素心建兰无菌播种快繁技术研究

以素心建兰种子为外植体,通过基本培养基(1/2MS、花宝1号、改良MS)、植物激素(6-BA、TDZ、NAA)等关键因子对素心建兰种子萌发、根状茎增殖、分化等各培养阶段影响的试验,探讨了素心建兰无菌播种快繁关键技术。结果表明:种子无菌萌发较适宜的培养基配方为1/2MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+水解乳蛋白2.0g·L~(-1)+活性碳1.0g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1);根状茎较适宜的增殖培养基配方为改良1号+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖30g·L~(-1),45d增殖系数高达7.3;根状茎接种于改良1号+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30g·L~(-1)培养基上分化培养45d后,再转入1/2MS+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)培养基上培养60d,可诱导形成完整植株,芽分化率为86.3%,生根率为100.0%。     

文心兰离体培养技术研究

应用植物离体培养技术研究文心兰增殖技术。结果表明:文心兰原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA4mg·L~(-1)+NAA0.4mg·L~(-1)+活性炭1.5g·L~(-1)+蔗糖20.0g·L~(-1);最佳的幼苗分化培养基是1/2MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.5mg·L~(-1)+蔗糖20.0g·L~(-1)+琼脂10.0g·L~(-1)为佳;最佳的壮苗培养基以1/2MS+NAA1.0mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+活性炭2.0 g·L~(-1)+黄瓜汁10%为佳。     

哈路比葡萄柚茎段的组培快速繁殖

以成年态葡萄柚的茎段为材料,研究不同激素组合、基本培养基对丛生芽增殖的影响,以及再生苗生根、炼苗与移栽技术。结果表明:(1)WPM+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1)为初代培养的最佳培养基,腋芽诱导率达78.33%;(2)继代增殖的最适培养基为WPM+6-BA 0.75mg·L~(-1)+NAA0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1),增殖系数达4.93,芽长达2.62cm;(3)培养基1/2WPM+NAA 0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖40g·L-1+AC 0.1%的生根效果最好,生根率达63.33%,株高3.03cm,根粗壮;(4)生根苗移栽成活率达78%以上。     

山药组培快繁技术条件的优化

以‘明淮2号’山药为试验材料,进行山药快繁技术条件的优化研究。结果表明:初代培养的外植体以中部带芽茎段为好。最好的消毒方法是用70%的酒精浸泡10s,0.1%HgCl_2浸泡10min,污染率为15.0%,死亡率为6.7%。初代培养基为:MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)+PVP100mg·L~(-1)+VC 500mg·L~(-1)+AC0.5g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1),2周后转入相同配方的固体培养基中,褐化率为36.7%,诱导率为81.7%。增殖培养基为:MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+KT1.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)+PP_(333)0.05mg·L~(-1)+琼脂粉4.0g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1),30d后增殖系数为2.97。生根培养基为:1/2MS+NAA0.3mg·L~(-1)+IBA0.2mg·L~(-1)+AC1.0g·L~(-1)+琼脂粉4.5g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),30d生根率达91.3%。组培苗炼苗2周,取出用多菌灵浸泡后移栽到草炭土穴盘中,成活率达70%以上。     

盆花文心兰丛生芽组培快繁技术研究

以文心兰‘豹斑宝石’花梗为外植体,采用丛生芽诱导途径,利用正交设计法,探讨基本培养基(MS、花宝1号、改良1号、改良2号、改良3号)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、水解酪蛋白(CH)等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立文心兰‘豹斑宝石’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对文心兰丛生芽增殖影响的主次关系为6-BA基本培养基NAACH;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良1号+6-BA 3.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CH 0.5g·L~(-1)+白糖30g·L~(-1)+琼脂粉5.0g·L~(-1),50d平均增殖系数达5.8;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3号+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽6个月成活率达96.8%。     

