意大利蜂工蜂幼虫和蛹的药理作用初探

从抗肿瘤、抗衰老、调节机体免疫功能三方面对工蜂幼虫、蛹的药理作用进行了研究,结果表明,工蜂幼虫、蛹对小鼠Ｓ１８０肿瘤生长有明显的抑制作用,其抑瘤率分别达６０．９２％和６４．３７％,荷瘤小鼠的生命延长率分别达８０．６５％和８１．７４％;工蜂幼虫、蛹能提高大鼠脑、肝脏和务液中ＳＯＤ的活性,降低ＭＤＡ的含量提高小鼠脑组织中ＲＮＡ和蛋白质的含是;工蜂幼虫、蛹能提高小鼠Ｔ淋巴细胞转化功能、碳瘤清指数和胸腺指     

蜜蜂幼虫,蛹抗衰老作用和实验研究

用工蜂幼虫，蛹，蜂王幼虫灌胃老年Ｗｒｉｓｔａｒ大鼠１０天后，分别测定大鼠脑，肝脏和血液中ＳＯＤ活力和ＭＤＡ含量。结果发现ＳＯＤ活力均显著提高。ＭＤＡ一均下降，这反映了工蜂幼虫，蛹与蜂王幼虫一样具有明显的抗衰老作用。     

工蜂蛹及其提取物对慢性炎症和免疫性炎症的作用及机理

通过工蜂蛹及其水提物和醚提物对小鼠肉芽肿模型、大鼠佐剂性关节炎模型的作用和对肾上腺中VC及胆固醇含量的影响实验,研究工蜂蛹对慢性炎症和免疫性炎症的作用及其机理.结果发现,工蜂蛹及其中、高剂量的水提物均对小鼠棉球肉芽肿有显著的抑制作用,对大鼠佐剂型关节炎模型的原发性病变和继发性病变具良好的对抗作用,能抑制细胞因子IL-6及炎症介质PGE2的生成,明显改变肾上腺中的胆固醇和Vc含量,并能有效地防止造模期间体重的减轻,且对肾上腺和胸腺指数无明显影响;但中高剂量的醚提物对模型的影响效果不明显.表明工蜂蛹发挥抗炎及免疫作用的大部分活性物质可能存在于其水提物中,其作用机制可能是通过作用于肾上腺皮质系统而发挥抗炎作用.抑制单核巨嗜细胞的活化和分化,抑制炎症介质的产生是工蜂蛹发挥抗炎和免疫调节作用的机理之一.     

甘薯糖蛋白的免疫调节作用研究

初步研究了经ＤＥＡＥ５２和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００柱层析纯化的北京２号薯糖蛋白的免疫的免疫调节作用。结果表明甘薯糖蛋白浓度达５０μｇ／ｍｌ时可促进ＰＨＡ人外周血淋巴细胞转化,１００μｇ／ｍｌ或者１５０μｇ／ｍｌ时间可显著提高ＰＨＡ刺激的人外周血淋巴细胞转化,刺激指数分别达到６．５和４．５（Ｐ〈０．０５）。腹腔注射甘薯糖蛋白８０ｍｇ／ｋｇ．ｄ可促进小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,吞噬指数和吞噬百分数均高     

新颖抗猪流行性腹泻免疫制剂

以新生乳猪增殖猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ），通过蔗糖密度梯度离心纯化，获得结构较为完整的病毒颗粒，病毒ＥＬＩＳＡ效价为１：３×１０＾５，蛋白含量为３．９６ｍｇ／ｍＬ。将提纯的ＰＥＤＶ免疫Ｂａｌｂ／Ｃ小鼠，取其脾细胞与ＳＰ２／０骨髓瘤细胞进行融合，融合率为９５．６％。用间接ＥＬＩＳＡ筛选并进行３次再克隆，阳性率达１００％，共获得１５株能稳定分泌特异性抗ＰＥＤＶ单克隆抗体（ＭｃＡｂ）的杂交瘤细胞。其染     

