荷花花粉活力的检测方法比较分析

为探究快速有效地检测荷花花粉活力的方法,选出适用于大部分荷花花粉萌发的培养基,筛选花粉活力较高的品种,以11份不同资源荷花的花粉为材料,利用离体培养法、I₂-KI染色法、2,3,5-氯化三苯基四氮唑（TTC）染色法对荷花花粉活力进行检测。结果表明,I₂-KI染色法和TTC染色法检测得到的花粉染色率均与离体培养得到的萌发率结果不符。易建莲花粉萌发率在5-1培养基（10%PEG 4000、0.02%硼酸、0.1%蔗糖）上最高,为9.86%。野生莲中的泰国莲、越南莲的花粉离体萌发率分别为16.45%、16.67%,品种荷花中单洒锦的离体萌发率则高达18.46%。由研究结果得出:（1）3种花粉活力测定方法中,离体培养法适用于检测荷花的花粉活力,而I₂-KI染色法和TTC染色法并不适合;（2）适合荷花花粉萌发的培养基是含10%PEG 4000、0.02%硼酸、0.1%蔗糖的液体培养基;（3）野生莲中,泰国莲、越南莲的花粉活力较高,而在品种荷花中,单洒锦的花粉活力最高。     

杨梅花粉活力检测及储藏方法研究

对杨梅（Myrica rubra Sieb. & Zucc.）花粉活力检测和储藏方法进行了研究。筛选出最佳的杨梅花粉活力离体萌发检测法：用毛笔轻刷花粉至固体培养基（15％蔗糖,0.01％硼酸,1％琼脂）上,22℃黑暗培养10 h,显微观测花粉萌发率。20℃储藏时,经硅胶干燥处理能延长杨梅花粉活力保存时间。与20℃相比,低温保存能明显延长杨梅花粉活力,在4,-20和-80℃保存100 d后,花粉萌发率分别是12%,37.5%和48%。     

银杏花粉生活力测定及贮藏方法的优化

以银杏花粉为试验材料,研究了花粉在离体培养条件下,培养基中蔗糖、硼、钙对其萌发率的影响,优化了培养基配方;并比较了3种不同的染色法对银杏花粉生活力的测定效果。结果表明：培养5d是进行花粉萌发率测定的最佳时期,蔗糖对银杏花粉萌发至关重要,在培养基中添加3%蔗糖可有效提高花粉萌发率,达到50%左右;硼和钙对银杏花粉萌发有一定的促进作用,最佳培养基配方为蔗糖3%＋硼60mg/L＋钙100mg/L。TTC染色法测定的银杏花粉生活力与离体萌发法测定的结果可以相互代替和印证,是一种较为准确的测定银杏花粉生活力的染色法。4℃冰箱干燥保存利于保持银杏花粉生活力。     

玉米自交系花粉生活力的研究

试验以玉米自交系478为材料, 研究了不同温度, 培养基中不同蔗糖浓度, GA3 和硼酸等因子对玉米自交系花粉萌发的影响, 以及超声波处理后花粉萌发情况。结果表明: 24~27℃温度条件最适于玉米花粉萌发, 15%蔗糖时花粉的萌发率最高, 25~50mg/L硼酸和40mg/LGA3 对花粉的萌发有较好的促进作用。随着超声波处理强度的加大, 花粉的萌发率也在降低。     

凤丹白牡丹花粉活力测定

为充分利用东北地区适应性牡丹品种凤丹白进行杂交育种,采用离体萌发法研究其花粉活力,比较蔗糖及H_2BO_3浓度对花粉萌发率的影响,并在适宜培养浓度条件下观察花粉的萌发动态。结果表明:在凤丹白花粉离体萌发试验中硼酸与蔗糖有着重要的影响,0.05g·L~(-1) H_2BO_3+90g·L~(-1)蔗糖浓度培养基为凤丹白最佳花粉培养基,花粉萌发率可达73.7%,花粉萌发出现高峰时段在离体培养的2h后,因培养基浓度不同出现的时间也不相同。     

