2,4-D残留免疫学检测方法研究进展

概述环境样品、生物样品和各类农作物等样品中2,4-D残留的免疫学检测方法的研究进展,并指出免疫学检测方法在使用中存在的问题和未来的发展趋势。     

MSPD-HPLC法测定大蒜中3种2,4-D类除草剂的残留

本研究建立了一种应用基质固相分散-高效液相色谱(MSPD-HPLC)法,同时测定大蒜中2,4-二氯苯氧乙酸、2,4-二氯苯氧丙酸及2,4-二氯苯氧丁酸等3种2,4-D类除草剂残留的方法。大蒜样品与基质固相分散介质ODS一起研磨,所得分散体系以水洗去干扰杂质,再用甲醇洗脱得分析液;在HPLC上,分析液经ODS柱以乙腈和水为流动相洗脱,用紫外检测器检测。在0.1mg/kg及1.0mg/kg添加剂量下,3种2,4-D类除草剂在大蒜中的添加回收率为77.7%~93.1%,标准偏差为4.3%~10.8%,最低检测限为0.071~0.11μg/kg。     

衍生后SPE_(C18)-GC-FID测定芦柑2,4-D残留

建立了永春芦柑(Citrus madurensis Lour)2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)残留量气相色谱(GC)测定方法。样品用乙酸乙酯超声波提取,减压蒸干,甲醇溶解,H2SO4催化衍生成甲酯,C18固相萃取净化除去H2SO4与杂质并富集10倍,HP-5柱气相色谱分离,火焰离子化检测器检测。结果表明,本方法测定2,4-D的线性范围为1.00-20.00 mg·kg-1,线性相关系数0.9987。合理用药时芦柑果皮2,4-D残留量为1.04 mg·kg-1,所测定的5批次芦柑2,4-D含量均在0-0.90 mg·kg-1之间,变异系数为4.8%-10.0%,2,4-D加标回收率为82%-89%。     

高效液相色谱法测定豆芽中2,4-二氯苯氧乙酸残留

为建立高效液相色谱法测定豆芽中2,4-二氯苯氧乙酸残留量的方法,样品采用碱化水提取,离心、过滤后将提取液酸化,经LC-18固相萃取小柱净化,甲醇洗脱,以甲醇-水(体积比4:1)为流动相,流速为0.8 mL·min-1,检测波长为290 nm.用Agilent TC-C18色谱柱分离,PDA紫外检测器测定豆芽中2,4-二...     

纳米金修饰的免疫传感器直接测定2,4-D的研究

利用自组装技术和静电吸附作用,制备出用于检测2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)的无试剂型免疫传感器,通过交流阻抗技术考察了电极的电化学特性.试验结果表明:该免疫传感器对2,4-D的检测范围为1-5000 ng/mL,检测下限为0.5 ng/mL.该方法提高了2,4-D抗体的固定量,增强了传感器的灵敏度和稳定性,为2,4...     

2,4-D残留检测的ELISA方法的建立和初步应用

本研究用标准抗原、纯化抗体和辣根过氧化物酶标记羊抗兔IgG,建立了间接抑制酶联免疫吸附法,测定了地下水、蔬菜和原粮等样品中的2,4-D含量。结果表明,间接抑制ELISA检测样品中的2,4-D含量变异系数小于15%,样品回收率误差在15%以内;工作曲线表明,在50～2000ng/ml浓度范围内呈良好的线性关系,检测底限为50ng/ml,低于我国规定残留限量(200ng/ml)。因此,本研究建立的间接抑制ELISA法检测地下水、蔬菜和原粮中的2,4-D含量是可行的。     

外源油菜素内酯对谷子2,4-D胁迫的缓解效应

通过盆栽方法,以张杂谷5号为材料,采用EBR和2,4-D两因素完全随机设计,研究在2,4-D胁迫下,外源EBR对谷子各项指标(出苗时间、出苗率、株高、叶绿素含量)的影响。结果表明,通过方差分析,不同浓度的EBR处理之间各项指标均有极显著差异(P0.01);不同浓度2,4-D处理之间幼苗的株高有极显著差异(P0.01),叶绿素含量差异显著(P0.05);两因素的相互作用对幼苗的株高有显著影响(P0.05),对叶绿素含量有极显著影响(P0.01),其中,0.1 mg/L EBR与0.5 g/L 2,4-D组合最有利于谷子幼苗的生长,为最佳组合。说明适宜浓度的EBR不仅能够减轻2,4-D对谷子幼苗的抑制作用,还能在一定程度上促进幼苗生长。     

1HNMR法定量测定土壤中除草剂2,4-二氯苯氧乙酸

建立了一种用内标法快速、简便检测土壤中2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-dichlorophenoxyacetic acid,2,4-D)的1HNMR分析方法.土壤中样品经pH值2.0的酸性水溶液和丙酮提取、浓缩、定容,用布鲁克AV 600核磁共振仪检测;在25℃下,以甲醇为溶剂、内置氘代丙酮为锁场溶剂,均苯三甲酸为内标,...     

