树皮藻岩藻聚糖硫酸酯的纯化及其化学结构研究

为研究树皮藻Ecklonia maxima岩藻聚糖硫酸酯的单糖组成及其化学结构,以产自南非的树皮藻为原料测定其基本成分,采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子层析柱对树皮藻岩藻聚糖硫酸酯粗品进行分离纯化,通过柱前衍生高效液相色谱法、红外光谱法和核磁共振波谱法测定单糖组成和化学结构。结果表明:树皮藻干基中基本营养成分分别为灰分18.59%、蛋白质9.16%、脂肪0.74%;对树皮藻岩藻聚糖硫酸酯粗品进行纯化得到4个组分,分别命名为SPF1、SPF2、SPF3、SPF4,收集冻干各组分,检测各组分得率分别为18.19%、24.02%、5.61%、4.23%,硫酸根含量分别为12.07%、5.44%、15.58%、19.30%;4个组分主要由岩藻糖、半乳糖、鼠李糖、甘露糖和葡萄糖醛酸组成,还含有少量的葡萄糖和木糖,其中SPF3、SPF4主要由岩藻糖和半乳糖组成,岩藻糖含量分别为70.92%和86.20%,4个组分的红外光谱显示出典型的多糖吸收峰,SPF1、SPF2在13C核磁共振谱177×10-6附近均出现糖醛酸C6信号峰,SPF3、SPF4在18×10-6附近均出现信号峰,为α-L-吡喃岩藻糖C6信号峰。     

马尾藻褐藻多糖硫酸酯的分离纯化及结构研究

为研究马尾藻Sargassum褐藻多糖硫酸酯的组成及结构,以马尾藻褐藻多糖硫酸酯粗品为原料,利用DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换层析对粗品进行分离纯化,采用高效液相色谱法(HPLC)对粗品(F)及纯化后的两个组分(F0、F1)进行了单糖组成分析,同时利用红外光谱法、核磁共振波谱法研究了F0及F1的多糖结构。结果表明:用高效液相色谱法对单糖衍生物的分离效果良好,F、F0、F1均含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、岩藻糖;红外光谱分析显示,F和F0的硫酸基主要连接于岩藻糖的C2和C3位置。本研究结果可为马尾藻褐藻多糖硫酸酯的生物活性研究奠定基础。     

柱前衍生HPLC法分析普洱茶多糖中单糖组成(英文)

[目的]建立柱前衍生HPLC法鉴别和分析普洱茶多糖中单糖组成。[方法]采用水提法提取普洱茶多糖,经DEAECellulose-52纤维素柱分离纯化;茶多糖及其组分TPS1、TPS2、TPS3、TPS4经1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(PMP)衍生化后,利用高效液相色谱法,分析单糖的PMP衍生物。[结果]普洱茶多糖中含有甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、岩藻糖8种单糖,不含有木糖;TPS1中含有全部8种单糖;TPS2、TPS3和TPS4均由7种单糖组成,且都不含岩藻糖。[结论]此方法简便,快速;可用于测定普洱茶多糖中单糖的组成分析和含量测定。     

萱藻中褐藻多糖硫酸酯的纯化及其组分分析

以从大连沿海新鲜萱藻Scytosiphon lomentaria中提取的褐藻多糖硫酸酯为原料,采用DEAE-Sepharose Fast Flow弱阴离子交换层析的方法对萱藻褐藻多糖硫酸酯粗提取物进行分离纯化,对纯化后各组分的硫酸根、总糖含量进行了测定,并进行组分分析。结果表明:各组分的硫酸根含量分别为10.64%、10.47%、11.93%、21.13%,多糖含量分别为46.56%、55.88%、50.06%、73.65%;通过单糖分析、红外光谱法和核磁共振波谱法分析,显示F-1、F-2含有鼠李糖,F-0、F-3出现岩藻糖的C6信号峰。本研究结果为下一步开发萱藻资源、了解其功效关系提供了理论基础。     

