杀虫抗生素对4种重要鳞翅目害虫的室内毒力测定

研究表明,3种杀虫抗生素对靶标生物4种鳞翅目幼虫均具有很高的活性.其中甲氨基阿维菌素苯甲酸盐对小菜蛾、甜菜夜蛾和斜纹夜蛾2龄初期幼虫的毒力最高,其次分别为多杀菌素和阿维菌素.甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和多杀菌素的毒力分别是阿维菌素的3.08～6 261.38倍和1.21～246.41倍.对二化螟1龄中期幼虫的毒力为甲氨基阿维菌素苯甲酸盐>阿维菌素>多杀菌素.甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和多杀菌素对4种鳞翅目幼虫的LC50为0.007 8～0.268 6 mg/L,显示出很高的毒力;小菜蛾和二化螟幼虫对阿维菌素较敏感,LC50在0.04 mg/L左右,甜菜夜蛾和斜纹夜蛾幼虫对阿维菌素的敏感性则偏低,LC50在25 mg/L以上.因此,田间防治甜菜夜蛾和斜纹夜蛾幼虫时应尽量避免单独使用阿维菌素,而应选用甲氨基阿维菌素苯甲酸盐和多杀菌素,以达到高效低毒的目的.     

靶标昆虫对转Bt基因作物产生抗性的机理及研究进展

总结了靶标昆虫对Bt毒素的抗性机理,系统综述了国内外靶标昆虫对转Bt基因作物抗性的研究现状,包括室内条件和大田条件下靶标昆虫对Bt毒素和转Bt基因作物形成抗性的研究和监测结果。     

多杀菌素的提取和萃取条件研究

【目的】研究多杀菌素的最佳提取和萃取条件。【方法】采用单因素试验,分别研究发酵液不同pH(6,7,8,9,10,11)、放置时间(2,4,8,16,24,32,48,72 h)和温度(20,30,40,50,60,70℃)对发酵液中多杀菌素提取效果及稳定性的影响,同时,从乙酸乙酯、石油醚、二氯甲烷和乙醚中筛选最适萃取试剂,并在此基础上研究萃取次数(1,2,3次)和萃取试剂体积对多杀菌素萃取效果的影响。【结果】单因素试验结果显示,在发酵液pH为10时,多杀菌素提取效果较好;放置2~72 h,多杀菌素质量浓度不会发生显著变化;在20~70℃多杀菌素能稳定存在;乙酸乙酯为最适萃取试剂,最佳萃取次数为3次,其与多杀菌素提取液的最适体积比为1∶1。【结论】得到了多杀菌素提取和萃取的最佳条件,在该条件下多杀菌素的质量浓度和萃取率分别为74.50μg/mL和98.18%。     

沙棘木蠹蛾性引诱剂对非靶标昆虫的诱集作用

通过研究沙棘木蠹蛾性引诱剂诱捕到的非靶标昆虫的多样性,为沙棘木蠹蛾性引诱剂的林间使用提供技术支持和指导,为减少非靶标昆虫对性引诱剂的影响奠定基础,从而更好地防治沙棘木蠹蛾,以山西省交城县庞泉沟国家级自然保护区的沙棘林为研究区,采用随机抽样法,分别随机选取3块平地和3块坡地,利用性引诱剂监测法,诱捕沙棘木蠹蛾成虫,并选取丰富度指数、均匀度指数、香农威纳多样性指数以及辛普森优势度指数分析诱捕器内非靶标昆虫的多样性及其对诱捕效果的干扰.结果 表明,沙棘木蠹蛾性引诱剂会诱引双翅目、鞘翅目、膜翅目、鳞翅目和半翅目的 非靶标昆虫;时间和地形会影响性引诱剂对非靶标昆虫的诱捕量;8月份诱捕到非靶标昆虫的类群和数量最多;平地诱捕到非靶标昆虫数量多于坡地.因为非靶标昆虫与沙棘木蠹蛾形态差异明显,所以非靶标昆虫的存在不会影响性引诱剂对沙棘木蠹蛾的检测效果;引诱膜翅目和双翅目的 访花昆虫,会在一定程度上干扰其传粉生态功能.     

