极置于上述功能化的金纳米粒子溶胶和微过氧化物酶混合分散系中,采用电聚合法制备了以双巯基苯胺为连接剂的三维结构金纳米粒子/微过氧化物酶-11薄膜电极,该电极中的微过氧化物酶-11对过氧化氢的电化学还原有良好的电化学催化作用。     

纳米金修饰电极的制备及其对亚硝酸根的测定

采用恒电位电沉积氯金酸法、循环伏安电沉积氯金酸法、恒电位电沉积金溶胶法和滴涂金溶胶法在玻碳电极表面修饰纳米金,以亚铁氰化钾为电活性探针,对4种纳米金修饰电极的制备方法分别进行了优化,并对亚铁氰化钾在4种修饰电极表面的电化学响应情况进行了比较,对亚硝酸根在该修饰电极上的电化学行为进行了研究.结果表明:利用恒电位电沉积氯金酸法制备的纳米金修饰电极对亚铁氰化钾具有良好的电催化活性.在最优的试验条件下,亚硝酸根的氧化峰电流与其浓度在1.0×10-6~1.1×10-2mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为3.8×10-7mol/L.运用该电极对水样中的亚硝酸根浓度进行检测,准确度和精密度均较高.     

嵌段共聚聚丙烯结晶性能的研究

采用恒电位电沉积氯金酸法、循环伏安电沉积氯金酸法、恒电位电沉积金溶胶法和滴涂金溶胶法在玻碳电极表面修饰纳米金,以亚铁氰化钾为电活性探针,对4种纳米金修饰电极的制备方法分别进行了优化,并对亚铁氰化钾在4种修饰电极表面的电化学响应情况进行了比较,对亚硝酸根在该修饰电极上的电化学行为进行了研究.结果表明:利用恒电位电沉积氯金酸法制备的纳米金修饰电极对亚铁氰化钾具有良好的电催化活性.在最优的试验条件下,亚硝酸根的氧化峰电流与其浓度在1.0×10-6~1.1×10-2mol/L范围内呈良好的线性关系,检出限为3.8×10-7mol/L.运用该电极对水样中的亚硝酸根浓度进行检测,准确度和精密度均较高.     

用非放射性的Digoxigenin标记的DNA探针检出马立克病病毒DNA

用非放射性的Digoxigenin标记的Ⅰ型马立克病病毒特异性DNA探针,杂交反应可有效地检出通过Southern blot及Dot blot固定到硝酸纤维膜上的同型病毒的DNA,其特性及敏感性均不低于放射性~(32)p标记的相同DNA探针。     

地高辛3′末端标记检测效率的分析

[目的]为核酸杂交试验提供依据。[方法]利用3个不同长度的核酸探针进行3′末端地高辛标记,并对标记效率进行检测,研究探针的长度和浓度及其在尼龙膜上的固定方法对其信号强度的影响。[结果]聚丙烯酰胺凝胶电泳结果表明地高辛标记的探针比未标记探针滞后,说明标记较为成功。检测信号强度随探针摩尔浓度的降低而降低。探针的固定方法对信号强度也有一定的影响。紫外交联和高温烘烤均能使检测信号增强,而使用紫外交联的信号强度较高。[结论]地高辛检测的信号强度与探针的长度、浓度、固定方法以及核酸与膜的结合效率有关。