福林酚比色法测定露兜簕果实中的总多酚

以海南种植生产的露兜筋果实为原料,没食子酸为标准品研究了福林酚比色法测定露兜簕果实中总多酚物质含量的最佳反应条件.结果表明,当Na2CO3溶液浓度为10％、福林酚试剂用量为1.5 mL、福林酚试剂与质量分数为10％的Na2CO3溶液体积比为3∶4、反应温度为40℃、反应时间为40 min时,总多酚的含量与吸光值呈良好的线性关系,测定方法的平均回收率为97.19％,相对标准偏差(RSD)为4.62％.该方法所用溶剂少、操作简单、灵敏度高、精密度高、稳定性好,适宜露兜簕果实中总多酚的测定.     

丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的研究

应用分光光度法研究丝瓜多酚氧化酶及过氧化物酶酶学特性的影响因素,为丝瓜酶促褐变的研究提供基础。以普通丝瓜果肉为材料,PPO以邻苯二酚为底物,POD以愈创木酚为底物,研究分析反应温度、反应时间、pH及测量波长、底物的浓度、PPO提取酶液添加量对丝瓜PPO、POD活性的影响。丝瓜褐变相关酶提取和测定方法的优化:(1)PPO最佳反应体系:测定波长408nm、反应温度是35℃、pH为6.0、酶液用量0.15mL,最适底物为邻苯二酚,底物浓度为0.056mol·L~(-1);(2)POD最佳反应体系:测定波长410nm,反应温度为40℃,最佳pH为5.5,酶液用量0.1mL,底物是愈创木酚,浓度为0.067mol·L~(-1)。     

藕节中总酚含量的福林法测定

采用福林法测定了藕节中总酚的含量，确定了以没食子酸为标准品福林法测定藕节中总酚的适宜方法。结果表明，没食子酸在福林试剂与10％Na2CO3之比为1：1(v：v)，体积为3ml，反应温度为25℃，反应时间为30min，浓度为2～10μg/ml时与其吸光值呈良好的线性关系。测定方法的回收率为89．5%～96．5％，变异系数为2．14％，有较好的精确度和准确度。     

Determination of Polyphenoi from Fructus canarii by Spectrophotometry

以没食子酸为标准品,使用酚试剂,采用分光光度法对青果(Fructus canarii)多酚的含量进行检测.结果表明,酚试剂用量为1.5 mL,与6 mL质量分数10％的Na2CO3溶液混合,30℃反应60 min,于765 nm处测定吸光度,没食子酸浓度在0.5-2.5 mg/L范围内与吸光度有良好的线性关系,回归方程为y=0.121 2x+0.004 0.该方法能较准确地定量分析青果多酚含量,具有简便、快速、稳定,重现性好的优点.     

Folin－Ciocalteu法测定浓缩还原橙汁中总酚含量

研究福林－酚（Folin－Ciocaileu）法测定浓缩还原橙汁（refrigerated orange juice from concentrated,ROJFC）中总酚含量的最佳反应条件,比较不同产地商品100％浓缩还原橙汁中的总酚含量。结果表明：福林试剂的浓度为0．25 mol／L、Na2 CO3的质量分数为12．5％、反应时间为20 min、反应温度为60℃时,在0～12μg／mL范围内,浓缩还原橙汁中多酚含量与其对应的吸光度有良好线性关系（r2＝0．9989）,该方法重现性好、精密度高（RSD＜2．0％）,回收率范围为99．3％～102．3％;不同产地商品浓缩还原橙汁总酚含量差异较大,介于571．80～1101．33μg／mL。研究结果为进一步研究浓缩还原橙汁的饮用价值提供了技术支持与数据参考。     