印楝素对昆虫的毒理作用机制

印楝素对许多种昆虫具高效的拒食，胃毒，触杀及抑制生长发育的作用，其作用机制主要是扰乱昆虫的内分泌，作用靶标为脑神经分泌细胞，心侧体，前胸腺等，影响促前胸腺激素（ＰＴＴＨ）的合成与释放，减低前胸腺对ＰＴＴＨ的感应而造成２０－羟基蜕皮酮合成，分泌的不足，致使昆虫变态，发育受阻，印楝对其他一些与变态激素的合成，释放相关的组织的作用，在该文也有讨论。     

多杀菌素发酵培养基的研究

【目的】以刺糖多孢菌C4-10-8B为试验菌株,对多杀菌素发酵培养基进行优化,以提高刺糖多孢菌的多杀菌素发酵产量。【方法】采用单因素和多因素试验,分别考察了不同碳源、氮源、前体、无机盐和微量元素对多杀菌素生物合成的影响,最后通过正交试验综合考察发酵培养基中各组分对多杀菌素产量的影响。【结果】葡萄糖是较优碳源,最佳质量浓度为40.0 g/L,当葡萄糖与糊精(质量比5∶2)复配时,多杀菌素产量较对照培养基提高18.35%;棉籽蛋白为最优氮源,25.0 g/L棉籽蛋白与15.0 g/L玉米蛋白胨或0.6 g/L硫酸铵复配时,多杀菌素产量分别较对照提高40.0%和45.3%;乙酸钠和谷氨酰胺质量浓度为1.0 g/L时,均能使多杀菌素产量较对照提高21.5%;K2HPO4对多杀菌素合成有明显的促进作用,在其质量浓度为2.5 g/L时,多杀菌素产量较对照提高24.5%;ZnCl2对多杀菌素合成也有促进作用,而MgSO4和CoCl2则显著抑制多杀菌素合成;通过2次正交试验获得最优发酵培养基,利用该培养基时多杀菌素产量可达395.54μg/mL,比对照提高了62.5%。【结论】多杀菌素生物合成的最优发酵培养基为:葡萄糖50.0 g/L,棉籽蛋白25.0 g/L,玉米蛋白胨20.0 g/L,(NH4)2SO40.8 g/L,谷氨酰胺1.25 g/L,乙酸钠0.8 g/L,NaCl 3.0 g/L,K2HPO42.5 g/L,FeSO450.0 mg/L,ZnCl225.0 mg/L,CaCO31.0 g/L。     

多杀菌素饵剂对红火蚁的药效试验

[目的]为红火蚁的有效防治提供依据。[方法]选择以多杀菌素为原药,制成含量不同的多杀菌素诱饵,研究其对红火蚁的室内外毒杀效果。[结果]0.02%、0.04%和0.08%的多杀菌素诱饵室内毒杀作用迅速,红火蚁全部死亡时间分别为24 h1、2 h和8 h;0.01%多杀菌素毒饵室内作用适中,药后54 h红火蚁死亡率可达到100%。0.01%多杀菌素毒饵对红火蚁野外防控效果明显,药后5 d防控效果达到71.52%,25 d后上升到92.91%。0.01%多杀菌素诱饵不会快速杀死觅食工蚁,可在红火蚁个体间传播,最后达到令其全巢覆灭的目的。[结论]多杀菌素饵剂具有药效高、防治彻底、适合于各种环境使用等优点,是防治红火蚁的理想方法。     

多杀菌素与4种杀虫剂复配对西花蓟马的联合毒力

为筛选对西花蓟马具有显著增效作用的复配药剂组合,采用浸叶法测定多杀菌素与4类杀虫剂复配后对西花蓟马的联合毒力。结果表明,多杀菌素与毒死蜱复配组合表现出明显的增效作用,当多杀菌素与毒死蜱配比为7∶5时,增效作用最大,共毒系数为238.585。而多杀菌素与丁硫克百威、高效氯氟氰菊酯2个组合表现出相加作用,多杀菌素+吡虫啉组合主要表现出拮抗作用。     

