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新城疫病毒Ulster株血凝素—神经氨酸酶基因的克隆与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
析城疫病毒Ulster株经SPF鸡胚增殖和超速离心纯化后,以酚-SOS法提取其基因RNA,作为反转录-聚合酶链反应的模板。根据其已发表的F和HN基因核苷酸序列,合成一个长为30mer的寡核苷酸和一对分别长为28、30mer的寡核苷酸分别作为反转录引物和PCR引物。 相似文献
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本研究利用对应于PRRSVATCCVR-2332株及LV株ORF5基因保守序列的1对均为25个碱基的引物1005PS、1006PR对PRRSV中国分离株B13进行RT-PCR,扩增出了包括完整ORF5基因的DNA片段,片段长约730bp。将此片段定向克隆入pUC18载体的EcoRI和stI位点之间,获得了B13ORF5基因与pUC18载体的重组质粒。通过EcorI/PstI、EcorI/HindⅢ 相似文献
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瓠瓜杂种优势利用研究初报 总被引:3,自引:0,他引:3
瓠瓜杂种优势利用研究初报向长萍晏儒来徐跃进李汉霞(华中农业大学园艺系,武汉430070)APRIMARYREPORTONUSINGHYBRIDVIGOROFBOTTLEGOURD(Lagenaria.sicerariaStandlvar.clava... 相似文献
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本文重缚和构建了新城疫病毒(NDV)融合蛋白基因,并对该基因进行了鉴定,将新城疫病毒F基因片段经RT-PCR扩增,插入经EcoRI/SalI酶切的克隆载体pUC18及表达载体pGEMEX,转化大肠杆菌JM109株,用氨苄青霉素平板法初步筛选克隆,再用双酶切法,核酸探针,PCR及核苷酸序列分析法鉴定,表明插入成功并且阅读框架正确。 相似文献
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禽传染性支气管炎病毒免疫原基因的PCR获取及其酶切鉴定 总被引:3,自引:1,他引:3
分绍用RT-PCR(反转录-聚合酶链反应)获取禽传染性支气管炎病毒M41株和广东地方致弱株D41免疫原(S1)基因的详细方法,所用引物为IBV Beaudette株S1基因两侧的对应序列,跨幅为1.7kb,结果表明,两株病毒所获的PCR产物与预期的一致;用此对引物,以IBV D41株S1基因PCR产物为模板,扩增出一样的DNA片段,试验还显示,国内外几家公司有关RT和PCR的分子生物学试剂可以兼用 相似文献
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高原特早熟玉米叶面积速测法研究简报 总被引:4,自引:0,他引:4
高原特早熟玉米叶面积速测法研究简报吴全一杜茂林柯定荣蒲雪莉(阿坝州农科所/马尔康县624000)BRIEFREPORTONTHESTUDYOFTHEMEASUREMENTOFLEARESAREAABOATPLATEAUSPECIALEARLY-MOT... 相似文献
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王明霞 《福建农业大学学报(自然科学版)》1996,25(1):56-60
利用狄高辛(DIG)标记制备菊花矮化类病毒(CSV)特异性探针,由反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)进行CSV RNA的反转录和cDNA的扩增,然后比较2种核酸杂交方法-微量板杂交和斑点杂交检测CSV的灵敏度。本研究结果表明,30mg干燥样本抽提的CSV RNA被稀释400倍,取4μL(约750pg样本抽提的RNA)经RT-PCR,其产物再用10×SSC稀释100倍,采用微量板杂交仍可很容易得到 相似文献
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不同皮色小麦种子GA_3处理和α-淀粉酶同工酶分析初报吴纪民,刘世家,魏燮中,徐勇(南京农业大学农学系,南京210095)APRELIMINARYREPORTONTHERESULTSOFTREATINGWHEATGRAINSDIFFERENTINKE?.. 相似文献
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肉桂数量性状变异调查研究黄少伟1谢治芳1汤松林2(1华南农业大学林学院,广州,510642;2福建省华安金山林场)VARIATIONOFTHEQUANTITATIVECHARACTERSOFCinnamomumcasiaPresl.HuangShao... 相似文献
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大麦黄矮病毒缺失复制酶基因植物表达载体的构建及转基因小麦的 … 总被引:2,自引:0,他引:2
以大麦黄矮病毒GPV株系的RNA为模板,采用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,扩增出1134bp的缺失复制酶基因。将扩增的片段克隆到pUC19的Smal位点上并进行了序列测定,获得正向插入的重组质粒pUC19D。以Kpnl从Xbal从pUC19D上切下此基因并插入质粒pEmu-mcs-N得到植物表达载体pPPI8。应用花粉管通道法转化普通小麦品种陇鉴127、陕160和晋麦47,通过卡那酶 相似文献