大白菜和油菜真空渗入遗传转化法初报

在携带ＣａＭＶＣａｂｂＢ－ＪＩ株系基因Ⅵ的根癌农杆菌菌种ＧＶ３１０１的介导下，对大白菜、油菜幼苗生理状态、真空渗入时间及不同处理部位和叶面造伤等的处理与遗传转化效果的关系进行了比较研究。结果表明，经自然春化后，大白菜、白菜型油菜植株长至４～５片叶，甘蓝型油菜、芥菜型油菜植株长至７～９片叶，花薹已抽出时，为真空渗入最适苗态。大白菜自然春化植株移栽缓苗（３ｄ），或者黑暗处理（８ｈ）均可显著提高其转化率。在吸力为１４．４ｍ３／ｈ的真空泵下处理１ｍｉｎ后，迅速打开真空泵气阀升压变常压，再关闭阀门抽真空３０ｓ的转化效果较好。仅处理叶片转化率可高达１１．２０％，叶面造伤处理对转化率没有明显影响。     

小白菜植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态建成方法的研究

低温处理小白菜（Brassica Campestris ssp.Chinensis var.communis Tsen et Lee)种子和春秋6个播期实验，研究了小白菜春化和植株原位真空渗入遗传转化适宜苗态的建成方法。结果表明，小白菜种子经50℃温烫10min,23℃浸种4h，催芽12h后，在0－4℃低温下，上海青处理17d，黄心乌处理25d，四月慢处理29d，7－9℃黄心乌处理25d，播种于大田，在长日照下均可完成春化，形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的苗态。上海青、黄心乌和四月慢9月7日露地播种均可完成春化，形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的最佳苗态，上海青和黄心乌2月17日播种也可完成春化，形成适宜植株原位真空渗入遗传转化的苗态。     

油菜基因转移适宜苗态建成方法研究

油菜种子经２～５℃低温处理及冬、春两季１０个播期试验,研究了采用真空渗入法对油菜进行ＣａＭＶＣＡＢＢ－ＢＪＩ和Ｂａｒｉ－Ⅰ株系基因Ⅵ转移时适宜植株形态的建成方法。结果表明,芥菜型油菜低温处理１０,２０,３０ｄ,均可明显促进抽薹,春季３月１８日播种或冬季１０月１１日播种最适于形成理想的转化态植株。甘蓝型及白菜型油菜种子经低温处理不能通过春化。甘蓝型油菜冬季１０月２６日播种,白菜型油菜冬季１０月１１日播种或春季３月１２日播种,易形成适于转移的植株形态。     

基于真空渗入遗传转化的菜薹苗态建成方法研究

采用不同时期播种和人工低温春化处理2种方法，对真空渗入法进行菜薹遗传转化的适宜苗态及其建成方法进行研究．结果表明，菜薹的适宜苗态是：植株已完成花芽分化，花薹未完全抽出，第2，3，4片真叶平均长6．0cm以上，宽3.0cm以上，茎粗4．0mm以上，具8-9片真叶．陕西关中地区适宜抽薹期为4月上旬、2月中旬播种于温室中，4月上旬进行真空渗入最为适宜．不同品种根据冬性强弱，种子低温(4℃)处理12-24d可以形成最适苗态．一叶一心幼苗低温(6℃)处理对苗态有显著影响，是建立适宜苗态的另一有效途径．     

油菜基因转移适宜苗态建成方法研究

油菜种子经２－５℃低温下处理及冬,春两季１０个播期试验,研究了采用真空渗入法对油菜进行ＣａＭＶ ＣＡＢＢ－ＢＪＩ和Ｂａｒｉ－Ｉ株系基因Ⅶ转移时适宜植株形态的建成方法,结果表明,芥菜型油菜低温处理１０,２０,３０ｄ均可明显促进抽薹,春季３月１８日播种或冬季１０月１１日播种最适于形成理想的转化态植侏。     

种子春化与光周期处理对大白菜花芽分化和抽薹的影响

大白菜在进行种子春化处理时．不同处理温度和处理时间对植株的花芽分化和抽薹过程影响很大．８℃的经比３，１３℃下植株的花芽分化开始得早，分化速度快，抽薹时间早．抽薹期早晚不同的大白菜品种在花芽分化和抽薹上存在着大的遗传差异性，春化１５ｄ时，３℃和１３℃的处理温度，均不能使晚抽薹材料Ｓ－１和ＹＣ完成花芽分化并引起植株的抽薹；１３℃下春化时间达到３０ｄ时，ＹＣ也不能分化完全的花芽和发生抽薹．在低温处理基础上，长日条件对植株的花芽分化和抽薹过程均有促进效应，但非必要条件．     