川芎多糖的分离纯化及其单糖组成测定

为了解川芎多糖的分子量和单糖组成,为药量学研究和中成药加工奠定基础,采用水提醇沉法提取川芎多糖,DEAE-纤维素柱层析法纯化,高效凝胶渗透色谱法测定分子量。然后用硫酸水解,1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生水解后的单糖,衍生物采用高效液相色谱法测定多糖的单糖组成。结果表明,DEAE-纤维素柱层析获得3个川芎多糖组分LCXP-1、LCXP-2和LCXP-3,分子量分别为11.916、20.793和701.875kDa。LCXP-1和LCXP-2均由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比分别为1:495:3.7:1.2和1:632:4.3:1.2;LCXP-3由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为1:6.5:1.5:248:50:14。该方法准确、灵敏度高,适用于川芎多糖中单糖组成的测定。     

商洛山茱萸多糖的理化性质及单糖组分研究

采用水提醇沉法提取商洛山茱萸粗多糖,经反复冻融、除蛋白质、脱色、透析等步骤分离纯化总多糖。采用比色法、高效液相色谱法等分析山茱萸多糖的理化性质及单糖组分。结果表明商洛山茱萸中总多糖含量为51.62%,蛋白质0.228%,硫酸根16.6%,糖醛酸29%。山茱萸多糖的单糖为阿拉伯糖,岩藻糖,半乳糖,葡萄糖,各种单糖的组成比例为1:4.65:13.26:2.05。     

裸藻多糖的分离纯化、单糖组成及其抗氧化活性

以裸藻为原料,将粗提后的裸藻多糖（EGPS）经DEAE-纤维素和Sephadex G-100柱层析进行分离纯化,得到3个主要组分EGPS1-A、EGPS1-B和EGPS3-A,并对其进行纯度鉴定和抗氧化活性分析,将纯化后抗氧化活性较好的裸藻多糖进行分子量测定、单糖组成分析。纯度鉴定结果表明柱层析后得到的3个多糖组分纯度较高,红外光谱表明其均具有典型的糖类特征吸收峰。抗氧化实验表明3个多糖组分中EGPS1-A的综合抗氧化活性最高,分子量为136.8 ku,单糖组成包括甘露糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖,单糖组分间物质的量比是0.072：0.430：0.049：0.010：0.260：0.620：0.530：0.180：1.010。     

海蒿子岩藻聚糖结构特征及其抗流感病毒活性

采用热水提取法从海蒿子中提取粗多糖,再用Q-Sepharose Fast Flow和Sepharose 4B Fast Flow纯化得到一种硫酸化岩藻聚糖,命名为SF0。通过逐步部分酸水解,该岩藻聚糖SF0被进一步分为3种次级多糖SF1、SF2和SF3,硫酸基团的含量和相对分子质量依次降低。通过单糖组成、傅里叶红外光谱(FT-IR)和¹³C-NMR谱分析了4种多糖的结构特征,并探究了其抗甲型流感(H1N1)病毒的活性。结果表明,SF0主要由甘露糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖和岩藻糖组成,摩尔比为10.8∶8.3∶3.0∶21.1∶21.2∶35.6,相对分子质量为628.1 ku,由α-D-1,2-Manp和β-D-1,4-GlcAp双糖重复单元构成核心骨架。抗甲型流感(H1N1)病毒检测表明,4种多糖都可以抑制MDCK细胞中的H1N1病毒复制。低分子量组分SF3比未降解岩藻聚糖抗病毒活性更好。初步认为该岩藻聚糖的抗H1N1病毒活性与其精细结构和分子量有关。     

海马多糖提取工艺优化与抗氧化活性研究

以日本海马（Hippocampus mohnikei）为原料,采用响应面试验优化超声辅助提取粗多糖工艺条件,通过柱层析进行纯化,测定海马多糖的单糖组成,并评价其抗氧化活性。结果表明：超声时间47 min、浸提温度87 ℃、液料比23 mL/g为最佳提取条件,粗多糖HP得率为9.91%;通过柱色谱分级纯化得到2种多糖HP-1和HP-2,HP-1主要由葡萄糖、半乳糖、甘露糖以摩尔比11.32: 6.39: 5.64组成,并含有少量阿拉伯糖、木糖、岩藻糖、鼠李糖,HP-2主要由氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸、半乳糖、葡萄糖、甘露糖以摩尔比 29.03: 18.18: 8.48: 6.30: 4.88: 2.70组成,并含有少量岩藻糖和木糖;HP-1、HP-2具有良好DPPH自由基清除能力,且HP-2最强,同时HP、HP-1及HP-2均具有还原力,表明海马多糖具有良好抗氧化活性。     

