3-羟基印楝素的制备、结构鉴定及生物活性测定

对印楝素进行水解反应,得到3-羟基印楝素。3-羟基印楝素处理后24、48 h,对斜纹夜蛾3龄幼虫拒食中体积质量(media antifeedant concentration,AFC50)分别为14.10和35.82mg.L-1。在3 mg.L-1的剂量下处理后24 h,3-羟基印楝素对小菜蛾3龄幼虫的拒食率为65.93%;在5 mg.L-1的剂量下处理后24 h,对棉铃虫3龄幼虫的拒食率为80.05%;在3 mg.L-1的剂量下处理后72 h,小菜蛾3龄幼虫的死亡率为79.34%;在5 mg.L-1的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的死亡率为79.81%;在2 mg.L-1的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的体重下降率为89.06%;在1 mg.L-1的剂量下处理后72 h,斜纹夜蛾3龄幼虫的体重下降率为51.89%。     

22,23-二氢印楝素A的制备、结构鉴定及生物活性

以印楝素A为原料,采用氢化加成反应合成了22,23-二氢印楝素A,用核磁共振氢谱对其结构进行鉴定,采用浸叶法测定了22,23-二氢印楝素A对小菜蛾Plutella xylostella、棉铃虫Heliothis armigera和斜纹夜蛾Spodoptera litura幼虫的拒食活性。结果表明：处理后24和48h,22,23-二氢印楝素A对斜纹夜蛾3龄幼虫AFC50值为6．55和12．61μg／mL,处理后48h,3μg／mL 22,23-二氢印楝素A对小菜蛾3龄幼虫的拒食率为80．29％,5μg／mL 22,23-二氢印楝素A对棉铃虫3龄幼虫的拒食率为81．16％．     

印楝素B的分离、结构鉴定及生物活性测定

从7.920%印楝素A干粉中分离出印楝素B,并对其结构进行了鉴定.生物活性测定结果表明,印楝素B对斜纹夜蛾幼虫具有较好的拒食活性,处理后24 h,印楝素B对斜纹夜蛾2龄幼虫的非选择性拒食中浓度(AFC50)为2.42 μg·mL-1;处理后24 h和48 h,对斜纹夜蛾3龄幼虫的选择性AFC50分别为0.18和0.22 μg·mL-1.印楝素B对大菜粉蝶幼虫具有一定的拒食活性,处理后24 h,对大菜粉蝶幼虫非选择性AFC50为224.48 μg·mL-1.印楝素B对赤拟谷盗具有较好的忌避活性,处理后24 h,50、30、10 μg·mL-1的印楝素B对赤拟谷盗的平均忌避率分别为86.24%、85.06%和70.83%;处理后48 h,其平均忌避率分别为67.70%、59.49%和59.74%.     

印楝素B的分离、结构鉴定及生物活性测定

从7.920%印楝素A干粉中分离出印楝素B,并对其结构进行了鉴定.生物活性测定结果表明,印楝素B对斜纹夜蛾幼虫具有较好的拒食活性,处理后24 h,印楝素B对斜纹夜蛾2龄幼虫的非选择性拒食中浓度(AFC50)为2.42 μg·mL-1;处理后24 h和48 h,对斜纹夜蛾3龄幼虫的选择性AFC50分别为0.18和0.22 μg·mL-1.印楝素B对大菜粉蝶幼虫具有一定的拒食活性,处理后24 h,对大菜粉蝶幼虫非选择性AFC50为224.48 μg·mL-1.印楝素B对赤拟谷盗具有较好的忌避活性,处理后24 h,50、30、10 μg·mL-1的印楝素B对赤拟谷盗的平均忌避率分别为86.24%、85.06%和70.83%;处理后48 h,其平均忌避率分别为67.70%、59.49%和59.74%.     

