硫酸化香菇多糖对新城疫疫苗免疫效果的影响

试验Ⅰ:免疫应答试验:取450只雏鸡随机均分为9组,在14日龄用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时分别肌肉注射高、低剂量的3种硫酸化香菇多糖(sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3)和香菇多糖(LNT)。分别于首免前和首免后连续6周检测血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。试验Ⅱ:免疫保护试验:取350只雏鸡随机均分为7组,除非免疫组外其余组用新城疫Ⅳ系疫苗免疫,同时3个sLNT组和LNT组分别注射sLNT_1、sLNT_2、sLNT_3和LNT。于免疫后第21天,除无佐剂对照组第2组外各组鸡均肌肉注射NDV强毒攻毒,观察保护效果,并分别于攻毒前和攻毒后第3、6、9、12和15天测定血清HI抗体效价和外周血T淋巴细胞增殖的动态变化。结果表明:3种sLNT在首免后28 d内比LNT显著提高血清抗体效价最高2个滴度(高剂量的效果优于低剂量),促进淋巴细胞增殖(低剂量的效果强于高剂量);攻毒鸡发病率和死亡率降低,保护率提高最多达17.5%,加速攻毒后血清抗体生成和T淋巴细胞增殖,病鸡最快可以在攻毒后6 d恢复正常。综合评价以sLNT_2的效果最好。揭示:硫酸化修饰能显著提高LNT的免疫增强活性,增强新城疫疫苗的...     

中药成分复方的佐剂作用及其与中药复方的功效比较

分别用淫羊藿多糖(EPS)加蜂胶黄酮(PF)、黄芪多糖(APS)加人参皂甙(GS)制成2个中药成分复方(cCHMI1,cCHMI2),同时用相应的淫羊藿、蜂胶、黄芪和人参的提取物制成相应成分含量相同的2个中药复方(cCHM1,cCHM2).试验1用2个中药成分复方(对照组为生理盐水)分别配合兔瘟灭活苗免疫家兔,于免疫后第0、3、7、10、14、17、21、28、35、42天用血凝抑制试验法测定血清抗体效价的动态变化;试验2将4个复方分别与灭活的新城疫强毒混合制成疫苗免疫雏鸡,以油佐剂苗、无佐剂苗和生理盐水为对照,分别于免疫后第7、14、21、28、35、42天用MTT法和血凝抑制试验法检测外周血淋巴细胞增殖和血清抗体效价的动态变化.结果表明,2个中药成分复方能显著提高家兔血清的兔瘟抗体效价,cCHMI1的效果优于cCHMI2;4个复方均能显著促进雏鸡淋巴细胞增殖和提高血清抗体效价,效果与油佐剂苗相当,中药成分复方稍优于中药复方.     

中药成分复方的佐剂作用及其与中药复方的功效比较

分别用淫羊藿多糖（EPS）加蜂胶黄酮（PF）、黄芪多糖（APS）加入参皂甙（GS）制成2个中药成分复方（cCHMI1，cCHMI2），同时用相应的淫羊藿、蜂胶、黄芪和人参的提取物制成相应成分含量相同的2个中药复方（cCHM1，cCHM2）。试验1用2个中药成分复方（对照组为生理盐水）分别配合兔瘟灭活苗免疫家兔，于免疫后第0、3、7、10、14、17、21、28、35、42天用血凝抑制试验法测定血清抗体效价的动态变化；试验2将4个复方分别与灭活的新城疫强毒混合制成疫苗免疫雏鸡，以油佐剂苗、无佐剂苗和生理盐水为对照，分别于免疫后第7、14、21、28、35、42天用MTT法和血凝抑制试验法检测外周血淋巴细胞增殖和血清抗体效价的动态变化。结果表明，2个中药成分复方能显著提高家兔血清的兔瘟抗体效价，cCHMI1的效果优于cCHMI2；4个复方均能显著促进雏鸡淋巴细胞增殖和提高血清抗体效价，效果与油佐剂苗相当，中药成分复方稍优于中药复方。     

