商洛不同产地连翘有效成分含量与土壤因子的相关性研究

采用HPLC法测定了商洛五县区14个样方点的连翘药材中连翘苷、连翘酯苷A含量,采用理化分析法进行土壤因子的测定,并研究了连翘有效成分含量与土壤因子的关系。结果显示:有机质、速效钾与连翘苷的含量呈极显著正相关,速效钾与连翘酯苷A的含量呈显著正相关。土壤中丰富的有机质、速效钾供应会促进连翘药材体内连翘苷的形成和积累,但过多的有机质和碱解氮不利于连翘酯苷A的积累。近碱性(平均p H值为7.236)土壤条件会促进连翘药材中连翘苷的积累而抑制连翘酯苷A的积累。因此,无论是选择适宜产地或是实施科学施肥,都应重视和考虑有机质、速效钾、碱解氮及土壤p H值对连翘药材质量的影响。     

连翘酯苷A对内毒素致鸡脾淋巴细胞白介素-17的影响

[目的]研究内毒素和连翘酯苷A对鸡脾淋巴细胞中白介素-17(IL-17)水平的影响。[方法]将1日龄雏鸡正常饲养至50日龄时,心脏采血处死,表面消毒后,剖检用脾淋巴细胞分离液分离脾淋巴细胞,将脾淋巴细胞分为20个组,具体为4个剂量组×5个时间点。4个剂量组分别为:对照组、LPS组(5μg/m L)、连翘酯苷A预防低剂量组(200μg/m L连翘酯苷A+5μg/m L LPS)、连翘酯苷A预防高剂量组(400μg/m L连翘酯苷A+5μg/m L LPS)。5个时间点分别为0、6、12、24、48 h。通过采用ELISA和Real time-PCR方法检测脾脏淋巴细胞中IL-17水平。[结果]ELISA结果显示,与正常组相比,LPS组脾脏淋巴细胞中炎症因子IL-17含量升高;与LPS组比较,连翘酯苷A组脾脏淋巴细胞中上述炎症因子含量下降,表明脾脏中炎症因子的变化呈正相关性,通过抑制LPS诱导的鸡脾脏中上述炎症因子的升高,减轻炎症反应。Real time-PCR结果显示,与正常组相比,LPS组脾脏淋巴细胞中炎症因子IL-17 mRNA表达量升高;与LPS组比较,连翘酯苷A组预防组脾脏淋巴细胞中上述炎症因子表达量下降,变化呈相关性,试验表明连翘酯苷A可以通过转录水平抑制LPS诱导的鸡脾脏淋巴细胞中上述炎症因子表达量的升高,减轻炎症反应。[结论]连翘酯苷A抑制鸡脾脏淋巴细胞中IL-17水平,可起到抗炎功能。     

莲藕多酚薄层层析分离鉴定研究

[目的]为分离和鉴定莲藕中的多酚奠定基础。[方法]利用薄层层析色谱法,以硅胶G60为固定相,以甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸为流动相,以儿茶素为对照品,用FeCl3-K3Fe(CN)6为显色剂,对莲藕多酚酯相组分中酚类物质进行分离和鉴定,并分析不同的展开剂对组分分离的影响。[结果]莲藕多酚酯相展开的第2个斑点与标准品儿茶素所对应的斑点Rf值相同,初步确定莲藕多酚酯相中有儿茶素成分。薄层层析利用所选的6种展开剂均得到很好的分离效果,其Rf值在0.49~0.61范围内,符合薄层层析中Rf值定性的要求。[结论]薄层色谱高效、灵敏、快速,为初步鉴定莲藕中的儿茶素化合物提供了较好的检测方法。     

商洛连翘中连翘苷和连翘酯苷A含量比较研究

使用高效液相色谱法(HPLC),对比8、9和10月份商洛连翘叶和果实中连翘苷及连翘酯苷A的含量,以探究主要次生代谢产物在连翘成熟期中积累量的变化。研究显示,8-10月连翘苷和连翘酯苷A在叶中的积累逐步增加,而果实中含量则变化不大;连翘同一部位中连翘苷和连翘酯苷A比例的动态变化显示,连翘果实中连翘酯苷A是连翘苷的13倍左右,而在连翘叶中则只有3倍左右。通过比较连翘叶和果实中连翘苷和连翘酯苷A含量变化,可以更加清楚了解主要有效成分的积累变化,为商洛地区连翘采收期选择及规范化生产提供借鉴。     

