氨基寡糖素对番茄青枯病防治作用

用氨基寡糖素对番茄青枯病进行防治试验,结果表明在NA平板上,氨基寡糖素400倍及以下的浓度能够完全抑制番茄青枯菌的生长;测定其对番茄青枯菌的最小抑制浓度为500倍.温室控病试验表明,用灌根、浸根后喷雾和灌根并喷雾3种方法处理时,灌根并喷雾的防治方法比其他2种的防效好.利用该方法,氨基寡糖素200倍溶液防治番茄青枯病21 d时的相对防效仍能达到51.72%.     

几种杀菌剂对番茄青枯病菌的毒力测定及田间药效

为了筛选出有效防治番茄青枯病的药剂,采用抑菌圈法测定10种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑制作用,并选择其中防效较好的4种药剂进行田间药效试验。结果表明：3％中生菌素可湿性粉剂、0．5％氨基寡糖素水剂、72％农用硫酸链霉素可湿性粉剂、0．1亿 CFU／g 多黏类芽孢杆菌细粒剂对青枯病菌的抑菌效果好,其 EC50值分别为1．308 mg／L、2．180 mg／L、5．202 mg／L、0．071亿CFU／L;3％中生菌素可湿性粉剂800倍液对番茄青枯病的防效最好,达90．53％,其次为0．5％氨基寡糖素水剂400倍液,防效为79．24％。     

氨基寡糖素诱导作物抗病毒病药效试验

总结了氨基寡糖素防治烟草、辣椒及番茄3种作物病毒病的田间实验结果,为其在生产上的应用提供依据。实验结果表明氨基寡糖防治烟草病毒病防效高达77.9%,辣椒病毒病防效77.0%,番茄病毒病防效74.45%,喷雾使用,浓度为稀释300~400倍。     

2种嫁接番茄根系分泌活性物质对番茄青枯病及根际微生物的影响

【目的】鉴定分析嫁接番茄根系分泌物,研究其活性成分对番茄抗青枯病、番茄体内青枯菌及根际微生物数量的影响,为番茄青枯病的防治提供新思路。【方法】以高感青枯病番茄品种粉贝贝（Fb）、高抗青枯病番茄砧木番砧1号（No.1）和茄砧21号（No.21）为试验材料,设自根嫁接（Fb/Fb）、砧穗嫁接（Fb/No.1、Fb/No.21）和砧木自嫁接（No.1/No.1、No.21/No.21）5个嫁接组合。利用气相色谱—质谱联用仪（GC-MS）对嫁接番茄接种青枯菌前后的根系分泌物进行鉴定分析,用筛选出的活性物质对高感病番茄进行灌根处理后接种青枯菌,采用稀释平板法分离测定番茄体内和根际青枯菌及根际微生物数量。【结果】从嫁接番茄根系分泌物中鉴定筛选出邻苯二甲酸二甲酯（DP）和2,6-二叔丁基对甲苯酚（BHT）2种活性物质,其中1.0mmol/L DP与1.0mmol/L BHT混合灌根处理的抗青枯病效果最好,使高感病番茄的青枯病发病率和病情指数显著降至46.7%、42.5（P<0.05,下同）。2种活性物质灌根处理均能使根际微生物总量和细菌数量明显下降;均可降低根际真菌数量,其中BHT的抑制效果更强;均可在发病初期显著抑制放线菌的增殖,且DP的抑制效果强于BHT。【结论】筛选出DP和BHT 2种活性物质,其可通过改善根际微环境、降低植株体内和根际的青枯菌数量而提高番茄对青枯病的抗性。     

5%氨基寡糖素水剂减化药对番茄叶霉病抗病增效作用研究

通过在海南省澄迈县番茄上开展试验,研究5%氨基寡糖素水剂减化药对番茄叶霉病抗病增效作用。结果表明,5%氨基寡糖素水剂1 000倍液对番茄叶霉病有一定的防效,并且5%氨基寡糖素水剂1 000倍液混配48%苯甲·嘧菌酯悬浮剂1 500倍液(减量1/3)与48%苯甲·嘧菌酯悬浮剂1 000倍液的防效相当,分别为82.24%和80.45%,差异不显著。说明5%氨基寡糖素水剂与杀菌剂混用能减少杀菌剂的使用量。     

1亿孢子/ML枯草芽孢杆菌水剂防治番茄青枯病田间药效试验

为探讨枯草芽孢杆菌防治番茄青枯病的效果,进行枯草芽孢杆菌水剂防治番茄青枯病田间药效试验。方法:选取1亿孢子/ML枯草芽孢杆菌水剂300倍液、400倍液、500倍药液,在番茄青枯病发病前灌根施药。结果:对番茄青枯病的防效分别为91.29%、88.06%、84.41%,300倍处理与400倍处理的防效有显著差异,300、400倍与500倍处理的防效均有极显著差异。     

