广东辣椒疫霉菌分离鉴定及其致病力和生理小种分化研究

分离鉴定了来源于广东省不同辣椒产区的5个病原菌分离物,经形态特征鉴定及回接发病特征观察,确定这些菌株均为辣椒疫霉菌Phytophthora capsici Leonian.广东5个菌株在CA培养基上诱导产生的孢子囊形态类似,孢子囊形状多为卵圆形或长椭圆形,乳突明显,孢子囊平均大小40.8～45.9 μm(l)×23.2～30.9 μm(b),l/b 1.4～1.8.菌株间菌丝生长速率、产孢能力及致病力有明显差异,经生理小种鉴别,4个为Race 3,1个为Race 1,初步推定Race 3为广东辣椒疫病病原菌的优势小种.     

几个炭疽菌株的分类鉴定

作者对８个炭疽菌株分离物进行鉴定，明确了核桃、枣、山茱萸、棉花和柑桔寄主上５个分离菌株为胶孢炭疽菌；大豆寄主上分离菌株为黑线炭疽菌；辣椒寄主上分离菌株为黑线炭疽菌；辣椒寄主上分离菌株为辣椒炭疽菌；西瓜寄主上分离物为瓜类炭疽菌。     

黄瓜花叶病毒贵州辣椒分离物外壳蛋白基因序列分析

[目的]分析贵州辣椒主产区黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)分离物的分子变异情况,为抗病毒辣椒品种选育及辣椒病毒病的防控提供科学依据.[方法]以来自贵州省8个县(榕江、大方、石阡、安龙、绥阳、德江、关岭和惠水)的16个辣椒CMV分离物为材料,采用逆转录—聚合酶链反应(RT-PCR)扩增辣椒CMV分离物的CP基因序列,利用DNAMAN和BioEdit对CMV分离物的CP基因序列进行比对分析,用MAGE 7.0的邻接法(Neighbor-joining,NJ)构建系统发育进化树,分析贵州辣椒CMV分离物的遗传多样性.[结果]将16个贵州辣椒CMV分离物的CP基因核苷酸序列及编码蛋白氨基酸序列与CMV亚组代表株系进行一致性比对,结果表明,贵州辣椒CMV分离物与CMV亚组分离物的CP基因核苷酸序列一致性为89.7%~100.0%、CP蛋白氨基酸序列一致性为96.8%~100.0%.系统进化分析结果表明,CMV-DF、CMV-RJ、CMV-SQ、CMV-SY、CMV-DJ与CMV I代表株系聚为一个亚支,但更趋近于CMV亚组IB株系,CMV-HS、CMV-GL、CMV-AL与CMV亚组Ⅱ株系聚为另一个亚支,说明侵染贵州辣椒的CMV株系有两大组群,其中大方、榕江、绥阳、石阡和德江CMV分离物归属于CMV亚组IB株系,惠水、关岭和安龙CMV分离物归属于CMV亚组Ⅱ株系.[结论]不同地域的贵州辣椒CMV株系发生了变异.     

北疆地区辣椒上烟草花叶病毒(TMV)各分离物的差异性研究

以 TMV om为对照 ,测定了辣椒上 5个烟草花叶病毒分离物 P 9、P 38、P 44、P71、TMV wym在 42上辣椒品种、品系上的致病反应 ,结果表明这 5个分离物对辣椒的致病性存在明显差异 :P 71、TMV wym>P 9>P 38、P 44 ;对接种过 5个 TMV分离物的辣椒 (四平头 )进行过氧化物酶 (POD)和酯酶 (EST)同工酶分析 ,结果表明辣椒上 5个 TMV分离物引起的酶活性有差异 ;导致 POD上活性强弱为 TMV wym>P 9、P 38>P 44、P71;引起 EST活性强弱为 P 38>TMV wym、P 44 >P 71>P 9。说明北疆地区辣椒上TMV存在着分化。     

贵州辣椒疫病病原鉴定及生物学特性研究

对来源于贵州省不同辣椒产区的5个辣椒疫病病原菌分离物进行分离鉴定。其孢子囊形态各异,多为圆形、近圆形、长椭圆性,孢子囊平均大小为43.5～52.7×33.3～38.8μm,长宽比1.0～2.3,乳突明显,一般单乳突,偶见双乳突。单株培养不产生卵孢子。病菌能在12℃以上、35℃以下生长,对浓度为1∶8×106的孔雀石绿不敏感,部分菌株可利用淀粉作碳源。根据这些特征将这5个菌株鉴定为PhytophthoracapsiciLeonian。     