香蕉越冬期ATPase和保护酶的活性及膜脂过氧化

在越冬期，随着气温的降低香蕉叶片腺苷三磷酸酶（ＡＴＰａｓｅ）活性明显提高，３月份后气温上升，活性开始下降．越冬期间超氧物岐化酶（ＳＯＤ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）、过氧化物酶（ＰＯＤ）活性呈下降趋势，膜脂过氧化产物ＭＤＡ含量呈上升趋势，其中台湾蕉ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性下降幅度比柴蕉大．ＡＴＰａｓｅ水解活性和ＭＤＡ含量明显高于柴蕉，经ＰＰ３３３处理的台湾蕉，ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＰＯＤ活性分别比对照提高６６．７７％、８６．４４％和２３７．７６％，ＡＴＰａｓｅ活性下降２４．１５％，ＭＤＡ含量下降２１．６７％，在一定程度上提高了香蕉的抗寒性     

灵芝孢子油对免疫低下模型小鼠的免疫调节作用

通过给昆明种小鼠隔天皮下注射环磷酰胺建立免疫功能低下模型,用灵芝孢子油灌胃小鼠30d,分别测定小鼠的免疫器官指数、脾淋巴细胞转化率和迟发型变态反应、抗体生成细胞数和血清溶血素水平、自然杀伤细胞活性,以研究灵芝孢子油对小鼠免疫功能的调节作用.结果表明:灵芝孢子油能显著提高免疫低下模型小鼠的脾脏指数(P<0.05)和胸腺指数(P<0.05);提高小鼠脾淋巴细胞转化率和迟发型变态反应水平(P<0.05);增强血清溶血素水平和抗体生成细胞数(P<0.05);改善小鼠自然杀伤细胞的活性(P<0.05).说明灵芝孢子油能提高免疫低下小鼠的体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能,对机体特异性及非特异性免疫功能均具有显著调节作用.     

凹纹胡蜂食用虫态营养成分分析及其利用价值评价

对凹纹胡峰３种食用态即幼虫，蛹，成虫的水分，灰分，粗蛋白，氨基酸组成，粗脂肪及总糖含量分别进行了测定和比较，结果表明，幼虫，蛹、成虫水分含量分别为７１．５８％，７１．４３％，７０．８８％，粗蛋白含量分别为１５．１３％、１７．１２％、２１．０７％；粗脂肪及总糖含量：幼虫〉蛹〉成虫，对氨基酸组成进行比值计算，幼虫，蛹和成虫必需氨基酸占总氨基酸含量，分别为３６．２０％。，３９．２３％和４２．４８％，必需     

低温胁迫对茄子的伤害及茄子抗寒机理

从膜损伤、ＡＯＳ代谢等方面研究低温胁迫对茄子的膜伤害，探索茄子的抗寒机理。试验结果表明，０￣５℃低温胁迫下，茄子叶片细胞膜透性增大，其相对电导率达２５．０５％￣５４．８０％；ＭＤＡ含量上升４６．５％￣８３．４％，细胞膜受损伤，ＳＯＤ和ＣＡＴ活性分别上升５．３９％￣３１．８１％和１１．０％￣７８．０％、ＰＯＤ活性保持相对稳定，茄子动员细胞膜保护系统清除ＡＯＳ。     