氨基寡糖素(0.5%水剂)对黄瓜根结线虫病的防治试验

进行了氨基寡糖素(0.5%水剂)防治黄瓜根结线虫病试验。试验结果表明,用氨基寡糖素(0.5%水剂)对水对黄瓜进行灌根处理,可以较好的防治黄瓜根结线虫病。其中:有效成分用量45 g/hm2、60 g/hm2的防效分别达到65.73%和69.10%;产量分别增加22.88%和30.61%。     

番茄晚疫病田间防治试验

为有效控制当地番茄晚疫病的发生,选用当前市场上广泛应用的4种番茄晚疫病防治药剂75%百菌清、80%烯酰吗啉、霜脲·锰锌和5%氨基寡糖素,对当地主栽番茄品种进行田间药效防治试验,旨在筛选出对番茄晚疫病具有显著防效的药剂。试验结果表明：除75%百菌清以外,其余3种药剂的二次防效均高于一次防效,防效最高的药剂为5%氨基寡糖素（防效65.03%）。第一次施药时处于病害始发期,第二次施药时处于病害高峰期,病情指数达到40以上,表明施药对于此阶段的病害发生控制作用不显著。对比9个处理的防效结果,除75%百菌清用药后病情指数略高于对照以外,其余6个处理施药后的病情指数均低于对照,表明适时喷药对于晚疫病的防治仍具有一定效果。     

氨基寡糖素与吡唑醚菌酯复配防治芒果炭疽病试验研究

为了筛选出防治芒果炭疽病的有效药剂,选用了广谱高效的吡唑醚菌酯结合氨基寡糖素对田间芒果炭疽病进行试验。结果表明,2%氨基寡糖素+25%吡唑醚菌酯水乳剂1 000倍液喷雾,防治效果显著,二次药后7 d防效达到74.68%,同时对芒果安全。     

不同生物杀菌剂对番茄灰霉病的防效对比试验

利用3.0%氨基寡糖素水剂、新型植物源作物保护剂、1%蛇床子素乳油对番茄灰霉病进行了田间药效试验,测定几种生物杀菌剂对番茄灰霉病的防效,为田间防治番茄灰霉病提供依据。结果表明:1%蛇床子素乳油500倍溶液对番茄灰霉病有良好的防治效果,第二次施药后5d防效达67.57%;3.0%氨基寡糖素水剂1 000倍溶液、新型植物源作物保护剂400倍溶液对番茄灰霉病效果不佳连续2次用药,第二次用药后5d防效不超过30%。     

25%噻虫嗪SC防治盘育秧和水育秧害虫试验研究

应用25%噻虫嗪SC在水稻苗期以不同处理方式(灌根、叶面喷雾)、不同浓度(500~1500倍液)施用1次防治苗期稻蓟马、大田期稻飞虱,结果表明:该药剂对水稻苗期蓟马有良好的防治效果,苗前一次施药控制大田期稻飞虱效果一般。对提高秧苗素质有良好的作用。     

"富思德"海藻精粉对盆栽小白菜生长及产量的影响

[目的]为海藻精粉在叶菜上的应用提供参考依据。[方法]以盆栽小白菜为试验材料,研究"富思德"海藻精粉对小白菜生长及产量的影响。[结果]施用"富思德"海藻精粉叶喷和灌根处理的小白菜株高、叶绿素SPAD值、鲜重、干重均高于对照清水处理,海藻精粉叶喷可使小白菜株高增加8.26%~15.81%,叶绿素SPAD值增加13.57%~22.86%,鲜重和干重分别提高27.85%~36.60%和22.16%~37.50%。海藻精粉灌根处理的小白菜株高、叶绿素SPAD值、鲜重和干重分别比对照增加10.48%~17.28%、14.39%~25.76%、28.35%~33.29%、19.51%~34.15%。[结论]"富思德"海藻精粉对小白菜叶面喷施、灌根均表现出很好的应用效果。其中叶面喷施2 000倍和0.01 g/盆灌根处理的促进作用最明显。     