拟南芥花粉体外和体内2种萌发差异的比较研究

[目的]比较拟南芥花粉体外和体内2种萌发的差异。[方法]以模式植物拟南芥作为研究对象,采用荧光显微镜观察比较2种体外萌发培养基的萌发率差异并比较体外萌发率和体内萌发率的差异。[结果]花粉在固体培养基上的萌发率平均为51.01%,而在液体培养基上萌发率平均为83.97%;在体外,液体萌发培养基优于固体萌发培养基,液体培养基萌发率较固体培养基萌发率高,稳定;体内萌发较体外萌发稳定,萌发率高,平均萌发率为94.00%。[结论]研究结果为检测花粉活力提供了一个有效的检测标准,为拟南芥花粉的生物学研究提供理论与方法。     

细萼连蕊茶花粉生活力和贮藏力研究

研究探索了碳源与温度对细萼连蕊茶(Camellia tsofui Chien)花粉萌发的影响,以期为利用该物种进行山茶杂交育种提供技术支持。采用培养基法,研究了碳源种类(蔗糖、乳糖、葡萄糖、麦芽糖和山梨醇)、浓度(0.146~0.876 mol/L)、低温(5~25℃)或高温(30~40℃)处理以及低温(-80℃)贮藏对长柄山茶花粉萌发的影响。结果表明:花粉在含有0.292 mol/L蔗糖的培养基中萌发率较高,可达20.07%。低温处理(5~25℃)对花粉萌发无不良影响,但高温(≥30℃)处理造成花粉萌发率显著降低。而经35℃处理6 h后,花粉萌发率显著下降至3.17%。室温下自然干燥24 h后于-80℃条件贮藏12个月,花粉萌发率仍可达11.54%。研究表明,蔗糖是细萼连蕊茶花粉培养的适宜碳源;高温(≥30℃)不利于花粉萌发;低温(-80℃)贮藏可在1年内维持花粉较高活力。     

神农香菊花粉萌发的研究

[目的]为新芳香资源植物神农香菊的进一步品种改良提供参考。[方法]用改良ME3作花粉萌发基本培养基,将材料培养在含有不同浓度蔗糖（62.5、125.03、33.0 g/L）及聚乙二醇（PEG）（50 2、00、400 g/L）的培养基上,分别在20、25、30℃温度下培养,研究不同温度、不同浓度蔗糖及PEG对神农香菊花粉萌发的影响。[结果]蔗糖对花粉萌发有促进作用,并且低浓度蔗糖对花粉萌发更有利,较高浓度的蔗糖抑制作用明显。PEG溶液能一定程度地促进神农香菊花粉萌发,浓度200 g/L的PEG对神农香菊花粉萌发促进作用最明显,平均萌发率达到6.61%。20℃对花粉萌发最有利,平均萌发率最高,可达7.90%,随着温度的升高,萌发率反而降低。[结论]蔗糖对神农香菊花粉萌发有促进作用,并且低浓度蔗糖对花粉萌发更有利;PEG溶液对神农香菊花粉萌发有促进作用,浓度200 g/L的PEG作用最明显;20和25℃对花粉萌发均较为有利。     

番茄属(Lycopersicon)花粉萌发培养基组分的优化

以番茄属４个种的花粉作试材,共用３组２２个培养基配方,在研究硼酸和蔗糖浓度对花 粉萌发和花粉管伸长影响的基础上,对番茄属花粉萌发培养基配方进行了优化。研究结果在明,番 茄属离体花粉萌发培养基的最佳组成是：蔗糖１３％、硼酸１５０ｍｇ·ｋｇ~（－１）、琼脂１％。     

海南原生墨兰花粉萌发试验初报

为探讨海南原生兰花花粉萌发所需的培养基成分,测定其生活力提供技术和方法,以海南原生墨兰为材料,采用不同的液体培养基进行花粉萌发试验。试验结果表明:海南原生墨兰花粉在所设计的液体培养基上都易萌发且萌发花粉管长。除对照外,7个处理萌发率高达78%以上。在含10%蔗糖,20mg/L硼酸和5mg/LCaCl_2的液体培养基上培养的萌发率为83.99%,效果较好,本着简便原则,可应用于海南原生墨兰花粉生活力的鉴定。     