2种商品连翘的质量比较

分别采用HPLC法和UV-Vis法测定了不同产地连翘中有效成分(连翘苷、连翘酯苷A和总黄酮)含量及其浸出物含量.结果表明,各产地老翘和青翘中的浸出物、连翘苷含量和连翘酯苷A含量均符合药典中的限量要求.青翘浸出物远高于老翘浸出物,老翘和青翘进行无梗处理后,山西陵川无梗老翘中的浸出物含量提高较明显,其余无梗老翘无明显变化.山西陵川无梗老翘中,连翘苷和连翘酯苷A含量分别高达0.88％、0.69％,所有老翘和青翘样品所含连翘苷和连翘酯苷A在去梗前后无明显变化.老翘和青翘的总黄酮含量在去梗后均出现降低趋势,而老翘总黄酮含量明显低于青翘总黄酮含量.说明连翘有梗与无梗对连翘苷和连翘酯苷A含量的影响较小,连翘药材在加工炮制时不需要进行去梗操作.     

不同采收期及干燥处理老翘中化学成分含量比较

为了确定老翘的采收期及干燥方法,对山西长治连翘2个月内每隔10 d进行样品采摘,采用晒干、烘干、阴干的方法干燥,按照2010版《中国药典》测定连翘苷和连翘酯苷A含量。结果表明:10月底连翘果实成熟进入老翘期,老翘中连翘苷的含量均低于2010版《药典》标准,而连翘酯苷A的含量都高于2010版《药典》标准。11月开始是老翘的采收期,随着采收时间的延后,连翘苷和连翘酯苷A的含量降低。     

不同采收期青翘中4种活性成分的含量分析

【目的】以不同采收期青翘中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁和槲皮素的含量为指标,综合比较4种活性成分含量以确定青翘的最佳采收期。【方法】采用高效液相色谱（HPLC）法,测定不同采收期采自陕西省洛南县的青翘中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁、槲皮素的含量,并对这4种活性成分的含量进行比较分析。【结果】7月下旬至8月上旬青翘中的连翘苷、连翘酯苷A、芦丁的含量较高,最高分别可达5.62,41.92,5.70 mg/g;这3种活性物质含量随采收时间的延长而波动较大。槲皮素含量以7月下旬至9月上旬采收青翘较高,最高达0.91 mg/g,且不同采收期青翘中槲皮素的含量变化较小。【结论】陕西省洛南县产青翘于7月下旬至8月上旬采收最佳,此时连翘苷、连翘酯苷A、芦丁和槲皮素的含量均较高。     

高效液相色谱法同时测定连翘中连翘酯苷A、连翘苷和表松脂素含量

目的:采用高效液相色谱仪,同时测定连翘中3种活性成分:连翘苷、连翘酯苷A和表松脂素含量。方法采用Thermo C18Column(4.6 mm×250 mm,5μm)色谱柱;以乙腈-水进行梯度洗脱;柱温30℃;流速1 m L·min-1;检测波长为203 nm。结果 3种活性成分(连翘苷、连翘酯苷A和表松脂素)具有良好的线性关系:连翘酯苷A 0.168~4.200μg(r=0.9998)、连翘苷0.00975~0.24375μg(r=0.9995)和表松脂素0.03~0.75μg(r=0.9999);平均加样回收率分别为:99.44%、99.84%、100.17%,RSD分别为1.82%、2.13%和1.50%。结论:该法测定样品,具有结果准确、重复性好、操作方便和实验条件易于满足等优点。     

连翘适宜采收期研究

[目的]确定连翘的适宜采收期。[方法]以太行山道地产区连翘为研究对象,对不同时间采收的连翘进行鉴别和分析。[结果]随着采收时间的延后,连翘中浸出物、连翘苷、连翘酯苷A含量均呈现降低趋势,但6月中旬到7月初采收的连翘的性状和理化鉴别不符合《中国药典》2015年版要求。[结论]综合考虑连翘药材的性状、理化鉴别、水分、总灰分、浸出物、连翘苷、连翘酯苷A等指标,确定连翘适宜的最佳采收期为7月中下旬。     

