广东省花生青枯病病原的分离和遗传多样性鉴定

为了解广东省花生青枯病病原菌的遗传多样性,对广东省主栽花生品种近年来发生青枯病的病株进行病原菌分离,共获得64株分离菌株,其中31株为青枯菌（Ralstonia solanacearum）．遗传多样性分析,发现31株青枯菌菌株均为演化型I型．随机挑取不同分离地点的花生青枯菌菌株进行致病力测定,发现来自不同地区的青枯菌致病力有所不同,其中来自湛江市的ZKRS126菌株致病力明显具有材料特异性,对花生A300致病力强而对花生A281致病力弱．此外,进化树分析的亲缘关系较近菌株致病力也有明显差异,近缘菌株ZKRS126与ZKRS206对花生A300的致病力具有显著性差异．本研究不仅有助于广东省花生青枯病的防治与研究,而且为抗青枯病花生品种的选育和研究提供基础数据和依托材料．     

桉树青枯病病原鉴定和致病力测定

桉树(Eucalyptus)青枯病于1983年和1986年分别在我国广西和广东发现。该病病原菌通过本试验鉴定为青枯假单胞杆菌(Pseudomonas solanacearum Smith),属生理小种1、生化型Ⅲ。桉树青枯菌与木麻黄、番茄及甘薯等青枯菌在形态特征、染色反应、培养特性、烟叶浸润反应、碳水化合物利用能力、硝酸盐还原等生化特性、酯酶同工酶某些主酶带、过氧化物酶同工酶谱和蛋白质氨基酸成分等方面基本相同。从不同桉树树种和地理种源分离到的青枯菌菌株的致病力基本相同。桉树青枯菌对桉树的致病力较强,木麻黄、番茄、甘薯及花生青枯菌对桉树的致病力较弱。经过比饺分析,发现桉树和木麻黄、番茄、甘薯青枯菌对某些寄主的致病力可能与其酯酶同工酶存在较密切的关系。     

四川水稻纹枯病菌分离、纯化及致病力鉴定

在四川特殊的生态条件下,通过对四川省东、南、西、北、中5个区域的55个具有代表性的县(市)水稻纹枯病样本进行分离、纯化与致病力鉴定.田间致病力鉴定研究发现,各菌株间致病力差异显著.通过对这些来自不同县(市)的病原菌与不同抗性水平水稻品种之间致病力差异比较,了解纹枯病菌的分布特点和致病力差异,为有效控制其流行、减少水稻纹枯病对水稻、玉米等农作物的危害打下基础,也为筛选到高抗纹枯病的育种材料和基因资源提供条件.     

青枯雷尔氏菌致病性生物测定方法的研究

采用不同浓度的强致病力青枯雷尔氏菌FJAT-91处理番茄盆栽苗,建立青枯雷尔氏菌致病性生物测定方法.结合菌落形态和特异性引物鉴定结果说明所分离得到的菌株均为强致病力青枯雷尔氏菌.当番茄植株培养至第5d时,4个不同接种浓度处理的番茄植株苗均出现发病症状.采用104 cfu·mL-1处理的番茄植株在第4d发病,但到第8d,...     

茄科作物青枯病原菌的脂肪酸鉴定

 【研究目的】采用脂肪酸鉴定技术对茄科作物青枯病原菌进行鉴定,以期为青枯病的预防与防治提供技术支持。【方法】采用选择性培养技术对茄子、番茄和辣椒病株进行青枯病原菌的分离和纯化,而后对青枯病原菌进行脂肪酸鉴定。【结果】经选择性培养分离得到的36株青枯病原菌中,有33株鉴定为典型的青枯雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）,占91.67%;茄子、番茄和辣椒上的青枯病原菌被鉴定为青枯雷尔氏菌的比例分别为100%、90%和89.47%。【结论】脂肪酸鉴定技术具有快速性、准确性,并可通过计算机的运用使分类达到数据化、自动化,可在茄科作物青枯病的检测中得到广泛的应用。     

青枯雷尔氏菌在植株体内分布及其致病力的异质性研究

 【目的】通过分析青枯雷尔氏菌在不同寄主发病植株、在同一寄主不同侵染状态植株和同一寄主不同发病阶段植株体内分布及其致病力的异质性，从生态位角度来初步探讨该病原菌与植物之间的相互关系。【方法】采用田间采样，室内测定样本的含菌量及其病原菌的致病性（弱化指数），统计分析比较青枯雷尔氏菌在寄主植株体内的分布和致病力的异质性。【结果】番茄和茄子病株体内青枯雷尔氏菌的平均含菌量>100×108 cfu/g，显著高于烟草、花生和生姜（<70×108 cfu/g）。青枯雷尔氏菌的分布在番茄体内依次为根部>中部以上茎>中部以下茎；茄子和花生从根到上部茎依次含菌量逐渐降低；烟草根部和中部茎的含菌量显著高于下部和上部茎；生姜下部茎的含菌量显著高于姜块和中上部茎。不同寄主植物植株体内青枯雷尔氏菌的致病性差异显著，根据弱化指数的划分标准，平均弱化指数的大小依次为茄子>烟草>花生>番茄>生姜；生姜体内的青枯雷尔氏菌的平均弱化指数为0.49（<0.60），明显表现为强致病力，茄子体内的为0.80，接近于无致病力，烟草、花生和番茄为0.64～0.70，属于致病力不确定的菌株。茄子、生姜和花生的健康和发病植株检测的结果表明，仅有花生的健康与发病植株同时存在着青枯雷尔氏菌，而茄子和生姜健株无青枯雷尔氏菌侵染。【结论】青枯雷尔氏菌在不同寄主、不同发病状态、不同生育期植株体内的分布及致病力呈现明显的生态位分化的特征，了解这一特性对于青枯雷尔氏菌控制具有重要意义。     

