应用单细胞凝胶电泳技术评价复合微生态制剂的遗传毒性

采用DNA损伤检测技术———单细胞凝胶电泳技术(SCGE,又名彗星试验)来检测复合微生态制剂对鱼类DNA的损伤,尝试利用鱼类的单细胞凝胶电泳技术来评价外来化学物质对水生生态环境的影响。试验结果表明,复合微生态制剂对鱼类的DNA没有明显的损伤作用,各试验浓度组与对照组相比没有显著性差异(P>0.05),复合微生态制剂对水体生态环境具有安全性。试验同时表明,鱼类肾细胞的DNA损伤可作为评价外来化学物质遗传毒性的生物标志物。     

应用单细胞凝胶电泳技术评价复合微生态制剂的遗传毒性

采用DNA损伤检测技术———单细胞凝胶电泳技术(SCGE,又名彗星试验)来检测复合微生态制剂对鱼类DNA的损伤,尝试利用鱼类的单细胞凝胶电泳技术来评价外来化学物质对水生生态环境的影响。试验结果表明,复合微生态制剂对鱼类的DNA没有明显的损伤作用,各试验浓度组与对照组相比没有显著性差异(P>0.05),复合微生态制剂对水体生态环境具有安全性。试验同时表明,鱼类肾细胞的DNA损伤可作为评价外来化学物质遗传毒性的生物标志物。     

1，2，4- 三氯苯对斑马鱼肝细胞DNA 的损伤作用

为了研究1,2,4- 三氯苯（1,2,4-TCB）对斑马鱼（Danio retio）肝细胞DNA 的损伤作用,采用不同浓 度的1,2,4-TCB 溶液（0、1、5、10 mg/L）对体外培养肝细胞进行染毒,应用单细胞凝胶电泳（彗星实验）检测肝 细胞DNA 的损伤效应。结果发现,染毒2 h 后,与对照组相比,当1,2,4-TCB 浓度大于5 mg/L 时,各染毒组细胞 尾长、尾部DNA 百分率均极显著升高,即1,2,4-TCB 染毒引起了肝细胞DNA 的严重断裂;随着1,2,4-TCB 浓 度的增加,DNA 损伤程度加剧,细胞尾长、尾部DNA 百分率及尾距与1,2,4-TCB 染毒浓度呈明显的剂量- 效应 关系。结果表明,水体中残留的1,2,4-TCB 可导致斑马鱼肝细胞DNA 损伤。     

黄曲霉毒素B_1致雏鸭肝脏细胞DNA的损伤效应

【目的】(1)研究黄曲霉毒素B1(AFB1)不同染毒水平(3,30,300μg·kg-1BW)染毒后,在不同时间点导致雏鸭肝细胞DNA损伤情况;(2)探明AFB1染毒剂量及染毒时间与雏鸭肝细胞DNA损伤之间的关系,为AFB1遗传毒性提供研究模型。【方法】96只雄性北京鸭雏鸭,随机分为16组,每组6只。第1组为对照组,第2至6组为低剂量(染毒)组、第7至11组为中剂量(染毒)组、第12至16组为高剂量(染毒)组。对照组、低剂量组、中剂量组、高剂量组雏鸭分别灌胃25%DMSO水溶液,0.25,2.5,25μg·mL-1溶液各1mL,对照组于灌胃1h后,各剂量染毒组分别于灌胃染毒1、2、8、24、48h用彗星试验检测肝细胞DNA损伤。【结果】试验表明,雏鸭对于AFB1导致的肝细胞DNA损伤非常敏感,肝细胞DNA损伤程度与AFB1摄入量以及摄入时间有关。经口染毒2h左右DNA损伤达到高峰,所有染毒组在尾长、尾部DNA百分含量、尾矩、Olive尾矩等指标上均显著高于对照组(P0.05);随着AFB1染毒剂量增加,DNA损伤程度加深、持续时间延长。【结论】(1)AFB1致雏鸭肝细胞DNA损伤的效应非常强,低剂量(3μg·kg-1BW)AFB1暴露就能够引起雏鸭肝细胞DNA发生显著损伤。(2)经口染毒AFB12h后雏鸭肝细胞DNA损伤达到高峰,此时DNA损伤程度与AFB1暴露之间的量效关系最为明显。(3)雏鸭是研究AFB1遗传毒性的一个良好动物模型,彗星试验能够反映AFB1致雏鸭肝细胞DNA损伤的量效关系。     