印楝素和银杏酚酸对甜菜夜蛾幼虫的协同增效作用

研究印楝素和银杏酚酸复配对甜菜夜蛾幼虫的协同增效作用,为开发植物源农药提供理论依据。用印楝素和银杏酚酸及其复配混剂对甜菜夜蛾2龄幼虫进行室内毒力和拒食活性测定,筛选对甜菜夜蛾高效低毒的药剂。结果表明,印楝素和银杏酚酸复配质量比为6∶2,对甜菜夜蛾2龄幼虫具有明显的协同增效作用,2d后的致死中质量浓度(LC_(50))为20.31mg/L,共毒系数为295.36;当印楝素和银杏酚酸复配质量比为3∶5时,拒食活性测定共毒系数为225.22,AFC_(50)为27.03mg/L,增效作用最强。     

印楝素干粉的制备及生物活性测定

【目的】测定印楝素干粉及印楝素A、印楝素B的生物活性,建立印楝素干粉中印楝素含量的检测方法。【方法】采用乙酸乙酯浸提法制备印楝素干粉,HPLC法检测印楝素含量,叶碟法测定生物活性。【结果】处理24 h后,印楝素干粉对斜纹夜蛾Spodoptera litura 2龄幼虫和大菜粉蝶Pieris brassicae 3龄幼虫的AFC50值分别为0.28和70.71μg·m L~(-1),拒食活性明显高于印楝素A和印楝素B。【结论】该干粉制备方法不仅简单有效,且生物活性良好,具有推广应用价值。     

印楝素对草地贪夜蛾的毒力测定及田间防效

【目的】评价印楝素对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda的毒力与防效,为草地贪夜蛾的防治提供技术参考。【方法】采用浸叶法与喷雾法测定了印楝素对草地贪夜蛾的室内毒力和田间防治效果。【结果】在室内条件下,0.3%(φ)印楝素乳油处理草地贪夜蛾7 d后,2龄和3龄幼虫的LC50值分别为0.59和0.46 mg/L;40%(w)印楝素干粉处理草地贪夜蛾7 d后,2龄和3龄幼虫的LC_(50)值分别为0.93和0.79 mg/L。0.3%印楝素乳油处理草地贪夜蛾3 d后,2龄和3龄幼虫的AFC50值分别为0.30和0.12 mg/L;40%印楝素干粉处理草地贪夜蛾3 d后,2龄和3龄幼虫的AFC50值分别为0.53和0.30 mg/L。0.3%印楝素乳油稀释500倍喷雾处理后1、3和7 d对草地贪夜蛾的防效分别达到了24.83%、50.34%和75.50%。【结论】印楝素对草地贪夜蛾具有较好的毒杀活性与拒食活性,7 d后的防治效果较好;印楝素对草地贪夜蛾的防治具有广阔的应用前景。     

取食量对斜纹夜蛾生长发育的影响

通过控制取食量的方法模拟拒食作用，研究了不同取食量和印楝素拒食处理对斜纹夜蛾幼虫生长发育的影响．结果表明，食物量的减少对斜纹夜蛾幼虫的生长发育有明显的抑制作用．对斜纹夜蛾3龄幼虫进行控制取食量处理，发现随取食量的降低，生长抑制作用增大，试虫的发育历期延长，死亡率增高，但化蛹率和羽化率所受影响不大．用不同浓度的印楝素处理斜纹夜蛾3龄幼虫，发现随印楝素浓度的增高，对斜纹夜蛾幼虫的生长抑制作用越明显．印楝素拒食处理使试虫的发育历期延长，死亡率升高，这与控制取食量的结果相似，但印楝素使试虫的化蛹率和羽化率明显降低，这与控制取食量的结果有差别．     

印楝素对斜纹夜蛾生长发育的影响

通过叶片浸渍法、食料混药法和药液点滴法,研究了印楝素对斜纹夜蛾3龄幼虫生长发育的影响。结果表明,印楝素对斜纹夜蛾3龄幼虫的生长发育有显著的抑制作用,表现为处理浓度越高,体重增长倍数越低,死亡率越高。经浸渍法和食料混药法处理后,幼虫的存活历期为12~14d,各浓度的致死作用可达100%。用药液点滴法处理后,印楝素的致死作用随时间的延长而增加,4d后最大死亡率为92.86%。     