油菜秋发栽培产量高

俗话说：“油菜要丰收，全靠年前发好蔸，”油秋发是指到秋末（11月底），植株绿叶达9～10片，冬前（12月底）植株有绿叶12～13片。这种秋发生长型油菜一般667平方米（1亩）产量可达200公斤，比冬发型（9～11片叶过冬）和冬壮型（7～8片叶越冬）增产30％～60％。实践证明，油菜秋发的增产效果非常显著。     

芥菜真空渗入遗传转化体系适宜苗态的建成

通过0～4℃低温处理芥菜种子和春秋7个播期试验，研究了根癌农杆菌菌株GV3101（携带CaMV CABB--BII和Bari-1基因VI）和LBA4404（携带GUS基因）转化芥菜的真空渗入高效遗传转化体系的适宜苗态建成方法。芥菜种子经50℃温烫10min、23℃浸种2～6h、催芽20h，或50℃温汤10min、23℃侵种5h，不催芽，然后置0～4℃低温下处理25d，种植大田，在长日照条件下易形成适宜真空渗入遗传转化苗态；圆叶芥9月20日、9月30日和次年2月27日露地播种，雪里蕻9月30日和次年2月27日露地播种，易形成真空渗入遗传转化的适宜植株形态。     

白菜型冬油菜萌动种子低温春化的生理生化特征

【目的】探讨白菜型冬油菜萌动种子低温春化的可能性,以及萌动种子春化过程其生理生化状态和植株结实性等表型变化特征,为白菜型冬油菜人工加代繁育和加速育种进程提供理论基础。【方法】以3个不同感温性的白菜型冬油菜品种为材料,于4℃对油菜萌动种子进行春化处理,春化处理过程中（0、20、30、40、50和60 d）测定萌动种子的硝酸还原酶、抗氧化物酶活性、渗透调节物、丙二醛含量等生理生化指标;同时播种各春化处理萌动种子,观察记录种子形成植株的生育期进程、测定植株结实性能等。【结果】随着春化处理时间的增加,白菜型冬油菜萌发种子形成的植株春化率、初花期株高、成熟期株高、一次分枝数、单株角果数、角果长、角粒数、单株产量等总体呈逐渐升高趋势;春化处理前期（0—40 d）,植株结实性能在不同品种间表现较明显差异,春化时间增加后（50—60 d）,不同品种结实能力虽略有差异,但均无显著差异水平。回归分析结果显示,在4℃条件下,强冬性冬油菜陇油7号萌动种子完全春化（春化率>95%）需处理76.9 d,陇油9号和天油4号分别为54.0和39.4 d。相关分析结果表明,春化率与株高、结实性能等各表型性状均呈极显著正相关,其中与初花期株高、成熟期株高相关系数最大为0.947和0.985,表明白菜型冬油菜春化程度显著影响着植株株高、结实性能等。随低温春化时间增加,白菜型冬油菜萌动种子硝酸还原酶、超氧化物歧化酶、过氧化物酶、丙二醛、可溶性蛋白、可溶性糖呈先升高后降低的趋势,过氧化氢酶活性呈不断降低趋势。与对照（未低温处理的萌动种子）相比,低温春化处理的陇油7号、陇油9号萌动种子GA₃含量均明显降低,春化30 d的天油4号萌动种子GA₃含量明显比对照增加。与对照相比,春化处理的冬油菜萌动种子IAA含量均明显增加（陇油9号春化40 d处理除外）,其中,春化50 d的天油4号萌动种子IAA含量比对照增加197.0%。陇油7号春化处理的萌动种子ABA含量比对照明显增加。【结论】白菜型冬油菜萌动种子可以感受低温使其完成春化作用,品种春化所需低温时间取决于品种冬性强弱;低温春化过程中,白菜型冬油菜萌动种子生理生化状态发生了一些变化,并最终影响植株的生长发育及其结实性能。     

转草酸氧化酶基因的甘蓝型油菜(Brassica napus L.)的苗期人工春化条件探索

对4种转草酸氧化酶基因甘蓝型油菜（Brassica napus L.）苗期人工春化条件进行研究的结果表明，春性和冬性半冬性转基因油菜移栽后，4～6叶期经适当低温处理后均可正常开花结实；转基因苗不移栽直接在试管中经适当低温处理也可以通过春化阶段；春性转基因油菜的春化处理时间长短与开花时间早晚有关，春化处理时间最长的，开花也最早，与开花株率关系不大；冬性半冬性转基因油菜的开花株率与春化处理时间长短呈正相关；4～6叶期转基因半冬性油菜通过春化阶段需时35～40d以上，转基因冬性油菜通过春化阶段需时50d，且适当延长春化时间能促进花期提前。