不同产地金银花中绿原酸及木犀草苷的快速检测

[目的]利用HPLC法同时检测不同产地金银花中绿原酸和木犀草苷。[方法]采用迪马公司Kromasil-C18色谱柱(250×4.6mm,5μm),以甲醇-1%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为350nm,柱温为室温,流速1ml/min,进样量5μl。[结果]绿原酸浓度在0~1mg/ml内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9991),回收率为98.79%~101.67%,相对标准偏差为1.05%;木犀草苷浓度在0~0.1mg/ml内与峰面积呈良好线性关系(r=0.9987),回收率为98.06%~101.17%,相对标准偏差为1.17%。[结论]该方法可同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷的含量,结果准确度高、精密度好,可为金银花药材的质量控制研究提供一种可靠的参考方法。     

10批金银花有效成分的高效液相色谱测定

【目的】用高效液相色谱建立金银花中有效成分含量的检测方法。【方法】采用梯度洗脱方法,对金银花75%甲醇提取液中绿原酸、新绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、芦丁和木犀草苷8种成分的含量进行研究。【结果】8种成分在各自范围内线性关系均良好(R²>0.999 0);平均回收率为98.98%～102.84%(n=6);相对标准偏差为0.90%～4.11%。10批金银花样品均表现为绿原酸含量最高,含量为26.93～31.90 mg/g,且8种成分含量的RSD均符合标准。【结论】该方法简单稳定,适合金银花中有效成分的定量测定。     

高效液相色谱法同时测定金银花中的六种成分

建立同时测定金银花(Lonicera japonica Thunb.)中绿原酸、咖啡酸、芦丁、金丝桃苷、木犀草苷、槲皮素含量的高效液相色谱法。采用Aglient phenyl柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈(A)-0.5%醋酸(B)为流动相梯度洗脱,在波长365 nm检测绿原酸、在波长327 nm检测咖啡酸,在波长358 nm检测芦丁、金丝桃苷、木犀草苷,在波长368 nm检测槲皮素,柱温40℃,进样量10μL。结果表明,6种化合物分别在测定范围内呈现良好的线性关系,回收率为96.85%~103.61%。该方法准确、快速、简单地进行金银花中6种成分的测定。     

冠菌素处理对忍冬的花和叶中有效成分含量的影响

通过不同浓度(0.001、0.010、0.100和1.000μmol/L)冠菌素(COR)处理忍冬花和叶,应用高效液相色谱法(HPLC)测定其中有效成分含量变化。结果表明:不同浓度COR处理对忍冬花、老叶和新叶中主要成分含量产生影响,1)0.010μmol/L处理使忍冬花中的绿原酸和芦丁含量分别增加19.75%和13.80%,总体趋势表现为低浓度促进作用;2)1.000μmol/L处理使忍冬老叶中的绿原酸、咖啡酸、木犀草苷、异绿原酸A和异绿原酸C,分别较对照高49.72%、28.57%、56.64%、72.78%和49.08%,总体趋势表现为高浓度促进作用;3)1.000μmol/L处理使忍冬新叶中的异绿原酸A含量增加16.83%,对木犀草苷和总含量都有促进作用。由此可以看出,采用花可选用0.010μmol/L冠菌素处理,采用叶可选用1.000μmol/L冠菌素处理;这可为更好地开发利用忍冬提供理论依据。     

高效液相色谱法测定金银花中木犀草素含量

为了准确测定金银花中木犀草素的含量,通过摸索流动相、洗脱方式、保留时间和速度等条件,建立了高效液相色谱测定金银花中木犀草素含量的方法.采用SinoChrom ODS C18色谱柱(4.6 mm× 150 mm,5 μm),流动相为甲醇-0.3% H3PO4溶液,流速为0.8 mL/min,梯度洗脱.检测波长350 nm,柱温25 ℃,木犀草素的线性范围0.032 5～0.39 μg/mL,回归方程为y =62.53x+10.88(r =0.999 0),平均回收率可达98.39%.测得金银花样品中木犀草素的含量为1.09%.     

不同施肥方式对金银花质量的影响

金银花是大宗常用珍贵中药,绿原酸含量及木犀草素苷含量是金银花产品质量主要指标。在遵循平衡施肥原则前提下,通过不施肥、单施无机肥、单施有机肥、无机肥有机肥配施的四种不同施肥方式,对金银花产品中绿原酸、木犀草素苷含量进行了比较。结果表明:施肥能显著提高金银花产品质量,单施无机肥与单施有机肥差别不显著;只施用有机肥更优于只施用无机肥;有机肥无机肥结合施肥,十分接近于只施用有机肥,可作为大规模商品化生产种植的依据。     

反相高效液相色谱法同时测定金银花中的绿原酸和木犀草苷方法的优化

[目的]研究反相高效液相色谱法同时测定金银花中的绿原酸和木犀草苷的优化色谱条件.[方法]采用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）同时测定金银花中绿原酸和木犀草苷含量,并对色谱条件进行优化.[结果]最佳色谱条件为色谱柱Waters SunFireTMC18（4.6mm＆#215;150 mm,3.5 μm）、柱温40℃,流动相为乙腈-0.5％冰醋酸,梯度洗脱为0～15 min（10：90～20：80）、16 ～ 17 min（20：80 ～ 10：90）,流速1.0 ml/min,检测波长0～15 min 328 nm、16 ～ 17 min 350 nm.[结论]优化后缩短了测试时间,为金银花质量的快速检测提供参考依据.     