3-羟基,12-羧基印楝素的制备、结构鉴定及生物活性测定

对印楝素进行水解反应,得到3-羟基,12-羧基印楝素,以浸叶喂食法研究了3-羟基,12-羧基印楝素对小菜蛾Plutella xylostella、斜纹夜蛾Spodoptera litura和棉铃虫Heliothis armigera的生物活性.结果表明,在室温敞开体系贮存15 d后,印楝素、印楝素干粉和印楝种子甲醇粗提物溶液中印楝素大部分降解,但溶液仍对斜纹夜蛾幼虫具有良好的毒杀活性.处理后24 和48 h,3-羟基, 12-羧基印楝素对斜纹夜蛾3龄幼虫的AFC50值分别为37.19 和 50.18 μg/mL.在3 μg/mL的剂量下处理后24 h,3-羟基,12-羧基印楝素对小菜蛾3龄幼虫的拒食率为 46.69 %;在5 μg/mL的剂量下处理后24 h,对棉铃虫3龄幼虫的拒食率为75.65 %;在3 μg/mL的剂量下处理后72 h,小菜蛾3龄幼虫的死亡率为61.28 %;在5 μg/mL的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的死亡率为47.65%;在 2.0 μg/mL 的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的体质量下降率为48.93 %;在1.0 μg/mL的剂量下处理后 72 h,斜纹夜蛾3龄幼虫的体质量下降率为41.18 %.     

影响印楝素稳定性的因素和一些解决方法

印楝素是世界上公认最有潜力的杀虫植物,但由于稳定性差,成为推广使用的一个重要影响因素,文章综述了影响楝素稳定性的主要原因及一些解决方法。     

印楝素B稳定性的观察

室内试验测定结果表明,印楝种子甲醇抽提物中印楝素B在甲醇、乙醇、乙腈和DMF等溶剂中具有良好的稳定性。在54℃下贮存14 d,印楝素B的降解率分别为-1.87%、1.13%、-2.32%和5.24%。印楝素干粉中印楝素B在甲醇、乙醇、丙酮和DMF等溶剂中的稳定性不佳,在54℃下贮存14 d,印楝素B的降解率分别为24.07%、35.65%、19.88%和10.29%。印楝种子甲醇抽提物在甲醇 水(55/3,V/V)中于0℃下贮存7 d和14 d,印楝素B的降解率分别为-2.98%和1.03%。于54℃下贮存7 d和14 d,印楝素B的降解率分别8.73%和15.09%。于甲醇 水(9/1,V/V)中在54℃下热贮14 d,印楝素B的降解率为52.47%,稳定性高于印楝素A。紫外光下照射19 d,印楝种子甲醇抽提物中印楝素B的降解率为-2.94%。     

印楝素和溴氰菊酯对米蛾的毒力评价

为评价印楝素对仓储害虫米蛾的毒效,采用微量点滴法,比较印楝素与溴氰菊酯对米蛾的室内毒力。结果表明:印楝素对米蛾的毒力随着处理时间的延长而增强,随处理时间的延长溴氰菊酯对米蛾的毒力差异不显著,说明印楝素对米蛾的作用效果较慢,药效持续时间长,适合应用于仓储害虫的防治。     

环保型25.15%印、硫种衣剂的研制及其活性效应测定

 根据胶体稳定原理和高分子聚合物成膜原理及流变理论,选取无毒的植物源农药印楝素和基本无毒的硫磺为杀虫杀菌剂活性组分,再配以有关助剂,研制出了环保型25.15%印硫种衣剂。用玉米小斑病菌(Bipolaris maydis)做印、硫种衣剂防病方面的配方筛选,结果认定:25.15%印、硫种剂的印、硫比以1∶124.8和1∶166.7为好,以1∶124.8为最佳配方。用孢子萌发法对选出的最佳配方(印:硫＝1∶124.8)进行毒力测定,对小斑病孢子发芽的毒力回归方程为y＝0.561 2＋1.493 3x,r＝0.966 1,LC₅₀为938.592 mg／L,LC_0.95＝816.394 4～1 079.195 2 mg／L,经卡方检验结果说明回归符合实际。根据N A Mansour法求出“协同毒力指数”(c.f)为＋10.32,表明混剂属相加作用(addition)。田间药效试验:用重庆地区玉米茎腐病主要病原瓜果腐霉菌(Pythium aphanidernatum)人工接种试验,用25.15%印、硫种衣剂药种比1∶40,1∶50,1∶60比例包衣玉为种子,田间出苗率依次为94.0%,96.5%,92.0%,相对防效分别为80.24%,79.46%和75.90%,前二者与后者差异显著(P＜0.05)。     