福林酚比色法测定海藻多酚的反应条件优化

为明确福林酚比色法测定海藻多酚含量的反应条件,本研究采用单因素试验和正交试验相结合的方法,优化了福林酚用量、碳酸钠用量、反应时间、反应温度等福林酚法测海藻多酚含量的检测条件;并进一步分析了外源物质(有机物质、无机离子)对测定结果的影响。结果表明,应用福林酚比色法测定海藻多酚的最佳反应条件为：12%福林酚5 ml、3%碳酸钠4 ml、反应温度37℃、反应时间30 min、最佳吸收波长730 nm;该方法的加标回收率为96.70%-103.67%,相对标准差2.68%。优化的福林酚法测得7种藻类的多酚含量为120.0～273.0 mg/L,其测定结果与国家标准茶多酚检测法的检测结果一致。外源添加1%或5%的Cu²⁺、Ni²⁺、Mn²⁺、Cl^-、I^-、蛋白质、可溶性淀粉测定结果增加2.31%-149.79%;添加5%的Zn²⁺、CO^2-₃、NO^-₃、PO^3-     

分光光度法测定青果多酚的含量

以没食子酸为标准品,使用酚试剂,采用分光光度法对青果(Fructus canarii)多酚的含量进行检测。结果表明,酚试剂用量为1.5 mL,与6 mL质量分数10%的Na2CO3溶液混合,30℃反应60 min,于765 nm处测定吸光度,没食子酸浓度在0.5～2.5 mg/L范围内与吸光度有良好的线性关系,回归方程为y=0.121 2x+0.004 0。该方法能较准确地定量分析青果多酚含量,具有简便、快速、稳定,重现性好的优点。     

藜麦中槲皮素和山柰酚含量测定研究

建立了藜麦中槲皮素、山柰酚的高效液相色谱含量测定方法,藜麦样品用80%甲醇溶液超声波及回流提取后再加浓盐酸水解,采用高效液相色谱法测定水解液中槲皮素和山柰酚的含量(以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,甲醇-0.4%磷酸溶液(55∶45)为流动相,检测波长360 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量20μL),采用外标法进行面积定量。结果表明,槲皮素在0.02~0.40μg,山柰酚在0.01~0.20μg范围内呈良好的线性关系(r=0.999);平均加样回收率分别为91.0%,89.3%,相对标准偏差分别为0.7%,4.5%(n=9)。该方法具有操作简单、重现性好、结果可靠、专属性强等特点,可用于藜麦中槲皮素和山柰酚的含量测定。     

山核桃仁多酚提取工艺及其抗氧化活性研究

以山核桃(Carya cathayensis)仁为材料,采用单因素试验和正交试验辅助超声波提取其中的多酚,确定多酚提取的最佳工艺,采用FRAP、DPPH和ABTS 3种方法测定了山核桃仁多酚的抗氧化能力并用Folin-Ciocalteu法测定其总酚含量。结果表明,多酚提取的最佳工艺组合为料液比1∶50(g∶m L),乙醇体积分数30%,超声时间20 min,提取温度35℃。FRAP、DPPH和ABTS法测得山核桃仁多酚的抗氧化活性分别为108.94、184.71和175.92μmol Trolox/g。山核桃仁多酚是较好的抗氧化剂。     

正交试验优化提取厚朴酚及其HPLC分析方法研究

在水浴辅助条件下利用超声处理,提取厚朴中酚类物质,选出最佳方案。采用正交试验设计,HPLC测定厚朴中厚朴酚与和厚朴酚的含量,色谱条件SinoChrom ODS-BP5μm4.6 mm×150 mm色谱柱,流动相为甲醇-水（体积比78∶22）,流速为1.0 mL/min,检测波长294 nm,柱温30℃,进样量20μL。在乙醇浓度为80%,浸泡时间50 min,浸泡温度50℃,超声时间为20 min的条件下,酚类物质分离好,提取率高。     

丝瓜ISSR-PCR反应体系的优化

以丝瓜为研究材料,通过单因素试验结合正交设计研究ISSR-PCR反应的影响因素,建立反应体系.结果表明;在20 μL的反应体系中,含2.0 μL 10×buffer,1.5 U TaqDNA聚合酶,0.25 mmol·L-1dNTPs,0.35 μmol·L-1引物,30 ng模板DNA,为丝瓜ISSR-PCR分析的最...     

Establishment and Optimization of SRAP Amplification System in Lonicara caerulea L.