植物青枯菌LAMP检测方法的建立

【目的】由茄科雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum,简称青枯菌)引起的青枯病(bacterial wilt of plants)是世界范围内危害最为严重的土传细菌病害之一,严重制约了多种经济作物的生产。建立高效、精准的早期诊断技术,是实现青枯病有效防控的基础。论文旨在建立一种能够特异检测青枯菌的环介导等温扩增方法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP),实现青枯菌的田间快速检测。【方法】通过比对分析青枯菌的lpx C基因序列,并利用在线引物设计软件Primer Explorer Version 4.0得到4条LAMP特异性引物,F3(5′-CCTGTACGTGGTCGGCTAT-3′)、B3(5′-ACCGCAACACGGGATCA-3′)、FIP(5′-TACGCCGTTTCATCGGCCAGGTACACGGCGCACAAGT-3′)、BIP(5′-ATCGTCACGTTCGACAAGGTGGAATGCCGGCTGCAACTG-3′)。通过单因素变化试验对LAMP反应体系中的各参数进行优化,设置反应温度为60、61、62、63、64、65℃,设置镁离子浓度为2、4、6、8、10、12 mmol·L-1,设置内外引物浓度比为2﹕1、4﹕1、6﹕1、8﹕1、10﹕1、12﹕1,确定最优反应体系。以分离自不同寄主的24个青枯菌株为参试对象,5个非青枯菌株(Ralstonia mannitolilytica、Ralstonia pickettii、Enterobacter sp.、Acidovorax citrulli、Burkhoderia cepacia)为对照,验证LAMP检测方法的特异性。将青枯菌GMI1000菌株的基因组DNA进行10倍梯度系列稀释,以原液和10~1、10~2、10~3、10~4、10~5、10~6、10~7倍的稀释液为模板同步进行LAMP和普通PCR检测,比较两者的检测灵敏度。将马铃薯青枯病菌株Po41、姜青枯病菌株Z-Aq-1分别与马铃薯块茎和生姜根茎组织悬浮液混合,以LAMP检测方法对混合物进行检测,并以同样方法对表现典型萎蔫症状的人工接种番茄植株和健康植株以及田间马铃薯罹病块茎样品进行检测。反应结果直接通过观察产生的白色焦磷酸镁沉淀情况进行判定,或通过加入1μL SYBR GreenⅠ荧光染料进行观察,阳性样品为绿色,阴性样品为橙色。【结果】建立了特异性检测青枯菌的LAMP方法,优化后确立了检测体系中FIP/BIP与F3/B3的浓度比为8﹕1(1.6﹕0.2μmol·L~(-1)),镁离子浓度为6 mmol·L~(-1),反应温度为63℃。特异性检测结果显示,仅参试青枯菌反应管中的反应液呈现绿色,表明建立的检测体系具有高度特异性。以青枯菌GMI1000菌株的DNA原液及不同梯度的稀释液为模板进行的LAMP和普通PCR检测结果显示,LAMP的检测灵敏度为1.42 pg,比普通PCR高10倍。能够快速准确地从植物组织悬浮液、罹病番茄植物组织及田间罹病样品中检测到青枯菌。【结论】建立的青枯菌LAMP检测方法,高效特异,操作简单,无需复杂仪器,肉眼可直接观察检测结果,适合基层和现场检测。     

青枯雷尔氏菌在芝麻植株内的分布及消长动态

芝麻青枯病是我国南方芝麻生产上的重要土传病害。通过测定健康植株、不同发病时期的自然病株及人工接种病株内不同部位青枯雷尔氏菌数量,旨在明确病菌在芝麻植株内的分布及消长动态。结果表明:发病初期,病株内青枯雷尔氏菌总数量随着病情的发展而增加,之后随着病情严重度的加重而下降。病菌的致病力则随着病情发展呈现持续上升的趋势。检测的所有芝麻健株各部位均无青枯雷尔氏菌分布,说明芝麻植株不存在无症状侵染现象。青枯雷尔氏菌在芝麻病株内的分布呈现丰富的多态性,自然病圃和灌根接种的Ⅱ类、Ⅲ类病株各部位菌量分布随着植株高度的升高而递减,但其Ⅰ类病株中下部菌量却高于基部。针刺接种的Ⅰ类、Ⅱ类和Ⅲ类病株,接种点以下的根部和基部均有青枯雷尔氏菌分布,说明青枯雷尔氏菌不仅可随植物蒸腾向上扩散,也可向下蔓延。     