紫芝子实体细胞壁多糖的特征分析

多糖是紫芝中重要的活性成分,具有抗肿瘤、免疫调节等多种药理作用。为提高紫芝多糖的利用率,以紫芝子实体的水提残渣为原料,经过超微粉碎、热水浸提、分级醇沉(30%、50%、70%),得到紫芝子实体细胞壁粗多糖,并对其得率、多糖含量、单糖组成和分子量分布特征进行了分析。结果表明:紫芝细胞壁粗多糖的总得率为2.0%;分级醇沉后各组分多糖含量在75.33%-98.99%,其中30%乙醇沉淀组分多糖含量最高,为98.99%;各多糖组分主要由葡萄糖组成,另外还含有少量的木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、岩藻糖和葡萄糖胺等;紫芝细胞壁多糖的重均分子量分布为0.8×10~4—135.7×10~4 g/mol。     

仙人掌多糖结构分析及抗凝血活性研究

[目的]分析仙人掌多糖组分和结构,并研究其抗凝血活性。[方法]以米邦塔仙人掌为试验材料,通过热水浸提、醇沉制得粗多糖CP,经交换层析和凝胶层析纯化,研究其单糖组成和重均分子质量分布与主链结构,并对多糖组分抗凝血活性进行了初步研究。[结果]对仙人掌粗多糖分离纯化后共得到3个多糖组分WSP1、WSP2a和WSP3,重均分子量分别为2.32×106、1.24×106和7.92×106。对氨基苯甲酸(PMP)衍生化高效液相色谱法检测表明,WSP1主要成分为半乳糖;WSP2a由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸组成,含量分别为6.3%、32.3%、12.9%、1.5%、4.8%、37.1%、0.64%和4.4%;WSP3主要成分为阿拉伯糖、半乳糖和木糖以及少量鼠李糖、甘露糖、糖醛酸。WSP2能延长活化部分凝血酶原时间(APTT)和凝血酶时间(TT),而对凝血酶原时间(PT)的影响不显著,说明其是通过影响内源性凝血系统而发挥抗凝血作用。纤维蛋白原转化纤维蛋白的抑制试验初步表明WSP2a和WSP3具有抗凝血活性。甲基化分析显示WSP2a含有1,4-连接的半乳糖酸,1,2-连接的鼠李糖和1,2,4-连接的鼠李糖构成的主链。[结论]该研究为仙人掌多糖资源优化和深度开发提供了试验依据。     

胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)胞外多糖的分离纯化

以胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)(硅酸盐细菌)为材料,经液体发酵培养后,通过碱提醇沉法得到胞外多糖粗提物。紫外光谱分析表明,该粗提物不含有核酸和蛋白质,经DEAE-纤维素离子交换柱层析分离纯化得到多糖纯品。通过Sephadex G-100凝胶柱层析和醋酸纤维薄膜电泳鉴定,其为均一组分不含有其他多糖;化学法分析表明,多糖纯品含有氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸,不含有硫酸根。     

不同类型灵武长枣果实多糖的单糖成分差异

为分析大果型、枣刺退化型、早熟型和普通型4种不同类型灵武长枣完熟期果实多糖中单糖成分的差异,经水提醇沉法提取、采用DEAE-cellulose52和HW-55S分离纯化,利用GC-MS等分别对果实进行多糖的单糖成分分析研究。结果表明:1)不同类型果实粗多糖得率分别为:普通型1.795%,大果型1.504%,早熟型0.999%,枣刺退化型0.956%,粗多糖含量从高到低依次为:普通型早熟型大果型枣刺退化型。2)不同类型果实粗多糖经DEAE-52柱层析,均得到1个中性级分(Ju-0)和3个酸性级分(Ju-1、Ju-2、Ju-3),其中Ju-2含量均为最高,表明果实多糖的主要形式为酸性多糖,但4个多糖级分的质量和得率差异显著。3)不同类型果实精制多糖含量因级分不同而差异较大,Ju-0和Ju-3级分均为普通型中最高,Ju-1级分在大果型中最高,Ju-2级分在早熟型中最高。4)不同类型果实精制多糖均以阿拉伯糖、半乳糖和鼠李糖含量较高,葡萄糖含量次之,甘露糖和木糖含量较低,均不含有果糖;NIST谱库显示,果实精制多糖中还含有核糖、岩藻糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸。因此,不同类型灵武长枣果实多糖中单糖成分相似,但其成分和含量因级分不同而差异较大。     

