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相似文献
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1.
本文概述了近年鱼类生物技术在中国之发展.在倍数性育种方面,已获得了至少6种同源多倍体和2种异源多倍体;将诱导雌核发育和人工性逆转技术相结合,建立了一套快速获得鱼类自交系的方法,在核移植方面,获得了核、质分别来源于不同种.属和亚科的移核鱼,并成功地以经短期培养的鲫鱼肾细胞作核供体,获得了1尾移核鱼,从而证明了鱼类体细胞仍具发育全能性。用电场诱导鱼类未受精卵和囊胚细胞间,用微束激光诱导受精卵间的融合,均已获得鱼苗,在基因转移方面,围绕外源基因在鱼类的整合、转录、表达及其生物学效应等方面,进行了一系列的研究。所采用的转基因方法包括显微注射、电穿孔及精子载体法等,在分离有价值鱼类基因方面,已获得了3种生长激素基因,2种肌动蛋白基因,1个泌乳素cDNA和1个抗冻蛋白的cDNA。  相似文献   

2.
本文概述了近年鱼类生物技术在中国之发展.在倍数性育种方面,已获得了至少6种同源多倍体和2种异源多倍体;将诱导雌核发育和人工性逆转技术相结合,建立了一套快速获得鱼类自交系的方法,在核移植方面,获得了核、质分别来源于不同种.属和亚科的移核鱼,并成功地以经短期培养的鲫鱼肾细胞作核供体,获得了1尾移核鱼,从而证明了鱼类体细胞仍具发育全能性。用电场诱导鱼类未受精卵和囊胚细胞间,用微束激光诱导受精卵间的融合,均已获得鱼苗,在基因转移方面,围绕外源基因在鱼类的整合、转录、表达及其生物学效应等方面,进行了一系列的研究。所采用的转基因方法包括显微注射、电穿孔及精子载体法等,在分离有价值鱼类基因方面,已获得了3种生长激素基因,2种肌动蛋白基因,1个泌乳素cDNA和1个抗冻蛋白的cDNA。  相似文献   

3.
柏爱旭  周鑫 《江苏农业科学》2012,40(11):248-251
水产动物多倍体诱导是一项具有重要经济价值的生物技术,其诱导方法包括物理、化学以及生物学等方法.关于水产类动物多倍体的诱导在鱼类和贝类中已有过较多的报道,相比之下对十足目甲壳类动物的研究就比较缓慢,仅在日本绒螯蟹、中国对虾、罗氏沼虾等少数虾蟹中有过报道.通过物理热休克法对河蟹进行多倍体诱导可以得到50%的三倍体率和52%的四倍体率,细胞松弛素B(CB)溶液处理河蟹受精卵来进行诱导也获得了58.18%的三倍体率和57.89%的四倍体率.将KCl溶液添加到一定盐度的海水里进行河蟹三倍体诱导试验,在探索到诱导的最佳时间和浓度后获得了100%的三倍体诱导率.本文综述多倍体诱导的原理、方法以及发展过程,对中华绒螯蟹多倍体的多种诱导方法及其诱导效果进行了比较,旨在为中华绒螯蟹多倍体诱导的研究提供参考.  相似文献   

4.
仿刺参(Apostichopus japonicus )多倍体诱导的初步研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
报道了仿刺参(Apostichopus japonicus Liao)多倍体诱导的结果。采用经紫外线照射后的海水成功地使仿刺参分别单独产卵、排精,从而准确地控制了仿刺参的多倍体诱导的开始时间。使用0.2、0.4mg/L细胞松驰素B(CB)在授精后5、10min开始处理受精卵抑制第一极体(PB1)放出,用10、20、30、40mg/L的6-二甲基氨基嘌呤(6-DMAP)分别在授精后5、10、20、28、35min开始处理抑制受精卵PB1、第二极体(PB2)祚出的方法诱导了刺参的多倍体。研究了诱导的药物浓度、处理时间与诱导效果的关系,同时对幼体的成活率等进行了探讨。结果表明,2种药物均可诱导仿刺参产生三倍体和四倍体。采用CB抑制PB1诱导,到达下幼体时,可产生21.3%的四倍体。用6-DMAP抑制PB2放出诱导三倍体,三倍体率可达25.8%。以幼虫浮游期中,处理组和对照组幼虫的摄食、生长、浮游时间以及变态率等方面没有明显差异。  相似文献   