不同加工方式对连翘药材品质的影响

为明确不同加工方式对连翘药材品质的影响,以生晒法为对照,研究了煮-晒、蒸-晒、煮-烘和一体化机器加工方式对连翘水分、总灰分、醇溶性浸出物、连翘苷和连翘酯苷A含量的影响。结果表明:不同加工方式下,连翘药材水分和总灰分含量与对照差异不显著;一体化机器加工的连翘药材中醇溶性浸出物、连翘苷和连翘酯苷A含量显著高于其他加工方式;煮-晒、蒸-晒和煮-烘加工方式下,连翘药材中醇溶性浸出物和连翘酯苷A含量均显著高于对照。不同加工方式对连翘药材品质影响差异较大,各指标都达到《中国药典》规定范围内,一体化机器加工的连翘药材品质最优,煮-晒、蒸-晒和煮-烘方式次之,生晒方式效果最差。     

几种中草药抗氧化性成分的还原能力及总酚含量比较研究

[目的]研究几种中草药的抗氧化性,为天然抗氧化剂的开发及应用提供参考。[方法]采用索氏提取法分别用乙醇和水作为溶剂对5种常见清热解毒中草药(连翘、黄柏、蒲公英、黄芩、紫花地丁)的抗氧化性成分进行有效提取,并进行还原能力的测定和总酚含量的测定。[结果]结果表明,乙醇提取物的抗氧化能力的大小顺序为:连翘>黄柏>蒲公英>黄芩>紫花地丁,水提取物的抗氧化能力的大小顺序为:黄柏>连翘>蒲公英>黄芩>紫花地丁。这5种中草药的抗氧化性不全是由酚类物质起主导作用。2种测定方法对抗氧化性的测定结果有很大的相关性,可相互验证。[结论]得出了5种中草药在相同条件下的抗氧化性大小,为今后天然抗氧化剂的开发合成及应用奠定了基础。     

连翘提取液中连翘苷和总黄酮的含量测定与抗氧化活性的研究

[目的]测定连翘不同部位中连翘苷和总黄酮的含量,研究其抗氧化活性,并分析连翘苷和总黄酮含量与连翘提取液抗氧化活性的关系。[方法]采用超声波辅助法提取连翘提取液中连翘苷和总黄酮,采用HPLC法测定连翘苷的含量,采用比色法测定总黄酮的含量,采用DPPH.清除法评价其抗氧化活性。[结果]连翘不同部位提取液中连翘苷含量大小顺序为新叶老叶花果实,总黄酮含量大小顺序为花新叶老叶果实;连翘不同部位提取液都具有较高的抗氧化活性,抗氧化性大小顺序为花果实新叶老叶。[结论]连翘花、果实和叶提取物都具有较强的抗氧化活性。连翘花、叶提取物中主要抗氧化活性成分是总黄酮;连翘果实中主要抗氧化活性成分是总黄酮和连翘酯苷。     

雪柳、连翘和小叶丁香叶片解剖结构及其抗旱关系的比较研究

利用石蜡切片法以及徒手切片法,对雪柳(Fontanesia fortunei Carr.)、连翘(Forsythia suspense Vahl.)和小叶丁香(Syringa microphylla Diels.)的叶片进行了形态解剖学观察。结果表明,三种植物均为异面叶,但是栅栏薄壁组织层数、栅海比以及叶片主脉的结构有着明显的差异性。三种植物的气孔密度的排列顺序为:雪柳>连翘>小叶丁香;栅海比的排列顺序为:雪柳>连翘>小叶丁香。由此得出,三种植物的抗旱性雪柳最强,连翘其次,小叶丁香最差。     

野生连翘资源调查与分析

在对文献资料查阅研究的基础上,选择了具有代表性的连翘野生资源分布地区,对连翘野生资源进行实地调查。结果发现,连翘在采收、炮制加工和采收期等方面存在许多问题,对野生连翘资源的破坏性很大。因此,需要进一步加强野生连翘资源的保护意识及加大人工的抚育力度,以实现野生连翘资源的可持续利用。     

不同花柱类型连翘的花粉形态和生活力比较

为找出连翘(Forsythia suspensa)结实率低的原因,采用电镜扫描、TTC染色、离体培养等技术,对连翘花粉的大小、形态、外壁纹饰、生活力和发芽率进行了观察和测定。结果表明:连翘花粉均为长椭圆形,沟状萌发孔、三沟、长达两极,花粉外壁纹饰为典型的网状雕纹,其中短花柱型连翘花粉的极轴长平均为36.47μm,赤道轴长平均为29.09μm,长花柱型连翘的极轴长平均为37.55μm,赤道轴长平均为23.1μm。短花柱型花粉的生活力为82.5%,长花柱的为69.3%,差异达到极显著水平。2种花粉均在400 mg/L硼酸培养基上萌发率最高,且短花柱花粉萌发率明显高于长花柱花粉的萌发率。因此,连翘结实率低的原因可能与花粉的发芽率及花粉形态有关。     