不同施氮量和采收期对金银花主要成分的影响

为金银花药材的生产及质量控制提供科学依据,设5个施氮水平、4个采收期,研究了不同施氮量和采收期对金银花中绿原酸和木犀草苷含量的影响.结果表明:施氮23g/株可明显提高绿蕾期、白蕾期、白花期和黄花期金银花中的绿原酸含量和木犀草苷含量;在白蕾期采收,金银花中绿原酸和木犀草苷含量均较高,可作为金银花中药材的适宜采收时期.     

金银花和山银花有效成分测定及比较分析

为了比较金银花与山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙含量差异.采用Diamonsil C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm),分别以流动相乙腈-0.5%磷酸(10∶90)和检测波长327nm,流动相乙腈-0.5%醋酸梯度洗脱和检测波长348nm测定绿原酸、木犀草苷,以蒸发光散射检测器和流动相乙腈-0.4%醋酸梯度洗脱检测灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙.结果发现:绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的线性范围分别为15.28~76.4、10.8~43.2、49~196和54.6~218.4μg/mL.山银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙含量分别为0.0513%、6.953%、1.132%、5.59%;金银花中绿原酸、木犀草苷、灰毡毛忍冬皂苷乙含量分别为2.82%、0.1847%、0.056%.本结果可为有效鉴别金银花和山银花提供依据,同时HPLC方法为全面控制金银花和山银花药材的质量提供了可靠的方法.     

RP-HPLC法同时测定金银花中绿原酸·芦丁·木犀草素的含量

[目的]同时测定金银花中绿原酸、芦丁、木犀草素的含量。[方法]利用反相高效液相色谱法测定,采用Zorbax SB—C18柱（250mm×4．6mm,5μm）,以甲醇：0．02％磷酸=50：50为流动相,流速1．0ml／min,检测波长350nm,柱温30℃。[结果]不同品种的金银花中绿原酸、芦丁、木犀草素的含量差别较大。[结论]该方法简单、可行,为金银花的质量控制提供了一定的参考。     

忍冬不同器官中绿原酸的提取及含量测定

[目的]提取忍冬不同器官中的绿原酸并进行含量测定。[方法]采用酸乙醇回流法对＂巨花一号＂忍冬的藤、叶、花和花蕾中绿原酸进行提取,并采用高效液相色谱法对绿原酸进行检测和含量测定。[结果]忍冬不同器官中绿原酸的含量不同,其中花和花蕾中绿原酸的含量较高,藤和叶中含量较少;其排序为：花（3.798 mg/g）〉花蕾（3.795 mg/g）〉藤（2.558 mg/g）〉叶（2.185 mg/g）。[结论]从忍冬药材资源开发利用的角度而言,藤和叶也可以作为绿原酸提取和综合利用的材料。     

不同产地金银花挥发性成分的GC-MS分析

[目的]该研究旨在比较与分析不同产地金银花挥发油的化学成分。[方法]采用HP-5MS弹性石英毛细管柱,程序升温,以 EI离子源和四极杆质量分析器进行分析,质谱图用 NIST02和 Wiley275谱库检索,鉴定金银花挥发油的各种成分,并用色谱峰面积归一化法测定各成分的相对百分含量。[结果]广西产金银花挥发油中鉴定出35种化学成分,主要成分为亚麻酸甲酯、软脂酸、ζ-依兰油烯等;湖南产金银花挥发油中鉴定出18种化学成分,主要成分为软脂酸、亚油酸、α-姜黄烯等。[结论]不同产地金银花挥发油的主要成分存在差异。     

金银花中绿原酸的提取纯化方法研究

[目的]对金银花中绿原酸的提取和纯化方法进行研究。[方法]用浓度70％乙醇和水做预试验确定提取溶剂,然后通过正交试验考察金银花中绿原酸提取工艺的最佳条件。在纯化试验中选用乙酸乙酯萃取法和聚酰胺层析法,得出纯化的最佳方案,并对聚酰胺层析的层析条件和不同洗脱剂的洗脱效果进行考察。[结果]试验表明,金银花中绿原酸的最佳提取条件为：以浓度70％的乙醇作提取溶液,加醇量为12倍,提取3次,每次2h。平均提取率为6．62％。乙酸乙酯萃取法纯化后绿原酸纯度为18．4％;吸附有绿原酸的聚酰胺以浓度30％的乙醇洗脱效果较好,得到的绿原酸纯度为33．2％。[结论]采用聚酰胺层析较有机溶剂纯化法操作简便、纯度高、无有机溶剂残留且成本低。     

