RNA沉默在植物与根结线虫互作基因研究中应用

基因沉默或RNA干扰（RNA interferance,RNAi）是双链RNA诱导的序列特异性基因沉默,是转录后水平上对基因的表达进行负调控。随着植物与根结线虫相互关系的研究的深入以及基因工程技术的发展,揭示了基因工程方法防治线虫危害的新途径。最近研究表明,dsRNA基因在植物体内表达,线虫取食这种转基因植物后线虫致病力下降并使植物有效抵抗多种根结线虫。这种转基因植物具有有效低抗线虫危害特性,而且其抗性是广谱的。该文对RNAi的研究历史、植物根结线虫抗性基因以及RNAi技术防治根结线虫的新途径等方面的研究进展进行了综述。     

Hg-rps-23基因RNAi转基因大豆对大豆胞囊线虫的抗性研究

大豆胞囊线虫(Soybean Cyst Nematode,SCN)是一种极具破坏性的大豆寄生虫,一般可造成大豆减产10%~20%。利用植物介导RNAi是培育抗虫转基因植物新品种的有效手段之一。本研究从大豆胞囊线虫中获得了编码参与线虫m RNA代谢的关键基因-核糖体蛋白基因Hg-rps-23。采用农杆菌介导法将Hg-rps-23 RNA干扰片段导入Williams82中。PCR和Southern杂交检测结果表明,外源RNAi片段已导入受体大豆品种。病土接种鉴定结果表明,转基因大豆对大豆胞囊线虫3号生理小种抗性水平显著提高,表明利用植物介导RNAi可以有效提高大豆抗胞囊线虫水平。本研究为大豆抗胞囊线虫新材料的创制及新品种培育提供了一条新的途径。     

RNA干扰及其在植物中的应用进展

RNA干扰(RNA interference,RNAi)是双链RNA诱导的基因沉默现象,RNA干扰现象是在线虫中首次发现的,它广泛存在于生物体中(包括单细胞生物、后生动物和哺乳动物)。综述了植物RNA干扰及其在植物基因功能分析、遗传改良农作物和抗病毒等方面的广泛应用。     

菊科植物的杀线虫活性研究与应用

菊科植物是杀线虫植物中种类最多的一类，在植物性杀线虫剂研究中具有重要地位。本文报道了菊科杀线虫植物及其防治线虫的种类，应用植物提取物、植物干粉或绿肥和作为间套种植物防治线虫的应用研究进展，并对菊科杀线虫植物活性成分研究进行了综述。     

豆科植物杀线虫活性的研究应用进展

归纳了豆科杀线虫植物及其防治线虫的种类,总结了应用植物提取物、植物干粉和利用间作或轮作方式防治线虫的应用研究现状,并对豆科杀线虫植物活性成分国内外研究情况进行了综述.     

园林植物土壤线虫群落组成分析

为了更好地防治园林植物寄生线虫,研究了园林植物云杉、杏树、东北连翘和榆叶梅植物根周土壤线虫群落,分析了土壤线虫群落在不同土壤深度的垂直分布特征.结果表明:试验期间共发现土壤线虫42个属,100 g干土中土壤线虫总数为17~178条,深层土壤线虫数量较少.杏树的优势营养类群为植物寄生线虫,其它3种植物的优势营养类群为食细菌线虫.4种植物共同优势属为 Dolichorhynchus.线虫总数、植物寄生线虫数量以及食真菌线虫数量存在植物种类间差异.榆叶梅根周土壤的植物寄生线虫数量在土壤深度间存在显著差异.园林植物土壤线虫群落组成的研究可以为本地区植物寄生线虫防治提供理论依据.     

植物内生菌对植物寄生线虫的预防与防治进展

本文介绍了植物寄生线虫的危害以及农林生产中主要危害的线虫种类和主要植物线虫病害,并就植物内生菌对植物寄生性线虫的预防与防治的研究现状与研究展望,进行了综述。     

植物寄生线虫发育基因的研究进展

植物寄生线虫是危害农作物的重要病原物之一.笔者对植物寄生线虫的发育基因研究状况进行了评述.目前,关于植物寄生线虫发育基因及其调控机理研究不多,主要集中于发育相关基因的克隆,RNAi方法和原位杂交技术在线虫发育基因分析中得到成功应用.利用模式动物秀丽小杆线虫发育基因的信息和方法研究植物寄生线虫发育基因将是人们研究的热点之一.     

