番木瓜炭疽病生防木霉菌株的初步筛选

为利用生物防治的方法抑制番木瓜炭疽病,通过测定并综合分析比较各木霉菌株的抗生作用、产孢量、不同培养基下的抑菌率、生长速度以及耐药性,从90株木霉菌株中初步筛选出拮抗番木瓜炭疽菌的优良木霉菌(Trichodermaspp.)T05-049、T8-R、T05-035和T05-044等4株菌株,其产孢量分别为1.42×109、5.45×108、4.16×108、1.38×109;在1.01 mg/L特可多的条件下,均生长良好;该4个菌株在25、20、15和10℃下生长正常,耐温性较好,对炭疽菌(Colletotrichumspp.)的抗生作用分别为3、1、1、5;分别在PDA和番木瓜培养基上于25、20和15℃下培养,木霉对胶孢炭疽菌(C.gleosporioides)的抑制率在57.05%以上,对辣椒炭疽菌(C.capcisi)的抵制率在47.87%以上.     

食用菌木霉种类及棉籽皮菌糠上木霉产孢量研究

从河北省栽培的食用菌上分离到了57株木霉,按Rifai和Bissett的分类系统共鉴定出6种木霉:康氏木霉、拟康木霉、哈茨木霉、桔绿木霉、长枝木霉和非钩木霉.其中康氏木霉和拟康木霉是河北省食用菌木霉菌优势种,分别占总菌株数的50.87%和26.32%,经过筛选向棉籽皮菌糠中添加黄腐酸可以增加木霉菌产孢量,可达6.5×108个/g.     

木霉菌T05-1对几种作物病原菌的抑制作用及发酵条件研究

为鉴定木霉菌T05-1种类,明确其生防机制和发酵条件,采用形态学鉴定、抑菌试验和液体发酵的方法,对分离自辽宁省锦州市蔬菜根际土壤的的木霉菌T05-1进行了鉴定、抑菌作用及发酵条件的研究。结果表明:木霉菌T05-1经形态学鉴定为绿色木霉(Trichoderma viride Pers.ex Fr.),对病原菌的生防机制分别属于重寄生、抗生等作用,碳源为葡萄糖时T05-1菌丝生长最快,碳源为蔗糖时产孢量最大,氮源为蛋白胨和硫酸铵时产孢量最大,氮源为硝酸铵菌丝生长最快,温度为25℃,pH值为6～7有利于木霉菌T05-1的生长及产孢。因此绿色木霉T05-1是一株生防作用较好的菌株。     

盐分对生防木霉菌株SH2303的影响

研究不同盐度条件下,木霉菌株SH2303的生长速度、生长量、产孢量、几丁质酶活性及其平板拮抗性的变化规律。结果表明,随着盐度增加,木霉的生长速度、生长量和几丁质酶活性受抑制程度逐步增强;有盐条件下产孢量比非盐条件下降明显;然而,盐分对木霉菌抑制枯萎病菌的效率无明显影响。     

小麦全蚀病拮抗木霉ZBS6的分离、筛选及鉴定

从河南省农科院试验地小麦田土中分离获得12株木霉,通过室内对峙试验,筛选出1株对小麦全蚀病菌拮抗作用较强的木霉菌株ZBS6,室内测定其抑菌率和寄生率分别达到82.5%和80%。并对该拮抗木霉进行了抑菌谱测定,研究了不同培养条件对该木霉菌株菌丝生长及产孢量的影响,同时利用形态学及分子鉴定相结合方法对木霉菌株ZBS6进行了鉴定。结果表明:ZBS6具有广谱的抑菌活性。其最适培养条件:以葡萄糖为碳源,基质酸碱度(pH)5.0,温度为25℃,光暗交替培养;光照处理对菌丝生长影响不明显,但显著促进产孢量。结合形态学特征及rDNA ITS序列聚类分析结果,ZBS6鉴定为绿色木霉(Trichoderma viride)。     

