pH对百子莲体胚诱导期生理特性的影响

合适的培养基pH可维持离体培养所需的酸碱环境,保证细胞的正常生理代谢。为了优化百子莲体胚诱导期培养基pH,并初步揭示不同pH对百子莲内源激素、碳源代谢、氧化胁迫等生理特性的影响,以百子莲小花梗为外植体诱导的胚性愈伤组织为试材,研究梯度pH(5.6、5.8、6.0、6.2)对幼胚(YSE)、成熟胚(MSE)诱导的影响,用酶联免疫法(ELISA)测定不同pH处理下YSE、MSE生理特性的差异,并将pH、体胚数量、生理指标进行相关性分析。结果表明,YSE、MSE阶段较佳的培养基pH分别为6.0和6.2。YSE诱导阶段,内源IAA含量与YSE数量呈极显著(P<0.01)正相关,而GA₁含量与YSE数量呈显著(P<0.05)负相关。MSE阶段,pH与MSE数量、IAA氧化酶活性、蔗糖含量呈显著(P<0.05)正相关,IAA氧化酶活性与MSE数量呈极显著(P<0.01)正相关,GA₄含量、蔗糖含量与MSE数量均具有较强的相关性。H₂O₂与YSE数量呈负相关,与MSE数量呈正相关,POD活...     

百子莲(Agapanthuspraecoxssp.orientalis)开花生理特征的研究

以百子莲为材料,研究了从营养生长到生殖生长整个过程中茎尖和叶片中的核酸、可溶性蛋白、淀粉、可溶性糖及淀粉酶含量的变化。结果表明：各项生理指标均在生理转变期和盛花期有显著的提高。在整个发育过程中,RNA含量和RNA/DNA比值在叶片中呈双峰曲线变化,在茎尖中呈单峰曲线变化;叶片中淀粉含量呈先上升后下降的趋势,茎尖中的淀粉含量从花芽分化开始一直持续下降到盛花期又显著上升;叶片中可溶性糖含量从花芽分化期一直保持较低水平,茎尖中可溶性糖含量在花芽分化前显著升高,随后下降,到花芽分化期与发育期又明显升高。叶片中淀粉含量、可溶性糖含量及淀粉酶活性始终低于茎尖。     

不同水培营养液浓度对百子莲生长发育的影响

为了开拓百子莲应用前景,以二年生百子莲(Agapanthus praecox‘Big Blue’)实生苗为材料,采用不同浓度莫拉德营养液水培的方式,筛选出最适合百子莲生长的营养液浓度。结果表明:百子莲在1/2浓度的莫拉德营养液中植株生长表现最佳,生物量最大;其次是1/4浓度的莫拉德营养液和莫拉德营养液,清水中表现最差。因此,1/2浓度的莫拉德营养液是最适合百子莲水培的营养液。     

植物生长延缓剂对百子莲开花的影响

采用不同浓度的多效唑（PP333）,矮壮素（CCC）和比久（B9）处理盆栽百子莲。结果表明：PP333处理浓度为1000mg/L时,推迟始花期9d,浓度为200mg/L时,延长花期持续时间近6d;施用20000mg/L的B9推迟始花期3d,延长花期持续时间2d;施用2000mg/L的CCC提前始花期3d,缩短花期持续时间2d,花径缩小12.26%,植株全部开花;3种延缓剂均使百子莲最高净花率下降,花葶增粗,PP333与CCC处理使花葶矮化。     

百子莲无土栽培营养液配方的研究

为提高百子莲的生产效率和花朵品质,降低百子莲的生产成本,促进百子莲的推广应用。本研究以两年生百子莲组培苗为材料,以无土基质配比组合(玉米秸秆∶百子莲腐叶∶炉渣=1∶2∶1)为栽培基质。试验营养液是在改良Hoagland营养液配方基础上,分别从浓度、铁盐含量和pH三个因素的三水平入手,按正交组合方法进行设计。从各营养液对百子莲形态及生理等指标的影响进行对比分析。结果表明:pH 6.5的0.5倍浓度添加1.2倍铁盐含量的无土基质栽培百子莲植株生长健壮,干物质积累迅速,抗外界胁迫能力强,是百子莲无土基质栽培的最佳的营养液处理配方。     