意大利蜜蜂工蜂幼虫饲料中适宜色氨酸水平

【目的】研究意大利蜜蜂(Apis mellifera)工蜂幼虫饲料中适宜色氨酸水平,为探明意大利蜜蜂工蜂幼虫发育阶段的色氨酸营养需要提供理论依据。【方法】选用1日龄工蜂幼虫1 008只,随机分为7组,每组3个重复,每个重复48只幼虫,分别饲喂色氨酸水平为7.84、8.84、9.84、10.84、11.84、12.84和13.84 mg·g-1的7种日粮。取5日龄工蜂幼虫虫体测定色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase,TPH)基因与5羟色胺受体(5-hydroxytryptamine receptors,5-HTR)1、2α、2β、7基因表达量;取6日龄工蜂幼虫虫体测定总蛋白、丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量、总抗氧化能力(total antioxidant capacity,T-AOC);取6日龄工蜂幼虫血淋巴测定其中游离色氨酸水平;7日龄时,统计工蜂化蛹率;取9日龄工蜂蛹测定色氨酸体沉积量,统计21日龄工蜂出房数目,计算羽化率。【结果】色氨酸水平为10.84 mg·g-1时,6日龄工蜂化蛹率最高,6日龄工蜂幼虫虫体蛋白含量最高,9日龄工蜂蜂蛹色氨酸体沉积最多,21日龄工蜂羽化率最高。色氨酸水平为10.84—11.84mg·g-1时,5日龄工蜂幼虫TPH基因表达量最高,5日龄工蜂幼虫5-HT受体1、2α、2β基因表达水平最高,6日龄工蜂幼虫血淋巴游离色氨酸含量最高。5日龄工蜂幼虫5-HT受体7基因表达量在色氨酸水平为7.84—11.84mg·g-1时,处于较低水平,12.84—13.84 mg·g-1时显著高于其他水平(P0.05)。6日龄工蜂幼虫MDA含量在色氨酸水平为7.84—11.84 mg·g-1时较低,12.84—13.84 mg·g-1时含量显著高于其他水平(P0.05)。6日龄工蜂幼虫T-AOC在色氨酸水平为7.84—9.84 mg·g-1时处于较低水平,10.84—11.84 mg·g-1时处于较高水平,12.84—13.84mg·g-1时显著高于其他水平。【结论】意大利蜜蜂工蜂幼虫饲料适宜色氨酸水平为10.84—11.84 mg·g-1。     

意大利蜜蜂蜂王与工蜂幼虫甲基供体S-腺苷甲硫氨酸合成与代谢的差异

【目的】研究意大利蜜蜂(Apis mellifera ligustica)蜂王与工蜂幼虫甲基供体S-腺苷甲硫氨酸(S-adenosylmethionine,SAM)合成与代谢的差异,为探索DNA甲基化与蜜蜂级型分化的关系提供理论依据。【方法】试验选用890只1日龄雌性蜂幼虫,分别来自5群姐妹蜂王群。其中445只进行人工育王(89只/群);剩余445只培育成工蜂(89只/群)。取3、4、5日龄蜂王和工蜂幼虫,测定其体内SAM合成与代谢关键酶基因表达和酶活性的差异。【结果】蜂王幼虫SAM含量随日龄的增加变化不显著(P0.05);工蜂幼虫SAM含量随日龄增加呈上升趋势(P0.05)。蜂王幼虫SAMS基因表达量随日龄增加呈梯度下降的趋势(P0.01),而工蜂幼虫SAMS表达随日龄变化不显著(P0.05);3日龄与4日龄时,蜂王幼虫SAMS表达量显著高于工蜂(P0.05),5日龄时,工蜂幼虫SAMS表达量显著高于蜂王(P0.05)。Dnmt1a与Dnmt3表达在两级型间差异不显著(P0.05),其中蜂王幼虫Dnmt1a表达随日龄增加无显著变化(P0.05),但其酶活性呈下降趋势(P0.05);工蜂幼虫Dnmt1a表达随日龄增加呈下降趋势(P0.05),其酶活性呈上升趋势(P0.01),其中3日龄与4日龄时,蜂王幼虫Dnmt1酶活性显著高于工蜂幼虫(P0.05),而5日龄时,工蜂幼虫Dnmt1酶活性显著高于蜂王幼虫(P0.05)。蜂王Dnmt3表达量随日龄增加呈下降趋势(P0.05),工蜂幼虫Dnmt3表达随日龄增加变化不显著(P0.05);蜂王幼虫Dnmt3酶活性随日龄变化不显著(P0.05),工蜂幼虫Dnmt3酶活性随日龄变化显著(P0.05),但蜂王幼虫Dnmt3酶活性在3、4、5日龄均显著高于工蜂幼虫(P0.01)。【结论】3—5日龄意大利蜜蜂蜂王幼虫与工蜂幼虫体内活性甲基供体SAM的合成与代谢存在差异。在4日龄之前,蜂王幼虫SAM的合成比工蜂活跃,4日龄之后,工蜂幼虫的SAM合成与蜂王幼虫相近;在4日龄之前,SAM参与DNA维持甲基化的代谢过程,蜂王幼虫比工蜂活跃,4日龄之后,工蜂幼虫比蜂王幼虫活跃;在3—5日龄,SAM参与DNA从头甲基化的代谢活性,蜂王幼虫始终不低于工蜂幼虫。     