蛹虫草基质多糖对传染性支气管炎病毒感染鸡免疫指标的影响

试验应用滴鼻+点眼法对7日龄黄羽肉鸡攻毒建立传染性支气管炎感染模型,采用蛹虫草基质多糖进行治疗试验,通过对肉鸡免疫器官指数、外周血淋巴细胞增殖指数、血清抗体水平和γ-干扰素浓度的检测来研究蛹虫草基质多糖用于防治鸡传染性支气管炎的可能性。结果表明,蛹虫草基质多糖能够促进肉鸡法氏囊和脾脏的生长发育,加快其增重,从而提高免疫器官指数,又能促进外周血淋巴细胞增殖转化水平;同时还能使血清抗体水平和γ-干扰素浓度升高,增强机体的免疫力。因此,蛹虫草基质多糖可作为鸡传染性支气管炎防治的临床候选药物。     

3种中药多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响（英文）

14日龄健康、非免疫罗曼蛋公鸡240只,随机均分为8组,用鸡新城疫疫苗首次免疫和二次免疫前3 d、当日及后3d,试验组分别灌胃0.5 ml高、低剂量黄芪多糖(ASP)、淫羊藿多糖(EPP)和板蓝根多糖(IRPS)溶液,空白对照组和免疫对照组灌胃等量生理盐水。各组分别于首免后连续4周随机取鸡10只称量体重、测定抗体效价和T淋巴细胞增殖变化。结果表明,3种中药多糖均可促进鸡只增重,提高新城疫HI抗体效价,促进外周血T淋巴细胞增殖,其中低剂量的IRPS效果最好。     

感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后免疫保护效应及其机理研究

 雏鸡 1日龄人工感染鸡贫血病毒 (CAV) ,于 8日龄接种 L asota疫苗 ,免疫后 2 8d进行新城疫强毒 (v NDV)攻击 ,以同龄未感染 CAV和用 L asota疫苗免疫并经 v NDV攻毒雏鸡为对照 ,检测其免疫保护效应 ,胸腺和脾脏 T细胞数量及 T细胞增殖反应 ,法氏囊和脾脏 Ig G+、Ig M+、Ig A+抗体生成细胞数量 ,血清免疫球蛋白 Ig G、Ig M、Ig A含量 ,血凝抑制抗体 (HI)滴度等。结果表明 ,CAV人工感染并用新城疫 (ND)疫苗免疫雏鸡经 v NDV攻击后的免疫保护率为 6 0 % ,对照组雏鸡 v NDV攻击后免疫保护率为 10 0 % ,胸腺和脾脏 T细胞数量和 T细胞增殖反应、法氏囊和脾脏Ig G+ 、Ig M+ 、Ig A+ 抗体生成细胞数量、血清 Ig G、Ig M、Ig A含量及 HI抗体滴度 ,均较对照组雏鸡显著降低。说明感染鸡贫血病毒雏鸡接种新城疫疫苗后的免疫保护效应及免疫功能明显降低。     

3种中药多糖对鸡新城疫疫苗免疫效果的影响

14日龄健康、非免疫罗曼蛋公鸡240羽,随机均分为8组,用鸡新城疫疫苗首次免疫和二次免疫前3 d、当日及后3 d,试验组分别灌胃0．5 mL高、低剂量黄芪多糖（ASP）、淫羊藿多糖（EPP）和板蓝根多糖（IRPS）溶液,空白对照组和免疫对照组灌胃等量生理盐水。各组分别于首免后连续4周随机取鸡10羽称量体质量、测定抗体效价和T淋巴细胞增殖变化。结果表明,3种中药多糖均可促进鸡体质量增加,提高新城疫HI抗体效价,促进外周血T淋巴细胞增殖,其中低剂量的IRPS效果最好。     