5.
金鳟伪雄鱼的制备及全雌三倍体的诱导   总被引:1,自引:0,他引:1  
以4龄金鳟Oncorhynchus mykiss为试验鱼(雄、雌性平均体重分别为1.7、2.2kg),采用人工诱导雌核发育技术灭活金鳟精子,对受精卵进行热休克处理后正常孵化,获得初孵仔鱼;再用雄性激素诱导全雌二倍体,得到性逆转雄鱼(伪雄鱼);培育至性成熟后进行人工繁殖,采用热休克法对受精卵进行处理获得全雌三倍体鱼类。结果表明:金鳟全雌二倍体的诱导出现率为80%,金鳟伪雄鱼获取成功率为75%;用不同pH人工精浆激活伪雄鱼精巢精子,高pH(9—10)的人工精浆激活受精卵的效果最好,金鳟三倍体的出现率为75%-80%,其中还有一定比率的嵌合体出现。  相似文献   

6.
细胞工程在鱼类育种中的应用   总被引:2,自引:0,他引:2  
介绍了鱼类细胞工程育种的研究现状和成果,其主要技术包括核移植,细胞融合,雌核发育,雄核发育和多倍体诱导,其中雌核发育和多倍体诱导是潜力较大的育种方法,并在生产中得到了应用。  相似文献   

7.
根据获得的鮸鱼应激蛋白(stress-inducible protein I,STI1)基因的EST序列,克隆测序获得鮸鱼STI1基因的全长cDNA序列。鮸鱼STI1基因全长为2 194bp,包括5’非翻译区31bp,3’非翻译区634bp,开放阅读框1 629bp,编码542个氨基酸。根据氨基酸序列推测鮸鱼STI1分子中含有5个酪氨酸激酶磷酸化位点,1个多聚脯氨酸识别位点,2个核定位信号识别位点,9个TPR结构域。对物种间STI1基因比对表明,鮸鱼存在保守的半胱氨酸位点,与其他物种STI1基因的相似性在76.5%~94.3%之间。用邻接法构建的STI1基因的系统发育树表明,硬骨鱼类的STI1基因形成独立的一支,其中鮸鱼与大黄鱼的STI1基因同源性最高。荧光定量PCR结果显示,鮸鱼STI1基因的mRNA主要分布于肌肉和肾脏中。  相似文献   

8.
多倍体在园林植物中广泛存在,由于多倍体具有一些独特的特征,已逐渐成为广大遗传育种学家研究的热点。就同源四倍体与相应二倍体核DNA、雌雄配子育性、受精过程的差异;同源四倍体结实率(或育性)降低的原因及其随世代推移的变化;叶绿体、线粒体与核基因的关系等方面进行了总结和探讨。  相似文献   

9.
赵荣涛  何建瑜  刘慧慧 《安徽农业科学》2012,(36):17492-17494,17546
温度休克法是海洋生物多倍体育种的一种重要手段,具有操作简便、成本低廉、诱导成功率较高等优点,主要包括冷休克和热休克2种方式.文中综述了温度休克法诱导海洋鱼类和贝类多倍体的原理、特点及研究现状,对多倍体未来的研究方向进行了展望,以期为其他海洋生物多倍体诱导提供理论参考.  相似文献   