三种不同生物质炭对2,4-二氯苯氧乙酸吸附特性的研究

以植物类生物质原料(玉米秸秆和毛杨树叶)、城市污泥两类原材料在400℃条件下制备生物质炭(秸秆、毛杨树叶以及城市污泥三种生物质炭分别表示为J400、Y400和W400),使用酸洗法去除生物质炭表面灰分优化生物质炭,采用批量吸附实验的方法分析三种生物质炭对2,4-二氯苯氧乙酸(简称2,4-D)的吸附特性,并结合元素分析及显微红外等分析方法,探讨生物质原料对生物质炭吸附2,4-D吸附特性的影响。结果表明:三种生物质炭的元素含量、O/C、H/C和(H+O)/C存在差异,大小顺序均为W400Y400J400,表明秸秆生物质炭具有更强的疏水性和更低的极性,有利于提高生物质炭对有机物的吸附能力。吸附试验显示秸秆生物质炭、杨树生物质炭、污泥生物质炭对2,4-D的吸附特性及吸附能力不同,吸附量大小依次为2.732、2.650、2.633 mg·g(-2)。三种生物质炭的红外光谱结果相似,但在O-H、饱和C-H和不饱和C-H面外振动等处存在差异;污泥生物质炭在吸附2,4-D后多处位点的吸收峰发生变化,而杨树和秸秆生物质炭发生变化的位点较少;污泥生物质炭与其他两种生物质炭对2,4-D的吸附机制差异较大。     

莱克多巴胺的毒性及其残留免疫学检测技术研究进展

综述了莱克多巴胺(RCT)的化学结构、理化特性、构效关系、毒性作用、在动物体内的代谢残留及其免疫学检测技术研究进展。     

柱前衍生-气相色谱法测定柑橘中2,4－D残留量研究初报

为了解决柑橘出口中2,4-D残留监测问题,研究了快速测定柑橘中2,4-D残留方法。样品经酸性乙腈提取,用酸性硅藻土净化,经三甲基氢氧化硫(TMSH)衍生后,用带电子捕获检测器的气相色谱仪进行测定。试验结果表明:2,4-D的最低检出量为5×10-13g,最低检出浓度为4×10-4mg/kg,在0.001、0.01、0.1mg/kg三种添加水平下,添加回收率范围为77.16%～97.72%,变异系数范围为3.30%～8.65%。该分析方法快速、准确、灵敏,重现性好,适用于柑橘中2,4-D残留量的检测。     

球孢白僵菌对棉蚜的毒力测定

经毒力测定预备实验,从5个菌株中筛选出2个对棉蚜致病力较强的球孢白僵菌菌株XW0107001和YN9108008。并在室内测定其对棉蚜的毒力,筛选出了高致病力菌株YN9108008。     

2,4-D对土壤酶活性的影响

2,4-D是人类最早使用的一种有机氯除草剂,其环境效应一直是人们关注的课题之一。通过室内模拟试验方法,研究了2,4-D对土壤酶活性的影响。结果发现,2,4-D可显著降低土壤脲酶的活性,起初酶活性有一个浓度迟缓期,活性变化较小,随后则表现出较强的抑制效应;3种模型拟合均达到了显著或极显著相关,揭示出土壤脲酶在一定程度上可表征2,4-D污染的程度,从侧面反映出其机理为完全抑制;得到土壤严重污染时2,4-D浓度为5.88～15.15mg·L-1。土壤转化酶效应无规律性变化,其对2,4-D反应较为迟钝。土壤碱性磷酸酶随农药浓度变化,先激活,后抑制,最后又激活;采用一元二次模型拟合,除4号土样外,其余均达到显著或极显著相关,表明磷酸酶活性与土壤污染状况有着密切的关系。土壤肥力水平对农药的生态毒理有重要的影响。     

砂糖橘果实中2,4-D的残留及保鲜效果研究

2,4-D与杀菌剂施保功混配处理可显著提高砂糖橘的贮藏保鲜效果,30 d内可较好地保持果实的糖度,防止Vc损失,并使果实维持一定的酸度。对处理后贮藏期间砂糖橘果皮和果肉内2,4-D含量变化进行分析,结果显示,在用2,4-D浸泡处理4 h后果皮中2,4-D含量急剧升高,在处理24 h后果肉中2,4-D含量最高,之后均逐渐降低。贮藏30 d后,2,4-D含量均降至一个较低的水平,符合柑橘的食用安全标准。     

4种杀虫剂对大豆蚜虫的室内毒力测定

为明确啶虫脒、吡虫啉、烯啶虫胺和吡蚜酮等杀虫剂对大豆蚜虫的毒力和防治效果,采用浸渍法进行了4种杀虫剂对大豆蚜虫的室内毒力测定。结果表明,4种杀虫剂对大豆蚜虫都有较高的毒力,以啶虫脒对大豆蚜虫的毒力最高,LC50为7.026μg/g,其余3种杀虫剂的毒力大小依次为吡虫啉、烯啶虫胺、吡蚜酮,LC50分别为9.484、15.247和43.734μg/g,对大豆蚜虫均有较好的防治效果。     