多糖-硒化多糖复方增强鸡免疫功能的比较研究

[目的]验证多糖-硒化多糖复方的增强免疫活性,筛选出活性最强的复方,为研制新型免疫增强剂提供试验依据。[方法]在前期研究筛选出增强免疫活性较强的当归多糖(CAP)、党参多糖(CPP)、大蒜多糖(GP)、硒化当归多糖(sCAP)、硒化党参多糖(sCPP)和硒化大蒜多糖(s GP)的基础上,以其为组分药,按照多糖与硒化多糖质量比9∶1的比例组成CAP-sCPP、CAP-s GP、CPP-sCAP、CPP-s GP、GP-sCAP和GP-sCPP共6个复方,比较它们的体内/外增强免疫活性能力。体外试验,用MTT法测定6个复方对鸡外周血淋巴细胞增殖的影响;体内试验,进一步比较了筛选出的3个复方对新城疫苗免疫雏鸡淋巴细胞增殖,血清抗体效价,IL-2、IL-6和IFN-γ含量的影响。[结果]体外试验结果显示:单独或与植物血凝素(PHA)共同刺激时,6个复方均有不同程度的增强免疫活性,CAP-sCPP、GP-sCPP和CPP-sCAP的活性较强;体内试验结果显示:在免疫后7、14、21和28 d,GP-sCPP高剂量促进T淋巴细胞增殖的作用最强,血清抗体效价和IL-2、IL-6及IFN-γ含量均为最高,且均显著高于免疫对照组。[结论]GP-sCPP的增强免疫活性最强,可以考虑作为新型免疫增强剂的候选方。     

中药成分复方对免外周血淋巴细胞增殖、IFN-Y和IL-10的mRNA表达以及兔出血症疫苗免疫效果的影响

[目的]研究两个中药成分复方(cCHMIs)的免疫增强作用和机理.[方法]选择黄芪多糖、淫羊藿多糖、蜂胶黄酮和人参皂苷4种中药成分组成两个复方,用MTT法和荧光定量RT-PCR法测定它们对兔外周血淋巴细胞增殖和IFN-y.IL-10 mRNA的表达影响;并将两个复方作为佐剂,配合兔出血症疫苗免疫幼兔,以铝胶苗和无佐剂苗为对照,分别于免疫后7、14、21、35、49 d用MTT法和血凝抑制法测定外周血淋巴细胞增殖和血清抗体的动态变化,于免疫后63 d测定免疫器官指数和攻毒保护率.[结果]两个复方在体外均可以显著促进淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞IFN-Y、IL-10mRNA的表达;作为佐剂,两个复方可以显著提高免疫兔的血清抗体效价,促进体内淋巴细胞增殖,显著促进圆小囊、肠淋巴结等免疫器官的发育,有较高的攻毒保护效果.[结论]两个复方中药成分具有较强的免疫增强作用,可被开发成新型的免疫增强剂.     

硫酸化多糖复方和中药成分复方的鸡新城疫疫苗免疫增强效果比较

为了筛选增强免疫效果最好的硫酸化多糖复方和中药成分复方,以前期筛选出的硫酸化黄芪多糖sAPS60、硫酸化淫羊藿多糖sEPS5和硫酸化香菇多糖sLNT2组成4个复方:复方1(sEPS-sAPS)、复方2(sEPS-sAPS-sLNT)、复方3(sAPS-sLNT)、复方4(sEPS-sLNT),以及前期筛选的2个中药成分复方--复方5(EPS-PF)和复方6(APS-GS),在14日龄雏鸡接种新城疫苗时注射,分别于免疫前和免疫后7、14、21 d,每组随机抽取6羽雏鸡翼下静脉采血,用β-微量法检测血清HI抗体效价;于免疫后14、21 d每组随机抽取4羽心脏采血,用MTT法测定外周血淋巴细胞增殖;于免疫后23 d各组用新城疫病毒攻毒,攻毒后14 d统计发病率、死亡率和免疫保护率,并测定血清抗体效价.结果表明,各复方均能明显或显著提高新城疫疫苗的免疫应答,提高血清HI抗体效价,促进淋巴细胞增殖,降低攻毒后的发病率和死亡率,提高免疫保护率.复方1和复方5的作用最为显著,可分别作为硫酸化多糖复方和中药成分复方免疫增强剂的候选方.     