仙人掌多糖结构分析及抗凝血活性研究(英文)

[目的]分析仙人掌多糖组分和结构,并研究其抗凝血活性。[方法]以米邦塔仙人掌为试验材料,通过热水浸提、醇沉制得粗多糖CP,经交换层析和凝胶层析纯化,研究其单糖组成和重均分子质量分布与主链结构,并对多糖组分抗凝血活性进行了初步研究。[结果]对仙人掌粗多糖分离纯化后共得到3个多糖组分WSP1、WSP2a和WSP3,重均分子量分别为2.32×106、1.24×106和7.92×106。对氨基苯甲酸(PMP)衍生化高效液相色谱法检测表明,WSP1主要成分为半乳糖;WSP2a由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸组成,含量分别为6.3%、32.3%、12.9%、1.5%、4.8%、37.1%、0.64%和4.4%;WSP3主要成分为阿拉伯糖、半乳糖和木糖以及少量鼠李糖、甘露糖、糖醛酸。WSP2能延长活化部分凝血酶原时间(APTT)和凝血酶时间(TT),而对凝血酶原时间(PT)的影响不显著,说明其是通过影响内源性凝血系统而发挥抗凝血作用。纤维蛋白原转化纤维蛋白的抑制试验初步表明WSP2a和WSP3具有抗凝血活性。甲基化分析显示WSP2a含有1,4-连接的半乳糖酸,1,2-连接的鼠李糖和1,2,4-连接的鼠李糖构成的主链。[结论]该研究为仙人掌多糖资源优化和深度开发提供了试验依据。     

海带硫酸多糖的分离纯化及性质研究

[目的]研究海带硫酸多糖的纯化方法、理化性质和生物学活性。[方法]海带粗多糖经离子交换纤维素分离纯化;采用硫酸酚法、比浊法、HPLC法分别研究多糖含量、硫酸根含量和分子量等理化性质;采用促小鼠脾淋巴细胞增殖试验研究其提高免疫功能的作用。[结果]得到3种纯化的海带硫酸多糖,LPS-1、LPS-2、LPS-3,对其中LPS-3的理化性质检测表明,其糖含量为36.90%,硫酸基含量为11.91%,分子量2.69×10^6D。LPS-3能明显促进小鼠脾淋巴细胞增殖,具有有丝分裂原样作用,对地塞米松引起的小鼠脾淋巴细胞增殖抑制具有显著的拮抗作用,但LPS-3不具有协同有丝分裂原ConA的作用。[结论]该分离方法可得到3种纯化的海带硫酸多糖,其中LPS-3具有显著提高免疫活性的作用。     

扁桃胶组分和多糖结构的研究

【目的】研究扁桃胶的氨基酸和单糖组成以及多糖结构。【方法】利用离子色谱仪测定扁桃胶的氨基酸和单糖组成;采用红外色谱仪分析多糖结构。【结果】扁桃胶的氨基酸成分为Arg、Ala、Thr、Gly、Val、Ser、Pro、His、Phe、Glu、Asp、Tyr等12种氨基酸。其中Thr含量(百分比)最高,为47.89%。扁桃胶的单糖主要由葡萄糖醛酸、木糖和半乳糖和阿拉伯糖组成。另外,还有少量的鼠李糖和海藻糖,这6种成分的摩尔比为24.35﹕9.25﹕33.75﹕31.60﹕0.74﹕0.31。初步推断扁桃胶的多糖主链结构可能由1,6-linked Galp和1,4-linked Araf构成;非还原性末端基团为1-linked Fucp、1-linked Ribf或1-linked GluA;分枝点主要位于1,2,6-linked Galp上。【结论】本研究可以作为扁桃胶深度开发利用的重要依据。