中药材附子基因组DNA提取方法研究

[目的]为研究附子的遗传多样性、种质鉴定和指纹图谱的构建提供基本保证。[方法]以中药材附子药源植物的幼嫩叶片和块根为试材,分别采用SDS法、CTAB法和改良CTAB法从中药材附子药源植物中提取基因组DNA,比较不同方法的提取效果。[结果]对于新鲜叶子,采用SDS法提取DNA的A260/A280值最接近1.80,其次为改良CTAB。采用改良CTAB法从新鲜附子提取DNA的A260/A280值最接近1.80,表明改良CTAB法的除杂效果优于SDS法。SDS法适于杂质含量较低的试材。采用SDS法提取的DNA浓度最高,改良CTAB法次之,CTAB法最低;从鲜材料提取基因组DNA浓度比干材料高。[结论]3种方法均能提取到中药材附子药源植物的基因组DNA,SDS法对新鲜叶子提取的基因组DNA效果最佳,改良CTAB法对新鲜附子进行DNA提取的效果最好。     

凉粉草基因组DNA提取与分析

[目的]为分子生物学研究提供高质量、高产量的凉粉草总DNA。[方法]采用改良CTAB法提取总DNA,通过测定OD260/OD280值、琼脂糖凝胶电泳和RAPD扩增对所得DNA的浓度和质量进行检测,考察该方法对DNA的提取效果。[结果]改良CTAB法提取的总DNAOD260/OD280值为1.6～2.0;电泳条带清晰,完整性好,纯度高,总DNA分子量与λDNA相近;以所提DNA为模板进行RAPD扩增时,可得到稳定的扩增条带。[结论]改良CTAB法适合凉粉草基因组DNA的提取。     

中药材景天三七DNA提取方法的比较分析

以景天三七药材为材料,分别采用改良CTAB法、SDS法、高盐低p H法对其DNA进行提取并检测,旨在建立一种适合中药材景天三七的DNA提取方法。结果表明,改良CTAB法提取的DNA浓度为290μg/m L,电泳条带最亮,无拖尾现象,在浓度和纯度方面均优于其他2种方法,并可用于ISSR-PCR扩增,改良CTAB法是中药材景天三七DNA提取的最佳方法。     

药用植物白术DNA提取方法的研究

为从白术叶片中提取高质量的基因组DNA，在传统CTAB法的基础上，采取先破碎细胞，将存在于细胞质中影响DNA提取质量的多酚等次生代谢物质去除后再裂解细胞核，经分离纯化，提取的DNA通过A260／A280比值测定，琼脂糖凝胶电泳和ISSR-PCR扩增检测，结果表明改良CTAB法提取的DNA纯度高，可作为ISSR分子标记的模板及用于后续分子生物学的研究。     

狗牙根基因组DNA提取方法的比较

以狗牙根的嫩叶为材料,在传统CTAB法的基础上加以改良,建立了狗牙根基因组DNA的CTAB提取方法.得到的DNA经核酸蛋白质分析仪测得A_(260)/A_(280)值处于1.69～2.02之间、A_(260)/A_(230)集中处于1.82～2.08之间,经琼脂糖凝胶电泳检测各样品具有一条明亮主带并无拖尾现象,经ISSR-PCR检测出现清晰稳定的条带,说明改良CTAB法提取得到的DNA完整性好,纯度高,适用于分子标记等分子生物学的研究.     

改良CTAB法对西南牡丹总DNA提取工艺的优化

为筛选适宜西南牡丹品种基因组DNA的提取方法,通过4因素3水平的正交试验,对提取牡丹基因组DNA的CATB法进行优化。结果表明:提取西南牡丹品种DNA改良的CTAB法的最佳配方为2%的CTAB、2%的PVP、0.5%β-巯基乙醇,三氯甲烷和异戊醇(24∶1)抽提2次,在此条件下,提取的基因组DNA浓度在712.0～780.5ng/μL,A260/A280比值在1.812～1.823,DNA条带清晰,无拖尾现象。说明,利用该改良的CATB方法,可获得高纯度的牡丹DNA。     

油梨果肉DNA提取方法的比较

为了获取高质量的油梨果肉DNA,以油梨果肉为试材,比较改良SDS法、改良CTAB法和试剂盒法对油梨果肉DNA的提取效果。结果表明:上述3种方法均可从油梨果肉中提取DNA,但改良SDS法与改良CTAB法所获得的DNA浓度都在600μg/m L以上,纯度(OD260nm/OD280nm)均在1.8左右,纯度高且完整性较好,可用于未来分子标记分析。     

基于改进CTAB法提取空间诱变柱花草总DNA研究

[目的]用改进CTAB法提取空间诱变柱花草的总DNA。[方法]以柱花草幼苗叶片为材料，采用改良CTAB法提取柱花草总DNA。[结果]所提的DNA凝胶条带清晰，无拖尾现象，浓度在406．6～857．3ng／μl，0D260／DD230检测值在1．96—2．18，OD260／0D280检测值在1．76—1．98。所提DNA适用于ISSR-PCR。[结论]该方法具有简便、快速、高效的特点。     

中国兰花苞基因组DNA的提取及优化

采用改良CTAB法提取国兰花苞基因组DNA。优化部分如下:(1)在裂解细胞核前加入洗净液(0.4 mol·L~(-1)葡萄糖+3%可溶性PVP+10 mmol·L~(-1)β-巯基乙醇);(2)抽提时加入1/4体积的无水乙醇;(3)用等体积异丙醇沉淀DNA的同时加入1/2体积NaCl(5 mol·L~(-1))。结果表明,采用该法提取的DNA浓度介于216.5～245.8 ng·μL~(-1)之间,1.78D_(260 nm)/D_(280 nm)1.81,浓度和纯度均能满足常规分子生物学研究的需求。     

利用改良CTAB法提取卷丹百合鳞叶基因组DNA

为了获得高质量卷丹百合鳞叶基因组DNA,在传统CTAB法的基础上进行了改良和优化,筛选出较理想的DNA提取方法.结果表明:用改良CTAB法提取的卷丹百合鳞叶基因组DNA电泳条带清晰,无降解现象,D260 nm/D280 nm为1.6 ～1.9,用于ISSR-PCR扩增时其稳定性和可重复性都很好,说明DNA纯度和产率完全满足PCR扩增分析的要求.