白术内生真菌AM569对3种镰刀菌的拮抗作用及其ITS分子鉴定

本研究采用平板对峙法,考察32株白术内生真菌对3种白术根腐病病原菌(Fusarium oxysporum,FO;Fusarium solani,FS;Fusarium incarnatum,FI)的平板拮抗效应;进一步制备内生真菌AM569发酵液浸膏,考察其对3种病原菌的拮抗作用;提取AM569菌丝DNA,用ITS分子鉴定法进行菌种鉴定。结果表明,白术内生真菌对根腐病菌具有较好的抑制作用,32株内生真菌中有26株至少对一种病原菌具有拮抗作用,其中内生真菌AM569对3种病原菌FS、FO、FI菌丝的生长都有显著的抑制作用,抑菌率分别为77.5%、74.3%和70.4%;进一步制备的AM569发酵液浸膏,其对FO、FS、FI的抑菌率均达到100%;分子鉴定结果显示AM569为拟茎点霉属(Phomopsis sp.)真菌。本研究筛选得到的白术拟茎点霉属内生真菌AM569,对3种白术根腐病病原菌具有较强的抑制作用,可作为白术根腐病生物防治的候选菌株。     

蛇足石杉内生真菌生物学性状及发酵产物研究

研究蛇足石杉内生真菌的生物学性状及其液体发酵产物中植物激素和酶类,结果显示:推测蛇足石杉内生真菌分别属于木霉属、曲霉、峡筒串孢霉属、聚孢霉属;从根毛细胞中发现内生菌菌丝,而在其他部位菌丝都以胞外菌丝状态存在;2株内生真菌能够分泌IAA,3株真菌发酵液具有PPO活性,3株真菌发酵液具有POD活性.     

植物内生真菌镰刀菌对马铃薯晚疫病菌的抑制研究*

 鉴定了分离自7种植物上的11株内生真菌镰刀菌并研究了它们对马铃薯晚疫病菌的抑菌活性。对峙培养试验表明：11株内生真菌镰刀菌对该病菌均有抑制作用,其中菌株e060-1, e060-3,e060-4的抑制率达50%以上。这些内生真菌镰刀菌的毒素粗提液对该病菌菌丝生长有更明显的抑制作用,其中e012-3,e060-4和e032毒素粗提液的抑菌率达100%。毒素粗提液能明显抑制晚疫病菌孢子对离体叶片的侵染,其中菌株e032毒素粗提液的抑制率达971%。     

除虫菊内生拟盘多毛孢Y1菌株发酵产物抑菌活性初步研究

摘　要:在对从除虫菊中分离到的内生真菌进行抑菌活性系统筛选的基础上,对其中活性较高的Y1 （Pestalotiopsis sp.）菌株进行了抑菌活性测定。其发酵液10倍稀释液和菌丝丙酮提取物对玉米大斑病菌 Exserohilum turcicum等 6种供试植物病原真菌菌丝生长的抑制率分别在85. 2%～95.1%之间和40%～80%之间,其 5倍稀释液对番茄灰霉病菌 Botrytis cinerea和苹果炭疽病菌 Glomerella cingulata孢子萌发的抑制率均大于 82%。活体生测结果表明,该发酵液对番茄灰霉病，辣椒疫霉病和黄瓜霜霉病的保护效果大于 55%,治疗效果不明显。     

1株拮抗棉花枯、黄萎病菌的纤维素分解菌筛选

为获得具有拮抗棉花枯、黄萎病菌的棉杆促腐菌剂,进行棉杆纤维素分解菌分离及拮抗菌株的筛选,采用平板对峙法测定菌株对棉花枯、黄萎病菌菌丝生长的影响,通过生长速率法和孢子萌发法测定菌株发酵液对2种病原菌菌丝生长以及孢子萌发的影响,并对筛选得到的菌株进行鉴定。结果获得1株具有抑菌效果的棉杆纤维素分解菌SJ-3,其羧甲基纤维素酶活(CMCase)达到69.1 U/mL,滤纸酶活(FPase)达到48.5U/mL。该菌对棉花枯、黄萎病菌菌丝生长均有显著抑制,抑制率分别达到24.7%、23.1%。其发酵液具有抑菌活性,较高的发酵液浓度能增强对病原菌的抑制作用,发酵液对枯萎病菌孢子萌发的抑制作用较强,最高抑制率为21.6%,而对该病原菌菌丝生长的抑制较弱,最高抑制率仅为6.2%;发酵液对黄萎病菌的菌丝生长和孢子萌发均有较强的抑制作用,最高分别达到32.2%、21.4%。经鉴定,菌株SJ-3为普通青霉(Penicillium commune)。     