8%印楝素·多杀菌素悬浮剂对小菜蛾的毒力测试及田间药效评价

为筛选出防治小菜蛾的高效环保药剂,将印楝素和多杀菌素按不同比例混配对小菜蛾进行室内毒力测试和田间药效试验。结果表明,0.7%印楝素乳油LC50值为1.661 5 mg/L、10%多杀菌素悬浮剂LC50值为2.964 3 mg/L;当印楝素与多杀菌素的质量比为1∶7混配时,共毒系数(CTC)高达310.17,具有明显的增效作用。田间药效表明,在小菜蛾暴发期,使用8%印楝素·多杀菌素悬浮剂168.75~337.50 g/hm2喷雾防治,药后14 d防效高达88.69%~97.93%,同剂量条件下其防效明显优于对照药剂。8%印楝素·多杀菌素悬浮剂对小菜蛾具有较好的防治效果,且在推荐剂量范围内对作物安全。     

利用离子注入技术选育多杀菌素高产菌株

多杀菌素是由刺糖多孢菌（Saccharopolyspora spinosa）发酵产生的大环内酯类化合物,是一种应用前景广阔的生物农药。采用氮离子注入方法并结合前体和自身代谢物抗性来选育多杀菌素高产菌株。结果显示利用氮离子注入诱变刺糖多孢菌,其致死率曲线呈典型的马鞍形,并确定30 s×2.6×1013 ions/cm2的注入剂量用于进一步诱变筛选。通过前体及自身代谢物抗性筛选,最终得到5株多杀菌素高产菌株,其多杀菌素的最高产量比选育前提高了44%。表明该技术对多杀菌素高产菌株的选育是一种行之有效的方法。     

The Post-exposure Effects of Spinosad and Plant Allelochemicals on Biological Characteristics of Helicoverpa armigera (Lepidoptera:Noctuvidae)

In order to define the combined effects of spinosad and plant allelochemicals on Helicoverpa armigera(Lepidoptera:Noctuvidae), the research fed them on artificial diets with different doses of spinosad, gossypol, quercetin and tannicacid, and the changes of pupal and imaginal biological characteristics were observed and recorded. The results showed that spinosad at sublethal concentrations decreased pupation ratio and pupal weight, prolonged prepupal and pupal periods, and decreased emergence ratio, fecundity and longevity of adults. Combined with plant allelochemicals, spinosad significantly prolonged pupal period and shorten adult longevity. Other life-cycle parameters such as pupation ratio, pupal weights, emergence ratio, eggs laid per female and hatch ratio did not change significantly. The results clearly indicated that plant allelochemicals did not change spinosad efficiency on H. armigera, but the combination of spinosad and plant allelochemicals might affect pest population dynamics significantly by changing its development.     

6种药剂防治芦笋蓟马的研究

[目的]评估6种药剂对蓟马的防治效果。[方法]选用6种不同类型的药剂对芦笋蓟马进行大田药效试验,调查药前、药后虫口密度,计算虫口减退率和防治效果。[结果]0.3%苦生碱AS 60 mg/kg、6.0%乙基多杀菌素SC 600 mg/kg和2.5%多杀菌素SC 350mg/kg对蓟马的防效较好,达到90%左右,明显优于其他处理;10.0%双三氟虫脲EC 2 000 mg/kg的防效次之,达到80%左右,明显优于10.0%烯定虫胺AS 500 mg/kg和24.0%氰氟虫腙SC 2 400 mg/kg。[结论]0.3%苦生碱AS、6.0%乙基多杀菌素SC和2.5%多杀菌素SC分别以剂量60、600和350 mg/kg防治芦笋田蓟马,速效性好,持效期长,对芦笋安全,可在芦笋生产上推广使用。     

