绿色木霉产纤维素酶的条件研究

[目的]优化绿色木霉产纤维素酶的条件,为其实际应用提供依据。[方法]采用液体发酵方法对绿色木霉产纤维素酶的条件进行研究,分别考察发酵时间、氮源、接种量和pH值对纤维素酶活力的影响。[结果]绿色木霉产不同酶组分的分泌高峰并不一致,FPA酶活在发酵2d后达到最高值,Cx酶活在发酵3d后达到最高值。发酵培养基以蛋白胨为唯一氮源时,纤维素酶活力最高。发酵培养的最佳接种量为5%,最适初始pH值为4.5。[结论]不同培养条件对绿色木霉产纤维素酶的活力影响各异。     

超声波/稀H2SO4预处理对玉米秸秆液体发酵产纤维素酶的影响（摘要）

[目的]研究超声波强化稀H_2SO_4预处理对玉米秸秆液体发酵产纤维素酶的影响,探索超声波强化稀H_2SO_4预处理玉米的最优条件。[方法]先以2%的H_2SO_4超声波预处理玉米秸秆,并以预处理后的秸秆为唯一碳源进行发酵,测定胞外发酵液的纤维素酶活性。单因素试验研究固液比、酸溶时间、超声时间、超声功率、酸浓度对发酵液纤维素酶活的影响。再以单因素测定结果为基础,设计4因素3水平的正交试验,筛选最高纤维素酶活的因素组合,进行验证试验。纤维素酶活测定：分别以新华定量滤纸50 mg/份,羧甲基纤维素钠（CMC-Na）510mg/份,脱脂棉花50 mg/份为底物,分别对应FPA、Cx、β-glucosidase,采用DNS还原糖法测定纤维素酶活。[结果]通过极差分析,影响FPA和β-Glu酶活因素大小依次为酸浓度、酸浴时间、超声功率、超声时间;影响Cx的因素依次为酸浴时间、酸浓度、超声功率、超声时间。产纤维素酶的最佳组合为：酸浴时间3h、酸浓度3.5%、超声功率150W、超声时间5h。在该条件下,利用玉米芯作为唯一C源液体发酵产纤维素酶的粗酶活分别为FPA 15.82 U/ml、Cx 39.9 U/ml、β-Glu 55.94 U/ml。验证试验也确定了其准确性。[结论]在筛选出的最佳组合条件下,胞外产纤维素酶具有较高的稳定性。     

N+注入选育益生菌及其产酶条件的研究

出发菌株黑曲霉AN01,经离子束多次诱变得变异菌株AN02.结果表明,出发菌株AN01酸性蛋白酶、纤维素酶和果胶酶的酶活分别由原来的1 298 U·mL-1、2 551 U·mL-1和5 620 U·mL-1相继提高到14 252 U·mL-1、13 016 U·mL-1和13 206 U·mL-1.变异菌株AN02经传5代培养,产酶特性稳定.该菌株的最佳产酶条件为在培养基基础营养为麸皮、豆粕和玉米芯的条件下,最佳无机氮源为硫酸铵,最佳pH为5.0,最佳含水量为60%,最佳发酵温度为30℃,最佳发酵周期为96 h.     

云南一株高产纤维素酶菌株YN-2的筛选及其产酶条件的研究*

 从云南农田土壤材料中分离得到一株高产纤维素酶真菌YN-2,对其进行形态及生理生化特征初步鉴定及通过ITS基因片断序列分析后,初步确定该菌株为草酸青霉。产酶条件及酶活力特性分析发现该菌株在培养4d后,羧甲基纤维素酶(CMCase）酶活达61.50U/mL, 滤纸酶 (FPAse) 酶活达19.37U/mL;酶促反应的最适反应温度为 50℃;pH值为4.8时,CMCase 达52.60U/mL, FPAse 活力达18.37U/mL。研究发现当固体发酵培养基中添加0.12%的吐温20(Tween 20）对菌株YN-2的CMCase活力影响最显著,在0.10% Tween 20的固体发酵培养基中菌株YN-2的FPA活力有所提高,在其他Tween 20添加浓度的固体发酵培养基中菌株YN-2的CMCase活力和FPA活力均受到不同程度的抑制。     

梅林青霉液态发酵生产纤维素酶条件的研究

研究不同培养条件对梅林青霉液体发酵产纤维素酶的影响,为此对不同碳源、氮源、pH、培养温度、摇瓶转速和摇瓶装量、发酵时间培养条件下羧甲基纤维素酶、滤纸酶、β-葡萄糖苷酶活力进行了测定。结果表明,碳源麦麸诱导效果好于稻草、玉米秸、羊草;氮源中尿素明显降低β-葡萄糖苷酶活力,豆饼、硝酸钠和蛋白胨之间影响不明显;28℃和pH5.0是产纤维素酶最佳温度与酸碱度;通过响应面与等值线分析可知,在摇床转速170~180 r.m in-1,摇瓶装量30~40 mL时,羧甲基纤维素酶、β-葡萄糖苷酶显示较高活性;摇床转速140~150 r.m in-1,摇瓶装量40~50 mL时,滤纸酶显示较高活性;梅林青霉在Bioengineering的NLF19生物反应器液体发酵大约11 d时3种酶活力达到最高。     

