致犊牛腹泻大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验

<正>对农七师123团牛场犊牛所发生的一种以急性腹泻、脱水及虚脱为主要特征的传染病进行了病原的(病料:心血、肝、脾淋巴)分离、培养和鉴定,观察了对兔血的溶血情况,并对两株分离株进行小白鼠感染试验,确定引起此次发病的病原菌为大肠杆菌。通过对两株分离株做药敏试验,表明该分离菌对硫酸链霉素、庆大霉素、恩诺沙星敏感,对土霉素中敏,对其他药物有抗药性。确定引起该牛场犊牛腹泻的病原,为临床预防和治疗提供了依据。     

甘肃地区新生仔猪腹泻细菌性病原的分离鉴定及其耐药性分析

为了解甘肃地区导致新生仔猪腹泻的主要细菌性病原。采集甘肃省部分地区新生仔猪腹泻病料104份,采用16SrDNA扩增技术对细菌性病原进行鉴定,经标准诊断血清确定其血清型,并用药敏纸片法对细菌性病原进行耐药性分析。结果显示:在35份病料中分离出致病性大肠埃希菌,4份病料中分离得到与致病性大肠埃希菌混合感染的沙门菌;肠道产毒性大肠埃希菌的血清型主要以O78:K80(B)为主;该地区的致病性大肠埃希菌对多种抗生素产生耐药性。表明:甘肃地区新生仔猪腹泻的细菌性病原主要是大肠埃希菌,且多重耐药性严重。     

新疆部分地区犊牛腹泻病大肠杆菌的分离、鉴定与血清型分析

【目的】为新疆犊牛腹泻病的预防提供理论依据。犊牛腹泻多是1月龄以内的犊牛出现一种以消化不良、腹泻为主要症状的消化道疾病,是造成犊牛死亡的主要疾病之一,同时引起犊牛腹泻的细菌种类不同,细菌的血清型也可能存在着地区差异型。【方法】选取新疆四个地方犊牛腹泻的粪便69份,进行细菌常规分离鉴定和血清型鉴定分析。【结果】大肠杆菌99株,沙门氏菌45株,克雷伯菌39株及未鉴定菌株20株。同时对分离的99株大肠杆菌进行血清型诊断和分析多为:O_(55)、O_(44)、O_(86)和O_(125)。【结论】新疆部分地区引起犊牛腹泻的病原菌和大肠杆菌优势血清型均存在地域性差异,为该不同地区犊牛腹泻防治提供理论依据。     

水貂大肠杆菌的分离·鉴定及药敏试验

[目的]为更好预防水貂大肠杆菌病提供依据。[方法]从山东某大型水貂养殖场采集病料,通过病原分离、培养特性、染色特性和生化试验等对病原进行分离与鉴定,并对分离菌进行药敏试验。[结果]共分离致病菌18株,其中有10株为大肠杆菌,说明该养殖场主要的细菌病为大肠杆菌感染。药敏试验结果表明分离出的大肠杆菌对大多数抗菌药物敏感。[结论]水貂发生细菌病后,应尽可能通过药敏试验筛选敏感药物,避免盲目投药。     

一例犊牛大肠杆菌病的诊治

2019年8月某牛场大量犊牛先后出现以精神萎靡、严重腹泻、脱水、消瘦等为主要特征的疫病,为了对发病犊牛及时进行诊断与治疗,本研究通过发病情况、临床症状、剖检病变等临床诊断以及细菌分离培养、分离菌株形态特征观察、分离菌株生化鉴定试验、分离菌株致病性试验、分离菌株药物敏感性试验等实验室检验综合判定致病原为大肠杆菌,经过迅速采取灌服硫酸钠溶液、灌服止泻剂、注射庆大霉素、补液、加强饲养管理等系列综合性治疗措施迅速控制了疫病。     