A single factor design was applied to optimize five factors influencing SRAP system, including Taq DNA polymerase, template DNA concentration, dNTPs, primer and Mg2＋, each at four levels. The optimal SRAP-PCR system for Lonicera caerulea L. was 20 ktL SRAP-PCR amplification reaction solution containing 2.0 μL 10×PCR buffer, 1.0 U Taq DNA polymerase, 30 ng template DNA, 0.2 mmol·L-1 dNTPs, 2.0 mmol·L-1 Mg2＋ and 0.2μmol·L-1 primer. The suitable amplification procedure consisted of an initial denaturation at 94℃ for 5 min; denaturation at 94℃ for 1 min, annealing at 35℃ for 1 rain, extension at 72℃ for 90 s and in total five cycles; denaturation at 94℃ for 1 min, annealing at 50℃ for 1 min, extension at 72℃ for 90 s and in total 35 cycles; extension at 72℃ for 8 rain; preservation at 4℃. The procedures and systems could meet the demand for SRAP amplification of Lonicera caerulea L. and would play an important role in Lonicera caerulea L. germplasm identification and genetic diversity analysis.     

干热处理对丝瓜种子发芽和贮藏特性的影响

[目的]探讨干热处理对丝瓜种子发芽和贮藏特性的影响,以期获得可有效促进丝瓜种子萌发和贮藏的便捷途径.[方法]以4个丝瓜品种(CTS-02、CTS-03、CTS-04和CTS-05)的种子为试验材料,分别在60、70和80℃的干热条件下处理30、60和90 min,随后检测其发芽和种子贮藏能力.[结果]经60℃处理30 min,初始发芽率较低的CTS-02和CTS-04的种子发芽率分别提高到26%和44%;在80℃处理60 min,初始发芽率较高的CTS-03和CTS-05的种子发芽率分别提高到96.5%和91%.80℃处理60 min后将CTS-03和CTS-05分别在15℃和32℃条件下贮藏6个月,其种子发芽率均未发生显著变化.[结论]干热处理对种子萌发有促进作用,但效果大小和丝瓜品种特性有关;干热处理对丝瓜种子发芽的促进效果可以维持6个月以上.     

濒危竹种小蓬竹（Drepanostachyum luodianense） RAPD PCR反应体系优化

为了建立小蓬竹（Drepanostachyum luodianense） RAPD PCR反应的最优体系,以小蓬竹基因组DNA为模板,对影响其RAPD扩增的dNTPs浓度、模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶量、引物浓度、Mg2+浓度等重要参数进行了单因子和正交试验。试验得出小蓬竹RAPD最优反应体系为: 20 μL反应体系,10×PCR buffer为1/10体积,dNTPs为100 μmol·L-1,模板DNA量为30 ng,Taq DNA聚合酶为10 U,引物浓度为02 μmol·L-1,Mg2+浓度为15 mmol·L-1。优化后的RAPD PCR反应程序为: 94℃预变性5 min,然后进入35个循环,即94℃变性1 min,35℃退火30 s,72℃延伸90 s,循环完毕后于72℃延伸7 min,最后在4℃保持。     

丝瓜络的双氧水漂白工艺

研究了以双氧水为主体漂白剂的丝瓜络漂白工艺。在漂白液中加入硅酸钠和硫酸镁；可以增大双氧水的漂白活性，提高丝瓜络的白度，经EDTA溶液浸泡过的作品不易返黄。在正交试验的基础上，优化了工艺参数，最佳工艺条件为：漂白液组成1％H2O2＋5％Na2SiO3＋0．1％MgSO4，氢离子浓度10pmol·L-1，漂白温度约60℃，漂白时间约1h。     

