龙吐珠组培快繁技术初探

[目的]探究龙吐珠最佳组织培养方案。[方法]以马鞭草科龙吐珠叶片、茎段、腋芽为外植体，进行组培快繁技术研究。[结果]最适宜外植体为茎段；最适宜消毒处理是消毒剂为0．1％升汞溶液，消毒时间为6min。产生侧芽的最佳培养基为1／2MS＋6-BA1．00mg／L＋NAA0．05ms／L＋IBA0．50mg／L，最适愈伤组织诱导及继代培养基为1／2MS＋6-BA2．00mg／L＋NAA0．10mg／L，平均诱导率为86．2％；最适分化培养基是1／2MS＋6-BA1．00mg／L＋NAA0．10mg／L＋KT 0．20mg／L，平均分化率为76．7％；不定芽的最适生根培养基是1／2MS＋N从0．01mg／L，其生根率为100％。[结论]该方案可为龙吐珠规模化生产提供技术支持。     

茶条槭组织培养中防止外植体褐化的初步研究

[目的] 探索克服茶条槭在组培过程中外植体褐化的最佳方法。[方法] 以茶条槭当年生萌条为试材, 研究不同外植体类型、不同消毒方式、不同取材时间和不同抗褐化剂对茶条槭初代培养过程中外植体褐化的影响。[结果] 取当年生萌条, 其茎段比茎尖褐化严重；先将外植体用1000mg/LVC溶液处理,再用浓度0.1%升汞消毒为最佳消毒方法；外植体的取材时间在5月，茶条槭的污染率、褐变率、死亡率相对较低；在一定浓度范围内, PVP200mg/L与AC2g/L配合使用防褐化效果较好；初代培养时，先进行弱光培养一周，再转入光照培养有利于抑制褐变的发生。 [结论]选用幼嫩的顶芽为外植体, 浓度0.1%的升汞为消毒剂, MS为基本培养基，添加PVP200mg/L和活性炭2g/L进行初代培养, 防止其褐化的效果最佳。     

红树莓海尔特兹初代培养中防止外植体褐化的研究

以红树莓海尔特兹(Heritage)的健壮新梢为材料,研究了不同外植体类型、0.1%HgCl2溶液消毒时间、6-BA浓度、防褐化剂、暗培养时间对组织培养中外植体褐化的影响,探讨防止初代培养中外植体褐化的最佳方法。结果表明:以带芽茎段为外植体,用0.1%HgCl2灭菌处理300 s,在MS+6-BA 0.50～0.75 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.2 mg/L培养基中,添加1.5 g/L VC,暗处理5 d,对防止外植体褐化效果最佳。     

消毒剂和激素对江西野生金线莲外植体的诱导研究

[目的]研究消毒剂和激素对江西野生金线莲外植体消毒效果的影响。[方法]以江西龙南九莲山自然保护区的野生金线莲带腋芽的茎段为材料,研究浓度0．1％升汞、浓度2％次氯酸钠、浓度10％次氯酸钙和饱和漂白粉溶液等不同消毒剂在不同处理时间对外植体的消毒效果,以及不同浓度的6-BA和NAA组合对外植体诱导率的影响。[结果]以酒精消毒30s后再用浓度0．1％升汞处理16min的消毒效果最好,其污染率只有10％,存活率高达82％;最适合江西野生金线莲外植体诱导的培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0．1mS／LNAA,诱导率高达98％。[结论]消毒剂和激素对江西野生金线莲外植体的诱导均有一定程度的影响。     

长寿花组织培养技术研究

对长寿花叶片、叶柄和幼茎进行了愈伤组织培养，并进行增殖、生根培养和炼苗移栽，同时对长寿花不同外植体的诱导时间进行了比较。结果表明：诱导长寿花块根产生愈伤组织的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L、MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0，1mg／L；而增殖的最佳培养基为MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L；生根培养基为Ms＋NAA0．2mg／L。在此次试验中还比较了不同消毒剂及其组合对长寿花外植体的消毒效果，结果表明：75％的酒精（0．5min）＋0．1％HgCl（10min）具有很好的消毒作用。     

