平菇原生质体制备及再生培养研究

平菇菌丝原生质体的释放以菌龄４～６ｄ的幼嫩菌丝，用２％Ｌｙｗａｌｚｙｍｅ采用０．６ＭＫＣｌ为渗稳剂在ｐＨ值为５．５、温度为３５℃、酶解２～２．５ｈ生长较好，可达１０７个／ｍＬ，孢子释放原生质体在１．５％溶壁酶和１．５％纤维素酶混合作用，同样外界条件下原生质体转化率可达１００％。原生质体再生以２号培养基在０．６Ｍ甘露醇的作用下，用载片悬浮滴式再生法，再生率可达１２．３％。     

菌丝培养条件的改进对香菇原生质体释放的促进效果

原生质体制备技术是通过体细胞杂交或基因转导进行种质改良的基础。探讨了菌丝培养条件对食用担子菌香菇原生质体释放的影响。在采用１．５％国产酶Ｌｙｗａｌｌｚｙｍｅ的条件下，对接处物进行预切碎处理后，用ＭＹＧ培养基培养可使原生持产量提高７倍，而对再生率影响有大。大ＭＹＧ中添加１μｇ·ｇ＾－＾１α－萘乙酸（ＮＡＡ）使原生质体产量进一步提高１倍，酶解４ｈ时产量达７２×１０＾６／ｍＬ（０．１ｇ湿菌丝），显著高于     

蝉拟青霉原生质体形成与再生

比较了不同酶液，菌丝生长增减基，渗透稳定剂，酶解温度及菌龄等因素对原生质体形成的影响。用１．５％的溶壁酶，菌丝生长培养在为淀粉琼脂培养基，０．６ＭＫＣｌ为渗透稳定剂，温度２８℃，菌龄１６ｈ，可从所试菌株的菌丝获得大量的原生质体。０．６ＭＮａＣｌ为稳定液，黄豆粉培养基上原生质体再生率可达７．９７％。原原生质体释放和再生的形态学过程进行了描述和显微摄影。     

香菇细胞融合育种的预备研究——原生质体制备与再生

探讨了在森林资源综合利用中具重要意义的木腐性食用菌香菇(Lentinus edodes)的原生质体制备及再生条件。对用MYG培养的菌丝,采用以0.6mol甘露醇为稳渗剂的1.5％溶壁酶Lywallzyme进行酶解脱壁,在菌龄7d、酶解液pH值4.5、温度28℃、酶解4h时原生质体产量最高(6×10~6/ml,每0.1g鲜菌丝)。酶解温度>31℃时原生质体产量和再生率都明显降低。用SO培养基代替MYG可使原生质体产量提高1倍,但再生率显著下降(从8.5％下降到1.1％)。从产量和再生率两方面综合考虑,以MYG作为菌丝培养基效果较好。     

禾谷镰孢原生质体的形成与再生

研究报道了制备禾谷镰孢（ＦｕｓａｒｉｕｍｇｒａｍｉｎｅａｒｕｍＳｃｈｗ．）原生质体的方法及影响原生质体再生的条件。ＰＤＳ培养液中培养的菌丝和５％绿豆汁中产生的分生孢子，在２８℃下通过蜗牛酶（３％）、蜗牛酶＋纤维素酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％＋１．５％）酶解，２ｈ开始有原生质体释放，５ｈ左右达释放高峰，后趋于稳定。而以纤维素酶（３％）、溶菌酶（３％）、蜗牛酶＋纤维素酶（１．５％＋１．５％）、蜗牛酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％）、纤维素酶＋溶菌酶（１．５％＋１．５％）处理，原生质体形成效果较差。原生质体在ＰＤＡＳ高渗培养基上再生频率较高（２０％～３０％），在ＭＭＳ上再生频率较低，而在ＮＭＳ上原生质体则不能再生。在ＰＤＡＳ中加入ＫＣｌＯ３和ＭＮＮＧ对原生质体再生有一定影响     

利用同源菌株融合改良农抗5102产生菌

报道了农抗５１０２产生菌同源菌株９０－１１、ＦＲ－００８及ＷＨ－１相互之间融合的前期结果。３菌株原生质体制备的适宜酶解温度和时间均为３２℃和１．０－１．５ｈ，但所需溶菌酶量则有异；９０－１１２－４ｍｇ／ｍｌ，ＦＲ－００８为６ｍｇ／ｍｌ，ＷＨｏｏ ２ｍｇ／ｍｌ。将各菌株的原生质体在－２０℃下冻存１个月内的再生率可维持在７０％以上，２个月以内仍可达６０％以上。以５０％ＰＥＧ１０００诱导融合组合的融合频     

黑曲霉和里氏木霉原生质体形成与再生条件选择 Ⅱ.菌龄,酶…

用正交试验比较了菌龄、酶种类及浓度配比、酶解温度和酶解时间４个主要因素，对黑曲霉ＡＭＳ１１和里氏木霉ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的影响。结果表明，ＡＭＳ１１和ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的４个因素的合理参数分别是：菌龄１４～１６小时和１８～２０小时；三种酶配比（纤维素酶：蜗牛酶：溶菌酶）（ｍｇ／ｍｌ）为（８：４：２）和（５：２．５：２．５）；酶解温度均为３２℃；酶解时间均为２～３小     

榆黄蘑(Pleurotus citrinopileutus)原生质体分离和再生的研究

试验从影响原生质体制备的诸多方面进行了研究,探索榆黄蘑原生质体制备的优化系统。试验时取鲜嫩的菌丝,用ＰＨ值为６．０的ＣＫｌ,蔗糖,甘露醇做酶解稳定液,３０℃下水浴酶解,酶解时间为４－５ｈ,此时榆黄蘑原生质体释放量最大,达到１０＾７个／ｍＬ。     

黑曲霉和里氏木霉原生质体形成与再生条件选择──Ⅱ．菌龄、酶配比及酶解温度和时间的选择

用正交试验比较了菌龄、酶种类及浓度配比、酶解温度和酶解时间４个主要因素，对黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ）ＡＭＳ１１和里氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的影响。结果表明，ＡＭＳ１１和ＱＭ９４１４两菌株原生质体形成与再生的４个因素的合理参数分别是：菌龄１４～１６小时和１８～２０小时；三种酶配比（纤维素酶：蜗牛酶：溶菌酶）（ｍｇ／ｍｌ）为（８：４：２）和（５：２．５：２．５）；酶解温度均为３２℃；酶解时间均为２～３小时。     

黑曲霉AMS—11原生质体的制备

研究了酶系统，制备方法，培养基成分及Ｃａ＾＋２对纤维素酶高产菌黑曲霉ＡＭＳ－１１原生质体释放量的影响，结果表明，经ＹＧ液体培养基静置培养所获得的菌膜用粗糙圆头玻棒仔细充分地捣碎。在３２℃下以２％纤维素酶＋１％蜗牛酶混合酶液酶解３．５ｈ，可以获得最佳的制备效果。