1株抗小麦病原真菌活性的射干内生真菌的筛选鉴定及其聚酮合酶基因分析

【目的】挖掘有用的射干内生真菌资源,并为其合理利用提供一定的参考依据。【方法】从射干根中分离获得了1株内生真菌,采用形态学和分子生物学手段鉴定其属种,采用菌丝生长速率法测定其发酵液对禾谷镰刀菌和小麦根腐离蠕孢的抑菌作用,并分析该菌株的聚酮合酶基因序列和生物学特性。【结果】结合形态学和ITS序列同源性分析将菌株鉴定为层出镰刀菌(Fusarium proliferatum)。该菌株的发酵液对禾谷镰刀菌和小麦根腐离蠕孢的菌丝生长有较好的抑制作用。SG5菌株的PKS氨基酸序列与Gen Bank所报道的层出镰刀菌的PKS序列相似性为99.7%。菌株最适生长的固体培养基为察氏培养基,最适碳源为蔗糖,最适氮源为硝酸钾,最适pH为7;在NaCl质量分数≤1%的培养基上正常生长。【结论】该拮抗内生真菌是潜在的小麦病原真菌生防菌资源,具有一定的开发与应用价值。     

海南粗榧内生真菌BWL6007的鉴定及抗菌活性研究

应用传统真菌形态学鉴定方法,对海南粗榧内生真菌BWL6007 进行鉴定。以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、水稻纹枯病菌、油菜菌核病菌、香蕉枯萎病菌、镰刀菌、罗非鱼源无乳链球菌为测试菌种,对海南粗榧内生真菌BWL6007 在不同生长周期15 d内的发酵液抗菌活性进行测定。然后,依次采用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷和正丁醇对发酵液进行分部提取,再测定各部粗提物的抗菌活性。结果表明,海南粗榧内生真菌BWL6007 属于生赤壳属（Bionectria）,是首次从海南粗榧中分离获得的生赤壳属内生真菌;其最佳发酵时间为11 d;发酵液乙酸乙酯部提取物的抗菌效果最佳,活性成分主要以中极性的物质为主。     

滇重楼内生菌分离及其发酵液抑菌活性

为研究滇重楼内生真菌的抑菌活性,先从滇重楼块茎中分离得到98株内生真菌,对峙试验结果表明,其中有8株内生真菌对供试植物病原菌立枯丝核菌、尖孢镰刀菌和烟草黑胫病菌有一定的抑制作用;内生真菌发酵液初提物抑菌试验结果表明,3株内生真菌发酵液的提取物对供试植物病原菌有一定的抑制作用,分别为PPC-25、PPC-43、PPC-78,其他菌株的发酵液提取物对供试植物病原菌没有抑菌活性。     

海南粗榧内生真菌BWL6007的鉴定及抗菌活性研究

应用传统真菌形态学鉴定方法,对海南粗榧内生真菌BWL6007进行鉴定.以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、水稻纹枯病菌、油菜菌核病菌、香蕉枯萎病菌、镰刀菌、罗非鱼源无乳链球菌为测试菌种,对海南粗榧内生真菌BWL6007在不同生长周期15d内的发酵液抗菌活性进行测定.然后,依次采用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、三氯甲烷和正丁醇对发酵液进行分部提取,再测定各部粗提物的抗菌活性.结果表明,海南粗榧内生真菌BWL6007属于生赤壳属(Bionectria),是首次从海南粗榧中分离获得的生赤壳属内生真菌;其最佳发酵时间为11 d;发酵液乙酸乙酯部提取物的抗菌效果最佳,活性成分主要以中极性的物质为主.     

产甘草苷内生真菌HGE5的鉴定及抑菌活性研究

[目的]研究甘草内生真菌HGE5及其活性代谢产物,为深入开发利用该菌株提供依据。[方法]选取12种受试致病菌,测定内生真菌HGE5的抑制活性,并采用形态特征观察法及r DNA ITS序列同源性分析对内生真菌HGE5进行鉴定,利用HPLC法对HGE5发酵液进行分析。[结果]甘草内生真菌HGE5对8种受试致病菌有较强的抑菌作用,内生真菌HGE5为尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum);该菌发酵液中含有甘草苷。[结论]HGE5是甘草苷产生菌,该菌的获得可为甘草苷成分的生产提供新方法。     

褐多孔菌发酵代谢物的抑菌活性初步研究

采用滤纸片法和生长速率法分别研究了褐多孔菌发酵代谢物对7种常见细菌和6种植物病原菌的抑制作用。结果表明,发酵液乙酸乙酯部分对金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌抑制效果显著,最小抑菌浓度分别为2.50 mg/mL和1.25 mg/mL,浓度为0.5 mg/mL时对小麦赤霉病菌抑菌率达到100%,菌丝乙酸乙酯部分对蜡状芽孢杆菌和枯草芽孢杆菌最小抑菌浓度分别为1.25mg/mL和0.625 mg/mL,对白菜黑斑病菌和小麦赤霉病菌抑菌率均高于70%,菌丝及发酵液正丁醇部分对几乎所有病原菌抑制作用都很明显。     