仙客来花粉生活力及发芽率的测定

采用TTC染色法对仙客来7个品种的花粉生活力进行了测定。结果表明:仙客来不同品种的花粉生活力在15.30%~51.41%之间,品种间差异显著。培养基法对3个仙客来品种花粉发芽率测定结果表明,品种、蔗糖浓度对花粉发芽率影响显著。其中美国山脊白色发芽率最高,培养基最优组合为15%蔗糖+2%琼脂+0.1%硼酸。     

玉米种子萌发响应淹水胁迫的定量蛋白质组学研究

[目的]从蛋白质组水平上研究淹水胁迫对玉米种子萌发的影响,筛选重要蛋白质,阐明相关的代谢通路,为深入研究植物种子萌发过程中的耐淹机制提供新的思路。[方法]以玉米自交系196为试验材料,对种子萌发进行淹水胁迫72 h处理,利用TMT标记结合LC-MS/MS的定量蛋白质组学技术对蛋白质组成进行分析,对差异表达的蛋白质进行鉴定及功能分析。[结果]此次试验总共鉴定到1 456个蛋白,通过比较、筛选,鉴定到281个差异蛋白,其中244个上调蛋白,37个下调蛋白。通过对差异表达的蛋白质进行了GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,发现这些差异蛋白大多参与了碳代谢、糖酵解过程、氨基酸代谢、抗逆与胁迫等过程。[结论]试验表明淹水胁迫抑制了玉米种子的萌发,通过不同代谢类型的动态变化和不同的信号转导来提高种子耐受性。     

晚熟李花粉生活力及柱头可授性研究

以晚熟李品种‘龙眼秋李’、‘黑宝石’、‘安哥诺’为试材,采用花粉离体萌发试验测定花粉生活力,用联苯胺—过氧化氢法和田间套袋法测定了其柱头的可授性。结果表明:蔗糖和硼砂浓度对晚熟李花粉生活力均有显著影响。3个李品种均在10%蔗糖浓度下萌发率最高,分别为36.61%、21.33%和12.97%。蔗糖浓度高低影响花粉萌发率,适宜硼砂浓度明显促进花粉萌发,晚熟李花粉萌发适宜条件为1%琼脂+10%蔗糖+50 mg/L硼砂。柱头的可授性可持续3 d,但开花后1~2 d的可授性最强。     

大叶杨花粉离体萌发和贮藏条件的研究

以15～20 a生大叶杨(Populus lasiocarpa Oliv.)花粉为试材,研究了不同培养基对其萌发的作用,初步探讨了贮藏温度对花粉生活力的影响.结果表明,花粉在25℃下培养24 h萌发率趋于稳定;培养基中添加蔗糖和H3BO3可使花粉萌发率显著提高;随蔗糖和H3BO3浓度升高,萌发率呈现先升高再降低的趋势,...     

花粉生活力与苦瓜植株耐冷性的关系

[目的]探索花粉萌发率与苦瓜植株耐冷性的关系,为筛选强耐冷性苦瓜品种提供参考.[方法]在9、12、15、18和25℃温度条件下,将10个苦瓜材料的花粉在培养基中培养,调查花粉萌发率,筛选可区别苦瓜材料的适宜温度.利用筛选的温度对不同苦瓜材料花粉萌发进行测定,同时苗期进行10℃冷害指数测定,分析两者的相关性.[结果]15℃可作为区别不同材料花粉萌发率的适宜温度.根据不同苦瓜材料在15℃下花粉萌发率和10℃低温处理的冷害指数差异显著性,均可将参试苦瓜材料分为3个耐冷类型,两者反映的苦瓜耐低温性能基本一致.15℃苦瓜花粉低温萌发率与植株冷害指数间呈显著负相关,相关系数为-0.8646.[结论]花粉低温萌发率可作为苦瓜品种耐冷性的鉴定指标.     

