苜蓿高频再生组织培养体系的优化

以3个品种紫花苜蓿7日龄无菌苗的下胚轴为外植体,以MS培养基为基础培养基,研究不同浓度激素配比对紫花苜蓿离体再生体系中愈伤组织的形成、不定芽诱导以及生根的影响。结果表明:金皇后、甘农1号、阿尔冈金愈伤组织诱导的最佳培养基分别为MS+2,4-D 2.5 mg/L+6-BA 0.5mg/L、MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L、MS+2,4-D 3.0 mg/L+KT 1.0 mg/L;不定芽诱导的最佳培养基分别为MS+6-BA 2.0 mg/L+CH 0.5 g/L、MS+NAA 0.3 mg/L+KT 0.5 mg/L、MS+KT 1.2 mg/L;最佳生根培养基为1/2MS+IBA 1.0 mg/L。     

三个苜蓿品种植株高频再生体系的研究

以适宜于西北地区生长的‘甘农1号’杂花苜蓿、‘甘农3号’紫花苜蓿,‘新疆和田大叶’紫花苜蓿3个品种的不同部位外植体为供试材料,进行了植株体外再生的研究.结果表明,苜蓿基因型、外植体来源、外源激素种类及浓度、激素处理时间、培养基蔗糖浓度等因素均影响细胞的生长发育和植株再生.‘甘农1号’苜蓿下胚轴愈伤组织诱导率和体细胞胚形成率最高,可达97.2%和70.9%,‘新疆和田大叶’苜蓿下胚轴次之,‘甘农3号’出愈率和体细胞胚形成率均最低;苜蓿愈伤组织诱导以2.0mg/L 2,4-D单独处理或2.0mg/L 2,4-D+0.5mg/L KT组合处理为最佳,在此激素组合处理下,下胚轴愈伤组织诱导率最高可达97.2%,激素处理时间以20d为宜;体细胞胚的发育则以2mg/L 6-BA+0.5mg/L NAA的激素组合处理为宜,在此激素组合处理下,体细胞胚形成率最高可达70.9%.适宜的生根培养基为1/2MS+1.0mg/L IBA+1%蔗糖+0.7%琼脂.体细胞胚形成阶段培养基添加25~30g/L的蔗糖有利于愈伤组织分化.     

旱半夏组织培养技术的优化研究

以旱半夏无菌苗的叶片、叶柄和块茎为外植体,在不同温度及激素组合的条件下,进行了愈伤组织诱导、芽分化和生根的研究。结果表明:愈伤组织诱导的最适温度为25℃;MS+KT 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L对块茎的愈伤诱导效果最好,诱导率达96.7%。温度对芽分化的影响不明显;最佳的芽分化培养基为MS+KT 3.0 mg/L+2,4-D 1.0 mg/L。MS+IBA 0.5 mg/L+蔗糖30 g/L对单芽增殖效果明显。MS+KT 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L最有利于生根。     

欧李芽离体诱导培养技术研究

采用4种不同的愈伤组织培养基和4种不同的芽分化培养基诱导欧李离体芽,以筛选出最佳的诱导方法.结果表明,欧李芽离体诱导最佳培养途径:在MS+ KT 0.2 mg/L +2,4-D0.25 mg/L的培养基上诱导出愈伤组织,然后将愈伤组织转接到MS+6- BA(或KT) 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L进行芽分化.     

薏苡愈伤组织的诱导与分化

为薏苡优良品种的脱毒快繁和基地化脱毒种苗的生产提供科学依据,以薏苡气生根、种子胚、嫩茎为材料,研究了2,4-D、KT、NAA不同浓度配比对愈伤组织的诱导、分化和成苗的影响。结果表明,KT是薏苡芽分化及脱毒种苗生成的主要影响因素,气生根是诱导胚性愈伤组织及胚状体最合适的外植体,其最佳分化培养条件为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 0.8mg/L,最佳成苗培养基为MS+2,4-D 0.4mg/L+KT 1.5mg/L+NAA 1.0mg/L。     

不同因素对魔芋愈伤组织诱导及增殖分化的影响

以清江花魔芋1号为试材,分析了不同因素对魔芋(A morphophallus)愈伤组织诱导与增殖分化的影响.结果表明,培养基中激素配比为MS+ 2.0 mg/L NAA+ 1.0 mg/L 6-BA或MS+2.0mg/L2,4-D+0.5 mg/L KT或MS+ 2.0 mg/L 2,4-D+ 1.0 mg/L KT时,均能获得较高的愈伤组织诱导率;4种外植体愈伤组织诱导率之间存在差异显著,诱导率大小依次为鳞片＞球茎＞叶片＞根段;添加活性炭(AC)可明显增强愈伤组织诱导效果;在MS+ 2.0 mg/L TDZ +0.1 mg/L NAA培养基上愈伤组织分化形成不定芽的效果相对较好,分化率达96.15％,分化系数达9.52.     