邢台野生酸枣组织培养研究

[目的]建立邢台野生酸枣组织培养快繁体系,为野生酸枣的规模化开发种植奠定基础。[方法]以邢台野生酸枣当年生枝条为外植体进行组培快繁研究,并探讨合适的培养基种类。[结果]邢台野生酸枣组织培养外植体最佳消毒方法是浓度70%乙醇消毒30 s,0.1%升汞消毒10 min。其最佳培养基组合为：诱导培养基1/2MS＋6-BA1.0 mg/L＋NAA0.2 mg/L;增殖培养基MS＋6-BA1.0或1.5 mg/L＋NAA0.2 mg/L;生根培养基1/2MS＋6-BA0.5 mg/L。[结论]初步研究出邢台野生酸枣组织培养方法,并筛选出合适的诱导、增殖及生根培养基。     

茶条槭组织培养防止外植体褐化的方法研究

为探索克服茶条槭在组培过程中外植体褐化的最佳方法,以茶条槭当年生萌条为试材,进行了不同外植体类型、不同消毒方式、不同取材时间和不同抗褐化剂对茶条槭初代培养过程中外植体褐化的影响试验。结果表明,采用当年生萌条进行组织培养,其茎段较茎尖褐化严重;先将外植体用1 000 mg/L VC溶液处理30 min,再用0.1%升汞溶液消毒为最佳消毒方法;外植体取材时间在5月,其组培污染率、褐变率、死亡率相对较低;在一定浓度范围内,聚乙烯吡咯烷酮(PVP)200 mg/L与活性炭(AC)2 g/L配合使用防褐化效果较好;初代培养时,先弱光培养7 d再转入光照培养,有利于抑制褐变的发生。由此说明,选用幼嫩的顶芽为外植体、浓度0.1%升汞溶液为消毒剂、MS为基本培养基、添加聚乙烯吡咯烷酮200 mg/L和活性炭2 g/L进行初代培养,防止其褐化的效果最佳。     

几种防褐剂对马铃薯愈伤组织培养褐化现象的抑制效应

[目的]在马铃薯的组织培养过程中存在着严重的外植体褐化现象。外植体表面的酚类物质容易氧化而生成褐色醌类，严重影响愈伤组织的诱导过程，适当控制培养条件可抑制褐化。[方法]选取硫代硫酸钠（Na2S2O3）、活性炭、维生素c、柠檬酸、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）5种抗褐剂进行防褐化效果的研究。每种抗褐剂都取不同的浓度进行平行试验。培养基为1／2MS＋0．3％琼脂＋1．5％蔗糖＋1．0mg／LNAA＋2．0mg／L2，4-D,于15℃下暗培养，每周转瓶1次。最后，统计褐化率，比较不同抗褐剂的作用效果。[结果]各种抗褐剂对马铃薯的生长均有一定的抗褐效果，其中，2．0g／L的硫代硫酸钠和8．0mg／L柠檬酸的防褐效果最好，可以将褐化率降低到15％以下。[结论]对生长的外植体添加一定的防褐剂有助于抑制组织培养中外植体的褐化现象。     

鸢尾组织培养中防褐化技术研究

[目的]研究鸢尾组织培养中的防褐化技术。[方法]以德国鸢尾黄娃娃、血石和不朽白3个品种为培养材料，以Ms＋15g/L蔗糖＋8∥L琼脂粉为基本培养基，研究影响鸢尾组织培养的褐化因素与防褐化技术。[结果]鸢尾的新生芽和花瓣较适宜作组织培养的外植体，与其他部位相比褐变率较低；外植体组织块适中（3mm×3mm×3mm）可降低褐变率；在培养基中加入0．1％vc或0．3％活性炭对防止组织褐化效果明显；外源激素2mg/L6-BA易引发褐变，2mg／L Kt和2mg／LNAA对组织褐变影响不大；使用乙醇消毒剂时，对外植体浸泡时间以5～10s为佳，褐变率最低；全光照条件培养容易诱发褐变，采用仿人工气候条件培养较其他条件培养可有效抑制褐变的发生。[结论]该研究为鸢尾工厂化育苗研究提供参考。     