10.
[目的]获得松江鲈β-肌动蛋白基因cDNA全长序列,并检测松江鲈β-肌动蛋白在组织中的表达。[方法]以松江鲈肌肉总RNA为模板,采用RT-PCR、5′-RACE和3′-RACE的方法扩增β-肌动蛋白基因cDNA片段,用RT-PCR方法检测组织表达。[结果]获得了松江鲈β-肌动蛋白基因cDNA的3个片段,测序后拼接得到1 905 bp全长cDNA序列,其包含了1 128个核苷酸的开放性阅读框,翻译编码375个氨基酸。核苷酸和氨基酸同源性分析发现,松江鲈β-肌动蛋白基因序列与点带石斑鱼、军曹鱼、红鲷鱼等同源性相对较高,与哺乳动物和鸟类同源性相对较低;系统发育分析表明,松江鲈β-肌动蛋白与点带石斑鱼关系最近。RT-PCR分析表明,该基因在检测的肌肉、肝脏、肠和脑4种组织均有表达。[结论]首次得到了β-肌动蛋白基因cDNA全长序列,并证明了松江鲈的β-肌动蛋白基因非常保守。  相似文献   

11.
晁珊珊  张倡珲  海蕾  宫佳琦  林亚秋 《安徽农业科学》2013,41(11):4750-4752,4779
[目的]克隆长丝裂腹鱼的MyoD1基因,并对其进行序列分析。[方法]根据鲤鱼(Cyprinus carpio)的MyoD1基因序列设计引物,采用RT-PCR方法对长丝裂腹鱼MyoD1的全长cDNA序列进行扩增,并对该基因编码氨基酸的理化性质及同源性进行预测和分析。[结果]试验获得了包括完整ORF的长丝裂腹鱼MyoD1基因,该序列长957 bp,编码274个氨基酸,具有MRFs家族基因的典型性碱性bHLH结构;该MyoD1序列与齐口裂腹鱼、鲤鱼、斑马鱼和虹鳟等的MyoD1序列同源性较高,与人、猪、牛等哺乳动物的同源性较低。[结论]该研究为长丝裂腹鱼的肌肉发育和肉质特性形成的分子机制研究提供了基础数据,同时为青藏高原冷水鱼资源的利用与保护提供了指导意义。  相似文献   

12.
为了解青岛地区鱼体汞污染现状,于2007年5月共采集鱼样16种102条,测定鱼体中的总汞含量.测定结果表明,16种鱼总汞含量范围为0.049~0.157 mg/kg,各种鱼类的总汞平均含量未达到背景值,没有样品超标.草鱼,鲫鱼,鲶鱼,沙丁鱼,4种鱼体内总汞含量相差较大;鲤鱼,八带鱼,小黄花鱼3种鱼体内总汞含量相差不大.城阳区鱼样总汞含量由大到小为:八带鱼>白鲢>小黄花>沙丁鱼>鲤鱼>鲫鱼>鲶鱼>乌贼>偏口鱼>草鱼>多春鱼>带鱼>小鱿鱼>花鲢>鱿鱼.市南区鱼样总汞含量由大到小为:沙丁鱼>银鱼>鲫鱼、小黄花>八带鱼>草鱼>鲶鱼>鲤鱼.结果显示鱼样总汞含量符合以下规律:底栖鱼类的总汞含量高于生活在水层中上部的鱼类,肉食性鱼类的汞含量高于杂食性和植食性鱼类的规律.  相似文献   

13.
真核生物延伸因子基因(EF-1α)在蛋白质翻译过程中起着重要的作用,其序列具有高度的保守性,常作为内参基因应用于real time PCR中。通过RT-PCR克隆出建鲤(Cyprinus carpio var.jian)EF-1α的部分cDNA序列,其长度为425 bp,翻译成140个氨基酸,Blast结果显示与其它鱼类leptin的相似性为98%。同时也克隆出建鲤EF-1α相应的DNA序列,共506 bp。cDNA和DNA的序列比对显示克隆出的建鲤EF-1α含有1个相位为0的内含子,在此基础上设计一对跨越内含子的引物,采用SYBR GreenⅠ染料建立了real time PCR方法。以肝脏cDNA为标准品,建立了标准曲线,并进行了融解曲线分析。结果表明,所建立的方法具有特异性强、相关系数高、线性范围广等优点,可应用于建鲤的功能基因表达研究。  相似文献   

