滇重楼内生真菌的生物学性状及其甾体化合物含量

从滇重楼根状茎中分离到133株内生真菌,对其中的7株真菌进行了生物学性状观察和甾体化合物含量测定。结果表明,2号、8号和12号真菌能合成大量的甾体化合物,培养液中甾体化合物的产率分别为208.62,144.97和198.79 mg/L。     

黑刺菝葜植株次生代谢产物分布特性研究

为了实现黑刺菝葜高效持续利用,对其次生代谢产物的分布规律进行了研究,结果表明:植株不同器官中有效成分的种类及含量是有差异的,除果肉和果核中不含甾体皂苷、香豆素和内酯类化合物,果核中含有油脂,果肉中含有强心苷等化合物外,植物体中普遍含有糖类、酚类、鞣质、氨基酸、蛋白质、生物碱、皂苷、黄酮、蒽醌、香豆素、甾体、内酯等化学成分;有效成分含量大小顺序为,黄酮类化合物:须根>果肉>块根>叶>茎>根茎>茎卷须>果核;甾体皂苷类化合物:叶>茎>茎卷须>块根>根茎>须根。     

长药隔重楼分离化合物抗肿瘤活性研究

[目的]研究中药重楼分离化合物的抗肿瘤活性。[方法]采用提取及萃取过程制备长药隔重楼分离化合物,选取昆明种小白鼠为动物模型,通过体外作用,测定其对小鼠黑色素瘤的抑制作用。[结果]从长药隔重楼中所提取出的7种甾体皂苷类成分,均表现出较强的癌细胞抑制活性。[结论]中药重楼分离化合物是一种安全有效的抗肿瘤活性物质。     

滇重楼皂苷部位HPLC指纹图谱的研究

[目的]建立滇重楼皂苷有效部位HPLC指纹图谱分析方法，研究不同产地滇重楼药材的质量。[方法]采用HPLC等度洗脱的方法进行色谱分离，使用“相似度评价软件”进行数据处理，对不同产地的滇重楼药材皂苷部位进行指纹图谱的研究。[结果]确立了滇重楼药材皂苷部位指纹图谱的高效液相分析条件，确定8个共有峰。不同产地的滇重楼药材皂苷部位指纹图谱有一定差异。[结论]采用HPLC法制定滇重楼药材皂苷部位的指纹图谱，其皂苷类成分得到较好的分离，方法重现性好，可用于滇重棱的质量评价。     

促进滇重楼皂苷类活性成分积累的内生真菌筛选

【目的】植物内生菌(Endophyte)是近年来深受重视的一种新型的微生物能源,具有固氮、促进植物生长、增强宿主植物抗逆性等作用,目前研究表明:内生菌可增强宿主植物合成活性物质的能力,甚至它们本身也能产生与宿主植物相同或相近的生物活性物质。【方法】以传统药用植物滇重楼(Pairs polyphylla var.yunnanensis)为研究对象,从滇重楼地下块茎中分离得到23株内生菌,对其进行分子鉴定,之后与滇重楼组培苗进行共生培养,一段时间后利用高效液相色谱法检测组培苗的皂苷含量。【结果】最终筛选出2株对滇重楼组培苗皂苷含量有促进作用的菌株。【结论】人参生柱隔孢和木霉菌能促进滇重楼皂苷类活性成分的积累。     

水溶性盾叶薯蓣皂苷及其药理活性研究进展

盾叶薯蓣甾体皂苷包含水溶性皂苷和脂溶性皂苷2大类,其中水溶性盾叶薯蓣皂苷是传统中医药临床药理的重要活性基础,但没有进行系统性地研究。该文对近年来水溶性盾叶薯蓣皂苷的化学成分、分离纯化及药理活性等方面的研究进行综述,为甾体皂苷类新药研发及皂素工业生产中对水溶性盾叶薯蓣皂苷回收利用提供理论参考。     

中国南海脆二歧灯芯柳珊瑚Dichotella fragilis(Ridleg)化学成分的研究

以硅胶柱层析、Sephdex LH-20凝胶柱层析及半制备HPLC等层析分离技术,对脆二歧灯芯柳珊瑚Dicho-tella fragilis (Ridleg)的提取物进行分离纯化,并利用NMR、MS等波谱方法分析所得化合物的结构,共分离鉴定出5个化合物,包括3个19-羟基甾体皂苷类化合物junceelloside B (1)、4’-O-Acetyl-3-O-[β-D-arabino-pyranosyl-oxy]-cholest-5-ene-3β,19-diol (2)及junceelloside C (3),以及2个briarane型二萜类化合物junceol E(4)及gemmacolide A(5).以上化合物均为首次从脆二歧灯芯柳珊瑚中分离得到.化学分类学研究表明19-羟基甾体皂苷可作为Dichotella和Junceella属柳珊瑚的标志性次级代谢产物,此二属的柳珊瑚具有很近的亲缘关系.     