怀山药—怀地黄对药多糖对小鼠淋巴细胞增殖的影响

探讨怀山药—怀地黄对药多糖对小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的影响。首先采用MTT法测定怀山药—怀地黄多糖、怀山药多糖、怀地黄多糖对小鼠脾脏淋巴细胞的安全浓度,然后,在各多糖安全浓度范围内,用MTT法测定三种多糖对健康和免疫抑制小鼠脾脏淋巴细胞增殖的影响。结果表明,怀山药-怀地黄多糖、怀山药多糖、怀地黄多糖均具有一定的促进淋巴细胞增殖作用,具有一定的浓度依赖性,综合比较,三种多糖增强小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的作用顺序为:怀山药—怀地黄多糖怀山药多糖怀地黄多糖。结论,怀山药—怀地黄对药多糖增强小鼠脾脏淋巴细胞增殖功能的作用优于其单一中药。     

黄芪板蓝根等多糖成分对鸡淋巴细胞体外增殖的影响

为了筛选免疫增强作用较好的单味中药成分(CHP),将6种浓度的黄芪多糖(APS)、牛膝多糖(ABPS)、板蓝根多糖(IRPS)、山药多糖(DOPS)等4种中药多糖分别加入到体外培养的鸡脾脏淋巴细胞中,培养48 h后,用MTT法测定淋巴细胞增殖的变化.结果表明,4种中药多糖在适宜的浓度下均能促进淋巴细胞增殖及协同LPS的作用.除ABPS外其余3种多糖在一定浓度下还能明显协同ConA刺激淋巴细胞增殖,其中以IRPS的作用最强.     

鸡柔嫩艾美尔球虫对免疫细胞体外增殖及产生的免疫相关分子的影响

【目的】检测鸡柔嫩艾美尔球虫体外刺激的巨噬细胞和淋巴细胞活力及分泌的细胞因子目的是了解球虫对免疫细胞增殖及产生的免疫相关分子的影响。【方法】无菌条件分离鸡外周血和脾淋巴细胞,淋巴细胞和HD11巨噬细胞分别与鸡柔嫩艾美尔球虫子孢子体外共培养,采用MTT、Griess、ELISA、RT-PCR法、流式细胞术等方法检测细胞增殖、免疫相关分子水平。【结果】子孢子组鸡外周血和脾淋巴细胞增殖明显高于对照组(P0.05);子孢子组HD11巨噬细胞NO和iNOS的分泌量明显增加(P0.05),外周血和脾淋巴细胞NO和iNOS分泌量升高,但统计差异不显著,脾淋巴细胞iNOS分泌量低于对照组差异不显著,但子孢子组免疫细胞上iNOS基因表达水平上调且显著高于对照组(P0.05);子孢子组HD11巨噬细胞和外周血淋巴细胞IL-2分泌量极显著低于对照组(P0.01),且IL-2mRNA表达下调;HD11巨噬细胞和脾淋巴细胞IFN-γ量极明显高于对照组(P0.01),而外周血淋巴细胞IFN-γ分泌量明显降低,IFN-γmRNA表达量与对照组无显著统计差异;子孢子组HD11巨噬细胞吞噬能力及明显强于对照组(P0.01),其表达MHC-Ⅱ分子的阳性细胞百分率显著高于对照组,细胞上表达KUL01表面分子阳性百分率显著降低,但阳性细胞平均荧光强度都极明显高于对照组(P0.01)。【结论】鸡柔嫩艾美尔球虫刺激免疫细胞增殖,提高巨噬细胞和淋巴细胞NO和iNOS的分泌量明显增加及iNOS基因表达水平上调,但IL-2分泌量下降其mRNA表达下调,免疫相关分子(MHC-II)表达量增加,结果表明鸡柔嫩艾美尔球虫能不同程度影响免疫细胞增殖及产生免疫相关分子。     

药用菌发酵液多糖对脾淋巴细胞的增殖作用

对3种药用真菌发酵液多糖进行小鼠脾淋巴细胞增殖试验,结果表明:3种药用真菌发酵液多糖对小鼠脾细胞具有增殖作用,但与剂量存在依赖关系。最适剂量赤芝发酵液多糖100μg/mL、蝉花菌发酵液多糖400μg/mL、硫磺菌发酵液多糖50μg/mL。     