14.
黄河鲤生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
[目的]研究黄河鲤生长激素基因cDNA的克隆和原核高效表达。[方法] 从黄河鲤脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR方法扩增并克隆黄河鲤的生长激素(GH)基因cDNA,分析其核苷酸序列和推测的氨基酸序列。[结果] 经克隆得到的黄河鲤生长激素基因的开放阅读框包括633个核苷酸,编码210个氨基酸,其中包括22个氨基酸的信号肽和188个氨基酸的成熟肽。将GH成熟肽的cDNA扩增并克隆入表达载体pET-28a,在大肠杆菌BL21(DE3)表达N 端含6个组氨酸的融合多肽。SDS-PAGE结果表明,0.1 mmol/L IPTG 诱导表达的蛋白约为23.5 kD,其表达量超过蛋白总量的50%,主要为不溶性的包涵体。包涵体经尿素溶解和亲和层析,获得了单一蛋白条带。[结论]该研究克隆到黄河鲤的生长激素基因,构建其原核表达质粒,得到了高效表达的基因工程菌。  相似文献   

15.
李景芬  刘莉  曹访 《农业科学与技术》2011,(12):1943-1945,1961
[目的]克隆草鱼的PKR基因,为草鱼抗病毒基因研究奠定基础。[方法]依据GenBank上斑马鱼(AJ852023.1)和鲫鱼(AY293929.1)的PKR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计了3对简并引物; 采用100μg/ml PolyI:C体外分别处理草鱼肾细胞(Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK)12、36、48h,并提取处理后细胞的总RNA,逆转录后用降落PCR方法扩增这3个处理时间细胞中 PKR 基因。[结果]处理12h时未扩增出PKR基因,处理36和48h时都扩增到了PKR基因,并且表达量随处理时间的增加有所升高,扩增到的部分序列与鲫鱼和斑马鱼的该段序列同源性分别为100.00%和81.48%。[结论]试验成功获得了草鱼PKR基因的部分序列,PolyI:C高效诱导草鱼PKR蛋白表达将有助于开创治疗草鱼类病毒病的一种新思路。  相似文献   

16.
李景芬  刘莉  曹访 《安徽农业科学》2011,(33):20514-20516,20529
[目的]克隆草鱼的PKR基因,为草鱼抗病毒基因研究奠定基础。[方法]依据GenBank上斑马鱼(AJ852023.1)和鲫鱼(AY293929.1)的PKR基因序列,利用Primer Premier 5.0软件设计了3对简并引物;采用100μg/ml PolyI:C体外分别处理草鱼肾细胞(Ctenopharyngodon indellus kidney cells,CIK)12、36、48 h,并提取处理后细胞的总RNA,逆转录后用降落PCR方法扩增这3个处理时间细胞中PKR基因。[结果]处理12 h时未扩增出PKR基因,处理36和48 h时都扩增到了PKR基因,并且表达量随处理时间的增加有所升高,扩增到的部分序列与鲫鱼和斑马鱼的该段序列同源性分别为100.00%和81.48%。[结论]试验成功获得了草鱼PKR基因的部分序列,PolyI:C高效诱导草鱼PKR蛋白表达将有助于开创治疗草鱼类病毒病的一种新思路。  相似文献   

17.
汉江中游产漂流性卵鱼类产卵场的现状   总被引:8,自引:0,他引:8  
于2004年5~8月对汉江中游江段产漂流性卵鱼类产卵场的现状进行了调查。结果表明:汉江中游现有产漂流性卵的鱼类16种,其中经济鱼类仅有草鱼C tenopharyngodon idellus、青鱼Mylopharyn-godon piceus、鲢Hypophthalm ichthysm olitrix、鳙Aristichthys nobilis、长春鳊Parabram is pekinensis、赤眼鳟Squaliobarbus curriculus等8种;产漂流性卵鱼类产卵和产卵的规模与江水的温度、流量、流速、涨水持续的时间紧密相关;汉江中游干流和支流唐白河共有11个经济鱼类产卵场,20个小型鱼类产卵场;干流鱼类产漂流性卵1 632 651万粒,“四大家鱼”、其它经济鱼类和小型鱼类分别占0.57%、2.23%和97.20%;支流唐白河鱼类产漂流性卵52 985万粒,“四大家鱼”、其它经济鱼类、小型鱼类分别占0、14.15%和85.85%。与20世纪70年代相比,产漂流性卵鱼类种类减少9种,全部为经济鱼类;汉江中游干流产卵量增加2.59倍,支流唐白河的产卵量减少76.17%;“四大家鱼”和其它经济鱼类分别减少89.97%和80.17%;干流王甫洲和襄樊的2个重要经济鱼类产卵场与支流唐白河12种经济鱼类的产卵场消失,而小型鱼类产卵量增加9.48倍。汉江中游经济鱼类资源呈衰退趋势。  相似文献   