环腺苷酸受体蛋白基因的过表达对刺糖多孢菌生长和多杀菌素合成的影响

【目的】利用全局性调控因子环腺苷酸受体蛋白（cyclic AMP receptor protein,Crp）基因在刺糖多孢菌（Saccharopolyspora spinosa）中的过量表达,研究其对刺糖多孢菌生长及形态方面的影响,促进多杀菌素的生物合成。【方法】PCR扩增环腺苷酸受体蛋白基因（crp）,通过限制性酶切、连接方法构建中间载体pOJ260-cm-P_ermE-crp,使crp置于红霉素增强型启动子P_ermE的控制下;PCR扩增P_ermE-crp基因片段,利用Red/ET同源重组技术将P_ermE-crp亚克隆至实验室保藏的大肠杆菌-链霉菌穿梭载体pUC-spn上,构建成Crp表达载体pUC-spn-P_ermE-crp。然后,采用接合转移方法将重组载体pUC-spn-P_ermE-crp导入野生型刺糖多孢菌中,通过单交换同源重组将其整合至刺糖多孢菌染色体上,以染色体上整合了原始质粒pUC-spn的刺糖多孢菌作为对照菌株。利用PCR扩增阿伯拉霉素抗性基因及目的基因的方法鉴定阳性接合子;观察工程菌株及对照菌株在不同固体培养基中的生长及菌落形态差异,同时比较工程菌株及对照菌株在液体培养基中的生长情况,测定生长曲线。借用扫描电子显微镜观察工程菌株及对照菌株的菌丝体形态;采用高效液相色谱检测工程菌株及对照菌株中多杀菌素生物合成情况。【结果】采用分子生物学方法成功构建了Crp重组表达载体pUC-spn-P_ermE-crp,并通过接合转移导入到刺糖多孢菌中;PCR检测结果显示,工程菌株作为模板扩增出长约2 kb的cm-P_ermE-crp目的条带,说明crp已成功整合到刺糖多孢菌染色体上,并且获得的重组工程菌株S. spinosa-Crp遗传性能稳定。在BHI培养基和ISP-2培养基上,工程菌株S. spinosa-Crp孢子萌发及形成速率与对照菌株S. spinosa-1相比均有所延迟,但在R6培养基上两者生长速率及菌落形态无明显差异。与对照菌株S. spinosa-1相比,液体培养基中工程菌株S. spinosa-Crp二次生长现象消失,且生物量略高于S. spinosa-1。扫描电子显微镜结果显示工程菌株菌丝片段化程度较高,分支较少,有利于提高工程菌株S摇瓶发酵结果表明,工程菌株中的多杀菌素产量与对照菌株相比提高了128%。. spinosa-Crp发酵过程中的溶氧水平。【结论】crp的过量表达对刺糖多孢菌的菌丝形态及生长产生一定影响,并有效促进刺糖多孢菌中多杀菌素的生物合成,为通过其他正调控基因的超量表达促进多杀菌素的生物合成奠定了基础。     

多杀菌素对舞毒蛾保护酶及几丁质酶的影响

为进一步揭示多杀菌素的杀虫活性及作用机理,采用生化方法测定了多杀菌素对舞毒蛾3龄和5龄幼虫体内几种保护酶活性的影响。结果表明:多杀菌素处理舞毒蛾3龄和5龄幼虫后,其体内的过氧化氢酶（CAT）活性无明显变化,而酚氧化酶（PO）的活性表现为先激活后抑制作用。多杀菌素对舞毒蛾3龄幼虫体内超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶(POD)同样表现为先激活后抑制作用,其中在处理3~6 h时,对酶的激活作用达到最高（P 0.01）;但对5龄幼虫体内这两种酶具有明显的激活作用,其中在处理3 h时,对酶的激活作用最强,分别为同期对照的1.543和1.716倍,差异极显著（P 0.01）,6 h后无明显差异。多杀菌素对舞毒蛾幼虫体内几丁质酶也存在影响,其中对处理3~12 h 3龄幼虫体内该酶具有激活作用,处理12~24 h对5龄幼虫体内该酶具有明显抑制作用。因此,多杀菌素能有效干扰舞毒蛾幼虫正常的生理代谢,从而起到毒杀作用。      

万寿菊杀菌素水乳剂防治西瓜枯萎病药效试验

试验包括室内抑菌和田间小区药效试验。室内抑菌通过测量含有不同质量浓度万寿菊杀菌素水乳剂培养基上的菌落直径,并计算相对抑制率,来确定杀菌的最佳质量浓度;田间小区试验以不同农药作对照,研究万寿菊杀菌素水乳剂防治西瓜枯萎病的药效。抑菌试验结果表明,0.6μg/mL万寿菊杀菌素水乳剂的杀菌效果较佳;药效试验结果表明,农抗120、多菌灵和万寿菊杀菌素水乳剂的防治效果分别为55.4%,61.4%和79.5%。万寿菊杀菌素水乳剂对西瓜枯萎病具有明显的防治效果。     