西方蜜蜂工蜂不同虫态发育的转录组学分析

【目的】基于转录组学对西方蜜蜂工蜂不同虫态间的差异表达基因（DEGs）进行筛选和功能注释分析,揭示与工蜂生长发育相关的信号通路,为深入解析工蜂生长发育的分子调控机理提供基础数据。【方法】以西方蜜蜂工蜂的3日龄幼虫、1日龄蛹和1日龄羽化工蜂3个虫态为研究对象,利用llumina NovaSeq 6000平台进行转录组测序,采用DESeq2筛选不同虫态样品间的表达差异基因,然后分别进行GO功能注释分析及KEGG信号通路富集分析,并通过实时荧光定量PCR进行验证。【结果】经转录组测序,在西方蜜蜂工蜂3日龄幼虫与1日龄蛹间筛选出4823个差异表达基因（51.86%上调,48.14%下调）,在1日龄蛹与1日龄羽化工蜂间筛选出3295个差异表达基因（57.51%上调,42.49%下调）,在3日龄幼虫与1日龄羽化工蜂间筛选出5267个差异表达基因（52.95%上调,47.05%下调）。GO功能注释分析结果显示,3日龄幼虫与1日龄蛹间的差异表达基因注释到43个GO功能条目,1日龄蛹与1日龄羽化工蜂间的差异表达基因注释到45个GO功能条目,3日龄幼虫与1日龄羽化工蜂间的差异表达基因注释到44个GO功能条目,主要涉及细胞过程、细胞部分及结合等。KEGG信号通路富集分析发现,3日龄幼虫与1日龄蛹间有2905个差异表达基因富集到332条KEGG信号通路上,其中17条KEGG信号通路呈显著富集,涉及核糖体、氧化磷酸化和昆虫激素生物合成等;1日龄蛹与1日龄羽化工蜂间有1644个差异表达基因富集到331条KEGG信号通路上,其中45条KEGG信号通路呈显著富集,涉及氧化磷酸化、生热作用和胰岛素分泌等;3日龄幼虫与1日龄羽化工蜂间有2958个差异表达基因富集到337条KEGG信号通路上,其中14条KEGG信号通路呈显著富集,涉及核糖体、蛋白酶体和胰岛素分泌等。6个随机挑选差异表达基因的实时荧光定量PCR检测结果与转录组测序结果相符,即转录组测序结果可靠。【结论】昆虫激素生物合成通路相关差异表达基因调控与西方蜜蜂工蜂各虫态JH滴度变化规律一致,氧化磷酸化信号通路则与各虫态的营养摄入和活动行为相关,而胰岛素分泌通路涉及各虫态的营养调控、脂肪体合成及细胞凋亡。可见,昆虫激素生物合成、胰岛素分泌和氧化磷酸化3种信号通路在西方蜜蜂工蜂幼虫、蛹和成虫的发育调控中发挥着重要作用。     

沙土含水量对桔小实蝇蛹存活的影响

采用室内湿度配比的方法研究了沙土含水量对桔小实蝇Bactrocera dorsalis (Hendel)存活的影响.结果表明沙土含水量对于桔小实蝇老熟幼虫和初龄蛹的存活影响很大.持续干燥大大降低了老熟幼虫和1日龄蛹的存活和羽化.在沙土相对含水量为0的条件下,3龄老熟幼虫仅有11.67%能够存活并正常羽化;1日龄蛹在持续干燥的情况(干燥器中处理 9 d)下死亡率上升至75.47%.桔小实蝇的老熟幼虫和各日龄蛹均不能在饱和沙土含水量的沙土中存活.高相对含水量(w=80%)沙土对发育中蛹的影响较大,3日龄蛹和6日龄蛹分别只有41%和39%的存活率.另外在干燥和高相对含水量的条件下,6日龄蛹的羽化成虫畸形率也显著上升,分别为7.22%和15.22%.     