马铃薯蛋白酶抑制子StPI基因的克隆及表达分析

 【目的】克隆马铃薯蛋白酶抑制子基因StPI的全长cDNA。【方法】以马铃薯高抗青枯病二倍体基因型ED13为材料，采用RACE方法进行StPI基因全长cDNA的克隆，利用半定量RT-PCR方法进行该基因的诱导表达分析。【结果】获得了StPI基因的全长cDNA，序列分析表明：该基因具有完整的开放阅读框架，编码116个氨基酸，与马铃薯蛋白酶抑制子 I 前体具有较高的同源性（核苷酸和氨基酸序列同源性分别为89%和74%）。该基因同时受青枯病菌的诱导和茉莉酸的调节，在6～12 h内即达到最高表达水平，但二者又有明显不同。相对而言，StPI基因受青枯病菌的诱导较弱，而受茉莉酸（JA）的诱导较为强烈，在JA处理3 h表达量即明显升高，6～12 h迅速升至最高。【结论】本研究从马铃薯抗青枯病基因型ED13中获得了StPI基因的全长cDNA。该基因可能参与了马铃薯的抗青枯病反应，且病菌处理对该基因的诱导可能与JA刺激具有相似或相同的信号途径。     

发病史、品种和轮作组合预防烤烟青枯病试验

选择不同烟地进行发病史、品种和轮作年数组合试验,初步量化3种因素,以求能更有效地预防烤烟青枯病。结果显示:把烟地发病史划分为0、5%、10%和≥30%4档是基本合理的;可以用K326、RG11和K346作为目前贵州省烤烟推广品种中对青枯病不同抗性的代表品种。在当前以K326及抗性类似品种为主栽品种的前提下,当烟地发病史为5%时就必须轮作;若连作,其倒数第2炕采收前1~2 d的平均病株率达22.1%(6.3%~39.6%),即可能很快进入明显甚至重病史档。黄泥土的重病史烟地轮作2~3年后种K326的病指分别为42.1~53.1和37.6,轮作3年和15年以上,种植与K326抗性相近的G28,病指分别是为13.2~16.1和30.3,显示轮作玉米多年后种植K326之类品种,被青枯病明显或严重危害的风险仍然高。提出了根据烟地发病史选择品种和轮作年数组合的试验结果预防青枯病明显危害的对策建议。     

荠菜提取液对烟草青枯病菌的抑制作用

采用无菌水、乙酸乙酯、无水乙醇、石油醚、丙酮、甲醇浸提荠菜干粉,通过室内毒力试验,分别考察荠菜提取液对烟草青枯病菌的抑制作用,结果仅有乙酸乙酯和无菌水荠菜提取液对烟草青枯病菌有抑菌活性,乙酸乙酯提取液抑菌率最高,为63.9%,无菌水提取液抑菌率为28.9%。通过透射电镜、麦法兰分度计比浊法、蒽酮比色法、考马斯亮蓝法分别考察荠菜无菌水和乙酸乙酯提取液对烟草青枯病菌形态、生长曲线、糖利用率及蛋白质含量的影响。电镜观察表明,经荠菜无菌水和乙酸乙酯提取液处理的烟草青枯病菌细胞膜和细胞壁的结构发生变化,菌体裂解。荠菜乙酸乙酯和水提取液能使烟草青枯病菌对数期滞后,糖利用能力降低,蛋白质含量增高。     

几种杀菌剂对番茄青枯病菌的抑菌活性

采用番茄青枯病防治中3种已登记杀菌剂和7种未登记杀菌剂对番茄青枯病菌进行室内毒力测定,并通过EC50和病原菌的抗性水平进行抑菌作用对比。结果表明:在10种药剂中,以已登记的3%中生菌素WP抑菌效果最好,EC50值为1.308 mg/L,番茄青枯病菌对其表现敏感;在未登记的7种杀菌剂中,0.5%氨基寡糖素AS的抑菌效果最好,EC50值为2.180 mg/L,番茄青枯病菌对其表现敏感。     

2%加收米水剂防治葱软腐病田间药效试验

为了解加收米对葱软腐病的防治效果、持效期及对作物和施药者的安全性,以农用链霉素为对照,进行了2%加收米水剂防治葱软腐病田间药效试验。结果表明,第2次药后7 d,2%加收米水剂400、600、800倍液对葱软腐病均有较好的防治效果,其中以2%加收米水剂400倍液的效果最好,而其400、600倍液对葱软腐病的防治效果与农用链霉素5000倍液处理相当,且对作物及施药人员安全。生产上建议使用2%加收米水剂400~600倍液在小葱软腐病初发期用药,隔7 d施药1次,连施2~3次,可达到较好的防治效果。     

烟草青枯菌致病型及其与寄主品种的互作关系

阐述了烟草青枯病菌系致病型及分布特点，种质资源抗性分类，主栽品种抗性表现，生态环境因素的影响；讨论了病原菌与寄主相互作用中的遗传关系。