10种中药成分对单层鸡胚成纤维细胞增殖的影响

将安全浓度范围内的黄芪多糖、当归多糖、蜂胶多糖、淫羊藿多糖、板蓝根多糖、黄芪黄酮、蜂胶黄酮、淫羊藿黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷等 10种中药成分分别加入已培养 2 4h、刚形成单层的鸡胚成纤维细胞 (CEF)中 ,在加药后12 ,2 4 ,36 ,4 8和 6 0h用MTT法测定它们对CEF增殖的影响。结果表明 ,黄芪皂苷、黄芪多糖、板蓝根多糖和蜂胶黄酮主要表现为促进增殖 ;淫羊藿多糖主要具抑制效应 ;其他 5种中药成分在某些浓度和时间点能促进增殖 ,而在某些浓度和时间点则抑制增殖 ,并有一定的量效和时效关系。     

中药成分与新城疫病毒感作后对病毒感染活性的影响

将5种浓度的当归多糖、黄芪多糖、板蓝根多糖、淫羊藿多糖、蜂胶多糖、淫羊藿黄酮、蜂胶黄酮、黄芪皂苷和人参皂苷分别与新城疫病毒La Sota株混合感作144 h和272 h后,加到已培养36 h的鸡胚成纤维细胞(CEF)中，继续培养72h，采用中性红染料吸收法测定CEF增殖变化,判定中药成分对病毒感染活性的影响。结果表明，所有中药成分几乎所有浓度均影响或显抑制病毒的感染活性，且与感作时间有一定的相关性。     

兔病毒性出血症、巴氏杆菌病二联蜂胶灭活苗的研制

应用兔出血症病毒(RHDV)和巴氏杆菌(Pm)联合研制而成的蜂胶佐剂灭活苗,用 1 mL 免疫试验兔,免疫后第 5d,对 RHDV 保护率达 100%(5/5);免疫后第 14d,对巴氏杆菌的保护率达 100%(4/4),第 7d 即产生较强的免疫力。T 细胞总玫瑰花环形成率(Et率)、活性玫瑰花环形成率(Ea率)的测定结果表明:蜂胶具有提高机体细胞免疫功能的作用;通过 HI 法监测兔病毒性出血症抗体水平,结果表明:蜂胶苗产生抗体时间较早,第 7d 抗体效价可达到较高水平(26.8),第 21 d 达到高峰(28.8)。     

复方霍山石斛浸膏增强免疫力作用的研究

[目的]研究复方霍山石斛浸膏对小鼠免疫力的影响。[方法]将200只健康雌性小鼠分为5个试验组,每组分高、中、低和空白对照4个剂量组[3.0、1.0、0.5、0 g/(kg.bw)],连续灌胃给药30 d后分别对不同剂量组小鼠进行细胞免疫的功能检测(ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化试验、DNFB诱导小鼠DTH试验)、体液免疫功能检测(抗体生成细胞检测试验、血清溶血素测定试验)、单核-巨噬细胞功能检测(小鼠炭粒廓清试验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞试验)和NK细胞活性测定。[结果]各项检测结果与空白对照组相比,均能刺激小鼠脾淋巴细胞增殖、转化作用,促进小鼠迟发型变态反应作用,提高小鼠抗体生成细胞数和血清溶血素水平,增强小鼠的单核-腹腔巨噬细胞吞噬、碳廓清能力及NK细胞的活性。[结论]复方霍山石斛浸膏具有增强免疫力功能。     

苍术挥发油对小鼠体外脾脏淋巴细胞增殖的影响

对苍术挥发油活性部分进行筛选,以评价苍术挥发油对机体免疫的调控机制。通过建立小鼠脾脏淋巴细胞增殖模型和热应激模型,采用MTT法对热应激中脾脏淋巴细胞增殖情况进行测定。苍术不同提取物中以苍术挥发油对脾脏淋巴细胞增殖效果最佳,对高温下小鼠体外脾脏淋巴细胞增殖的最佳浓度为200μg／mL。苍术挥发油对热应激后小鼠脾脏淋巴细胞具有较强的上调作用,通过体外脾脏淋巴细胞热应激模型,对高通量、快速筛选中药有效部分和药效学评价进行新的探索。