茵芋花粉培养效应的优化

为研究茵芋花粉的培养效应,采用蔗糖、硼酸、氯化钙三因素三水平培养基离体培养法,I2—KI、TTC、红墨水等染色法,以及生物荧光显微镜对花粉活力进行观察与检测,筛选有活力的花粉的最适培养基及活力测定方法.结果表明,新鲜茵芋花粉粒呈黄色,花粉离体后逐渐转变为黄褐色.I2—KI、TTC对花粉染色无效;红墨水染色法使有活力的花粉在蓝色滤光片下呈绿色或原色,能够快速有效地检测花粉活力.花粉于25℃的恒温下离体培养4 h开始萌发,至24 h萌发稳定.蔗糖、硼酸、氯化钙三因素三水平培养基离体培养对花粉萌发的互作效应极显著,最优培养基为:15 g·L~(-1)蔗糖+0.05 g·L~(-1)硼酸+0.02 g·L~(-1)氯化钙,萌发率为60.0%;次优培养基为:15 g·L~(-1)蔗糖+0.03 g·L~(-1)硼酸+0.02 g·L~(-1)氯化钙,萌发率为58.0%;第三培养基为:15 g·L~(-1)蔗糖+0.01 g·L~(-1)硼酸+0.01 g·L~(-1)氯化钙,萌发率为50.4%.影响茵芋花粉萌发的主因素为氯化钙,次因素为蔗糖,辅助因素为硼酸.     

临界胁迫贮藏条件下不同基因型玉米种子活力及生理变化

【目的】了解不同基因型玉米种子在临界胁迫贮藏条件下的生活力及生理变化规律,对不同基因型玉米种子的耐贮性做出客观评价,为玉米种子耐贮性生理生化机制提供理论依据。【方法】选用目前主栽玉米杂交种郑单958、农大108、先玉335、正大619、京科968种子为试验材料,分别测定供试材料的初始含水量、活力水平及相关生理指标。将供试材料的种子含水量回湿至14%,在种子含水量14%和贮藏温度35℃（14% & 35℃）的临界胁迫贮藏条件下,贮藏一年时间,每月测定种子发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数、电导率、MDA浓度、可溶性蛋白含量、可溶性糖含量及脱氢酶活性。采用砂培法进行发芽试验,用DDS-ⅡA型电导率仪测定种子电导率,利用硫代巴比妥酸（TBA）溶液法测定丙二醛含量,可溶性蛋白含量的测定利用考马斯亮蓝G-250法,可溶性糖含量的测定利用蒽酮比色法,脱氢酶活性的测定采用氮蓝四唑（TTC）染色法。比较不同基因型玉米种子在临界胁迫贮藏条件下的活力及生理指标变化。【结果】在同一贮藏条件下,基因型是影响种子活力及生理特性的决定性因素。参试玉米种子的初始含水量均处于较低水平,为7.39%-8.71%。在初始状态下,各基因型玉米种子的发芽势及发芽率均在90%以上,具有较强的萌发能力。贮藏一年后,京科968发芽率、发芽势为50%-60%,发芽指数为25%,种子活力指数为0.3;农大108、先玉335、正大619发芽率、发芽势为15%-25%,发芽指数8%-25%,活力指数0-0.08;郑单958发芽率、发芽势、发芽指数活力指数在贮藏1年后均下降为0。临界胁迫贮藏条件下不同基因型玉米种子随着贮藏时间的延长,发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数与可溶性蛋白含量、可溶性糖含量、脱氢酶活性均出现不同程度的下降,种子可溶性蛋白含量和可溶性糖含量的变化与种子活力的变化关系密切。发芽势、发芽率、发芽指数、活力指数的变化趋势及规律基本一致,但变幅差异较大,不同基因型玉米种子因发芽速率不同发芽指数差异较大,而种子活力指数的降低总是先于种子发芽率的下降,可以真实体现种子的老化及劣变程度。不同基因型玉米种子随着贮藏时间的延长,膜透性变差,种子电导率及丙二醛含量均出现了不同程度的升高,其变化趋势及种子生活力变化呈负相关关系（R²=0.752）,各基因型间细胞膜系统功能存在差异。在本试验中,不同基因型玉米种子活力与丙二醛含量无显著相关性（R²=-0.171--0.094）,与可溶性蛋白含量、可溶性糖含量以及脱氢酶活性呈显著正相关（R²=0.284-0.517）,但各基因型间玉米种子生理变化机制复杂,差距较大。【结论】不同基因型玉米种子对临界胁迫贮藏条件表现均较敏感,但基因型间存在较大差异,在临界胁迫贮藏条件下,郑单958的活力下降最快,京科968活力及各项生理指标变化相对稳定,表现出较强的耐贮性。     