三角梅外植体消毒和愈伤组织诱导研究

[目的]探索三角梅的最佳消毒时间和最佳愈伤组织诱导培养基。[方法]采用不同消毒时间对三角梅的7种外植体进行灭菌,并用不同激素与浓度组合的培养基诱导愈伤。[结果]三角梅的最佳外植体为半木质化茎段;最佳消毒方法为先用浓度75%酒精溶液灭菌30 s,无菌水冲洗5次,再用浓度0.1%升汞溶液消毒9 min,最后用无菌水冲洗7~8次;最佳诱导培养基为MS＋2.0 mg/L 6-BA＋1.0 mg/L NAA。[结论]获得了三角梅外植体的最佳消毒方式和最佳愈伤组织诱导培养基,为三角梅组织培养体系的建立奠定了基础。     

蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌和芽增殖的研究

[目的]研究蔓性千斤拔组织培养中种子灭菌的方法,筛选适宜芽增殖的外植体及激素组合。[方法]用乙醇、次氯酸钠和升汞的不同组合对种子进行灭菌,然后比较顶芽和带腋芽的茎段作为外植体进行继代增殖的效果,探讨不同激素组合对芽增殖的影响。[结果]较好的种子灭菌方法为:75%乙醇30 s+10%NaClO10 min+0.1%HgCl25 min;带腋芽的茎段为较好的继代增殖外植体。6-BA对芽增殖有显著促进作用;KT对芽的增殖效果不如6-BA;芽增殖的最佳激素组合为6-BA2.0 mg/L+IAA0.1 mg/L,增殖倍数为6.74。[结论]获得了较好的种子灭菌方法,筛选出适合继代增殖培养的外植体和激素组合,为蔓性千斤拔组织培养的深入研究提供实验基础。     

库拉索芦荟组培中的褐变现象及防止

[目的]研究库拉索芦荟组培中的褐变现象,寻求防止褐变的有效措施。[方法]以库拉索芦荟茎尖、中部茎段和根茎为外植体,以MS为基本培养基,分别附加NAA0.1 mg/L和不同浓度的6-BA(1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mg/L),研究不同外植体类型、激素浓度以及培养温度、活性炭等因素对芦荟组培褐变的影响。[结果]用库拉索芦荟茎尖做外植体,MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L做培养基,芦荟组培褐化程度较轻;培养基中加入活性炭500.0 mg/L,环境温度控制在25℃有利于减轻褐变。[结论]茎尖是最佳的外植体,适宜的6-BA浓度(2.0 mg/L)可抑制褐变,添加活性炭和适宜的培养温度均能防止褐变死亡的发生。     

大叶栎组织培养中外植体褐变的初步研究

[目的]分析大叶栎多酚类物质含量对初代培养外植体褐变的影响情况。[方法]将大叶栎外植体接种在添加不同浓度的活性炭和抗坏血酸的MS培养基上,观察其褐变致死情况。同时对大叶栎不同年龄、不同部位试样的多酚类物质含量进行测定,分析其对初代培养外植体褐变的影响,初步研究降低大叶栎初代培养外植体褐变的措施。[结果]大叶栎不同器官、不同部位的试样多酚类物质含量不同,多酚类物质含量与大叶栎初代培养外植体褐变呈极显著的正相关（r=0.899）,在培养基中添加1.0~3.0 g/L活性炭和0.1~0.3 mg/L抗坏血酸有利于降低大叶栎初代培养外植体的褐变,活性炭的效果略优于抗坏血酸。[结论]大叶栎初代培养外植体的褐变与多酚类物质含量密切相关。     

Vc液和活性炭对中华红叶杨外植体褐变的影响

[目的]为中华红叶杨种苗的快速繁殖提供依据。[方法]以红叶杨茎段为外植体,经Vc液振荡处理3 h后进行常规消毒处理,然后分别接种于附加不同含量活性炭的培养基上,不经Vc液处理为对照,研究Vc液处理和在培养基中加入活性炭及二者综合应用对红叶杨外植体褐变的影响。[结果]Vc液处理在外植体培养初期对褐变有一定的抑制作用,随时间延长其抑制作用减弱;当培养基中含0.3%的活性炭时,2周后可观察到绿色小芽点,8周后芽长达2 cm以上;对照组无明显变化;Vc液和活性炭综合应用对褐变的抑制效果最好,外植体长出的芽达0.9 cm长。[结论]用Vc液处理红叶杨外植体,同时在培养基中加入0.3%的活性炭,对外植体褐变有较好的抑制效果。     