干旱和盐胁迫下百子莲的抗逆生理研究

以蓝色大花百子莲实生苗作为材料进行干旱和盐处理,从抗逆生理层面探索其在干旱和盐胁迫下的耐受能力,为其在干旱和盐碱环境下的园林应用提供科学的指导依据。研究结果表明,园土培养下百子莲能够完全耐受约30 d的断水干旱胁迫;盐处理下的半致死NaCl浓度为1.29%。生理指标测定结果显示,干旱和盐胁迫提高了百子莲叶片的细胞膜透性、丙二醛(MDA)与总可溶性蛋白(TSP)含量。干旱胁迫下叶绿素(Chl)含量先升后降,盐胁迫下维持稳定。干旱胁迫下,超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)活性在胁迫30 d时显著(P<0.05)升高而后下降,过氧化氢酶(CAT)活性持续下降;盐胁迫下3种抗氧化酶均表现为由高活性降低的趋势。基因表达结果显示,两种胁迫下百子莲的抗氧化基因响应有所差异,Cu/Zn-SOD、POD、APX和GPX积极响应干旱胁迫信号,Cu/Zn-SOD、POD和GPX参与响应盐胁迫信号。主成分分析结果表明,可从膜脂过氧化程度、抗氧化酶活性、渗透调节物质含量来评价百子莲对干旱的耐受能力,从抗氧化酶活性评价百子莲对高盐的耐受能力。     

低温预处理对大豆未成熟子叶胚胎发生影响的研究

选用3个栽培大豆品种的未成熟子叶在接种前用4℃低温预处理幼苗0，2，3，4，5，6d,研究低温预处理对大豆体细胞胚胎发生的影响。结果表明：4℃低温预处理幼荚3－4d，可刺激大豆体细胞胚胎发生，提高胚胎发生频率。不同品种对低温预处理的反应基本一致。     

百子莲CONSTANS同源基因的克隆及表达分析

根据前期百子莲转录组测序分析的结果,获得了1 个与光周期调控开花途径关键基因CONSTANS(CO)同源 性较高的核心片段。采用cDNA 末端快速扩增(RACE) 方法得到了百子莲CO 基因cDNA 全长序列,命名为 ApCOL,GenBank 登录号为KF683287。序列分析表明,百子莲ApCOL 基因cDNA 全长1 648 bp,5非编码区(5UTR) 和3非编码区(3UTR)分别为126 和355 bp,开放阅读框(ORF,127 ~ 1 293 bp)1 167 bp,编码388 个氨基酸。 ApCOL 具有CO 蛋白典型的结构域:氨基末端有2 个B-box 结构域,羧基末端有1 个CCT 保守结构域。氨基酸同源 性比对发现,ApCOL 与葡萄(XP_002274384.2)、可可(EOX99181.1)和大豆(NP_001241023.1)等植物的CO 蛋白有 很高的相似性,同源性均在50%以上。系统进化树分析表明,ApCOL 与小麦CO(EMS51329.1)聚类关系最近。实 时荧光定量qRT-PCR 结果表明:叶片中ApCOL 的表达量在花芽分化3 个时期均高于花芽中的表达量,且叶片中的 最高表达量和花芽中最低表达量均出现在花芽诱导期;在整个初花期内,各器官中ApCOL 表达量由高到低依次是 花梗、叶片、幼果、子房、花瓣、茎和花葶,花梗中表达量分别为叶片和茎中的2.68 和114.3 倍;不同光周期处理的叶 片中ApCOL 基因表达模式相近,均在暗处理时期呈现高表达。说明该基因的表达具有明显的时空差异性和生物钟 调节特性,推测ApCOL 在百子莲成花过程中以及花发育过程中发挥着一定的作用。      

太空搭载对百子莲SP_1代生长特性的影响

利用太空搭载百子莲DBH、BB、DB早花、DB大花4个品种的种子,通过盆栽试验观测其SP1代搭载效应。结果表明,搭载后DBH、DB早花的出苗率极显著提高,BB的出苗率显著提高,而DB大花的出苗率受空间条件抑制为0;BB的株高显著增高,DB早花的叶长、叶最大宽度、冠幅显著减小;BB、DBH分蘖数增加而DB早花减少,BB、DBH、DB早花的叶片、茎干、根鲜重均大于地面对照,但干重均低于地面对照。     