珍珠彩桂的快速繁殖技术

以珍珠彩桂半木质化枝条为外植体,采用丛生芽诱导途径,建立组培快繁体系。结果表明:最佳启动培养基为木本植物培养基(WPM)+2.0 mg·L~(-1)6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)+0.5 mg·L~(-1)赤霉素(GA3)+6.5 g·L~(-1)琼脂+30 g·L~(-1)蔗糖,启动率高达86.4%;最佳增殖培养基为WPM+4.0 mg·L~(-1)6-BA+2.0 mg·L~(-1)6-糖基氨基嘌呤(KT)+0.5 mg·L~(-1)GA3+6.5 g·L~(-1)琼脂+30 g·L~(-1)蔗糖,继代周期25 d,增殖系数高达5.8;最佳生根培养基为1/2WPM+3.0 mg·L~(-1)3-吲哚丁酸(IBA)+6.5 g·L~(-1)琼脂+30 g·L~(-1)蔗糖,培养30 d后生根,生根率达89.5%。炼苗后,移栽到珍珠岩∶蛭石∶泥炭土体积比为1∶1∶1的混合基质中,成活率达到90%以上。     

杂交兰的组织培养与快繁技术

以杂交兰的茎尖为外植体进行离体培养,探讨杂交兰的原球茎的诱导、增殖、分化、生根培养,以及练苗移栽等一系列技术措施。结果表明,原球茎诱导的适宜培养基为Hyponex No.1(花宝1号)+6-BA2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎增殖的适宜培养基为花宝1号+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎分化的适宜培养基为1/2MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);生根培养基以1/2MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA1.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1)为佳,移栽基质选用泥炭土∶珍珠岩3∶1成活率高。     

金线莲的无菌播种和组织培养

金线莲蒴果进行无菌播种成熟期为40~60 d,播种培养基为1/2MS+AC1 g·L~(-1)+香蕉泥100 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1)。增殖培养材料顶芽优于茎段,2个品种间增殖培养基激素最适浓度和配比存在差异。适合金线莲生根壮苗培养基为1/2MS+活性炭1 g·L~(-1)+香蕉泥200 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1)。     

秋石斛离体快速繁殖技术研究

以秋石斛‘三亚阳光’幼芽为外植体,采用丛生芽诱导途径,并利用正交设计法,探讨基本培养基(花宝1号、改良1#、改良2#、改良3#)、植物生长调节剂(6-BA、NAA、IBA)、白糖等对其丛生芽诱导、增殖、生根等关键环节的影响,以期建立秋石斛‘三亚阳光’丛生芽组培快繁技术。结果表明:各试验因素对秋石斛丛生芽增殖影响的主次关系为基本培养基6-BANAA白糖;筛选出丛生芽适宜的增殖培养基配方为改良2#+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),50d平均增殖系数达6.25;筛选出适宜生根的培养基配方为改良3#+NAA 0.3mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+香蕉泥100.0g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),生根率为100.0%;试管苗移栽60d成活率达96.5%。     

文心兰杂种胚培养研究

以文心兰‘红狐狸’与‘百万金币’杂种胚为外植体,采用种胚→原球茎→完整植株→移栽的途径,探讨植物生长调节剂、有机添加物等因素对文心兰杂种胚萌发、原球茎分化、生根等各阶段的影响,建立文心兰杂种胚离体培养及植株再生技术。结果表明,适宜萌发的培养基为花宝+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CM 150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),培养90~100d后相对萌发率为155.6%,原球茎基本不增殖,利于叶的分化;适宜分化的培养基为花宝+6-BA 0.1mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1),分化率显著最高,为87.8%,添加马铃薯泥能显著提高分化率,促进芽苗的粗壮;将分化的芽苗在花宝+NAA 0.2mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.5g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1)培养基上培养40d后生根率为100%,且根系发达,植株健壮;生根苗炼苗后以水苔作为基质,移栽成活率达91.7%。     

过山蕨组织培养技术研究

为建立过山蕨组培工厂化育苗技术体系,本试验以其可育叶为外植体,以GGB途径进行增殖扩繁,开展了组织培养的深入研究。结果表明:过山蕨可育叶诱导形成GGB的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+BA 0.1g·L~(-1)+NAA 0.5g·L~(-1)+AC 0.5g·L~(-1);GGB增殖的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+BA 0.1g·L~(-1)+NAA 0.3g·L~(-1)+AC 0.3g·L~(-1);GGB形成孢子体及完整植株的最佳培养基为1/2MS+琼脂6g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1)+IBA 0.05g·L~(-1)+AC 0.3g·L~(-1);试管苗移栽28d后,成活率在98%以上。     

