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相似文献
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1.
藻蓝蛋白是一种仅存在于螺旋藻中的天然营养物质,具有抗氧化、抗衰老、防癌、抗辐射等作用。藻蓝蛋白具有很高的经济价值,对其提取工艺的开发研究具有重要意义。本研究先将冻融法和超声法单独进行提取实验,探索出各自最佳的提取条件后,又进行了先冻融再超声的提取实验,利用紫外分光光度计法测定藻蓝蛋白的浓度和提取率。实验结果如下:(1)冻融法实验当中最佳工艺为:冷冻时长4h、冻融4次,提取率为:0.37%。(2)在超声提取实验中,最佳工艺为:提取时间25min、破碎功率65W、料液比1:18(g/mL),提取率为2.32%。(3)在先冻融再超声的提取实验中,藻蓝蛋白提取率较冻融法和超声法单独使用有明显的提高,提取率为3.07%。  相似文献   

2.
[目的]对鱼腥藻藻蓝蛋白的提取进行优化,并对藻蓝蛋白粗品进行分离纯化、凝胶电泳以及抑菌作用研究。[方法]采用反复冻融法提取藻蓝蛋白,液相色谱分离纯化藻蓝蛋白,SDS-PAGE电泳分析蛋白质成分,并利用96孔板法培养、酶标仪浓度检测,进行抑菌作用研究。[结果]藻蓝蛋白提取的最佳条件为固液比1∶1 g/ml,冷冻时间60 min,硫酸铵饱和度为60%。藻蓝蛋白的最大吸收光是620nm。高效液相色谱分离得到3种蛋白质,标记为PC-1、PC-2、PC-3。SDS-PAGE电泳可知,PC-1和PC-2的分子量在14~18 kD。PC-2对苏云金芽孢杆菌和藤黄叠球菌有较弱的抑菌作用。[结论]为鱼腥藻藻蓝蛋白的提取、纯化和性质研究提供了试验依据。  相似文献   

3.
钝顶螺旋藻藻胆蛋白性质的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
采用羟基磷灰石柱层析法对钝顶螺旋藻藻胆蛋白粗提液进行纯化,得到藻蓝蛋白(PC)和别藻蓝蛋白(APC)纯化液。用紫外-可见分光光度计测得PC和APC的最大可见吸收峰分别在620 nm和650 nm处;用荧光分光光度计测得它们的室温荧光发射峰分别在645 nm和656 nm处。经12% SDS-PAGE法分析,PC由α和β两个亚基组成,其分子量分别为16.3 kD和18.9 kD;APC也由α和β两个亚基组成,其分子量分别为15.0 kD和16.9 kD。用高效液相色谱仪(HPLC)对PC和APC的氨基酸组成作了测定,发现二者的氨基酸组成比较相似。  相似文献   

4.
以垦芸2号芸豆品种为原料,以自来水和纯净水作对比试验,研究小分子团磁化水促进芸豆清蛋白的浸出作用,并优化了提取技术参数。通过对提取温度、提取时间、液料比和粉碎粒度四个因素的单因素试验和响应面分析,结果表明:提取温度31℃,提取时间2 h,液料比22∶1,粉碎粒度60目时芸豆清蛋白的提取率均最高,其中小分子团磁化水组提取率为48.96%,高于自来水组(42.79%)和纯净水组(40.87%);并对小分子团磁化水提取的芸豆清蛋白进行SDS-PAGE电泳测试,得出分子量排布主要集中在42.01 k Da左右,说明所得蛋白为清蛋白。  相似文献   

5.
赵冰冰  张发宇  陈裕  汪家权 《安徽农业科学》2014,(17):5345-5347,5392
[目的]研究不同冻融条件对破壁提取巢湖水华新鲜蓝藻中藻蓝蛋白的影响,为后续提取纯化试剂级藻蓝蛋白提供支持。[方法]在各种条件下,冻融破壁后,利用粗提液中藻蓝蛋白即PC纯度和得率为评价指标,研究不同冻融次数、不同含水率和不同冻融介质对藻蓝蛋白提取效果的影响。[结果]粗提液中PC纯度随着冻融次数的增加而依次减小,PC得率随着冻融次数的增加呈现下降的趋势;PC纯度和得率随着含水量的增大呈现先持平后降低的趋势;在不同冻融介质的试验中,通过比较得出最优的冻融介质为浓度0.0025mol/L的PBS缓冲溶液。[结论]对于冻融储存时间较长的巢湖新鲜蓝藻,最优的试验条件是选用浓度为0.0025mol/L的PBS缓冲液作为冻融介质,在含水率为96.O%~97.5%区间冻融次数仅需1次,即可得到最优的PC的纯度和得率。  相似文献   