2株木霉抑菌效果及其促植物生长机制

[目的]探究绿色木霉(Trichoderma viride)和棘孢木霉(T.asperellum)对8种植物病原菌的抑制效果及其促植物生长机制,为木霉防治植物病害和促进植物生长等的田间应用提供理论参考.[方法]采用平板对峙法和固体稀释法,检测2株木霉及其活性代谢产物对8种植物病原菌(棉花枯萎病菌、茄子菌核病菌、番茄链格孢病菌、茄腐镰刀病菌、尖孢镰刀病菌、枸杞炭疽病菌、番茄灰霉病菌和番茄匍柄霉病菌)的抑制率;采用平板透明圈法、Salkowski比色法及钼锑抗比色法测定2株木霉的生防因子、生长素及溶磷效果;通过辣椒盆栽试验,测定2株木霉发酵液不同稀释倍数处理对辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶[过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)和苯丙氨酸解氨酶(PAL)]活性的影响.[结果]平板对峙试验结果显示,2株木霉对8种植物病原菌的抑菌率均在60.00%以上;绿色木霉发酵11 d时其无菌滤液对茄子菌核病菌的抑制率达96.78%,但对其他病原菌的抑制率不高;棘孢木霉发酵11 d时无菌滤液对茄子菌核病菌、枸杞炭疽病菌和番茄链格孢病菌的抑制效果较好,抑菌率分别为99.08%、85.33%和68.65%,发酵9 d时无菌滤液对番茄灰霉病菌的抑制率为72.08%;2株木霉均可产生蛋白酶、几丁质酶、纤维素酶和铁载体4种生防因子;绿色木霉发酵9 d时分泌吲哚乙酸(IAA)量为3.389 mg/L,在PKO无机磷液体培养基培养7 d后溶磷量为67.236μg/mL;棘孢木霉发酵11 d时分泌IAA量达11.638 mg/L,在PKO无机磷液体培养基培养7 d后溶磷量达151.905μg/mL;盆栽试验结果表明,喷施不同稀释倍数的棘孢木霉发酵液较绿色木霉发酵液更能提高辣椒叶片叶绿素含量及3种抗性酶活性.[结论]供试2株木霉对8种植物病原菌均具有抑制能力并存在多种生防因子和促植物生长能力,其中棘孢木霉较绿色木霉具有更好的抑菌和促进植物生长及提高植物叶片叶绿素含量和抗性酶活性的能力,具有较好的田间应用潜力.     

5个木霉菌株的抑菌谱及部分生物学特性

 5个木霉菌株在对峙培养中对水稻稻瘟病菌、水稻纹枯病菌、棉花枯萎病菌、油菜菌核病菌等18种植物病原真菌和7株土壤习居镰刀菌都有明显抑制效果。哈茨木霉菌株Th-B的抑菌效果显著高于绿色木霉菌株LTR-2和其他3个菌株,哈茨木霉菌株Th-A和Th-B的产孢能力高于其他菌株,Th-B对辣椒灰霉病的预防效果达65.20%.     

混合发酵木霉菌对4种病原真菌的拮抗作用

通过对峙培养试验从4株木霉菌株哈茨木霉(Trichoderma harzianum)SH2303、HF3407,深绿木霉(Trichoderma aureoviride)LY1208、SG3407中筛选出了2株对尖孢镰刀菌、串珠镰刀菌、番茄灰霉菌均具有较好抑制作用的菌株SH2303和HF3407,并对这2株菌进行生长特性及稳定性研究.结果表明:SH2303和HF3407平板培养生长迅速,产孢量大,遗传稳定性较强.将SH2303与其他3株菌分别进行复配,并选定接种量、接种比例、转速共4因素,做四因素三水平混合发酵正交设计试验,结果表明:SH2303和HF3407混合发酵的产孢量较高,可达4.7×107个·mL-1,优于其他组合.同单一发酵液相比,混合发酵液处理对于防治黄瓜白粉病和枯萎病的防效显著增加,因此可选定SH2303和HF3407作为生物防治混合发酵复配菌株.     

绿色木霉HT-01的生物学特性和抑菌特性

从淮安市城南栽培番茄的菜园土中分离出绿色木霉HT-01,研究不同培养条件对该木霉菌丝生长和孢子产生的影响,以及该木霉对番茄灰霉病的抑制效果.结果显示,25℃、pH为5时最有利于菌丝生长和产孢;葡萄糖和蔗糖为菌丝生长和产孢的最佳碳源;光照处理对菌丝生长影响不明显,但明显促进孢子产生;菌株在玉米粉培养基上生长最快,但在纯糠培养基上产孢量最大.木霉HT-01对番茄灰霉病(Botrytis cinerea Pers)的抑制率为0.452±0.020,用木霉HT-01孢子悬浮液喷布番茄叶面和灌根处理接种灰霉病菌的番茄幼苗,使叶片感病率分别降低38.1%和42.1%,植株感病率分别降低15%和20%.     