松材线虫RNA聚合酶基因的RNA干扰研究

克隆了松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)RNA聚合酶基因片段,构建大量表达松材线虫RNA聚合酶基因片段的特异双链RNA(dsRNA)表达载体,并用表达的双链RNA(dsRNA)对松材线虫进行了RNA干扰实验。结果表明,松材线虫浸泡在20℃的RNA聚合酶基因双链RNA(dsRNA)溶液中干扰24 h后再培养12 d,其繁殖倍数为73.2;对照处理的繁殖倍数为322.8,两者的繁殖倍数相差4.4倍;松材线虫浸泡在4℃的RNA聚合酶基因双链RNA(dsRNA)溶液中干扰24 h后再培养12 d,其繁殖倍数为120.8。RNA聚合酶基因的双链RNA(dsRNA)浸泡明显的抑制了松材线虫的繁殖;并且发现利用浸泡法对线虫进行干扰试验,双链RNA(dsRNA)20℃浸泡的干扰效果要好于前人报道4℃浸泡的干扰效果。     

佳木斯地区植物根围土壤中植物寄生线虫的群体组成

为防治植物寄生线虫,对佳木斯地区4个研究区域不同植物根围的土壤线虫群体组成进行了研究.结果表明:土壤线虫总数为每100g干土11~428条.植物寄生线虫数量较多,具有14个属,其中9个优势属;洪河农场和佳木斯大学校园植物的植物寄生线虫数量及比例较高,优势属分别为Rotylenchus(盘旋属)和Helicotylenchus(螺旋属).     

佳木斯园林树木根周土壤中植物寄生线虫组成分析

对佳木斯4个公园主要园林树木根周土壤中植物寄生线虫进行调查发现,植物寄生线虫有14个属,其中优势属线虫6个,8种树木共有优势属均为Dolichorhynchus(长吻属)。同时,分析了植物寄生线虫优势属的分布。本研究提出了植物寄生线虫防治措施,为当地农林业植物寄生线虫防治奠定理论基础。     

环介导等温扩增技术在植物寄生线虫检测中的应用

植物寄生线虫是世界各地农林业生产中一种重要的生物胁迫,如何在早期快速、准确地鉴定出植物寄生线虫种类是减少其危害的重要前提。环介导等温扩增技术因在实际操作中简易、快速和灵敏等特点,已被广泛应用于多种植物病原体的检测和诊断。本文主要就LAMP技术在松材线虫、根结线虫、孢囊线虫、短体线虫、滑刃线虫、粒线虫等重要植物寄生线虫中的应用研究情况进行综述,为针对不同的植物寄生线虫开发和选用最佳的LAMP检测方法提供参考。     

施肥对大豆田植物线虫群落结构的影响

线虫病害已成为农业生产中不容忽视的主要病害之一,其危害超过细菌和病毒,仅次于真菌病害,为了探讨施肥方式对植物线虫种群密度的影响,对中国科学院海伦农业生态试验站长期定位试验区大豆田(无肥、化肥、化肥+有机肥3种施肥方式)不同时期植物线虫群落结构进行研究。结果表明:播种期植物线虫密度和总体线虫密度较小,随着大豆生育期的推进,植物线虫密度和总体线虫密度增大,施肥方式没有改变植物线虫优势种群,但施有机肥降低了植物线虫所占比例。     