高氟低碘对老年大鼠肝脏细胞DNA损伤的影响

[目的]研究高氟低碘对大鼠肝脏细胞DNA损伤的影响。[方法]离乳Wistar大鼠21只,随机分为4组：①CK（5只）,饲喂大鼠标准饲料,饮自来水;②高氟组（5只）,饲喂大鼠正常饲料,饮100mg/L氟化钠（NaF）去离子水;③低碘组（5只）,饲喂低碘饲料（定做）,饮去离子水;④高氟低碘组（6只）,饲喂低碘饲料,饮100mg/L氟化钠（NaF）去离子水。在大鼠20月龄时,处死取肝脏组织,检查其DNA的损伤情况。[结果]与①CK相比,②、③和④的老年大鼠肝细胞拖尾率显著增高（P〈0.01）;②、③和④的老年大鼠肝细胞的拖尾长度亦显著增长（P〈0.01）;肝细胞DNA损伤分级结果显示,②（高氟组）老年大鼠肝细胞DNA损伤主要是Ⅱ级、Ⅲ级。③（低碘组）肝细胞DNA几乎全部损伤,主要是Ⅲ级损伤。④（高氟低碘组）的细胞损伤以Ⅲ级损伤为主。[结论]高氟、低碘、高氟低碘都影响了大鼠肝脏细胞DNA的损伤。     

鱼类肝细胞分离、原代培养与应用研究综述

鱼类肝细胞分离与原代培养技术已有30多年的历史,目前已有40多种鱼的肝细胞被分离、培养并用于各种研究中。主要讨论鱼类肝细胞的分离与培养方法以及不同条件对细胞生理的影响;概括鱼类肝细胞体外培养在生理学、环境毒理学和药理学等方面的应用研究,旨在为建立更多的鱼类肝细胞原代培养模型并应用于相关的研究领域提供参考依据。     

永城煤矿塌陷区水污染对鲫鱼外周血细胞数量的影响

选用鲫鱼(Carassius auratus)为研究对象,以相对无煤矿污染的商丘天沐湖为对照,以煤矿污染较严重的永城煤矿塌陷积水区为研究样地,研究永城煤矿塌陷区水质对鲫鱼外周血细胞数量的影响。结果表明:与对照天沐湖相比,永城煤矿塌陷区样地鲫鱼的红细胞数量极显著增加(P<0.01),但白细胞数量差异不显著(P>0.05);从白细胞分类计数统计结果看,淋巴细胞极显著增加(P<0.01),血栓细胞极显著减少(P<0.01),单核细胞显著减少(P<0.05);嗜中性粒细胞虽有减少,但两地差异不显著(P>0.05)。总之,永城煤矿塌陷区水污染已造成鲫鱼外周血细胞数量发生明显改变。     

盐酸小檗碱对小鼠肝、脾、肾细胞DNA损伤的比较研究

通过彗星试验比较研究了盐酸小檗碱对小鼠肝、脾、肾细胞的DNA损伤。设置6个不同剂量组(阴性对照组、7.5、15、30、60、120 mg/kg组)对小鼠进行30 h灌胃方式染毒,末次染毒6 h后小鼠颈椎脱臼处死。检测小鼠肝、脾、肾细胞的彗星细胞率、彗星尾长及尾矩。结果表明:(1)盐酸小檗碱可引起上述3种受试器官的DNA损伤,且随剂量增加,DNA损伤增加(P0.05),呈显著的剂量-效应关系。(2)比较同剂量组不同器官之间的彗星细胞率、彗星尾长及彗星尾矩,3个剂量组均为肾细胞脾细胞肝细胞,并存在器官间显著差异(P0.05)。一定剂量盐酸小檗碱对小鼠肝、脾、肾细胞造成了DNA损伤,具有一定的遗传毒性,比较研究发现肾细胞对盐酸小檗碱致DNA损伤最为敏感。     