马齿苋提取物对枸杞蚜虫毒杀和拒食活性的研究(英文)

[Objective] The experiment studied on insecticidal and antifeedant action of on Portulaca oleracea L.to provide theoretical basis for developing a new botanical insecticide by taking Portulaca oleracea L.as a raw material.[Method] The insecticidal activities of the ethanol extracts and 5 kinds of extracts with petroleum ether,chloroform,ethyl acetate,n-butanol,water from Portulaca oleracea L..against Aphis sp.was studied;Leaves are using drug treatments of 5 extracts anti-feedant activity of Aphis sp.[Result] The results showed that 95% ethanol extract displayed high contact activity to Aphis sp.The corrected mortality after 48 h reached 95.4 % under the concentration of 50.00 mg·ml-1 and the insecticidal activities of 5 extracts against Aphis sp.was in the order that petroleum ether > chloroform > n-butanol > ethyl acetate >water.Five kinds of anti-feeding activity in the extract of the order for the water> ethyl acetate> n-butanol > chloroform >petroleum ether.[Conclusion] The extract from Portulaca oleracea L.has a strong contact toxicity of pesticide active on Aphis sp.substances and for a small polar compounds,the strong anti-feeding activity is a kind of larger polar compounds.     

马齿苋提取物对枸杞蚜虫毒杀和拒食活性的研究(英文)

[Objective] The experiment studied on insecticidal and antifeedant action of on Portulaca oleracea L.to provide theoretical basis for developing a new botanical insecticide by taking Portulaca oleracea L.as a raw material.[Method] The insecticidal activities of the ethanol extracts and 5 kinds of extracts with petroleum ether,chloroform,ethyl acetate,n-butanol,water from Portulaca oleracea L..against Aphis sp.was studied;Leaves are using drug treatments of 5 extracts anti-feedant activity of Aphis sp.[Result] The results showed that 95% ethanol extract displayed high contact activity to Aphis sp.The corrected mortality after 48 h reached 95.4 % under the concentration of 50.00 mg·ml-1 and the insecticidal activities of 5 extracts against Aphis sp.was in the order that petroleum ether > chloroform > n-butanol > ethyl acetate >water.Five kinds of anti-feeding activity in the extract of the order for the water> ethyl acetate> n-butanol > chloroform >petroleum ether.[Conclusion] The extract from Portulaca oleracea L.has a strong contact toxicity of pesticide active on Aphis sp.substances and for a small polar compounds,the strong anti-feeding activity is a kind of larger polar compounds.     

马齿苋提取物对枸杞蚜虫毒杀和拒食活性的研究

[目的]研究马齿苋(Portulaca oleracea L.)对枸杞蚜虫(Aphis sp.)的毒杀和拒食活性,为开发以马齿苋为原料的新型植物性杀虫剂提供理论依据。[方法]采用点滴法,测定马齿苋乙醇粗提物及其石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇、水5种不同极性萃取物对枸杞蚜虫的触杀活性;采用载毒叶片法,测定5种萃取物对枸杞蚜虫的拒食活性。[结果]马齿苋提取物对枸杞蚜虫有较高的触杀活性,浓度为50.000 mg/ml时,48 h的校正死亡率达95.4%;5种萃取物对枸杞蚜虫的触杀活性顺序为石油醚>氯仿>正丁醇>乙酸乙酯>水,石油醚萃取物48 h的校正死亡率达96.7%;5种萃取物对枸杞蚜虫的拒食活性顺序为水>乙酸乙酯>正丁醇>氯仿>石油醚。[结论]马齿苋提取物对枸杞蚜虫具有较强的触杀活性且杀虫活性物质为一类小极性的化合物,拒食活性物质为一类极性较大的化合物。     

多孔菌发酵代谢物的抑菌活性研究

用乙酸乙酯和正丁醇分别从多孔菌(Polyporus variusPers.:Fr.)摇瓶发酵液的上清液和菌丝体中提取生物活性物质,然后分别对不同细菌和植物病原菌进行抑菌活性的测定。试验结果表明,发酵液的乙酸乙酯提取物能显著抑制金黄色葡萄球菌、枯草杆菌和大肠杆菌;菌丝的乙酸乙酯提取物对大肠杆菌的抑制作用较强;而菌丝的正丁醇提取物对5种植物病原菌均有不同程度的抑制作用。     