东方百合遗传转化组培体系的建立

为建立高效稳定的基因转化受体系统,以东方百合"西伯利亚"(Lilium orienta l"Siberia")无菌苗叶片和鳞片叶为外植体,使用不同种类和浓度的生长素与细胞分裂素、蔗糖、抗生素筛选等方法进行了不定芽的诱导分化、试管苗小鳞茎诱导及生根等研究。结果表明:鳞片诱导最佳分化培养基为MS+KT2.0+NAA0.2mg·L~(-1),试管苗小鳞茎诱导培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+KT2.0 mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1)+75g·L~(-1)蔗糖,试管苗叶片分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1),试管苗鳞片叶分化培养基为MS+6-BA 2.0 mg·L~(-1)+2,4-D 0.2 mg·L~(-1)。生根培养基为1/2MS+NAA0.2 mg·L~(-1)。抗生素敏感性试验表明,百合叶片的卡那霉素选择压为100 mg·L~(-1),鳞片叶为120 mg·L~(-1)。     

铁皮石斛茎段原球茎的诱导、分化与植株再生

为建立铁皮石斛Dendrobium officinale茎段原球茎途径的快繁技术体系,以带腋芽的无菌茎段为材料,利用正交试验的方法,研究基本培养基、植物生长调节剂、蔗糖质量浓度和添加物对原球茎的诱导、增殖与分化和生根的影响。结果表明,原球茎诱导的最佳培养基为1/2MS+6-BA4mg·L~(-1)+NAA0.1mg·L~(-1);原球茎增殖与分化的最佳培养基分别为MS+蔗糖30g·L~(-1)和1/2MS+蔗糖10g·L~(-1)+马铃薯泥10%;生根的最佳培养基为1/2MS+NAA1mg·L~(-1)+马铃薯泥10%+香蕉泥10%,成功建立了铁皮石斛茎段从原球茎诱导到植株再生的组培技术体系。     

激素对冰灯玉露不定芽和不定根分化的影响

为了建立冰灯玉露组培快繁体系,以冰晶玉露的叶片为外植体,在含有不同激素的培养基上进行了不定芽诱导、茎的伸长培养和不定根的诱导。结果显示:在MS+BA 1mg·L~(-1)+IAA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)分化培养基上培养60 d后,可以100%诱导出不定芽,每株产生的不定芽数量为30个;在MS+BA 0.25 mg·L~(-1)+IAA 0.5 mg·L~(-1)+蔗糖30 g·L~(-1)茎伸长培养基上培养30 d后,茎长的最高,茎平均长度为3.4 cm;在MS+NAA 0.2mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)的生根培养基上培养30 d后,生根率100%,单株平均生根数最高(6.4个),根系粗壮(平均根长2.4 cm)。     

垂枝樱花组培技术研究

为了建立更高效的垂枝樱花的组织快繁体系,以垂枝樱花的当年生带腋芽茎段为外植体,进行了外植体的灭菌、启动、增殖和生根培养,探讨了适宜的外植体灭菌方法与程序,不同培养基配方对启动、增殖、生根培养效果的影响。结果表明:适宜的表面灭菌方法为75%乙醇浸泡30s,0.1%的HgCl2浸泡10min,最后无菌水冲洗5遍,成活率达66.7%;较适宜的启动培养基为1/2 MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1),分化达68.3%;适宜的增殖培养基为:MS+6-BA 0.3mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+GA310mg·L~(-1),增殖系数为7.0,平均苗高2.9cm;适宜的生根培养基为:1/2 MS+NAA 1.0mg·L~(-1)+IBA 0.5mg·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),生根率达93%。     