单细胞凝胶电泳检测镉对中华倒刺鲃肝细胞DNA的损伤

以中华倒刺鲃为研究对象,利用单细胞凝胶电泳技术检测不同浓度的氯化镉对倒刺鲃肝细胞DNA的损伤作用,检测指标包括尾部DNA含量、尾长、尾矩、Olive尾矩.结果显示,低浓度的镉虽然并不会引起试验鱼明显的中毒症状,但已经对肝脏DNA产生损伤.0.01 mg/kg组4个指标与对照组无显著差异;0.05 mg/kg组尾部DNA含量、尾长与对照组相比差异显著(P＜0.05);0.1 mg/kg组4个指标均与对照组差异显著(P＜0.05).在试验浓度范围内,存在明显的剂量-效应关系(P＜0.05).     

泽泻提取物对油酸诱导建鲤脂肪肝细胞损伤中生化指标及CYP1A蛋白表达的影响

为了研究中药泽泻提取物对油酸诱导建鲤脂肪肝变性细胞的保护作用,本实验以0.4 mmol·L-1油酸来构建建鲤原代脂肪肝细胞损伤模型,然后用不同浓度的泽泻提取物处理肝细胞24和48 h后,分别收集细胞和细胞培养液,然后测定谷丙转氨酶(GPT)、谷草转氨酶(GOT)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、碱性磷酸酶(AKP)、胆碱酯酶(CHE)、细胞色素酶P4501A1(CYP1A1)和细胞色素酶P4502E1(CYP2E1)的含量等生化指标以及CYP1A的蛋白表达情况。结果显示,0.4 mmol·L-1的油酸与原代肝细胞共培养48 h可以显著提高肝细胞培养上清中GPT、GOT、TG、TC、AKP、CHE、LDH、CYP1A1和CYP2E1的含量(P0.01或者P0.05),可以诱导肝细胞中CYP1A的蛋白表达。将不同浓度的泽泻提取物(0、1、5、10、20、50μg·m L-1)与脂肪肝细胞共培养24~48 h发现,泽泻提取物能不同程度抑制油酸诱导的GOT、GPT、TG、TC、LDH、AKP、CHE水平和CYP1A1、CYP2 E1含量的升高(P0.01或者P0.05),不同程度降低肝细胞中CYP1 A蛋白表达,以作用时间48 h效果较好。研究证实了泽泻提取物对油酸诱导的鱼类脂肪肝细胞损伤具有保护作用,而泽泻提取物作为鱼类脂肪肝的防治药物还需要进一步的在体研究。     

淮南采煤塌陷区生态修复优化设计研究

针对淮南采煤塌陷区多次塌陷的特点,分析了塌陷区生态环境遭受破坏的现状,阐述了塌陷区生态治理与产业发展相结合的思路,提出了塌陷区生态修复优化设计模式和治理方法。     

煤炭资源开采对植被影响综述

介绍了我国采煤塌陷的现状、类型、形态,以及采煤塌陷对植被的直接和间接影响.采煤塌陷直接导致植被景观被破坏,导致地表变形而产生地下水位改变、土壤侵蚀、水土流失,间接阻碍植被对水分和养分的吸收,破坏植被生长.采煤塌陷对植被产生的影响严重而深远,因此矿区植被的修复对矿区生态环境的恢复有重要意义.     