犊牛腹泻大肠杆菌血清型鉴定

为查明引起巴州地区犊牛腹泻的大肠杆菌血清型,采用细菌分离培养鉴定、血清型鉴定试验进行鉴定。结果表明,从36株大肠杆菌中鉴定出的6种血清型,其中O8 3株、 O26 4株、 O35 2株、 O78 13株、 O101 2株、 O111 12株,O78、O111为主要流行的血清型。本试验为巴州地区犊牛腹泻的防治提供理论依据。     

O78败血型犊牛大肠杆菌的分离和鉴定

从发病犊牛体内分离到一株病原细菌,经微生物学鉴定表明为O78血清型的败血型犊牛大肠杆菌。     

奶牛混合感染附红细胞体的诊断与分析

奶牛附红细胞体病多为混合感染。通过对宁夏某奶牛场送检的发病犊牛的各种脏器组织及粪样进行病原体的分离培养、分离菌的药敏试验等检测,并对发病犊牛和同群犊牛的血样进行附红体检测。结果表明,该场发病犊牛存在附红细胞体、致病性大肠杆菌、巴氏杆菌、沙门氏菌和链球菌的混合感染,且附红细胞体感染为主要发病原因;未发病的犊牛存在着附红细胞体隐性感染。对发病犊牛使用血虫净（贝尼尔）进行治疗的同时,使用氧氟沙星全身给药,病牛发生明显好转。     

泰州地区鸭源大肠杆菌的分离鉴定与耐药性试验

以泰州地区15羽临床疑似大肠杆菌病病死鸭为病料进行病原分离培养、革兰氏染色镜检、生化试验,分离鉴定出13株大肠杆菌。对分离菌进行药敏试验发现,13株大肠杆菌对头孢噻呋的耐药率最低,对链霉素的耐药率最高。对氟苯尼考、阿米沙星、大观霉素的耐药率相对较低(分别为15.4%、23.1%、30.8%),而对大多数抗菌药物则表现出较强的耐药性,大肠杆菌多重耐药现象非常普遍,大多数大肠杆菌都是5耐、6耐、7耐甚至8耐。     

肉犊牛沙门氏菌肺炎的诊治

为找出重庆丰都县和四川自贡市肉牛场肉犊牛肺炎的病原,从肉犊牛的鼻分泌物和肺组织共分离到29株细 菌,经形态特性及生化试验,结合临床症状及病理变化,鉴定为沙门氏菌.用临床上常用的21种抗菌素纸片对分离 菌进行药敏试验,结果显示所分离的沙门氏菌对头孢曲松等大部分头孢类药物、氨曲南和亚胺培南敏感性极高.临 床上采用头孢曲松及壮观霉素进行治疗,效果良好.     

O149大肠菌株的细菌学检测与肠毒素鉴定

通过流行病学及病原学的调查研究，从患黄痢的新生仔猪分离出13株O149大肠杆菌，采用兔肠结扎试验、平板免疫溶血试验对其产肠毒素性能进行了鉴定，生物学试验和血清学反应的结果表明，O149大肠菌株的被检滤液中存在热敏肠毒素（LT）。     

鸭致病性大肠埃希菌的分离鉴定与毒力基因检测及菌蜕制备

从江苏省某水禽场的疑似感染致病性大肠埃希菌的病鸭中分离获得鸭致病性大肠埃希菌野毒株;通过玻板凝集和试管凝集试验确定其血清型,采用PCR进行分群分析和毒力基因检测;扩增φX_(174)噬菌体裂解蛋白E的基因序列,构建温控型表达质粒pBV221–E,并将其电击转化入分离毒株,升温诱导E蛋白表达制备菌蜕;通过测量菌液A600 nm值和在透射电镜下观察细菌形态,评估菌蜕构建效果;用该菌蜕进行灭活处理和无菌检测后,对雏鸭进行免疫,用间接ELISA法检测血清IgG水平。结果表明:该大肠埃希菌的血清型为O24,属于B1群,具有毒力基因fimC、csgA和iroN;获得的鸭致病性大肠埃希菌菌蜕裂解率为99.96%;经透射电镜观察发现,制备获得的菌蜕表面有明显孔道,细胞质从孔道溢出,细胞膜皱缩变形;抗体水平检测结果显示,二免后菌蜕免疫组雏鸭血清IgG水平显著提高。可见,通过将pBV221–E重组质粒转化至鸭致病性大肠埃希菌分离株,调节细菌培养温度诱导E蛋白表达,能制备鸭致病性大肠埃希菌B1群O24型野毒株菌蜕。该菌蜕可诱发机体产生体液免疫。     