王浆主蛋白MRJP7基因在意大利蜜蜂(Apis melliferaligustica Spinola)体内的表达

王浆蛋白是蜂王浆生物功能的物质基础,是由王浆蛋白基因家族(mrjps)编码合成的。但部分家族成员如MRJP7在王浆中的含量极少甚至检测不到。基因功能与其在生物体内的时空表达特性相关,为探究蜂王浆中含量较少的王浆主蛋白基因mrjp7在蜜蜂体内的表达和生物学功能,本研究利用荧光定量PCR技术对mrjp7在不同发育时期的工蜂和、成年工蜂、雄蜂和蜂王的不同发育时期和不同组织部位的表达进行定量分析检测。结果显示mrjp7在成年雄蜂体内的表达水平最低,成年蜂王次之,且在这两种蜜蜂类型它们的各不同发育时期和不同组织部位之间的表达量差异较小,其表达基本没有时空特异性。该基因在工蜂幼虫和蛹期的表达量同样较低且没有组织特异性,但在羽化后9日龄前后的哺育蜂王浆腺和头部脑组织内特异性高表达,其表达与工蜂的发育时期和组织密切相关。mrjp7在这与哺育蜂分泌蜂王浆王浆腺中的特异性高表达与哺育蜂所担负的哺育幼虫和蜂王的功能是相适应的,该结果在转录水平上证实了mrjp7该基因的的营养功能,为进一步的研究和应用打下了理论基础。。其在生殖和非生殖蜜蜂体内的差异表达可能与蜜蜂的生殖调控有关。     

蒲黄醇提取物对C57BL／6荷瘤小鼠免疫功能的影响

[目的]研究蒲黄醇提物对C57BIM6荷瘤小鼠免疫功能影响。[方法]通过建立Lewis肺癌小鼠移植瘤动物模型，以抑瘤率为指标考察蒲黄醇提物的体内抗肿瘤活性，分别测定其抑瘤率、胸腺指数和脾脏指数；四氮唑盐（MTY）法对荷瘤小鼠脾淋巴细胞增殖活性进行测定；ELISA法测定荷瘤小鼠血清中白细胞介素一2（IL-2）、肿瘤坏死因子-a（TNF-a水平。[结果]蒲黄醇提取物100mg／kg·d组对肿瘤生长有明显的抑制作用（P〈0．01），其抑瘤率为48．3％，蒲黄醇提物三个剂量组均能提高荷瘤小鼠的胸腺指数和脾脏指数。同时100和200mg／kg·d组能显著提高荷瘤小鼠脾淋巴细胞的增殖能力和荷瘤小鼠血清中IL-2、TNF—ol的水平。[结论]蒲黄醇提物具有提高荷瘤小鼠体液免疫和细胞免疫的作用。     

Effects of human sex hormones and gonadotropins on the development of worker bee larvae (Apis mellifera L.)

Worker bee larvae of Apis mellifera L. were fed artificially in an incubator under controlled temperature and relative humidity conditions. Our results showed that (35.5±0.1)°C with a relative humidity of (85±5)% was suitable for the growth of worker bee larvae. A gradually increasing content of pollen and honey, accompanied by decreasing the content of royal jelly in diet, met their fundamental needs. With environmental and nutritional needs basically met, larvae got a similar growth rate to that under natural conditions. Four kinds of human hormones, i.e., estradiol, testosterone, follicular stimulating hormone, and luteinizing hormone, were added into the daily diets of worker bee larvae at different concentrations. Their growth curves were perfectly fitted by binomial fitting complex models. Effects of a single hormone and the combinations of different hormones with a follicular stimulating hormone on the development of worker bee larvae were evaluated. Our results indicated that the development of worker bee larvae at early stage was affected greatly by exogenous hormones. Larvae of 65–89 h old were particularly sensitive to the effects of sexual and gonadotropic hormones, and interactions between different hormones were detected.     