花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术研究

以花叶金线莲茎段为外植体,采用正交设计,探讨基本培养基(MS、B_5、改良MS)、植物生长调节剂(TDZ、6-BA、KT、IBA)等对其茎段诱导、增殖及生根等关键环节的影响,以期建立花叶金线莲茎段诱导植株再生培养技术。结果表明:各试验因素对花叶金线莲茎段诱导丛生芽影响的主次关系为基本培养基KT6-BATDZ;筛选出适宜的增殖培养基配方为改良MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+KT 0.5mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30.0g·L~(-1)+琼脂粉3.0g·L~(-1)+卡拉胶3.0g·L~(-1),60d平均增殖系数达4.58;筛选出适宜生根的培养基配方为改良MS+IBA 0.3mg·L~(-1)+活性炭0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)+琼脂粉3.6g·L~(-1)+卡拉胶3.6g·L~(-1),培养60d,生根率为100.0%。     

东亚唐棣增殖培养条件的优化

以东亚唐棣(Amelanchier asiatica)无菌试管苗为材料,研究了不同基本培养基、激素组合、蔗糖浓度以及琼脂浓度对东亚唐棣增殖的影响。结果表明:最为适合东亚唐棣增殖的培养基组合为MS+6-BA 1.00mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+IBA 0.10mg·L~(-1)+40g·L~(-1)蔗糖+8g·L~(-1)琼脂,增殖系数可达6.83,幼苗叶片生长舒展,苗高和茎的生长量也有了很大提高。试验结果将为东亚唐棣工厂化育苗提供技术指导。     

不同培养基对牡丹、芍药杂交种胚培养的研究

目前牡丹、芍药远缘杂交种胚的挽救未能建立起高效稳定的体系,杂交种胚珠和幼胚培养的研究也鲜少报道。本文通过对牡丹、芍药杂交败育前的杂交胚进行培养,研究了不同培养基对杂种胚萌发的影响。以牡丹品种‘凤丹白’(Paeonia suffruticosa ‘Feng dan bai’)、芍药品种‘粉玉奴’(Paeonia lactiflora ‘Fen yu nu’)为亲本,进行远缘杂交。本研究以MS为基本培养基,添加不同浓度的激素组合,对杂交种胚正常生长的初代培养基进行了筛选,认为处理为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+3%蔗糖的膨大率,发芽率及发芽势相对较高,是较好的初代培养基。将初代培养基上的幼苗转移至继代培养基上,30 d后发现,各项指标最优的处理为MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+GA3 0.2 mg·L~(-1)+6-BA 0.2 mg·L~(-1)+3%蔗糖,其次为MS+IBA 0.1 mg·L~(-1)+GA3 0.3 mg·L~(-1)+6-BA 0.2 mg·L~(-1)+3%蔗糖。本试验在生根培养30 d后发现,MS+IBA 0.3 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+3%蔗糖的培养效果较好,根状突起较多,根数及根长都相对较高。胚培养结果表明:培养基种类不同,对胚的诱导分化也有所不同。     

乳茄组培快繁技术

以乳茄嫩枝为外植体,研究了不同消毒方法和不同激素对乳茄诱导、增殖及生根等的影响。结果表明,最适合乳茄外植体的消毒方法为70%的酒精消毒10s,0.1%的升汞消毒6min;最佳芽诱导培养基为MS+6-BA2.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1);最佳继代增殖培养基为MS+BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.05mg·L~(-1)+GA_30.1mg·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1),增殖系数为4.35;最佳生根培养基为1/2MS+IBA0.5mg·L~(-1)+ABT1 0.3mg·L~(-1),生根率达93.5%以上;组培苗移栽适宜基质为泥炭土∶珍珠岩=5∶1,成活率达96.7%。     

观赏水草雪花草的离体培养与快速繁殖

为了促进雪花草的工厂化育苗,以雪花草幼嫩的枝条为外植体,建立了快速无性繁殖体系。结果表明:不定芽诱导增殖培养基最佳配方为改良MS培养基+6-BA2.0mg·L~(-1)+IBA0.1mg·L~(-1)+GA1.5mg·L~(-1);生根培养基配方为改良的MS培养基+NAA 1.0mg·L~(-1)+6-BA 0.1mg·L~(-1)。该离体培养方法能提高雪花的繁殖系数,有效缓解当前种苗不足和缩短上市时间,满足市场需求。