利用甘薯青枯病菌及其粗毒素测定甘薯品种抗瘟性的相关性研究

用甘薯青枯菌液及其粗毒素在温室内测定甘薯幼苗的抗病性，结果表明青枯菌菌株侵染甘薯幼苗的病情指数与其粗毒素的致萎度之间呈正相关，相关系数为0.9458(n=88)，达极显著水平；用5个不同致病力（强、中、弱）甘薯青枯菌株及其粗毒素分别接种抗、中、感甘薯品种华北48、广薯15、惠红早，结果表明甘薯品种对不同致病力青枯病菌菌株及其粗毒素的抗性呈极显著正相关，相关系数在0.9992-1.0000之间；以不同致病力甘薯青枯菌混合菌株及其粗毒素接种抗、中、感甘薯品种97-10、广薯15、惠红早，结果表明不同抗性甘薯品种病情指数与致萎度之间也存在极明显正相关，相关系数为0.9257-0.9651。说明在室内用粗毒素检测甘薯幼苗的致萎度，能够反映甘薯对甘薯瘟病的抗病或感病水平。     

赣南地区番茄青枯菌菌系多样性分析

【目的】分离鉴定赣南地区番茄青枯病菌,明确菌系分化,为当地番茄抗青枯病育种和病害防治奠定基础。【方法】从江西省赣南地区采集番茄青枯病病株,经选择性平板分离、纯化和分子鉴定,获得不同地理来源的青枯菌Ralstonia solanacearum菌株。通过生理生化测定和接种番茄试验,鉴定青枯菌的生化变种和致病类型。PCR扩增内切葡聚糖酶基因egl序列,明确青枯菌的演化型和序列变种。双层平板培养法测定其对8个不同噬菌体的敏感性。【结果】获得了来自赣南地区9个市(县)的番茄青枯菌菌株44个,其中,41个菌株为生化变种Ⅲ,3个菌株为生化变种Ⅳ;致病力测定结果聚为I、II和III类,其致病力分别为强、中和弱,其中,强致病力菌株占65.9%。所有菌株属于亚洲分支演化型(Ⅰ),并进一步划分为Sequevar13、14、15、17、18、34、44和48等8个序列变种。大部分菌株对供试的8个噬菌体敏感。【结论】赣南地区番茄青枯菌以生化变种III和强致病力菌株为主,对噬菌体较敏感,存在8个序列变种,具有明显的菌系分化现象和遗传多样性。     

烟草青枯菌Tn5突变体库的构建及突变位点分析

为了从烟草青枯菌全基因组范围内发掘致病性相关基因,采用电转化法构建了一个EzTn5转座子介导的烟草青枯菌TXLLJ14-3菌株插入突变体库,该突变体库包含1.2万个突变子,经烟草上的致病性检测,共得到216个无致病力或弱致病力突变菌株。利用TAIL-PCR扩增获得其中15个无致病力烟草青枯菌的Tn5侧翼序列,并对其插入位点进行了分析,结果表明,15个突变菌株的插入位点分别位于核苷酸水解酶、糖基转移酶、转座酶和合成酶等具有不同功能的基因上,这些基因受到干扰或破坏后,可能会抑制致病相关物质的表达或分泌,或者诱导烟草对病原菌产生抗性,从而表现出无致病力特征。     

棉花黄萎病菌系不同组合对致病力的影响

为探讨黄萎病菌系对棉花的侵染规律,以陆地棉耐病品种冀棉20和感病品种邯208为鉴别寄主,在人工培养条件下鉴定和比较了不同培养方式、不同接种方法对6个黄萎病菌系致病力的影响。结果表明:单独培养单独接种时,6个供试菌系的致病力可划分为强、中、弱3种类型,其中V2和V6致病力最强,V1和V3中等,V4和V5最弱。混合培养后接种时,除个别菌系组合在邯208上略有增强外,其余菌系组合的致病力都存在不同程度的减弱;单独培养后混合接种时,其致病力较相应单菌系接种时致病力呈现一定程度的波动,但大部分接种菌系在2个鉴别寄主上的致病力,表现出增强的趋势。     

茄科作物抗青枯病水培法鉴定研究Ⅰ.烟草、辣椒、番茄的水培条件及营养液配方筛选

对辣椒、番茄、烟草幼苗水培条件下营养液通气增氧时间和营养液配方进行了筛选试验.结果表明,在基本满足幼苗正常生长前提下,营养液每小时通气15分钟可满足水中溶氧值的需要;筛选出的MS改良营养液更能增加参试植物的生长量,该营养液加入1 mg/L吲哚丁酸(IBA)有助于辣椒根系的发育.     