徐州市采煤塌陷地农业综合开发研究

煤矿开采引起的塌陷地对周边的地质地貌、生态环境产生了影响和破坏，并且严重制约了农业资源的开发利用。该文根据徐州矿区采煤塌陷地特点（塌陷面积大、地表移动和变形大、地表积水严重），引用了PDI指数，分析了徐州矿区采煤塌陷地对当地农业资源的破坏情况，并坚持因地制宜的原则，对徐州市采煤塌陷地农业资源综合开发利用以及如何保障实施提出了建议。     

采煤塌陷对水养流失及生态环境的影响

[目的]为研究采煤塌陷对土壤水分、养分以及生态环境的影响。[方法]将兖州采煤塌陷区作为研究对象,采用野外调查和室内测试分析等方法。[结果]采煤塌陷不仅促使土壤水分由坡顶到塌陷中心点迁移,而且导致垂直剖面上的土壤含水量变化明显。在垂直剖面上,随着深度的增加,土壤的含水量增大。受采煤塌陷和地下潜水的影响,60 cm深度之下含水量迅速增加。采煤塌陷还导致土壤养分从塌陷地坡顶到塌陷中心点发生迁移流失,并且在塌陷中心点发生富集。土壤养分在0～20 cm深度含量达到最大,并且随着深度的增加,养分含量降低。此外,由于受塌陷等因素的影响,塌陷区的生态环境遭到一定程度的破坏。[结论]应对采煤塌陷加以足够的重视,并进行更深入的研究。     

东部高潜水位采煤沉陷区破坏耕地生产力评价研究

针对矿区面临的问题，在综合分析东部高潜水矿区开采对耕地破坏特征的基础上，选取了潜水位、裂缝、坡度、农田水利设施等作为破坏耕地生产力评价指标体系，并构建了评价模型，利用兖州矿区鲍店矿采煤沉陷区对该评价模型进行了实地应用验证，评价结果与实测结果相关性显著，表明构建的耕地生产力评价模型可用于东部高潜水果煤沉陷区破坏耕地生产力的评价定级。     

工矿区土地复垦中破坏面积及破坏程度的预测

煤炭资源的开采会引起地表沉陷,对矿区的土地和生态环境造成很大破坏。土地的破坏程度和破坏范围不同,对其复垦利用的方向和复垦的方法也有差异。结合矿区开采沉陷和土地复垦的实践,提出了开采沉陷土地破坏面积及破坏程度的预测方法,以期在土地复垦中,根据土地的破坏程度及破坏范围确定合理的复垦方向及复垦方法。     

我国煤矿塌陷区土地利用方式综述

随着工业的快速发展,能源需求量不断加大,作为国家能源结构中占比例最大的煤炭资源的需求量更是大大增加。煤炭开采量不断增加的同时,对生态环境的破坏也在不断加剧,特别是煤矿塌陷区土地资源的破坏,使人口多、耕地少的人地矛盾更加尖锐。该文就煤矿塌陷区的现状作了简要分析,对煤矿塌陷区综合治理的途径进行了综述。     

基于遥感技术的采煤塌陷区时空演变研究

[目的]为采煤塌陷区检测工作提供依据。[方法]利用遥感技术解译塌陷区整治前后的遥感图像,以获取塌陷区时空演变信息,定性分析采煤塌陷区综合治理的成效。[结果]塌陷区整治后,唐山市南部塌陷区和粉煤灰的面积逐渐减少,绿地面积不断增加。[结论]塌陷区综合整治有利于恢复生态环境和自然景观,对区域发展具有积极意义。     

宿州采煤塌陷区湿地生态重建模式初探

该文介绍了宿州采煤塌陷区的基本情况，初步分析了采煤塌陷区对环境产生的危害，对采煤塌陷区生态系统的重建进行了探讨；通过采煤塌陷区的生态治理，可以化害为利变废为宝，产生巨大的生态效益，进一步促进人与自然的和谐，保持宿州经济社会的持续健康发展。     

煤矿区土地复垦的问题及对策研究简

煤矿资源的开发一方面给人们带来巨大的经济效益,另一方面也给矿区土地造成了严重的破坏。该研究以安徽省淮南煤矿为例,根据该煤矿区的土地塌陷及复垦情况,从立法、资金、组织管理体制和技术4个方面分析煤矿区土地复垦存在的问题,并提出了相应的土地复垦对策。