忍冬植株光合生理特性初步研究

研究忍冬植株光合特性,为确定合理栽培措施、提高药材产量提供参考。利用CRIAS-1便携式光合作用测定仪,测定1d中不同时段、不同光子通量密度下的净光合速率及其相关生理生态因子;采用灰色关联分析,确定忍冬植株净光合速率与生态因子间的关联度。结果表明,忍冬植株叶片光饱和点为1 529μmoL/(m2.s)、光补偿点为48μmoL/(m2.s);净光合速率日变化呈双峰曲线状,有光合"午休"现象存在;净光合速率与气孔调节密切相关(r=0.82,P0.05),大气中CO2浓度、大气温度是影响净光合速率关系最密切的生态因子。     

喷施叶面肥对忍冬生长指标的影响

试验研究了喷施不同类型叶面肥对忍冬生长指标的影响。结果表明,氨基酸＋全微量元素叶面肥和全微量元素叶面肥均能显著缩短花枝节间长度,从而提高单位长度花枝上的花蕾数量,有助于提高产量;喷施氮磷钾复合肥和氮肥对花枝节间长度有显著促进作用,能显著降低单位长度花枝上的花蕾数,进而造成减产。喷施磷钾动力叶面肥和铁肥叶面肥对忍冬花蕾伸长和（或）花蕾鲜重有显著促进作用;喷施全微量元素叶面肥、氨基酸＋全微量元素叶面肥和激素DCPTA[2-（3,4-二氯苯氧基）-乙基-二乙胺]对忍冬叶片大小及鲜重有促进作用,有助于提高金银花产量。     

响应面法对忍冬藤总黄酮提取工艺的优化

试验考察了乙醇体积分数、液固比、提取时间、提取温度4个因素对忍冬(Lonicera japonica Thunb.)藤总黄酮提取的影响,并采用Box-Behnken试验优化了忍冬藤总黄酮提取工艺。结果表明,4个因素能显著影响忍冬藤总黄酮的提取,并优化得出最佳提取工艺为乙醇体积分数91%、液固比42∶1(m L∶g)、80℃提取2.7 h,此时总黄酮提取率为5.22%,与理论值5.24%相差不大,表明该工艺可行。     

金银花扦插繁殖技术研究

以四倍体金银花1～2 a生木质化枝条为试材,研究插穗蘸取根宝2号+遮阳网,插穗蘸取根宝2号、无遮阳网,仅有遮阳网,既无遮阳网、也没蘸取根宝2号4种条件对金银花扦插效果的影响。结果表明,插穗在蘸取根宝2号并有遮阳网的条件下,扦插效果最好,既无根宝2号、又没遮阳网的扦插效果最差。     

Effect of Different Factors on Rooting Characteristics and Survival of Lonicera japonica Thunb

[Objective] The aim was to explore the effects of different factors on rapid propagation and seedling survival of Lonicera japonica Thunb. [Method] The cuttings of 1, 2 or 3 years old, with different length, were soaked in different hormones at different concentrations for different time and planted at different dates. Finally, their rooting rate and survival rate in different treatments were measured and compared. [Result] The rooting rate and survival rate of one-year old cuttings with length of 10-13 cm and planted on September 20 and October 20, 2012 were relatively higher among all the treatments. Hormone treatment could significantly promote the callus formation and accelerate the rooting of the cuttings, and improve their survival rate. The cuttings treated with 120-200 mg/L ABT1 or NAA for 35-45 min had higher rooting rate and survival rate. Among them, the survival rate of cuttings treated with 160 mg/L ABT1 for 35 min was the highest, up to 92.5%. [Conclusion] The study provided basis for improving the survival rate of L. japonica by cuttage, and for optimizing the rapid propagation technique.     

金银花快繁技术比较研究

[目的]比较研究金银花块繁技术。[方法]分别选取金银花的茎尖、1~2年生的茎段作为外植体,并对其进行表面灭菌、接种培养,以找出最佳的取材部位和相应的消毒方法。[结果]在初代培养过程中,当以茎尖作为外植体时,材料在添加生长调节剂0.5~1.0mg/L 6-BA,0~0.3 mg/L NAA或0.1 mg/L IBA的培养基上启动状况都比较良好;用茎段作外植体,则多产生愈伤组织。在增殖培养时,添加0.5 mg/L 6-BA+0.10 mg/L IBA的培养基最有利于金银花的增殖培养。在生根培养时,以1/2 MS+1.5 mg/L IBA更有利于植株的生根。[结论]筛选出了一个更好的快速繁殖金银花优良品种的方案,为生产用苗提供了一种更为快速和科学的繁殖途径。     

分离纯化金银花绿原酸工艺研究

[目的]研究从金银花中提取、纯化绿原酸的工艺。[方法]通过单因素试验和正交试验,筛选最佳提取条件和纯化条件。[结果]最佳提取工艺条件为：提取温度60℃,提取溶剂为60%乙醇（V/V）,pH值为4,提取时间为1.5h,料液比为1∶25。在此条件下,提取的绿原酸得率为4.52%。最佳纯化工艺条件为：洗脱液浓度20%,洗脱液体积为5BV,洗脱液pH值为8,洗脱液流速为5ml/min。在此条件下,纯化的绿原酸产品纯度为58.3%。[结论]该试验得到了绿原酸最佳提取条件和纯化条件,为绿原酸的工业化生产提供了理论试验依据。