梅林青霉液态发酵生产纤维素酶条件的研究

研究不同培养条件对梅林青霉液体发酵产纤维素酶的影响,为此对不同碳源、氮源、pH、培养温度、摇瓶转速和摇瓶装量、发酵时间培养条件下羧甲基纤维素酶、滤纸酶、β-葡萄糖苷酶活力进行了测定.结果表明,碳源麦麸诱导效果好于稻草、玉米秸、羊草;氮源中尿素明显降低β-葡萄糖苷酶活力,豆饼、硝酸钠和蛋白胨之间影响不明显;28℃和pH5.0是产纤维素酶最佳温度与酸碱度;通过响应面与等值线分析可知,在摇床转速170～180 r·min-1,摇瓶装量30～40 mL时,羧甲基纤维素酶、β-葡萄糖苷酶显示较高活性;摇床转速140～150 r·min-1,摇瓶装量40～50 mL时,滤纸酶显示较高活性;梅林青霉在Bioengineering的NLF19生物反应器液体发酵大约11 d时3种酶活力达到最高.     

纤维素酶产生菌的筛选、鉴定和产酶条件优化

采用稀释平板法分离马铃薯瓢虫肠道菌,利用刚果红平板法对产纤维素酶菌株进行初筛,选取透明圈较大的菌株进行摇瓶发酵复筛,根据菌株形态、生理生化特征对菌株进行初步鉴定,通过正交法优化产酶条件。结果表明,经初筛和复筛得到1株酶活相对较高的菌株B-12,经初步鉴定为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)。1.25%麦芽浸粉为碳源、1.5%KNO3为氮源、0.2%的NaCl、0.1%的CMC-Na、接种量6%、培养时间44 h为B-12产酶的适宜条件。优化后发酵液中的内切葡聚糖酶活(CMCA)为111.710 U/mL,较培养44 h后的酶活提高了8.78%;滤纸酶活(FPA)为35.017 U/mL,提高了387.23%;β-葡萄糖苷酶酶活(BGL)为116.799 U/mL,提高了700.38%。     

梅林青霉液态发酵生产纤维素酶条件的研究

研究不同培养条件对梅林青霉液体发酵产纤维素酶的影响,为此对不同碳源、氮源、pH、培养温度、摇瓶转速和摇瓶装量、发酵时间培养条件下羧甲基纤维素酶、滤纸酶、β-葡萄糖苷酶活力进行了测定。结果表明,碳源麦麸诱导效果好于稻草、玉米秸、羊草;氮源中尿素明显降低β-葡萄糖苷酶活力,豆饼、硝酸钠和蛋白胨之间影响不明显;28℃和pH5.0是产纤维素酶最佳温度与酸碱度;通过响应面与等值线分析可知,在摇床转速170~180 r.m in-1,摇瓶装量30~40 mL时,羧甲基纤维素酶、β-葡萄糖苷酶显示较高活性;摇床转速140~150 r.m in-1,摇瓶装量40~50 mL时,滤纸酶显示较高活性;梅林青霉在Bioengineering的NLF19生物反应器液体发酵大约11 d时3种酶活力达到最高。     

纤维素酶高产菌株的选育及产酶条件的研究

利用产纤维素酶的微生物分解废弃物(如农作物秸秆)不仅可以减少污染,还可以节省能源.该实验以康氏木霉TR为出发菌株,经过紫外线诱变,结合双层平板分离技术选育出1株纤维素酶活力明显提高的菌株TR6.并通过对康氏木霉固体发酵培养基、接种量、氮源、培养时间和培养温度等培养条件的研究,通过测定其所产纤维素酶的CMA和FPA酶活,找到了最佳的产酶条件.即:秸秆粉∶麸皮=1∶1,固液比=1∶3,添加硫酸铵为氮源,添加量为2%,接种量5%,30℃培养84h左右为宜.CMC,FPA酶活分别达到468.27U/g和275.31U/g.     

猪胃肠道及土壤中分离和纯化产植酸酶、纤维素酶和淀粉酶微生物的研究

以猪胃肠道和土壤作为产酶微生物的主要来源,分别选用植酸钙、磷酸纤维素和淀粉作为指示剂,从猪胃肠道和土壤中筛选出高活力植酸酶产生菌9株(5个细菌、4个真菌)、纤维素酶产生真菌7株及高活力淀粉酶产生细菌2株.选用不同的培养基进行固体和液体振荡培养.结果表明,1)植酸酶的产酶高峰出现在振荡培养的第2天(7.14 U·mL-1),真菌固体培养的植酸酶活力最高可达到12.42 U·g-1;2)纤维素酶的产酶高峰出现在振荡培养的第2～4天(8.49～9.55 U·mL-1),固体培养的纤维素酶活力最高可达到2 185 U·g-1;3)淀粉酶的产酶高峰出现在振荡培养的第2天,达到4.68 U·mL-1对于真菌生产植酸酶和纤维素酶而言,固体发酵要优于液体发酵,说明固体培养条件更适合这2种酶的生产.