不同种源滇重楼对干旱胁迫的响应分析

【目的】筛选滇重楼（Paris polyphylla var.yunnanensis）抗旱种源,为滇重楼抗旱种源筛选及种质遗传改良提供理论依据。【方法】以3个种源（温带种源、南亚热带种源和北热带种源）的滇重楼为试验材料,结合单因素方差分析、相关分析、正交偏最小二乘判别分析及变量投影重要性分析,对比分析充足水分（W₀）、轻度干旱（W₁）和重度干旱（W₂）3个水分梯度下,不同种源滇重楼根茎叶性状、生物量分配及总皂苷产量等性状的变异,并对抗旱种源进行评价。【结果】单因素方差分析结果显示,土壤水分显著影响滇重楼地上、地下多个性状（P<0.05,下同）。干旱胁迫下,3个种源滇重楼的根茎、须根及茎和叶的鲜重、生物量呈明显下降趋势。随着干旱胁迫加剧,温带种源根质比降低;南亚热带种源和北热带种源根质比则呈升高趋势;所有种源中,南亚热带种源在不同土壤水分条件下的药用部位生物量（W₀:6.16±2.78 g、W₁:4.78±1.51 g和W₂:2.98±0.59 g）及总皂苷产量（W₀:60.51±28.23 mg、W₁:45.96±16.88 mg和W₂:13.62±2.51 mg）最高;相关分析结果显示,株高、茎粗、茎鲜重、茎生物量、叶鲜重、叶生物量、叶长和叶宽与滇重楼根及根茎部位的鲜重、生物量及总皂苷含量呈极显著（P<0.01）正相关;正交偏最小二乘-判别分析结果表明,所有种源W₁处理的植株根茎直径、根茎长、须根直径、须根长、须根数、茎鲜重、茎生物量、叶鲜重、叶生物量、叶片含水率、株高、茎粗、叶长和叶宽明显高于W₂处理;变量投影重要性分析结果显示,不同种源的株高、叶长、叶宽、茎鲜重、须根长、须根数的VIP值>1.0,表明上述性状对干旱胁迫较敏感。【结论】综合分析地下器官生物量和总皂苷产量,南亚热带滇重楼抗旱性最佳;其高产优质性状在未来抗旱优良种源培育中应加以关注。     

氮、磷、钾对滇重楼产量及皂苷含量的影响

滇重楼是名贵道地中药材,过度采挖已使其野生资源濒临灭绝,人工栽培是解决滇重楼资源危机的必然途径。合理施用氮、磷、钾肥可提高其药用部位产量和品质。本文通过"3414"田间小区肥料效应试验,设N:23 kg/667 m~2、P2O5:12 kg/667 m~2、K2O:30 kg/667 m~2为常规施肥水平,研究不同水平氮、磷、钾对滇重楼产量及皂苷含量的影响。结果表明:土壤氮、磷、钾的贡献率分别为77.97%,64.93%和136.52%,土壤供钾量丰富,供氮量中等,供磷量不足;增施氮肥和磷肥,不施钾肥可提高滇重楼的产量。由滇重楼根茎增产率的单因素、双因素和三因素肥料效应函数方程可知:单施氮、磷、钾肥对滇重楼根茎增产率影响较小,氮、磷、钾配施对滇重楼根茎增产率影响最大;三因素肥料效应方程推荐的最佳施肥量(N:34.5 kg/667 m~2,P2O5:18 kg/667 m~2,K2O:0 kg/667 m~2)所得滇重楼根茎增长率最高,为87%;适量的氮肥和磷肥可提高滇重楼新、老根茎的皂苷含量,增施钾肥会使滇重楼新根茎皂苷含量降低。当氮肥和磷肥施用量分别为23 kg/667 m~2和18 kg/667 m~2时,滇重楼新、老根茎总皂苷含量最高;钾肥施用量为0 kg/667 m~2时,滇重楼新根茎总皂苷含量最高。     

响应面法优化重楼药材中甾体皂苷的回流提取工艺研究

目的:利用响应面法优化了重楼药材中甾体皂苷类化合物提取工艺。方法:在单因素实验的基础上,以重楼皂苷类化合物提取得率为指标,采用响应面软件Design Expert 8. 0设计方法,对提取纯化工艺的4个显著因素(液料比、提取溶剂、提取时间、提取次数)进行了对比分析。结果:提取溶剂为70%乙醇,液料比30∶1(m L∶g),提取时间60 min·次-1及连续回流提取2次为最佳工艺。在此条件下,实际提取率值为2. 094%(20. 94 mg·g-1),与软件预测值相比,其实验结果相符。结论:该甾体皂苷类化合物的最佳提取工艺为重楼药材资源开发利用提供参考。