山核桃SRAP体系的建立及与RAPD和ISSR标记的比较

以山核桃Carya cathayensis基因组DNA为模板,对聚合酶链式反应（PCR）体系各组分进行了梯度实验,优化出条带清晰、重复性好的相关序列扩增多态性聚合酶链式反应（SRAP-PCR）扩增体系,并筛选了引物。该体系（25.00 μL）为：1 × 缓冲液0.20 mmol·L^－1,脱氧核糖核苷酸（dNTPs）,0.20 μmol·L^－1 引物,2.00 mmol·L^－1镁离子（Mg²⁺）,33.34 nkat Taq DNA 聚合酶,0.80 mg·L^－1基因组DNA（以上均为终浓度）。反应条件为94 ℃预变性5 min;94 ℃变性30 s,35 ℃退火30 s,72 ℃延伸2 min,5个循环;94 ℃变性30 s,50 ℃退火30 s,72 ℃延伸2 min,30个循环;72 ℃延伸8 min,4 ℃保存,反应时间比其他体系缩短了一半。从100对引物中筛选出了适用于山核桃的引物15对。在山核桃中,随机扩增多态性DNA（RAPD）,简单序列重复区间（ISSR）,SRAP等3种标记,以SRAP标记每对引物扩增的位点数及每对引物扩增的多态性位点数为多,但SRAP多态性引物的比例、多态性位点比例居于另2种标记之间。在山核桃研究中可以考虑使用SRAP及RAPD标记。图6表4参28     

热带海草海菖蒲不同组织中硝酸还原酶活力的研究

利用活体法研究了海南陵水新村湾热带海草海菖蒲不同组织中硝酸还原酶活力以及酶促反应条件因子pH、温度和KNO3浓度对酶活力的影响;pH设3个水平（7,8,9）,温度（20～40℃）和KNO3（50～250mmol·L-1）浓度各5个水平。研究表明：酶促反应温度和KNO3浓度对酶活力有显著影响,而pH对酶活力没有影响;海菖蒲的最佳酶促反应条件为：100mmol·L-1KNO3,0.5mmol·L-1Na-EDTA、磷酸缓冲液（pH=8.0）、10mmol·L-1葡萄糖和w=0.5%的正丙醇;温度为30℃。在最佳酶促反应条件下,海菖蒲叶、根和茎的鲜质量组织中硝酸还原酶活力大小分别为：1.01,0.08,0.001μmol.g-1.h-1。     

胡萝卜ISSR反应体系优化的研究

以改良CTAB法提取胡萝卜基因组DNA作为ISSR-PCR模板,通过单因素试验建立了一套适合胡萝卜ISSR-PCR的优化的反应体系,即25μL反应液中含10×buffer2.5μL,2.0mmol.L-1Mg2＋,200μmol·L-1dNTPs,Taq酶1.5U,引物0.5μmol·L-1,DNA模板20ng。PCR扩增程序为：94℃预变性4min,94℃变性40s,48～58℃退火45s,72℃延伸2min,进行35个循环,72℃延伸8min,在16℃保存。应用该优化反应体系筛选出了24条有效引物。     

黑曲霉变异株AU 55发酵菊芋汁产菊粉酶的研究

为提高菊粉酶活力,以菊芋汁为主要培养基成分,对一株产菊粉酶的黑曲霉(Aspergillus niger)变异株AU-55发酵产酶历程和发酵工艺条件进行研究。结果表明,菊芋汁中还原糖的含量为3.4 g.L-1,菊糖含量约为121.3 g.L-1;黑曲霉AU-55在基础发酵培养基中培养,发酵液中菊粉酶活力、糖度、酸度、菌体生物量随着发酵时间的不断延长而变化,96 h菊粉酶活力达到最大;菊芋汁添加量、玉米浆添加量、初始pH、接种量对黑曲霉AU-55菊粉酶活力的影响均显著,优化后的发酵工艺参数为:菊芋汁250.0 mL.L-1,玉米浆20.0 g.L-1,NH4H2PO45.0 g.L-1,MgSO4.7H2O 0.5 g.L-1,NaCl 3.0 g.L-1,初始pH 6.5,接种量35.0 g.L-1,30℃,200 r/min下,培养4 d,所得菊粉酶活力最高达42.3 U.mL-1。     

短短芽胞杆菌FJ AT-0809-GXL代谢产物活性物质提取方法的优化

为分析短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX代谢产物中的活性物质成分,对其提取方法进行了优化,大孔树脂提取法为最佳的提取方法,其活性物质得率为1.593 g·L-1,且抑菌活性高于氯仿萃取法所得的活性物质的活性.确定了短短芽胞杆菌FJAT-0809-GLX代谢产物活性物质收集的最佳方案为:将短短芽胞杆菌FJAT-080...