番红花球茎组培中的消毒和褐化抑制方法

[目的]优化番红花球茎消毒和褐化抑制的方法。[方法]以番红花球茎的染菌率、褐化率和愈伤组织诱导率为指标,分析了外植体大小、氯化汞浓度和消毒时间对番红花球茎染菌和诱导的影响,同时比较了抗坏血酸和活性炭对番红花球茎褐化的抑制效果。[结果]当外植体大小5 mm~3,氯化汞溶液浓度0.2%、消毒时间10 min时,染菌率和诱导率较为适宜;向培养基中加入0.5 g/L活性炭可以降低球茎的褐化。[结论]该研究建立了番红花球茎消毒和褐化抑制方法,为野外番红花球茎的初代组培提供了理论依据。     

不同培养条件对油茶愈伤组织和芽诱导的影响

[目的]为油茶的快速繁殖提供技术参考。[方法]以油茶品种岑软2号和岑软3号的鲜嫩带芽的茎段和顶芽为外植体,分别设置不同消毒时间,9组培养基激素浓度配置,2个光照条件,进行组织培养。[结果]在其他条件一致的情况下,不同的外植体消毒方式、培养基激素配置和光照条件对油茶愈伤组织和芽的诱导的影响各异。采用0.1%HgCl2对外植体消毒6min的诱导效果最好,岑软2号和岑软3号的成活率分别达71%和73%;激素配置为6-BA2.0mg/L和NAA0.2mg/L时,愈伤组织和芽的诱导效果达到最佳,岑软2号和岑软3号的诱导率分别为47.8%、48.5%;接种后直接进行光照培养的效果最好,岑软2号和岑软3号的愈伤组织和芽的诱导率分别为45%、62%。[结论]最佳条件：0.1%HgCl2消毒6min;激素配置为6-BA2.0mg/L和NAA0.2mg/L;接种后直接进行光照培养。     

二色补血草的组织培养和离体快繁研究

[目的]为二色补血草的快速繁殖技术提供科学指导。[方法]以二色补血草的子叶与胚轴作为外植体，建立快速繁殖体系，研究不同激素浓度对诱导愈伤组织、不定芽以及生根率的影响。[结果]不同激素浓度的培养基均能使外植体不同程度地生成愈伤组织及不定芽；生根培养基中只有A、B、H、I组有不定根产生，其余组均无不定根产生。[结论]以子叶为外植体，愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基分别为：Ms＋O．7mg/L6-BA＋0.1mg/L NAA、MS＋0．5mg／L6-BA＋0．1mg／LNAA；以胚轴为外植体，愈伤组织和不定芽的最佳诱导培养基为：MS＋0．3mg／L6-BA＋0．5mg／LNAA。诱导不定根的最佳培养基为：MS0。     

不同激素种类和配比对秤锤树愈伤组织诱导的影响研究

[目的]为秤锤树的组培快繁提供依据。[方法]以WPM培养基为基本培养基,秤锤树叶片为外植体,比较了不同激素及其组合对秤锤树愈伤组织诱导的影响。[结果]不同浓度2,4-D诱导出的愈伤组织呈褐色透明的水渍状,放置约40d后逐渐褐化并坏死;2.0mg/L2,4-D和不同浓度KT的激素组合诱导出的愈伤组织呈乳白色的致密颗粒状或团块状。单独使用6-BA未诱导出愈伤组织,6-BA和NAA的激素组合诱导出了愈伤组织。当6-BA添加量为1.0mg/L时,出愈率随着NAA添加量的增加而提高。单独使用TDZ未诱导出愈伤组织,TDZ和NAA的不同浓度组合的出愈率分别为46.5%、37.1%、25.4%、24.5%和11.7%,诱导出的愈伤组织呈绿色、颗粒状、小而致密。[结论]只有激素组合2,4-D2.0mg/L+KT0.25～2.00mg/L才能诱导出致密、颗粒状、生长快的愈伤组织。