18.
杂交鲟和匙吻鲟HSP70 cDNA克隆与序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
采用RT-PCR法从杂交鲟(♀Huso huso×♂Acipenserschrencki)和匙吻鲟(Polyodonspathula)肝脏RNA克隆获得HSP70基因的全长cDNA(HSP70 cDNA)。所测定的HSP70 cDNA序列与NCBI/GenBank上登载的鲫(GenBank No.DQ872648)同源性最高,杂交鲟和匙吻鲟分别达96%和98%,杂交鲟HSP70序列为382 bp,匙吻鲟为334 bp。将杂交鲟和匙吻鲟与其它脊椎动物HSP70氨基酸序列用DNAstar软件进行相似度比较,鱼类与哺乳动物、两栖类非洲爪蟾之间HSP70氨基酸序列相似度平均值分别为86.2%和86.8%。鱼类之间的氨基酸序列相似度较大,平均为93.8%,表现出较高的保守性。以HSP70核苷酸序列为分子标记,用MEGA4软件中最大简约法(MP)构建了12个物种HSP70系统发育树,识别出3个大的单系类群:杂交鲟、匙吻鲟、团头鲂、鲫、鲤、斑马鱼聚为类群一(bootstrap 96);虹鳟和大西洋鲑聚为类群二(bootstrap 100);人类和褐家鼠类聚为类群三(bootstrap 89)。  相似文献   

19.
2006-2010年通过"人工诱捕"和"天然捕获"的方法对贺江典型海弯水虱种群动态进行监测,评价生物防控的效果。结果显示:典型海弯水虱在4-6月的寄生数量最少;推测其生命周期为1a,6月是世代交替期,种群世代不重叠或重叠不明显;试验发现草鱼、青鱼、鲤能主动捕食典型海弯水虱。选择典型海弯水虱寄生数量最少的4-6月作为放流时间,于2007-2009年在贺江人工放流草鱼、青鱼、鲤156万尾;比较2006-2010年人工诱捕的典型海弯水虱的数量,发现从2008年开始,典型海弯水虱的数量逐年减少,2010年诱捕到的典型海弯水虱的数量比2006年减少85.1%;天然捕获贺江野生鲮和,发现在2009年9月至2010年8月,典型海弯水虱对鲮和的感染率、平均感染强度和平均密度均比2006年9月至2007年8月显著降低。以上结果初步表明生物防控取得了一定的效果。  相似文献   

20.
四种鱼肉的基本成分及胶原蛋白含量分析   总被引:3,自引:1,他引:2       下载免费PDF全文
通过测定鲈鱼(Lateolabrax japonicas)、鮻鱼(Liza haematocheila)、草鱼(Ctencpharyngodon idellus)和鲤鱼(Cyprinus carpio)的背部肌肉基本成分及羟脯氨酸的含量,对其胶原蛋白含量进行分析.结果显示:4种鱼肉中粗蛋白含量分别为18.23%、19.82%、16.18%、17.07%;胶原蛋白的特征性氨基酸羟脯氨酸含量分别为0.0574%、0.0646%、0.0781%、0.0743%,胶原蛋白含量分别为0.6371%、0.7159%、0.8669%、0.8247%.结果表明:仅从蛋白质含量来看,鱼肉是一种很好的蛋白质来源,并且海水鱼优于淡水鱼.但鱼肉中胶原蛋白含量很低,表明鱼肉不适合作为胶原蛋白的提取原料.  相似文献   

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