加拿大金脉连翘引种试验与栽培技术

[目的]综合开发利用连翘[Forsythia suspense（Thumb.） Vahl]资源。[方法]引进连翘叶脉变异品种-金脉连翘,通过苗木扩繁、区域试验与推广,观察金脉连翘的稳定性。[结果]该品种特异性状保持稳定,具有新品种的遗传稳定性和一致性,是1个很有发展前景的叶脉变异类连翘新品种。[结论]该试验介绍了金脉连翘的引种过程、繁殖和栽培管理技术,为连翘资源的开发利用提供了理论基础。     

不同花型连翘花粉活性比较

[目的]比较不同花型连翘花粉的活性.[方法]应用TTC液染色法、I2-KI染色法和醋酸洋红染色法3种方法测定连翘短花柱二雄蕊花、短花柱三雄蕊花、长花柱二雄蕊花和长花柱三雄蕊花4种花型的花粉生活力,并应用离体培养法比较短花柱二雄蕊花与长花柱二雄蕊花在不同条件下的萌发率.[结果]浓度1％醋酸洋红染色法是连翘花粉活力的最佳检测方法.二雄蕊花的花粉活性高于三雄蕊花;当雄蕊数相同时,短花柱花的花粉活性高于长花柱花.短花柱二雄蕊花和长花柱二雄蕊花2种花型花粉离体萌发的适宜组合为浓度15％蔗糖＋浓度0.01％硼酸＋浓度1.5％琼脂.[结论]试验比较了不同花型连翘花粉的活性,为连翘的进一步开发利用提供了依据.     

连翘乙醇提取物对细菌生长曲线的影响

研究连翘乙醇提取物的抑菌活性。以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌为实验菌株,通过比较和分析不同连翘提取物浓度下细菌生长曲线的变化来研究连翘的抑菌作用特点。结果发现0.01 g/ml的提取物对摇床培养的金黄色葡萄球菌生长具有较强的抑制作用;0.10g/ml的提取物对摇床培养的大肠杆菌生长具有一定的抑制作用。由此表明,连翘乙醇提取物具有明显的选择性抑菌作用。     

中药对奶牛子宫内膜炎主要致病菌的体外抑菌研究

[目的]为开发治疗奶牛子宫内膜炎的中药制剂提供依据。[方法]选取连翘、黄连、丹参、大黄、大青叶、益母草、当归、红花对奶牛子宫内膜炎的主要致病菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、链球菌)进行单味中药抑菌试验,在此基础上配成3个复方,确定复方的抑菌效果。[结果]连翘、黄连、大黄对3种致病菌均有很好的抑菌效果,抑菌直径都超过了15.0 mm,其次是红花、大青叶和丹参。复方1、复方2、复方3对3种致病菌均有很好的抑制作用,其中复方1(连翘、大黄、益母草、红花按一定比例组成)对3种致病菌极度敏感,平均抑菌直径为22.3 mm,其他2个复方对3种致病菌高度敏感。[结论]选用复方中药治疗奶牛子宫内膜炎是可行的。     

豫产连翘挥发油化学成分研究

[目的]更好地利用卢氏连翘。[方法]以豫产连翘为材料,采用超临界CO2萃取法提取挥发油,再用气相色谱-质谱法研究豫产连翘挥发油的化学成分。[结果]经GC-MS分析,所得质谱与标准图谱对照,确认了35个成分,占总量的72.965%,主要化学成分为β-蒎烯、香叶醇、1-松油醇-4、肉豆蔻酸、顺-亚油酸、环氧异香橙烯、角鲨烯、二十八烷、乙酸羽扇烯酸酯,其中乙酸羽扇烯酸酯尚未见文献报道。连翘挥发油烯类化合物的含量占所鉴定成分含量的40.050%,烷类占15.100%,醇类占7.135%,酸类占10.785%,酯类占24.327%。[结论]豫产连翘挥发油化学成分中含量最大的成分为乙酸羽扇烯酸酯(17.068%),而非β-蒎烯,提示了豫产连翘挥发油的药用效果可能与其他产地不同。