主要营养和环境因素对疣孢漆斑菌X-16菌株产孢的影响

营养条件和环境因素影响疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria)的产孢量,对其进行研究能为疣孢漆斑菌的发酵提供理论支持。采用产孢量测定了不同碳氮比、碳氮源、碳浓度、温度、pH及光照对寄生根结线虫的疣孢漆斑菌X-16菌株产孢量的影响。结果表明,X-16菌株对碳源、氮源等营养的利用存在显著差异;X-16菌株产孢量以可溶性淀粉和硝酸钠最高,产孢量分别为7.87×108,1.027×109个/m L;C/N是60∶1时,产孢量最高;碳浓度为1～2 mol/L时最有利于平板产孢;X-16菌株在30～32℃时产孢量最高;适宜产孢的pH值为6.5;24 h光照有利于产孢。建议生产中可根据实际发酵情况选择最佳营养和环境条件。     

氮磷钾肥对木霉菌丝生长和产孢的影响

在土壤浸出液马铃薯汁琼脂培养基中,添加不同氮、磷、钾肥及其不同剂量对木霉生防菌(Trichoderma harzianum)的菌丝生长、产孢和培养基的pH的影响不同。木霉菌丝生长和产孢随尿素、碳酸氢铵和钙镁磷肥剂量的增加而减少,随普钙的剂量增加而增加;氯化钾、硫酸钾对木霉菌丝生长略有影响,对产孢的影响不明显;硝酸铵的剂量变化对木霉菌丝生长和产孢无影响。木霉菌丝生长和产孢的变化不仅与肥料的种类有关,还与培养基的pH值有关。酸性环境有利于未霉菌丝生长和产孢。     

利用马铃薯残渣等废弃物生产长枝木霉颗粒剂的研究

【目的】利用马铃薯残渣等废弃物作为培养基质研制一种具有较高产孢量和较长货架期的长枝木霉颗粒剂.【方法】通过测定长枝木霉在马铃薯残渣、餐厨垃圾、植物叶片等培养基质中的产孢量和孢子萌发率,采用固体培养和液体发酵的方法,筛选生产长枝木霉的最佳培养基质,并研究其加工工艺.【结果】培养基质筛选结果表明,植物叶片基质中杨树叶和泡桐叶产孢量最高,为1×109 cfu/g,经1∶1混合加入不同餐厨垃圾后均能产孢,但产孢量和孢子萌发率均较马铃薯残渣低,故确定马铃薯残渣为最佳固体培养基质;加入珍珠岩后的马铃薯残渣固体培养基,产孢量明显提高,且与珍珠岩5∶1混合,产孢量最大,为5.66×109 cfu/g;马铃薯残渣液体培养基的浓度为60mL/g时产孢量最高,为9.995×108 cfu/g,但显著低于其固体培养基;加工工艺优化表明:最佳的粘结剂为凹凸棒土,最佳贮藏容器为黑色玻璃瓶,最长贮藏期可达8个月,萌发率为53.81%.【结论】最终获得生产长枝木霉颗粒剂的最佳培养基质并优化了加工工艺.     

生防木霉菌T41菌株生物学特性研究

木霉菌T41菌株是一株分离于土壤中的具有生防潜力的木霉菌株,为进一步研究菌株的发酵培养及田间应用技术提供理论依据,进行了菌株生物学特性研究.采用室内菌丝生长、产孢测定方法研究了T41菌株生物学特性,结果表明:T41菌株在PDA、PSA、PMA、NA、查彼培养基和基本培养基上均能生长,但在PDA培养基上菌丝生长和产孢最佳,菌落直径达到81mm,产孢量达到2.6×1010个;温度对菌丝生长和孢子产生影响显著,在10～40℃范围能够生长产孢,以30℃时菌丝生长最快,培养2d后菌落直径达到93mm,并且产孢量也高于其他培养温度;光照处理对菌丝生长影响不明显,但光照可明显促进孢子产生.葡萄糖、木糖、果糖和麦芽糖能够较好促进菌丝生长,葡萄糖和果糖是T41菌株产孢的最佳碳源;蛋白胨、天冬酰胺是有利于菌丝生长和孢子产生的有机氮源;微量元素中Ca、Cu对菌丝生长及产孢都有一定的促进作用,而Mn、Zn则不利于T41菌丝生长和产孢;菌株在pH值2～11的范围均可以生长产孢,但偏酸性条件是T41菌株生长产孢的适宜环境,pH值5为最佳.     

