铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖研究

为研究铁皮石斛种子试管苗的快速繁殖技术,以铁皮石斛的种子为外植体。在不同培养基、不同的激素组合进行诱导产生试管苗,用松树皮作为移栽基质。结果表明:铁皮石斛种子在不同激素的培养基上均能萌发;不同培养基对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为改良MS>N6>MS>1/2N6>1/2改良MS>1/2 MS,以改良MS培养基最好;不同激素组合对铁皮石斛原球茎的增殖、分化有明显差异,其顺序依次为B5>B2>B3>B1>B4;不同激素组合对铁皮石斛生根有影响,其顺序依次为C2>C3>C1。因此,比较适合铁皮石斛种子萌发的激素是1/2MS+NAA 0.3 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原球茎增殖、成苗的培养基及激素组合为改良MS+6-BA0.4 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L;适于铁皮石斛原生苗生根的培养基为改良MS+ABT60.6 mg/L+IBA 0.2 mg/L+NAA 0.1 mg/L+蔗糖15 g/L。在改良MS培养基中不加任何水果汁诱导铁皮石斛种子,获得了大量试管苗,移栽成活率达到90%以上。     

添加物和植物生长调节剂对铁皮石斛离体快速繁殖的影响

以铁皮石斛未成熟种子为外植体,在离体条件下进行原球茎诱导,类原球茎增殖、分化、生根试验研究。结果表明,以种子萌发直接诱导原球茎的适宜培养基为MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L NAA+0.5g/L活性炭(AC)+1.0g/L水解酪蛋白(CH),诱导率达95%以上。在MS+1.0mg/L BA+0.5mg/L KT+0.5mg/L NAA+0.5g/L AC+0.6g/L CH条件下可获得类原球茎最大增殖系数(达18.7),该培养基也适宜于维持类原球茎的增殖保存。类原球茎的最大分化率为93.7%,所需的培养基成分为MS+0.5mg/L BA+0.5mg/L KT+0.2mg/L NAA+0.5g/L AC+0.6g/L CH。试管苗在1/2 MS+0.5mg/L NAA+0.5g/L AC培养基上生根率达100%,且根系健壮发达,移栽后全部成活,长势良好。     

铁皮石斛组培技术研究

以野生优质铁皮石斛种源授粉获得铁皮石斛蒴果,再以蒴果种子为源材料进行组培快繁试验,结果表明:试验中种子萌发的最适培养基为MS+NAA0.5mg/L,萌发率达到95%;原球茎增殖培养基为MS+6~BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,鲜重增殖系数达到8.73;最适生根壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L。     

铁皮石斛组培技术研究

以野生优质铁皮石斛种源授粉获得铁皮石斛蒴果,再以蒴果种子为源材料进行组培快繁试验,结果表明:试验中种子萌发的最适培养基为MS+NAA0.5mg/L,萌发率达到95%;原球茎增殖培养基为MS+6~BA1.0mg/L+NAA0.5mg/L,鲜重增殖系数达到8.73;最适生根壮苗培养基为1/2MS+NAA0.5mg/L。     

铁皮石斛抗寒品种的快速繁殖

以铁皮石斛抗寒品种茎段为外植体,运用组织培养技术建立铁皮石斛无性快繁体系,筛选出铁皮石斛快繁的最佳培养基。结果显示,以铁皮石斛茎段为外植体诱导原球茎,最佳诱导培养基为MS+6-BA 2 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.2 mg·L~(-1),诱导率为66.67%。原球茎最佳分化培养基为MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+IBA 0.1 mg·L~(-1),苗整齐健壮,叶片大而浓绿。试管苗生根的最佳培养基为1/2 MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+NAA 0.3 mg·L~(-1),生根率为100%。驯化移栽基质为碎砖瓦15%+松树皮50%+刨花25%+羊屎10%。     

铁皮石斛组织培养研究

为了解决铁皮石斛种苗稀缺的现状,提高种苗繁殖率,以铁皮石斛种子(成熟率80％～90％)、带芽茎段、叶片3种材料作为外植体,进行组织培养研究.结果表明:铁皮石斛最适宜外植体材料是种子,最适宜的类原球茎诱导培养基为1/2MS,最适宜的类原球茎增殖培养基为MS+KT1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+CM100 mL/L+活性炭0.3 g/L,最适宜类原球茎分化培养基为MS+KT1.5 mg/L+NAA0.5 mg/L+100 mL/L苹果汁,最适宜生根培养基为MS+IBA1.5 mg/L.     

铁皮石斛种子快繁培养体系的优化

以铁皮石斛种子为基础材料,建立铁皮石斛快速成苗的组培技术体系.通过调整组织培养过程中的激素种类及浓度配比,找出不同生长阶段最适的培养基配方.结果表明,诱导种子萌发、原球茎的最适培养基配方为1/2MS+0.1 mg/L NAA,9～10 d时种子开始萌发,30 d后种子萌发率达94.4％.原球茎增殖与分化的最适培养基配方为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA,15 d后原球茎增殖率为8.0％,55 d后分化率达73.6％.生根壮苗阶段的最适培养基为MS+0.5 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA,生根率达92.0％.研究结果为铁皮石斛快繁技术奠定了理论基础.     

铁皮石斛培养基配方筛选

以铁皮石斛种子、一年生嫩茎为外植体,通过试验筛选种子培养、原球茎增殖、分化成苗、壮苗生根4个阶段的最佳配方。结果显示,铁皮石斛苗在MS培养基中生长状况最好;种子培养最佳配方为MS＋0.5 mg·L^-1NAA＋15%土豆;当添加NAA的浓度为0.2 mg·L^-1,6-BA的浓度为2.0 mg·L^-1时,铁皮石斛原球茎的增殖率达到最高;适合分化的培养基为MS＋0.5 mg·L^-1NAA;铁皮石斛壮苗生根的较佳培养基为MS＋0.5 mg·L^-1IBA＋0.5 mg·L^-1NAA＋8%香蕉。     

梳唇石斛快速繁殖技术

通过组织培养方法研究梳唇石斛快速育苗技术,利用不同培养基诱导种子直接萌发形成原球茎,并进一步分化获得再生植株。结果表明,种子萌发原球茎诱导的最佳培养基:1/2MS NAA 0.2 mg/L;最佳原球茎增殖培养基:1/2MS 6-BA 0.5 mg/L;最佳生根培养基:1/2MS 香蕉泥100 g/L NAA 0.5 mg/L。     

不同培养基对铁皮石斛种子萌发和壮苗生根的影响

以铁皮石斛种子为材料,通过组织培养技术,不添加植物生长调节剂直接得到丛生芽,并比较天然有机物、活性炭等添加物对铁皮石斛丛生芽壮苗生根的影响,优化铁皮石斛组培快繁技术体系.结果显示,铁皮石斛种子分化最佳培养基为MS+6 g/L琼脂+20 g/L蔗糖+80 g/L香蕉泥;芽苗的壮苗生根试验中,最佳培养基为1/2 MS+0.4 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA+20 g/L蔗糖+6 g/L琼脂+80 g/L香蕉泥+0.5 g/L活性炭,有利于芽苗的壮苗和生根.该研究可以一次性直接得到优质铁皮石斛幼苗,减少了试验步骤,节省人工、降低成本,提高了试验效率,促进原球茎增殖、提高分化率,促进壮苗和生根,可为铁皮石斛快繁和大规模化生产提供技术支持.