Cathepsin B基因的沉默对香蕉穿孔线虫繁殖力的影响

【目的】通过研究cathepsin B基因对香蕉穿孔线虫(Radopholus similis)繁殖力的影响,探索cathepsin B基因的功能,为利用该基因防治香蕉穿孔线虫和植物寄生线虫组织蛋白酶的进一步研究提供科学依据。【方法】根据已知香蕉穿孔线虫cathepsin B基因(Rs-cb-1)的序列,从香蕉穿孔线虫克隆cathepsin B基因,以含有目的基因的质粒DNA为模板合成特异的双链RNA(dsRNA),采用dsRNA浸泡的方法对香蕉穿孔线虫进行RNA干扰(RNAi)试验,通过室内接种胡萝卜愈伤组织繁殖线虫的方法,研究cathepsin B基因的沉默效应对香蕉穿孔线虫繁殖力的影响。【结果】用Rs-cb-1dsRNA浸泡12、24、48、72h后香蕉穿孔线虫的平均繁殖倍数分别为165、93、54、53,而未经dsRNA处理的该线虫繁殖倍数均大于420;并且Rs-cb-1dsRNA浸泡的时间不同,对应各处理之间的繁殖倍数差异显著。RT-PCR检测,经Rs-cb-1dsRNA浸泡12h后,目的基因在香蕉穿孔线虫的表达量明显减弱,浸泡24h后其表达量进一步减弱,但还有微量表达,经dsRNA浸泡48、72h后目的基因基本不表达。【结论】Rs-cb-1与香蕉穿孔线虫的繁殖力相关;Rs-cb-1dsRNA的浸泡可以明显抑制cathepsin B基因的表达量,从而影响香蕉穿孔线虫的繁殖力,但浸泡时间不同Rs-cb-1的沉默效率也不同,沉默效率最好的干涉时间是48h。     

我国具有杀根结线虫活性的植物资源统计

统计了我国自20世纪90年代以来,在植物源杀根结线虫活性药剂研究领域已经进行过活性筛选的60多种植物资源,其中,具有显著杀根结线虫活性的植物共21科29种 以南方根结线虫为活性受体的有13科18种植物 以爪哇根结线虫为活性受体的有7科8种 以花生根结线虫为活性受体的有3科4种。展望了杀根结线虫活性植物资源筛选工作的发展趋势。     

根结线虫的致病机理和防治研究进展

综述了根结线虫对植物、根区土壤的影响及防治方法,指出了根结线虫-植物-根区土壤三者间的复杂关系,提出今后根结线虫致病机理的研究应从植物自身和植物根区土壤两方面着手进行,根结线虫的防治还应考虑如何改善根区土壤微生态环境、恢复土壤质量。     

厚垣轮枝孢菌(Verticillium chlamydosporium)防治植物线虫研究进展

厚垣轮枝孢菌(Verticilliumchlamydosporium)是一种重要的噬植物线虫真菌。文章对该菌的分类地位、生物学习性、噬线虫机制及其在防治植物线虫中的应用情况进行了综述,探讨了影响该菌防治植物线虫的一些因素,并指明了今后的研究方向。     

植物寄生线虫效应子研究进展

植物寄生线虫是一类专性活体寄生物,每年给全世界农业生产造成极大的损失,其中根结线虫和孢囊线虫分布广、为害重,是最具经济重要性的2大类群。植物寄生线虫诱导植物细胞转化为特异性的取食位点,从中摄取营养以维持线虫的发育和繁殖,效应子被认为在线虫建立和维持寄生过程中发挥着重要的作用。本文从分泌器官、降解和修饰细胞壁、建立取食位点、抑制植物防卫反应以及激活植物免疫系统等方面介绍了植物寄生线虫效应子的相关研究进展,同时讨论了当前研究中存在的问题并对未来的研究方向进行了展望。     

植物线虫的分泌蛋白质及其功能研究进展

植物体内寄生的植物线虫必须寄生于宿主体内并获取充足的营养才能完成完整的生活史。植物线虫的寄生过程主要是依靠线虫分泌蛋白质的作用来完成。近年来,对植物线虫分泌蛋白质的研究取得了重大进展,分离出一系列由线虫表皮、侧器、食道腺等分泌的蛋白质,这些蛋白在线虫与植物相互作用的过程中起重要的作用:破坏宿主细胞壁,影响宿主细胞周期,改变宿主细胞代谢过程和传导信号,选择性蛋白质降解、抵抗宿主细胞对线虫的防御等。     

利用植物防治植物寄生线虫的研究概况

综述了具有杀线虫活性的植物在植物寄生线虫防治中的研究概况,并对研究中存在的问题进行了探讨,提出了建议。