麻点豹天牛的营养成分

麻点豹天牛(Coscinesthes salicis Gressitt)是杨树等速生丰产林木的危险性害虫,经分析测定,其幼虫和蛹的蛋白质含量分别为43．95％、49．14％．脂肪含量为45．98％、34．80％．具有包括7种必需氨基酸在内的16种氨基酸组分,同时还含有K,P,Mg,．ca,Fe,Cu,S,Zn,Mn等人体必需营养元素,是一种有较高开发潜力的天然昆虫资源。     

除草剂对广聚萤叶甲(Ophraella communa)存活的影响

为筛选出对豚草天敌广聚萤叶甲低毒的除草剂,达到化学防治与生物防治的协同关系,研究了草甘膦异丙胺盐、百草枯、氟磺胺草醚、乳氟禾草灵和氯氟吡氧乙酸5种除草剂对广聚萤叶甲卵、幼虫、蛹和成虫存活的影响。结果表明,在常用剂量下,百草枯处理的广聚萤叶甲成虫存活率在16.9%以下,蛹存活率低于70.6%,但其对卵和幼虫的影响较小。中等剂量下,草甘膦异丙胺盐、氟磺胺草醚、乳氟禾草灵和氯氟吡氧乙酸处理的成虫存活率均在70%以上,幼虫存活率均高于90%,且对卵和蛹几乎无致死作用。说明百草枯对广聚萤叶甲的毒害作用较强,建议在豚草综合治理中慎用百草枯。     

蜜蜂(Apis mellifera L.)幼虫级型分化差异蛋白质组分析

【目的】对蜜蜂(Apis mellifera L.)蜂王与工蜂级型分化期的蛋白质组进行比较,以探明蜂王和工蜂在级型分化时期蛋白质表达调控方面的异同。【方法】采用双向电泳建立蜂王和工蜂级型分化期蛋白质组表达谱,获得图谱中蛋白质表达的数量、表达量、等电点和分子量等信息,然后进行比较蛋白质组研究。【结果】在幼虫3日龄,蜂王表达288个蛋白质,工蜂表达259个蛋白质,2种级型蜂共有蛋白质为156个,其中25个蛋白质在蜂王中的表达量显著大于(P0.05)工蜂,34个蛋白质工蜂表达量显著大于(P0.05)蜂王,而蜂王和工蜂的特异蛋白质分别为132个和103个;到幼虫5日龄时,蜂王表达274个蛋白质,工蜂为236个,这2种级型蜂共有蛋白质点为95个,其中蜂王15个蛋白质的表达量显著大于(P0.05)工蜂,工蜂26个蛋白质的表达量显著大于(P0.05)蜂王,而蜂王特异蛋白质点为179个,工蜂特异蛋白质点为141个;到蛹11日龄时,蜂王蛋白质组有311个蛋白质点,而工蜂则有278个蛋白质点,2种蜂共有蛋白质点为194个,其中蜂王45个蛋白质的表达量显著大于(P0.05)工蜂,工蜂35个蛋白质的表达量显著大于(P0.05)蜂王,而蜂王的特异蛋白质点为117个,工蜂特异蛋白质点为84个。【结论】在蜜蜂3日龄、5日龄、11日龄时,蜂王和工蜂的蛋白质表达谱存在显著差异,蜂王表达的蛋白质总数和特有蛋白质数都较工蜂多,说明蜂王幼虫的基因表达和代谢比工蜂幼虫更加旺盛。2种级型蜂发育中所表达的共有蛋白质可能是它们发育所必须的管家蛋白质,但级型间部分共有蛋白质的表达模式存在较大差异,在3个日龄中蜂王和工蜂中所表达的特异蛋白质表明在级型分化中,不同级型需要不同的蛋白质来调节各自的发育。这些特异蛋白质是否是级型发育相关的功能蛋白质,还有待进一步的研究。