低温预处理和基因型对甘蓝型油菜小孢子胚胎发生的影响

以生长在大田自然环境下的16个甘蓝型油菜品种(系)和杂交组合为材料进行游离小孢子培养,探讨材料的低温预处理方式、处理时间、花序长度及其基因型对油菜小孢子胚胎发生的影响。结果表明,冷冻处理的油菜花序,其小孢子无胚胎发生能力;30～40cm长的花序冷藏处理10d,小孢子仍有一定的胚胎发生能力;花序长度在0～40cm时,用于处理的花序越长,则能进行小孢子胚胎发生的花序的有效处理时间越长;但随着花序处理时间的延长,小孢子产胚率有下降的趋势。此外,材料的基因型对小孢子产胚率有重要影响。     

百子莲的盆栽矮化研究

[目的]为更好地调控植物生长提供一定的理论依据。[方法]采用不同浓度的多效唑（PP333）和矮壮素（CCC））处理盆栽百子莲,研究2种物质对盆栽百子莲的矮化效果。[结果]浓度500和1 000 mg/L的矮壮素和多效唑对2和4年生的百子莲植株都有很好的矮化作用,但是高浓度的多效唑会使植株产生药害。浓度500和1 000 mg/L的矮壮素对2年生植株花葶的矮化和增粗都有很好的效果,浓度500和1 000 mg/L的多效唑会使2年生植株产生药害,无法开花。浓度500 mg/L的矮壮素对4年生植株的花葶矮化和增粗效果最好。[结论]低浓度的矮壮素和多效唑有利于百子莲的盆栽矮化。     

龙眼体细胞胚胎发生过程中内源多胺的变化

采用高效液相色谱测定了龙眼胚性愈伤组织体胚发生过程中内源多胺含量的变化.结果表明:龙眼胚性愈伤组织中内源多胺含量比非胚性愈伤组织高;体胚发生过程中内源多胺含量变化趋势大致呈“M”状,在胚性愈伤组织Ⅱ和球形胚阶段转折;内源多胺含量的变化先于形态学的变化.     

百子莲胚性愈伤组织在超低温过程中的 蛋白质组学研究

【目的】从蛋白质组学层面揭示植物胚性细胞对超低温保存复合逆境的响应调控机制,筛选出百子莲胚性愈伤组织在超低温保存中的差异表达蛋白,进一步丰富观赏植物超低温保存的分子生物学理论。【方法】利用iTRAQ技术鉴定百子莲胚性愈伤组织在超低温保存四个关键步骤(预培养、玻璃化脱水处理、洗涤和恢复培养)中的差异表达蛋白,应用生物信息学分析方法构建细胞响应超低温保存复合逆境的蛋白调控网络,筛选出植物超低温逆境保护类蛋白。【结果】共鉴定到2730种蛋白,筛选出821个差异表达蛋白。GO功能注释分析结果表明差异表达蛋白主要参与代谢、细胞过程和刺激应答等生物学过程,而催化活性和分子结合是最主要的分子功能类别。KEGG通路分析结果表明差异表达蛋白主要富集于能量代谢、蛋白的合成与降解、信号转导及细胞质膜修复等通路。通过STRING软件构建差异表达蛋白互作调控网络,发现上调表达蛋白主要参与糖代谢、氧化还原过程和核糖体翻译过程,下调表达蛋白主要参与ROS代谢、DNA修复、抑制细胞程序性死亡过程和细胞骨架。此外,筛选到96个与逆境保护相关的差异表达蛋白,分别参与能量代谢、氧化还原平衡、蛋白质合成与降解和信号转导。【结论】在超低温保存过程中,百子莲胚性愈伤组织的能量代谢、氧化应激与蛋白降解及PCD有所加剧,而细胞的ROS清除和胁迫防御过程明显下降,即百子莲胚性愈伤组织在超低温复合逆境下形成以糖代谢和抗氧化系统为主的抗逆保护机制。     

低温胁迫对蝴蝶兰内源激素的影响

以3个抗寒性不同的蝴蝶兰品种为试材,研究了不同低温条件下蝴蝶兰叶片内ABA、IAA与GA 3种内源激素等的变化规律,分析了蝴蝶兰抗冷的生理生化机理。研究结果表明:(1)低温胁迫条件下,随着温度的降低,叶片内部内源激素的变化越来越显著。C(昼23℃/夜18℃)处理温度下,内源激素变化较为平缓,而A(昼11℃/夜6℃)处理的变化则较为剧烈。3种内源激素的含量随着温度降低有显著增加的趋势。(2)随着处理时间的延长,各品种叶片内ABA、IAA与GA含量的高低均呈现先升高后降低的趋势。(3)低温胁迫条件下,抗冷性强的品种‘彩云’体内的ABA大量合成的启动时间早于另外两个品种,对低温处理的响应迅速,而IAA与GA则没有较大差异,对低温响应较为迟缓,在低温胁迫一段时间后才表现出显著增加的趋势。     