江苏省大丰地区鸡大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

[目的]探讨江苏省大丰地区鸡大肠杆菌病的流行情况及耐药情况。[方法]对来自江苏省大丰区不同鸡场疑患大肠杆菌病的237只病鸡,通过病理剖检、细菌分离培养、革兰氏染色、镜检和生化试验等对致病菌进行分离与鉴定,然后对鉴定的大肠杆菌进行血清型定型,并对定型的大肠杆菌进行药敏试验。[结果]共分离到218株大肠杆菌;通过血清学鉴定,获得11个血清型,其中52株为O_(88),44株为O_(18),32株为O_1,21株为O_2,12株为O_(35),9株为O_(81),8株为O_(115),5株为O_(78),O_(11)、O_(26)、O_(114)各1株,另有32株没有定型。对定型的186株大肠杆菌进行药敏试验,结果发现其对大多数抗菌药物耐药,但硫酸黏菌素、头孢噻呋、头孢噻肟、卡那霉素、氧氟沙星和新霉素高度敏感。[结论]研究结果可为制备大肠杆菌自家疫苗奠定基础。     

中药与抗菌药物联用对大肠杆菌抑制作用的研究

本试验将黄芩及4种中药组合分别与5种抗菌药物联用来检测这些组合对大肠杆菌的体外抑制效果。结果表明，所采用的大多数中西药物组合对大肠杆菌的生长具有抑制作用，不同组合对大肠杆菌生长的抑制作用显著不同，其中黄芩与5种抗菌药物的组合对大肠杆菌生长的抑制作用均十分明显。另外，同一种中西药物组合对大肠杆菌耐药株和标准株的生长的抑制作用也不同。     

奶牛隐性乳房炎主要病原菌的分离鉴定及耐药性测定

对陕西省杨凌区某奶牛场经体细胞计数(SCC)法确定为隐性乳房炎的20份乳样中的主要病原菌进行分离鉴定,并对分离菌进行耐药性测定。共分离到24株分离菌,其中金黄色葡萄球菌10株,占41.6%;沙门氏菌6株,占25.0%;表皮葡萄球菌5株,占20.8%;大肠埃希菌2株,占8.4%;其他细菌1株,占4.2%。耐药性试验显示,主要分离菌均对庆大霉素和卡那霉素敏感,而对四环素、复方新诺明有较强的耐药性,链霉素、红霉素、氯霉素对分离菌的生长也有明显的抑制作用,建议在临床治疗中联合用药,以取得更好的效果。     

蒲公英抑菌成分提取工艺的优化

用常温水提、煎煮水提和醇提法分别对蒲公英抑菌成分进行提取,并对提取物进行大肠杆菌、沙门氏菌及绿脓杆菌的抑菌试验,同时采用正交试验对3种方法的各影响因素进行优选,确定最佳提取工艺。结果表明,蒲公英提取产物对3种致病菌均有一定的抑制作用,对沙门氏菌抑制效果较好,对大肠杆菌和绿脓杆菌的抑制效果基本相同。蒲公英提取物对3种致病菌的最小抑菌浓度分别为大肠杆菌0.125 g/ml,沙门氏菌为0.031 25 g/ml,绿脓杆菌为0.125 g/ml。最佳提取条件是室温下先把蒲公英浸泡1 h,然后煎煮2次,分别加20倍和15倍的水,提取时间分别是50和40 min。     