杀虫剂对小菜蛾幼虫的毒力研究

采用浸叶法测定10种杀虫剂对海南省海口、三亚、儋州小菜蛾田间种群的毒力。结果表明：10种药剂对海口地区小菜蛾3龄幼虫的毒力LC50大小顺序为：Bt〉氟啶脲〉多杀菌素〉茚虫威〉虫螨腈〉阿维菌素〉丁醚脲〉虫酰肼〉杀螟丹〉高效氯氰菊酯：三亚地区小菜蛾3龄幼虫的毒力三％大小顺序为：Bt〉多杀菌素〉氟啶脲〉茚虫威〉虫螨腈〉阿维菌素〉虫酰肼〉丁醚脲〉杀螟丹〉高效氯氰菊酯：儋州地区小菜蛾3龄幼虫的毒力L氏大小顺序为：Bt〉多杀菌素〉茚虫威〉氟啶脲〉虫螨腈〉阿维菌素〉丁醚脲〉虫酰肼〉杀螟丹〉高效氯氰菊酯。3个地区对Bt和多杀菌素均表现敏感。海口地区小菜蛾种群除对高效氯氰菊酯、杀螟丹和Bt外，对其他药剂的敏感性均比三亚种群和儋州种群敏感。     

刺糖多孢菌分批发酵动力学研究

利用摇瓶培养试验研究了刺糖多孢菌Saccharopolyspora spinosa的分批培养过程中生物量、培养液pH、葡萄糖消长、多杀菌素含量等因素的变化规律。利用MATLAB软件对试验数据进行非线性回归，拟合出了细胞生长动力学模型、基质消耗动力学模型和产物生成动力学模型，得到了细胞生长量、残糖量、多杀菌素产量在发酵过程中随时间变化的规律，相关系数分别为0．98934、0．99266和0．98635．拟合曲线95％置信度区间分析的结果表明，该模型能够很好的反映出刺糖多孢菌分批发酵的过程．     

Field resistance to spinosad in western flower thrips Frankliniella occidentalis(Thysanoptera:Thripidae)

The western flower thrips, Frankliniella occidentalis, is one of the most destructive sucking pests of vegetables, fruits and ornamental crops in China. Spinosad is one of the most commonly used insecticides to manage thrips. To assess the incidence of spinosad resistance in F. occidentalis field populations in eastern China, survival rates for 24 different populations were compared with those of a susceptible laboratory strain. All populations showed significantly higher resistance to spinosad compared with the control as determined by comparing median lethal concentrations. Two populations from Shouguang and Liaocheng in Shandong Province were classified as having moderate and high levels of resistance to spinosad with a mean resistance ratio of 17.0 and 89.2, respectively. Our research indicates a widespread reduction in spinosad efficacy for controlling F. occidentalis field populations, and that resistance management strategies should be implemented as soon as practicable, to reduce the potential of progressive resistance development and loss of efficacy.     

目标昆虫对Bt杀虫晶体蛋白抗性的研究概况

综述了多种目标昆虫对Bt杀虫晶体蛋白的抗性机制和遗传特性。     

万寿菊杀菌素水乳剂对西瓜枯萎病反应的抗性

研究了万寿菊杀菌素水乳剂对西瓜枯萎病菌菌丝生长的影响和对西瓜幼苗保护酶的作用。结果表明,万寿菊杀菌素水乳剂对西瓜枯萎病菌的菌丝生长有明显的抑制作用,当质量浓度为1μg/mL时已完全抑制病菌菌丝生长。同时,经对西瓜幼苗叶的酶活性测定和过氧化物同工酶电泳分析的结果表明,该万寿菊杀菌素水乳剂能使西瓜保护酶———超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性提高,减轻西瓜枯萎病菌对西瓜幼苗的毒害作用。