辽宁省辣椒疫霉菌生理小种鉴定

辣椒疫病是辽宁省辣椒生产上的重要病害,开展辽宁省辣椒疫病病菌生理小种鉴定,可为抗疫病辣椒新品种的选育提供理论依据。对来源于辽宁省不同辣椒产区的30个病样进行了分离鉴定,经致病性测定和形态特征观察,确定所分离的病菌均为辣椒疫霉菌(Phytophthora capsici Leonian);利用中国辣椒疫霉菌生理小种鉴别通用寄主,对其进行了生理分化鉴定。根据供试菌株在鉴别寄主上的抗感反应,鉴定结果表明:辽宁地区辣椒疫霉菌划分为1号、2号和3号生理小种,发生频率分别为3.33%、26.67%和70%;其中3号生理小种为辽宁省辣椒疫霉菌的优势小种。从不同地区测定结果表明不同生理小种的分布与地域间的相关性不强。     

贵州辣椒疫病病原鉴定及生物学特性研究

对来源于贵州省不同辣椒产区的5个辣椒疫病病原菌分离物进行分离鉴定.其孢子囊形态各异,多为圆形、近圆形、长椭圆性,孢子囊平均大小为43.5～52.7×33.3～38.8μm,长宽比1.0～2.3,乳突明显,一般单乳突,偶见双乳突.单株培养不产生卵孢子.病菌能在12℃以上、35℃以下生长,对浓度为1:8×106的孔雀石绿不敏感,部分菌株可利用淀粉作碳源.根据这些特征将这5个菌株鉴定为Phytophthora capsici Leonian.     

贵州辣椒烟草花叶病毒的分子鉴定

为有效控制贵州辣椒的病毒,采用生物学单斑分离法对酶联免疫吸附(ELISA)检测烟草花叶病毒为阳性的贵州辣椒病毒分离物(TMV-GZ)进行纯化。RT-PCR技术克隆其外壳蛋白(CP)基因并测序,使用DNAMAN7.0和MEGA5.0软件对TMV-GZ的CP基因进行序列同源性分析。结果表明:成功克隆该病毒分离物的CP基因,其序列长度为480bp,编码159个氨基酸残基;该分离物的CP基因与11种已报道的TMV各地分离物同源性均在98%以上,而与其他3种同属不同种的病毒同源性均低于65%。贵州辣椒感染的病毒为TMV。     

不同来源苹果茎沟病毒分离物部分序列分子特性研究

【目的】明确为害新疆不同品种梨的苹果茎沟病毒(Apple Stem Grooving Virus,ASGV)侵染状况,并对获得的病毒基因序列进行分子鉴定。【方法】采用生物学和分子生物学方法对来源于新疆梨、砂梨及红梨上的ASGV进行检测,将获得基因序列进行比对分析。【结果】从10份新疆梨2、份砂梨及3份云南红梨样品上扩增到预期大小为500 bp的ASGV扩增产物。对扩增产物进行克隆和测序,序列分析的结果显示,15个ASGV分离物的CP基因核苷酸及其编码的氨基酸序列相似性分别为88.2%～100%和95.6%～100%。CP基因核苷酸序列构建系统发育树显示,来源于库尔勒香梨分离物KII-3、KII-5、KII-7和新梨7号的分离物XII-5、XII-6,与早期已报道的库尔勒香梨分离物KRL-1及砂梨分离物P-6-1-17亲缘关系较近,聚集成簇。此外,库尔勒香梨的分离物KII-10、KII-14及新梨7号的分离物XII-10与云南红梨上2个分离物YN-2和YN-4聚集成簇,遗传距离较近。【结论】CP基因核苷酸序列系统发育树显示,来源于新疆不同品种梨的8个ASGV分离物及红梨上3个ASGV分离物位于两个不同的组群,存在复杂遗传变异现象。     

鲁粤两省黄瓜花叶病毒辣椒分离物CP基因序列分析及亚组鉴定

从广东和山东呈现花叶病症的辣椒上分离纯化得到2个黄瓜花叶病毒Cucumber mosaic virus(CMV)的分离物.利用RT-PCR技术克隆了病毒分离物的外壳蛋白(CP)基因.核苷酸序列测定表明,CMV-GDLJ和CMV-SDLJ 2个病毒分离物CP基因序列长度为657bp,编码218个氨基酸.2个病毒分离物的CP基因序列与CMV亚组Ⅰ的6个株系CP基因序列同源性均在90%以上,而与亚组Ⅱ的3个株系同源性均低于80%,据此将分离物CMV-GD和CMV-TA归属于CMV亚组Ⅰ.