6.
以巢湖新鲜蓝藻藻泥为原料,通过冻融破壁的方法获得藻蓝蛋白粗提液,采用粉末活性炭法-羟基磷灰石柱层析法纯化藻蓝蛋白。在粉状活性炭法的研究中,通过单因素试验研究了粒径、添加量、藻蓝蛋白浓度和时间对藻蓝蛋白的提纯效果,并与羟基磷灰石柱层析法联用以优化高纯度藻蓝蛋白的提取纯化工艺组合。结果表明,粉末活性炭法纯化藻蓝蛋白的最优条件是粒径400~500目,藻蓝蛋白浓度1.0 mg·mL-1,添加量100 g·L-1和吸附时间15 min,经羟基磷灰石柱层析法纯化后,藻蓝蛋白纯度可达4.51,回收率为36%。  相似文献   

7.
以钝顶螺旋藻的一个直线型突变株(SP-Dz)为材料,分别采用反复冻融法、超声波法和CaCl_2溶胀法提取藻胆蛋白。研究结果表明:在反复冻融法中,以冻融1次、冷冻时间1h时藻胆蛋白提取效果最好;在超声波法中,以超声功率200W,累计超声时间1min时藻胆蛋白提取量最多;在溶胀法中,在35℃下,溶胀20 min时藻胆蛋白提取量最多。综合比较上述3种方法,以冻融法提取的藻胆蛋白含量最多,纯度最高,但需要时间最长;超声波法需要的时间最短,但纯度最低;溶胀法提取藻胆蛋白的纯度及纯化所需时间界于二者之间,但提取藻胆蛋白的含量最低。  相似文献   

8.
太湖蓝藻藻蓝蛋白的提取及纯化   总被引:1,自引:0,他引:1  
为利用太湖打捞蓝藻的蛋白质资源,采用冻融破壁、絮凝、盐析、透析、双水相萃取等方法制备荧光试剂级藻蓝蛋白。研究结果表明,以水为介质冻融2次破壁,将冻融藻浆中蓝藻干物质调节为0.95%,用浓度为7.5g/L的聚合氯化铝絮凝初分离,所得藻蓝蛋白纯度(A6 20/A280)为0.31;采用20%、50%饱和度的硫酸铵两步盐析可将其纯度(A620/A280)提高至2.29;盐析后藻蓝蛋白经100 000的透析袋透析,再以140 g/L的聚乙二醇(分子量2 000)和140 g/L的磷酸钾盐萃取纯化,最终纯度(A620/A280)高达4.60,达到荧光试剂级要求。  相似文献   

9.
以实验室培养的水华蓝藻单种[铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa,M.A)、水华微囊藻(Microcystis flos-aquae,M.F)、惠氏微囊藻(Microcystis wesenbergii,M.W)、鱼腥藻(Anabaena sp,A.s)]以及野外新鲜水华蓝藻为研究对象,通过设置不同细胞破碎方法和提取剂种类,筛选并优化藻蓝蛋白荧光分析法的前处理技术。结果表明,冻融试验中,冷冻温度与提取剂添加顺序对蓝藻细胞破碎率无显著影响;以去离子水为提取剂时,冻融2次即可达到最佳破壁条件;在冻干试验中,蓝藻真空抽滤在滤膜上能提高蓝藻细胞的破碎率;综合比较冻融和冻干,后者对蓝藻细胞的破碎效率高于前者;对比3种提取剂对藻蓝蛋白的提取效率,去离子水对藻蓝蛋白的提取效率最高。  相似文献   

10.
[目的]为了寻找一种代替磷酸缓冲液的提取溶液,满足尽量保持其活性的要求。[方法]分别用蒸馏水和磷酸缓冲液,采用研磨法提取藻蓝蛋白并保存。[结果]两者提取效果差别不大。但是,水保存的藻蓝蛋白溶液比磷酸缓冲液保存的藻蓝蛋白溶液易分解。[结论]综合试验条件及藻蓝蛋白稳定性影响因素考虑,可确定pH变化为藻蓝蛋白分解的主要原因;蒸馏水可代替磷酸缓冲液用于提取藻蓝蛋白,活性维持时间不超过15d。  相似文献   

11.
[目的]为普通念珠藻藻蓝蛋白的提取及开发提供试验及理论基础。[方法]以普通念珠藻为材料,比较藻体及细胞的破碎方法、提取液类型及饱和硫酸铵浓度对藻蓝蛋白提取的影响。[结果]结果表明:利用发酵法破碎藻体和细胞,0.05 mol/L的KP缓冲液(pH值7.2)作为提取液,经过30%~50%饱和硫酸铵盐析和DEAE-Toyopeal 650 S离子交换柱层析后,藻蓝蛋白纯度达2.51,最大紫外-可见吸收峰位于616 nm。[结论]普通念珠藻藻蓝蛋白分离提取较为理想的程序为:藻粉→0.05 mol/L KP缓冲液(pH值7.2)浸泡→发酵法破碎细胞→35%~50%饱和硫酸铵盐析→DEAE-Toyopeal 650 S柱层析→较纯的藻蓝蛋白。  相似文献   