梅花粉生活力和授粉亲合力的测定

试验结果:①梅的花对低温的忍耐力较强,花粉发芽所要求的温度较低,适应范围较广;低浓度的蔗糖琼脂培养基对花粉发育有利,高浓度的培养基对梅的花粉发芽有抑制作用。②梅是自花能结实的果树,但异花授粉更能增产。     

水分胁迫对玉米萌芽期和苗期生长的影响

[目的]为了研究水分胁迫对玉米萌芽期和苗期生长的影响。[方法]用PEG高渗溶液模拟干旱条件,以抗旱性不同的玉米自交系为材料,研究了玉米萌芽期和苗期水分胁迫对其生长的影响及生理指标的变化与抗旱性的关系。[结果]各玉米自交系发芽率、叶片鲜干比明显下降,抗旱性强的自交系下降的幅度较小;根冠比、MDA含量和CAT、SOD酶活性均有一定程度升高,抗旱性强的自交系升高的幅度较大。萌芽期发芽率、苗期叶片鲜干比、根冠比、失水率、MDA含量及SOD和CAT酶活性与玉米抗旱性都有明显的相关性,可作为玉米抗旱性的鉴定指标。[结论]该研究为玉米早期抗旱育种提供了参考。     

国内外骨干玉米自交系耐低温萌发能力综合评价

【目的】 选用来自美国、德国、前南斯拉夫、加拿大和中国的玉米种质,研究耐低温萌发能力,筛选耐低温萌发能力强的种质,为耐低温种质改良和新品种选育提供材料基础和技术支撑。【方法】 以74份玉米自交系为材料,运用田间直接鉴定法和室内鉴定法,调查测定标准发芽率(SGR)、冷浸发芽率(CIGR)、田间常温出苗势(NFEP)、田间常温出苗率(NFER)、田间低温出苗势(LFEP)、田间低温出苗率(LFER)、田间常温发芽指数(NFGI)、田间常温活力指数(NFVI)、田间低温发芽指数(LFGI)和田间低温活力指数(LFVI)等10个指标,运用隶属函数法和多元统计方法分析对玉米种子耐低温萌发能力,并综合评价。【结果】 参试玉米自交系耐低温萌发能力存在丰富的遗传变异,10个鉴定指标的遗传变异系数在10.10%~145.47%,累计贡献率为73.554%,回归建立了玉米自交系种子耐低温萌发能力综合评价数学模型Y_耐低温=0.162+0.250X_NFGI+0.246X_LFGI,预测结果与隶属函数值(L)法的评价结果基本一致。最后基于耐低温萌发能力综合评价值,将74份自交系分为5个等级,筛选出耐低温萌发能力极强自交系1份,耐低温萌发能力较强的自交系12份,耐低温萌发能力中等的自交系45份,耐低温萌发能力较弱的自交系13份,耐低温萌发能力极弱的自交系3份。【结论】 筛选出的耐低温萌发能力极弱自交系Shen137、D3M、JSH2402和耐低温萌发能力极强的自交系Xinzi3113,将应用于耐低温QTL定位,种质创新及新品种选育研究中。常温田间发芽指数和低温田间发芽指数可作为评价自交系耐低温能力的主要指标。