玉米湘农3号幼胚愈伤组织诱导及再生体系建立

以玉米品种湘农3号幼胚为外植体,以MS为基本培养基,研究2,4-D与NAA浓度配比对愈伤组织诱导、KT与IBA浓度配比对愈伤组织分化、NAA与6-BA浓度配比对试管苗生根的影响。结果表明:愈伤组织诱导的最适培养基为MS+2,4-D 2.0 mg/L+NAA 0.5mg/L;愈伤组织分化的最适培养基为MS+KT 1 mg/L+IBA 0.5 mg/L;生根的最适培养基为MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.6 mg/L。     

红掌愈伤组织高效再生体系建立研究

红掌愈伤组织高效再生体系建立研究结果表明:1/2MS+6-BA 1.0 mg/L+2,4-D0.4 mg/L+NAA 0.3 mg/L+KT0.3 mg/L红掌诱导愈伤组织效果最佳,诱导率达50%;1/2 MS+6-BA 0.4 mg/L+KT0.1 mg/L+蔗糖25g/L+NAA 0.3 mg/L产生丛生芽的效果最好,愈伤分化率达90%。     

不同基因型甜高粱愈伤组织与丛生芽诱导条件优化

【目的】探讨不同培养基类型和激素配比对不同基因型甜高粱的愈伤组织和丛生芽诱导的影响,为建立高效稳定的甜高粱遗传转化体系奠定基础。【方法】以不同基因型甜高粱辽甜三号和北甜三号的成熟种子为外植体,在MS培养基中添加不同浓度2,4-D及2,4-D与NAA、6-BA或KT配比组合,对愈伤组织和丛生芽进行诱导;分别在B5、N6、MS和1/2MS培养基中添加不同2,4-D、NAA、6-BA组合,对愈伤组织进行诱导。【结果】适宜北甜三号愈伤组织和胚性愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L NAA,辽甜三号为MS+2.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA,可获得质量较好的愈伤组织,愈伤组织块大且色泽鲜艳。适于两个基因型甜高粱丛生芽诱导的最佳基本培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA+0.5 mg/L 2,4-D,但不同基因型的诱导率有明显差异,以辽甜三号的诱导效果较好。【结论】不同浓度2,4-D与其他激素配比对两个基因型甜高粱的愈伤组织诱导有明显影响,以对辽甜三号的诱导效果较好;在MS、B5、N6、1/2MS基本培养基中,MS可作为愈伤组织诱导的最佳基本培养基。     

苜蓿愈伤组织的诱导和再生体系的建立

以改良SH为基本培养基,研究了不同激素配比和不同外植体对苜蓿愈伤组织诱导的影响,筛选出诱导愈伤组织的最佳外植体是下胚轴、最佳培养基为SH+2,4-D 2mg/L+KT 0.2mg/L;继代增殖后对愈伤组织进行分化再生培养,研究了附加不同浓度外源激素的MS和改良SH培养基对愈伤组织分化的影响,确定最佳分化培养基为改良SH+NAA0.1mg/L+KT 0.5mg/L。     

甘薯的组织培养

以甘薯的叶片为外植体进行组织培养,结果表明:适合甘薯愈伤组织诱导的培养基是MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L和MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L,适宜愈伤组织分化出根的分化培养基是MS+KT 0.5 mg/L或MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5mg/L或MS+KT 2 mg/L+2,4-D 0.5 mg/L,适宜根分化出试管苗的分化培养基为MS+KT 2 mg/L+NAA 0.5 mg/L;增殖培养基为MS;生根的培养基为1/2 MS.     

安祖花愈伤组织诱导和植株再生的研究

为建立适合安祖花遗传转化的受体体系,分别选取安祖花组培苗带叶柄的叶片和带叶柄的茎段为外植体,进行了愈伤组织的诱导和植株再生试验。结果表明:以带叶柄的茎段为外植体对愈伤诱导效果好于带叶柄的叶片。使用带叶柄茎段为外植体,以1/2MS BA 1.0 mg/L 2,4-D 0.1 mg/L为基本培养基进行愈伤组织诱导和继代培养,愈伤组织诱导率最高为89.65%;使用3%蔗糖作为碳源的1/2MS添加0.1 mg/L KT能显著提高诱导率;添加NAA 0.5 mg/L或2,4-D 0.5 mg/L有助于生根。     

马铃薯根组织培养与植株再生

利用马铃薯温室生长幼芽和组培根组织进行了以MS为培养基、附加不同种类和浓度生长素和细胞分裂素组成的8种培养基,在散光和黑暗条件下培养诱导愈伤组织,在3种分化培养基上培养分化再生植株的试验。结果表明,青薯5号和青薯8号温室生长幼芽根组织接种MS＋2,4-D 2mg/L＋BAP 3mg/L＋NAA 0.5mg/L＋蔗糖30g/L＋琼脂7g/L培养基上散光条件下培养45-90d产生愈伤组织,诱导率为0.024%;青薯5号愈伤组织接种1/2MS＋2,4-D 0.5mg/L＋BAP 2mg/L＋KT 2mg/L＋GA30.5mg/L＋ZT0.2mg/L＋蔗糖20g/L＋琼脂7g/L培养基上培养80d分化出再生植株,分化率为6.25%,再生植株切成一叶茎段接种于MS＋BAP 0.1mg/L＋IAA 10mg/L＋GA30.1mg/L＋白糖30g/L＋琼脂6g/L培养基上培养3周长成株高8-10 cm、叶7-10片、叶色深绿和根系发达的小植株。     