太空搭载百子莲种子对其SP1代叶片形状的影响

本文对太空搭载百子莲（Agapaathus）DBH、BB、DB3个品种种子的SP1代样本单株的叶片长度、宽度和面积进行了统计分析,对实验数据进行了柯尔莫哥罗夫一斯米尔诺夫检验,计算了样本的列文统计量,并采用SPSS13．0统计分析软件检验了本假设的满足条件,进行了独立样本T检验。结果表明：DBH、BB的SP1代实验组和对照组叶片形状存在变异且叶长和叶宽均差异显著,DB差异不显著。     

低温对观音莲幼苗膜脂过氧化作用的影响

研究了低温对观音莲幼苗膜脂过氧化作用的影响。结果表明：经过5℃低温处理后，观音莲幼苗受害严重，质膜透性明显增大，MDA（丙二醛）含量明显提高，CAT（过氧化氢酶）活性明显下降，POD（过氧化物酶）活性变化不大；10℃处理后，观音莲只受轻微伤害，叶片细胞质膜透性稍有变化，MDA含量有所上升，CAT、POD活性明显提高；光照条件对上述各项指标有很大的影响。     

航天诱变百子莲种子对其SP1代的影响

本实验研究了4个百子莲品种种子经航天诱变后其种子生命力和SPI代生长情况的变化。结果表明,航天诱变对百子莲种子的发芽率和出苗率有明显提高,除DB大花品种其发芽率与出苗率受空间条件抑制为0外;而对其SP1代生长情况的影响不很明显,其中BB的株高呈显著增高,DB早花的叶长、冠幅显著减小。     

百子莲的花蜜分泌节律及传粉效率影响因素的研究

对百子莲的花蜜分泌节律及影响百子莲昆虫访花行为的因素进行了分析和检测.结果发现:百子莲的花蜜存在2次分泌现象,花蜜分泌速率及花蜜常备量均在开花第2天达到最大值.花蜜含量糖为 21.80%～36.14%.去雄和切除花瓣试验表明:百子莲的主要传粉报酬为花蜜,其在诱导昆虫传粉中起主要作用.昆虫的访花活动与开花式样有一定关系,10～15朵花是百子莲有较好传粉效率的开花式样.     

断根处理对百子莲(Agapanthus praecox ssp.orientalis)开花的影响

对百子莲4年生苗进行未断根、1/3断根、1/2断根和2/3断根4个处理,观察百子莲开花进程和品质的变化,并研究断根对其花芽分化前期可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白含量的影响.结果表明,3个断根处理的现蕾期分别提前5、7 d和1 d;初花期分别提前5、7 d和2 d;平均花期分别延长5、6 d和3 d;开花率分别提高15%、15%和-35%;平均花葶高度分别增加了25.6、32.2 cm和13.4 cm.3个断根处理的可溶性糖、淀粉、可溶性蛋白含量都有不同程度的增加,且3个处理之间存在一定差异,其中1/2断根最佳,1/3断根次之.表明适当断根可以有效提高百子莲体内营养物质的积累,从而有利于百子莲花期提前和开花品质的提高.     

百子莲的传粉昆虫及其访花行为研究

连续2年对百子莲引种地的访花昆虫和昆虫访花行为进行了观察和检测,共发现访花昆虫23种,分属于5目、17科.其中传粉昆虫有10科13种,主要有中华蜜蜂、熊蜂、玉带凤蝶、菜粉蝶和黑带食蚜蝇.访花频率在不同昆虫之间差异显著.在不同花期(始花期、盛花期)间差异不显著.各昆虫单日的访花频率存在一定规律.其中蝶类传粉活动集中在上午,蜂类传粉持续时间长,7:00～17:00均有出现.昆虫访花频率和虫体解剖镜观察表明.蜂类的传粉效率明显高于蝶类和蝇类.