多孢木霉HZ-31菌株活性物质的初步分离及除草活性研究

为明确多孢木霉HZ-31菌株的除草活性物质,对其活性成分进行逐步分离。采用种子萌发法和离体叶片接种法分离最佳活性组分。结果表明,HZ-31菌株发酵滤液活性高于发酵液,发酵滤液对野燕麦和油菜种子萌发抑制率分别为80.00%和91.67%。4种有机溶剂萃取物对7种杂草叶片的致病效果由强到弱表现为:正丁醇相乙酸乙酯相石油醚相氯仿相。4种有机溶剂萃取粗提物在5 mg/mL浓度下对野燕麦和油菜的种子萌发均有强烈的抑制作用,除乙酸乙酯外,其余处理的发芽抑制率为100%。3 mg/mL浓度下正丁醇粗提取物能完全抑制野燕麦和油菜种子的萌发。因此,粗提物活性测定以离体叶片和种子萌发结果为依据,检测HZ-31菌株活性物质最佳有机相,最终确定最佳活性组分在正丁醇相中。     

近缘毛壳Chaetomium subaffine LB-1抑菌物质存在部位及提取方法

【目的】对近缘毛壳Chaetomium subaffine菌株LB-1产生抑菌物质的部位及提取方法进行研究，为开发生防菌株LB-1防治植物病害奠定基础。【方法】以番茄灰霉病菌Botrytis cinerea和玉米大斑病菌Exserohilum turcicum为指示菌，采用平板密封培养法检测菌株LB-1是否产生挥发性抑菌物质；采用菌体超声破碎和液态培养的方式检测菌株LB-1产生的非挥发性抑菌物质存在的部位；采用含毒培养基法和滤纸片法检测菌株LB-1培养液的硫酸铵沉淀、盐酸沉淀和有机溶剂萃取物的抑菌效果，以确定菌株LB-1培养液中抑菌物质的提取方法。【结果】菌株LB-1与2种供试病原菌密封共培养时，对病原菌的生长没有明显影响，表明菌株LB-1不能产生挥发性抑菌物质。菌株LB-1菌体胞内提取物的抑菌活性与对照无差异，但其培养液对B. cinerea和E. turcicum的生长有较强的抑制作用，表明菌株LB-1产生的抑菌物质存在于菌体细胞外。菌株LB-1培养液的硫酸铵沉淀和盐酸沉淀对2种供试植物病原真菌的生长均无抑制效果，但有机溶剂萃取可获得菌株LB-1培养液中的抑菌物质，其中正丁醇萃取物...     

长裙竹荪发酵液抗菌活性初步研究

以长裙竹荪发酵液为材料,采用圆形纸片扩散法和菌丝生长速率法对长裙竹荪深层发酵液的乙酸乙酯和水饱和正丁醇萃取物的抗细菌、抗真菌活性进行了检测。结果表明,长裙竹荪深层发酵液的乙酸乙酯萃取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌3种细菌都具有一定的抑菌作用,抑制圈宽度分别为2.0、2.3、4.0 mm;水饱和正丁醇萃取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌也具有一定的抑菌作用,抑制圈宽度分别为3.0、3.8 mm。乙酸乙酯萃取物对红色面包霉和枇杷炭疽病菌具有一定的抑制作用,对两种供试真菌菌丝生长最低抑制率分别为41.50%和33.87%,而水饱和正丁醇萃取物对供试真菌无抑制作用。     

大叶黄杨内生真菌的分离及抑菌活性研究

[目的]从大叶黄杨中找到具有抗菌活性的内生真菌。[方法]采用PDA双抗培养基从大叶黄杨茎和叶中分离内生真菌,对其分别进行液体培养,将发酵后所得的发酵液用乙酸乙酯萃取处理,以大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌为试验菌株,用纸片法对分离的真菌及其次生代谢产物进行了抑菌试验。[结果]从大叶黄杨茎和叶中分离得到28株内生真菌,其中有21株内生真菌的发酵液粗提物对指示菌株有一定的抑制作用,占总分离菌株的75%。[结论]大叶黄杨内生真菌的次生代谢产物中存在着丰富的天然活性抑菌物质,可为寻找新型抗菌物质提供资源。     

辣木内生真菌产生抗菌物质的生物学特性研究

从辣木(Moringa sp.)中分离得到一株内生真菌(Aspergillus sp.),其发酵液对金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的生长有很强的抑制作用。曲霉ly14发酵液抑菌效果的最适碳源是麦芽糖,最适氮源是玉米浆,最适初始pH为5,最适装液量为50 mL和最适培养时间160 h,但生长因子(叶酸和VB12除外)和无机盐离子并不促进发酵夜得抑菌效果。