平菇菌糠培养哈茨木霉对植物生长的促进作用1)

以废弃的平菇(Pleurotus ostreatus)菌糠作为培养哈茨木霉的基质,通过筛选最适培养条件及成分优化获得发酵产物并进行成分分析,采用萌发试验和盆栽试验研究其对拟南芥(Arabidopsis thaliana)和烟草(Nicotiana tobacum)生长的促进作用。结果表明:哈茨木霉的最佳培养条件为,接种量1.5×10~8个·mL~(-1),料液比1.0 g∶1.5mL,初始pH=6,培养温度24℃,发酵时间12 d。另外,向菌糠中补充一定量氮源以及微量元素可以促进哈茨木霉的产孢量。拟南芥和烟草种子分别在20倍和10倍的稀释菌糠发酵液中萌发效果最好,活力指数分别为15.61和20.49;利用发酵物栽培的拟南芥、烟草植株的株高和茎粗等生物量指标显著增加。     

马铃乡香菇主要病害调查及防治方法的筛选

[目的]明确马铃乡香菇的主要病害并筛选防治方法。[方法]调查马铃乡香菇主要病害的发生情况,并筛选主要病害的室内药剂。[结果]该基地香菇病害主要是木霉病,经鉴定是康氏木霉(Trichoderma koningii)和长枝木霉(T.longibrachiatum),两者发病率达66%,病情指数为24。实验室药剂筛选试验结果表明:混合液(生石灰∶硫酸钙∶盐∶水=5∶1∶1∶100)能同时抑制木霉生长和产孢,可有效控制木霉的发生与扩散,但同时也抑制香菇的菌丝生长,不适宜用来防治菌袋中的木霉菌,可用于喷施培养菌袋所在的土壤、器具等,减少木霉菌感染菌袋的机会;1.000%的大蒜稀释液效果最理想,可有效抑制木霉生长,同时对香菇生长抑制率很低,对香菇产量影响较小。[结论]研究结果为香菇病害的防治提供了理论依据。     

一株促生拮抗木霉菌的鉴定

从采集的植物根际土壤中分离到一株对黄瓜具有拮抗作用的木霉菌LT19,该菌能够促进黄瓜幼苗的生长,并具有溶磷、产嗜铁素、IAA及ACC脱氨酶的能力,显示了该菌在防治作物病害以及促进作物生长方面潜在的应用价值。根据形态特征与ITS序列分析,将其鉴定为棘孢木霉(Trichoderma asperellum)。     

新疆番茄生长及其果实加工过程中霉菌污染的监测

[目的]确定新疆番茄果实生长及其加工过程中的霉菌组成,了解不同加工番茄产地所分离霉菌的差异与分布特征以及是否有产毒霉菌污染.[方法]对番茄生长与加工过程中不同环节进行样品采集与霉菌分离,并根据菌落形态特征、显微特征、生理生化和ITS序列分析等方法对分离获得的霉菌进行鉴定.[结果]共分离鉴定45株霉菌,曲霉为优势菌17株,其次为青霉9株,镰孢菌6株,赤霉菌4株,木霉2株,其它类型霉菌7株.[结论]番茄生长土壤与番茄果实中均分离鉴定出产毒真菌黄曲霉菌和木贼镰孢霉,从番茄叶片中分离到产毒真菌尖孢镰孢菌.     

绿色木霉 X-13株固态发酵产酶优化条件的研究

 对绿色木霉X-13株固态发酵产纤维素酶、半纤维素酶及果胶酶的优化条件进行了研究;通过综合评分的决策方法分析表明,X-13株的产酶优化条件是:稻草粉与麸皮的比例1.5∶1,料水比1∶1.5,氮源是2.0%～2.5%硫酸铵,培养基起始pH值6.0～6.5,250 mL三角瓶中装培养基15～20 g,培养时间60 h;以0.01 mol/L,pH 7.4 PBS于室温下浸提发酵培养基2 h,所得粗酶液活性最高。     

黄瓜黑星病菌的生物学特性研究

黄瓜黑星病菌是引起黄瓜及其他葫芦科蔬菜病害的主要病源菌.探讨了温度、培养基酸碱度、光照、碳氮营养对病菌菌丝生长和产孢的影响.结果发现,黄瓜黑星病菌生长和产孢的适宜温度为15～25℃,最适温度为20℃,适宜pH值为5.0～6.5,最适pH值为6;在散射光下培养有利于菌丝生长和产孢;培养基碳源中,以葡萄糖和蔗糖最有利于病菌菌丝生长,以葡萄糖为碳源产孢最多;培养基氮源中,酵母提取物、硝酸钠、牛肉膏最有利于病菌菌丝生长和产孢.     

木霉的适宜培养基条件及药剂筛选

6种不同固体培养基上培养木霉Th1，以MSA、MDA培养基培养产孢量较大，而PDA等其他培养基上的木霉产孢量较小。11种杀菌剂对2株木霉菌的抑菌试验表明：Th1对多菌灵、万霉灵、斯克、甲基托布津非常敏感，对施佳乐、链霉素、氯霉素敏感性差，无抑菌圈。Th2对多菌灵、万霉灵、甲基托布津则非常敏感．对斯克、腈菌唑、施佳乐、百菌清敏感性差。故施佳乐可作为与木霉配合使用防治蔬菜病害的药剂。