12.
姬松茸蛋白制备及分析研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
以姬松茸子实体为原料,对姬松茸蛋白的制备工艺进行研究。用碱提酸沉法和酶法,采用4因素3水平L9(34)正交试验确定最佳提取方法和提取工艺;用SDS-PAGE测定蛋白质亚基分子质量分布。结果表明,碱提酸沉法提取的最佳条件为:提取温度30℃,pH值9.5,料液比1∶20,时间1.5 h,提取率达26.80%;酶法提取蛋白质的最佳条件为:提取温度40℃,1%的酶液0.6 mL,料液比1∶20,时间2.0 h,提取率达32.74%。酶法优于碱提酸沉法。姬松茸蛋白质等电点为3.25,主要蛋白质亚基的分子量为81.7 kD。  相似文献   

13.
鲅鱼皮酸溶性胶原蛋白提取及分子特性的初步研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
【目的】在分子水平上初步探究酸溶性鲅鱼鱼皮胶原蛋白的特征性。【方法】在提取方法中用L9(34)正交试验寻求最佳提取条件。在分子特征性研究中检测了胶原蛋白紫外吸收图谱,并使用SDS-PAGE电泳测定分子量。【结果】酸溶性鲅鱼皮胶原蛋白的最佳提取条件是提取液浓度为0.2 mol/L柠檬酸溶液、固液比1∶30、提取48 h;所提取出的胶原蛋白在230 nm处有显著吸收峰而在260 nm处无吸收峰是酸溶性鲅鱼鱼皮胶原蛋白的特征性之一。【结论】SDS-PAGE电泳图表明酸溶性鲅鱼鱼皮胶原蛋白含有2条α链(a1和a2)、β、γ链,分子量约为127、115、278、343 kDa,根据文献可知该胶原为典型的Ι型胶原蛋白。  相似文献   

14.
关杰敏  张桂芳  林吉  徐鸿华 《安徽农业科学》2010,38(20):10575-10577
[目的]为分子生物学研究提供高质量、高产量的凉粉草总DNA。[方法]采用改良CTAB法提取总DNA,通过测定OD260/OD280值、琼脂糖凝胶电泳和RAPD扩增对所得DNA的浓度和质量进行检测,考察该方法对DNA的提取效果。[结果]改良CTAB法提取的总DNAOD260/OD280值为1.6~2.0;电泳条带清晰,完整性好,纯度高,总DNA分子量与λDNA相近;以所提DNA为模板进行RAPD扩增时,可得到稳定的扩增条带。[结论]改良CTAB法适合凉粉草基因组DNA的提取。  相似文献   

15.
红枣多糖提取工艺参数的优化及分子量的分布研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
李小平  陈锦屏  张宝善 《安徽农业科学》2007,35(26):8092-8093,8095
以正交法优化了红枣多糖的热水浸提工艺参数,采用分级醇沉和分步醇沉的方法研究了红枣多糖分子量的分布。结果表明,热水浸提红枣多糖的最优工艺条件为料液比1∶15、温度100℃、时间6h、提取2次;在醇浓度小于80%时,多糖得率与醇浓度呈指数相关;乙醇浓度达80%时,可沉淀出大部分红枣多糖;分步醇沉试验结果表明,红枣多糖的分子量分布广泛,以60%和70%醇浓度沉淀出的中等分子量的多糖比例最多,低分子量和高分子量红枣多糖所占比例较少。  相似文献   

16.
柑桔皮中黄酮类化合物的提取及抗氧化作用研究   总被引:3,自引:3,他引:0  
文章对柑桔皮中黄酮类化合物的提取工艺和抗氧化活性进行研究,以黄酮提取率为考察指标,选用L9(34)表进行正交试验,确定从柑桔皮中提取黄酮类化合物的最佳提取工艺,并用TAB法和烘箱储藏法对提取的黄酮类化合物进行抗氧化研究。结果表明,最佳的提取条件为乙醇浓度70%,提取时间1.5 h,固液比1:20,提取温度80℃,提取的黄酮类化合物为柑桔皮干重的2.689%;抗氧化试验结果表明,柑桔皮中提取的黄酮类化合物能阻断芝麻油和猪油自氧化作用,具有良好的抗氧化活性。研究为利用桔子皮工业化生产黄酮类药用成分提供科学依据。  相似文献   

17.
洋根中低聚糖的提取   总被引:1,自引:1,他引:0  
陈劼 《安徽农业科学》2007,35(27):8673-8674
研究国产洋根中低聚糖的提取方法和最佳提取条件。以产自浙江省台州地区的新鲜洋根块茎为试材,先测定其主要组分含量,之后依次进行水提S、evag法除蛋白、乙醇沉淀除多糖,从而提取其中的低聚糖。选择固液比、浸提温度和浸提时间为因素,以提取率为指标,建立3因素4水平正交实验,研究低聚糖的最佳提取条件。可溶性总糖的干基含量达到92.30%(W/W)。通过正交实验得到最优提取条件为:固液比1∶4,浸提温度70℃,浸提时间60 min,此条件下低聚糖得率为52.94%(W/W)。经HPLC测定,洋根低聚糖提取物中低聚果糖含量为53.70%(W/W),接近以蔗糖为底物果糖转移酶催化反应得到的商品低聚糖浓度。该提取方法简便易行,稍加改进后即可用于工业化生产。  相似文献   

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