印楝素悬浮剂的制备及拒食活性测定

研究了阴离子和非离子表面活性剂复配体系对印楝素悬浮剂悬浮率的影响,采用水基悬浮剂悬浮率、分散性、粘度、粒度等作为控制指标,确定了w=2%印楝素悬浮剂的最佳配方:表面活性剂(w=10%)为阴离子表面活性剂农乳500、木质素磺酸钙和非离子表面活性剂农乳600以质量比2∶ 1∶ 2复配;增稠剂为w=1%白炭黑;防冻剂为w=3%的乙二醇;抗泡剂为w=1%的硅酸;其余为去离子水.测定了w=2% 印楝素悬浮剂和w=0.3%印楝素乳油对斜纹夜蛾Spodoptera litura的拒食活性,结果表明,2种印楝素制剂对斜纹夜蛾的拒食活性相当.     

水分影响印楝素及同系物降解动力学研究

研究水分对印楝素A、6-deacetylnimbin、6-deacetylsalannin、nimbin和salannin5种同系物稳定性的影响,并建立水分影响印楝素及同系物降解动力学模型。结果表明,水能加快印楝素A及同系物的降解,且降解率随着水分含量的增加而增大。     

印楝素可能通过干扰细胞凋亡抑制果蝇生长发育

为了探讨印楝素调节昆虫生长发育的细胞毒理机制,寻找杀虫作用新靶标,以含印楝素0.5、1.0、2.0、3.0、5.0 mg/kg的培养基饲养黑腹果蝇幼虫,观察幼虫生长发育情况,通过荧光显微技术研究胚胎发育过程中的细胞凋亡. 结果表明,印楝素处理可显著抑制黑腹果蝇幼虫的生长发育,处理后5 d平均虫重由对照的1.41 mg降低至1.13~0.38 mg,发育历期由对照的4.50 d延长至5.17~12.33 d,发育抑制率为19.86%~73.05%,或形成永久性幼虫不能化蛹,最终死亡;部分幼虫虽然能化蛹,但化蛹率下降至1.67%~63.33%,均显著低于对照组的95.00%,羽化率由对照的95.00%下降至63.33%~1.67%,平均产卵数由对照的57.33下降至29.67~4.33,出现畸形成虫,个体明显变小. 运用荧光显微镜观察发现,印楝素0.5 mg/kg和2.0 mg/kg处理能明显推迟果蝇胚胎细胞凋亡高峰期,缩短凋亡峰期的持续时期.     

印楝素在贵州茶区防治茶小绿叶蝉药效试验

为进一步了解印楝素对贵州茶区茶树主要害虫的田间防治效果以及其对天敌、茶树植株的影响,以0.3%印楝素乳油和30%印楝油为供试药剂进行了田间试验。结果表明:这两种药剂在大田中单独施用后防治茶小绿叶蝉较为理想,最高防效可达91.82%~94.87%,同时速效性好,持效期长,可维持在14 d以上,且对茶树生长安全、对天敌亦无影响,推荐施用剂量分别为90和30 m L/667m2。     

紫外光对印楝素A及同系物降解的影响

研究了紫外照射对印楝素A、6-deacetylnimbin、6-deacetylsalannin、nimbin和salannin 5种同系物稳定性的影响,结果表明,在紫外光持续照射48 h后印楝素A及同系物已基本完全降解,降解率基本达到99%以上.说明印楝素A及同系物属于很容易降解的物质.     

印楝素诱导黑腹果蝇复眼发育异常的形态学研究

将果蝇置于含印楝素2 mg/kg的昆虫培养基中产卵,待卵孵化发育至不同虫态,运用光学显微镜及扫描电镜研究果蝇新羽化成虫复眼外观,发现复眼明显萎缩并呈现不规则状,表面粗糙,出现异常凹陷,刚毛缺失或增生,排列不规则或弯曲;运用透射电镜研究复眼超微结构,结果表明,3龄末期幼虫复眼组织细胞中染色质高度聚集成小体、小体分散,吞噬泡数量明显增多,核膜皱缩、界限模糊,蛹和新羽化成虫复眼中感光细胞丢失.这些结果确证了印楝素诱导果蝇复眼发育异常,为寻找新型昆虫生长发育调节剂提供了可能的新靶标.