张家口地区仔猪白痢病原菌血清型检测及药敏试验

[目的]为临床上选用仔猪白痢疫苗与防治用药提供参考。[方法]从20个规模化猪场采集40份仔猪白痢病料,对致病性大肠杆菌进行分离和生化鉴定,分析其血清型并检测其耐药性。[结果]从40份病料中分离出36株大肠杆菌,其中32株为致病性大肠杆菌。分离菌对16种药物均有不同程度的耐药性,最高为100%,最低为6%。所有分离菌均表现出不同程度的多重耐药性,其中22株分离菌为4耐以上的菌株。32株致病菌分布在9个血清型中。[结论]张家口地区规模化猪场仔猪白痢病原菌的优势血清型为O8、O149、O141和O54,占已定型菌株的59.3%。对仔猪白痢病原菌敏感率较高的药物为头孢噻肟钠、诺氟沙星、丁胺卡那和新霉素。     

中草药黄荆复方提取物的体外抑菌试验*

 用水提法提取黄荆、黄连、大黄等药组成的中草药复方，以不同梯度药物提取物进行体外抑菌试验，观察其对大肠杆菌O₂,O₄,O₅,O₈,O₁₀₁，猪伤寒沙门氏菌C_78-2,猪副伤寒沙门氏菌C₅₀₀,鸡白痢C_79-13，绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌、气单胞菌、表皮葡萄球菌等12种细菌的抑制效果。结果表明，黄荆复方除对表皮葡萄球菌无抑制作用外，对其它11种细菌均有较好的抑制作用。     

河南省鸡大肠杆菌的致病特点及血清型研究

通过门诊送检病例 ,对河南省鸡大肠杆菌病的流行情况进行了调查研究 ,并进行了病原体的分离鉴定、血清型及耐药性检测。结果表明 ,在收治的 80例病例中 ,卵黄性腹膜炎占5 0 % ,败血症占 2 5 % ,幼雏脐炎占 1 0 % ,肉芽肿占 6.2 5 % ,气囊炎占 5 % ,肠炎占 3.75 % ;共分离到 72株大肠杆菌 ,分离率 90 %。通过血清型鉴定 ,共有 9个血清型 ,即O5( 2 0 .8% )、O8( 1 6.7% )、O78( 1 2 .7% )、O1 4 1 ( 1 2 .5 % )、O1 4 7( 1 2 .5 % )、O1 8( 1 2 .3% )、O1 9( 5 .6% )、O1 4 ( 4 .9% )和O1 5( 2 .0 % )。河南省鸡群中致病性大肠杆菌的优势菌株依次为O5,O8,O78,O1 4 1 ,O1 4 7,O1 8,说明河南省鸡大肠杆菌病的不同性和复杂性。并且所分离的大肠杆菌菌株对链霉素、烟酸氟哌酸高度敏感 ,高敏菌株达 61 .1 % ,而对痢特灵、土霉素和磺胺嘧啶则产生了明显的抗药性     

大肠杆菌O157 Stx噬菌体裂解酶的克隆表达及活性分析

为研究大肠杆菌O157Stx噬菌体编码的裂解酶(内溶素)对肠出血性大肠杆菌的抗菌作用,克隆表达了大肠杆菌O157Stx噬菌体裂解酶,并检测其裂解作用和裂菌谱。利用PCR方法扩增大肠杆菌O157Min27株中Stx2噬菌体裂解酶基因(R基因),构建表达质粒pET28a(+)-lysEC1,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)。重组质粒在BL21中获得了高表达,目的蛋白表达量占菌体总蛋白的34%,经His-trapTM亲和层析柱纯化后,获得的重组LysEC1的纯度大于97%。体外裂解活性试验证实纯化的噬菌体裂解酶LysEC1对肠出血性大肠杆菌菌株具有很好的裂解作用,这为新型噬菌体抗菌生物制剂的研发提供了新的研发方向。