2,4-D对盐藻生长的调控作用

[目的]探讨2,4-D对盐藻生长的调控作用。[方法]研究不同浓度的2,4-D对盐藻生长的影响。[结果]1.0～6.0mg/L的2,4-D均能促进盐藻的生长与物质积累,其中4.0mg/L为最佳促进浓度,可使盐藻的细胞密度、蛋白质及β-胡萝卜素积累均达到最大值。[结论]2,4-D可用于盐藻培养中对盐藻生长的调控。     

洛阳温室蔬菜根结线虫的初步鉴定及其毒力测定

[目的]测定药剂对蔬菜根结线虫的毒力。[方法]采用传统的制作会阴花纹的方法,对洛阳温室蔬菜根结线虫的种类进行鉴定,并选择4种药剂对根结线虫的二龄幼虫进行室内毒力测定。[结果]结果表明,洛阳温室蔬菜根结线虫病主要由南方根结线虫引起,未发现其他种类;4种药剂中5%阿维菌素乳油对根结线虫有较高的毒力。[结论]该研究为根结线虫的有效防治奠定了基础。     

6种杀菌剂对番茄早疫病的毒力测定

采用菌丝生长速率抑制法测定了6种杀菌剂对番茄早疫病的抑菌作用,并得到了6个毒力回归方程及抑制有效中浓度(EC<,50>).结果表明,6种杀菌剂对番茄早疫病病原菌的生长均有抑制作用,但不同药剂之间有差异,对番茄早疫病病原菌的EEC<,50>由低到高依次为25%金力士乳油、25%巨佳乳油、10%世高水分散粒剂、70%纳米欣...     

低浓度2,4-D及外源激素诱导小麦体细胞快速成苗

用０．２ｍｇ／Ｌ、０．４ｍｇ／Ｌ、０．８ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ,通过１４ｄ左右的时间,从４个小麦品种（“Ａｌｏｎｄｒａ”、“扬麦９号”、“扬麦１０号”、“扬麦１５８”）的未成熟胚上均诱导出芽簇块。其中,以０．８ｍｇ／Ｌ浓度２,４－Ｄ的诱导率最高,部分品种（Ａｌｏｎｄｒａ和扬麦１５８）的诱导频率可达８０％。细胞分裂素对芽簇块的诱导有一定的抑制作用,ＫＴ的抑制效果尤为明显。芽簇块在含０．２ｍｇ／Ｌ、０．４ｍｇ／Ｌ２,４－Ｄ的原培养基上可以成苗,但需时较长,成苗数较少;转移到添加１ｍｇ／ＬＫＴ＋０．１ｍｇ／Ｌ ＩＡＡ的成苗培养基上１４ｄ后,每个芽簇块平均成苗４．４个。如分割成小块,成苗效率进一步提高。研究结果表明,芽簇块在继代培养基上很难保持微芽状态。     

2，4-D人工抗原合成及2，4-D类农药特异性多克隆抗体的研制

通过改良EDC法,将2,4-DB、2,4-D分别与载体蛋白(BSA、OVA)偶联合成了2,4-D的免疫原2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA和包被原2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA.免疫抗原测定结果表明,所得紫外吸收光谱,具有载体蛋白BSA和半抗原2,4-DB或2,4-D的特性,最大吸收峰为282 nm.合成2,4-DB-BSA、2,4-D-BSA免疫抗原的结合比分别为1:24、1:20,合成的2,4-DB-OVA、2,4-D-OVA包被原的结合比分别为1:10、1:8.上述两种免疫原分别免疫新西兰白雄兔,获得2,4-D类农药多克隆抗体.其中免疫2,4-DB-BSA的两只兔PBD1和PBD2的效价较高,分别是1:102400和1:51 200.选择效价较高的PBD1多克隆抗体进一步优化筛选出抗原抗体的工作浓度,2,4-D-OVA包被原3 μg·mL-1,PBD1多克隆抗体1:12 800.经测定,该多克隆抗体对目标检测物2,4-D、2,4-D butyl ester敏感度较高,抑制中浓度(I,50)、检测限(I,20)分别为,2,4-D:179.8 ng·mL-1,1.09 ng·mL-1;2,4-D butyl ester:3010.0 ng·mL-1,1.53 ng·mL-1.对2,4-D识别的特异性也较强.另外测定了制备2,4-D多克隆抗体对几种2,4-D类似结构化合物交叉特异性反应,2,4-DB最强,2,4-D次之,之后依次为2,4-D丁酯、2,4-D异丙酯,交叉反应性较差的有2甲4氯、2,4,5-涕、2,4-滴丙酸.