马铃薯茎段愈伤组织培养体系的优化

以克新12号、克新13号、东农303和早大白4种马铃薯试管苗茎段为材料,研究各品种的组织培养体系。结果发现,克新13号和克新12号的最适愈伤组织诱导培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+1 mg/L 2,4-D;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D;早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D。用上述最适诱导培养基培养,各品种的愈伤诱导率分别为100%,100%,100%和90%。克新13号愈伤组织分化的最佳培养基为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+4.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;克新12号和早大白为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA3;东农303为MS+30 g/L蔗糖+8 g/L琼脂+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/LNAA+1.5 mg/L GA3。用上述最适诱导培养基培养,各品种的分化率分别为80%,90%,100%,76.7%。     

结缕草成熟胚愈伤组织的诱导及再生体系的研究

以结缕草的成熟胚为外植体,通过胚性愈伤组织诱导进行植株再生。结果表明在MS+2,4-D(2.0mg/L)+VB1(4mg/L)的培养基中,成熟胚可较高频率的诱导产生愈伤组织,诱导率为43.20%,但愈伤组织质量较差。将其在降低2,4-D浓度和添加6-BA,ABA的继代培养基中继代培养,可明显改善愈伤组织质量,增加胚性愈伤。筛选继代的胚性愈伤组织置于分化培养基MS+6-BA(1.0mg/L)+KT(2.0mg/L)+NAA(0.1mg/L)中,分化率45.6%。本研究建立了一套有效的以成熟胚为外植体结缕草组织培养再生体系。     

黄山药愈伤组织的诱导与分化

研究黄山药愈伤组织形成、器官分化和植株再生,结果表明:叶片是诱导黄山药愈伤组织的最佳外植体;含2,4-D2.0 mg/L和BA2.0 mg/L的培养基对愈伤组织诱导效果最好;大多数愈伤组织在含有1.0 mg/LBA、0.5 mg/L NAA和2%蔗糖的培养基(pH值6.4)中能诱导出芽;含有0.5 mg/LBA、0.1 mg/L NAA和3%蔗糖的MS培养基(pH值6.8)能诱导大多数转接芽中根的形成。     

四川竹根姜胚性愈伤组织诱导和植株再生

选用四川竹根姜的茎尖组织,诱导产生了胚性愈伤组织,建立了高频再生体系。筛选出了适于胚性愈伤诱导及扩增最佳培养基MSN+1.0 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L KT+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;胚性愈伤组织分化培养基MS+0.2 mg/L 2,4-D+5.0 mg/L BA+3.0%蔗糖+0.7%琼脂;根状茎形成培养基MS+3.0 mg/LBA+0.1 mg/L NAA+6.0%蔗糖+0.7%琼脂。在3.0%~6.0%的范围内蔗糖浓度越高越促进根状茎形成。     

紫花苜蓿下胚轴再生条件的优化

[目的]优化紫花苜蓿下胚轴的再生条件。[方法]选用不同的培养基和激素,对公农1号、公农2号、美国苜蓿王、草原1号4个苜蓿品种的下胚轴进行愈伤组织的诱导和分化。[结果]经筛选,获得了诱导愈伤组织的基本培养基为改良SH＋MS有机＋MS微量及铁盐＋2,4-D2．0mg/L＋KT0．05mg／L＋蔗糖30g／L,诱导再生植株分化的培养基为MS＋NAA1．0mg／L＋KT0．1mg／L＋水解酪蛋白25mg／L＋蔗糖20g／L。[结论]得到公农1号、公农2号、草原1号3个易于诱导和分化的基因型。     

燕麦成熟胚的组织培养及植株再生

以燕麦成熟胚为外植体,通过对不同基因型、培养基的激素种类和配比、盾片放置方式的研究,探索影响燕麦成熟胚愈伤组织诱导及分化的因素.结果表明:基因型对燕麦愈伤组织的诱导及分化有显著影响;不同基因型材料诱导愈伤及分化所需激素及其比例不同,‘白燕2号’和‘陇燕3号’的最佳诱导培养基为MS+4mg/L 2,4-D+1mg/L NAA,分化培养基分别为MS+0.4mg/L NAA+0.2mg/L KT+1.0mg/L 6-BA和0.8mg/L NAA+0.8mg/L KT+1.0mg/L 6-BA;‘丹麦444’的最佳诱导培养基为MS+2mg/L 2,4-D,分化培养基为0.2mg/LNAA+0.4mg/L KT;接种时将成熟胚盾片朝下直接接触培养基放置,可获得更高的诱导率;‘陇燕3号’的成熟胚有利于燕麦再生体系的建立.