青枯菌的运动性野生型菌株的发现和鉴定

运用ＳＭＭ半固体平板法和悬滴法，检测了不同来源的青枯菌野生型菌株１０７株，发现３０株有明显运动性的青枯菌野生型菌株，这与在科学界沿用至今已有２０多年的青枯菌野生型菌株没在运动性＾「１１」的观点不相符。青枯菌的运动性分为爬行运动和游泳２种方式，具有爬行运动能力的青枯菌还表现游泳运动性。同时笔者对数个有运动性的野生型菌株进行了检测，鉴定，结果显示，被检测菌株的检测性状与前人测定的结果相符＾「１－４」。     

烟草感染青枯菌前后POD及同工酶的变化

【研究目的】对烟草感染青枯菌前后的根、茎、叶内过氧化物酶(POD)及同工酶进行比较研究,为抗病育种提供理论基础。【方法】采用比色法测POD酶活,用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)进行POD同工酶的比较。【结果】对烟草感染青枯菌前后,酶活性测定结果表明,烟草叶部POD活性显著高于根部和茎部。烟草接菌后,根、茎、叶内的POD活性均在第3天升至最高,而叶内比对照增高了29.67%。同工酶电泳分析表明,烟草接菌后的同工酶谱带,在条带的数目、种类和各条的相对活性上表现出差异。【结论】POD作为植物的保护酶类,随植物抵抗疾病的过程变化而变化,故与植物抗病性密切相关。     

高产高抗青枯病花生日花一号特征特性及高产栽培技术

阐述了花生新品种日花一号的特征特性、产量表现及推广应用前景,并提出了在花生青枯病严重地区,利用该品种获得高产的一系列措施。     

广东农作物青枯病菌的生化型

比较了１３种寄主植物１２９个青枯病菌株对３种双糖（乳糖、麦芽糖、纤维二糖）和３种已醇（甘露醇、山梨醇、甜醇）的利用情况，结果表明它们大部分（８７．５％）分属于Ｈａｙｗａｒｄ的４个生化型，以生化型Ⅲ为优势生化型（约６５％）。除Ｈａｙｗａｒｄ的４个生化型外，还存在４个其它的生化类型：（１）１个能利用３种双糖和甘露醇、山梨醇而不利用甜醇产酸的马铃薯菌株；（２）３个能利用３种双糖和山梨醇、甜醇而不利用甘露     

我国南方甘薯品种资源抗瘟病鉴定研究

用不同菌系群的薯瘟病菌对７８０份南方甘薯品种资源进行室内抗瘟性鉴定,并在此基础上选取抗瘟性较强的品种,再在不同菌系群的类型田中进行鉴定。鉴定结果表明,室内和田间鉴定论一致,但不同品种对不同菌系群的薯瘟抗性差异显。     

3种杀菌剂对烟草青枯病的室内毒力测定

采用生长速率法测定了3种杀菌剂对烟草青枯病菌（Pscudomonas solanacearum Smith）进行室内抑菌毒力测定。测定结果表明，20％青枯灵可湿性粉剂对烟草青枯病菌菌丝生长的抑制作用最强，相对抑制率达到23．71％～93．66％，在烟草青枯病菌的防治中具有重要的价值。     

香蕉细菌性枯萎病菌实时荧光PCR检测方法的建立

根据香蕉细菌性枯萎病菌与其它细菌菌株16SrDNA序列差异，设计并合成一对引物和一条具有稳定点突变特异性探针，建立了对香蕉细菌性枯萎病菌的实时荧光PCR检测方法。除烟草青枯病菌和马铃薯青枯病菌外，还对其它属细菌菌株进行了荧光PCR检测。结果表明，只有香蕉细菌性枯萎病菌产生荧光，其它细菌都没有荧光产生。从而证明此方法特异性强，灵敏度高，适合病害的快速诊断和口岸检验检疫应用。     

番茄抗青枯病育种方法研究

采用番茄高抗青枯病的抗源材料与符合育种目标的优良品质性状材料进行有性杂交获得的系统材料进行抗青枯病育种方法的研究表明，采用幼苗期鉴定沟汰感病苗，再对抗性苗进行成株期鉴定及经济性状选择的抗病育种方法是有效的，能够筛选到抗性材料，并极大地提高了工作效率。通过上述育种方法育出一批食用性番茄的高抗系统，但经济性状与育种目标要求相差较远。番茄抗青枯病育种需时间长，难度大，抗性不易固定。番茄的经济性状与多是属于数量性状，将抗青枯病性状同其它经济性状很好的结合起来，需要较长的育种过程。实验对番茄果实的大小与抗青枯病的相关性进行了研究，其结果是相关系数为r=-0.02,这似乎在育种过程中可以不予过多注意，说明抗青枯病与其它经验性状相关的研究领域还比较宽阔。     

茄子抗青枯病的育种方法研究

用高抗青枯病的抗源材料与符合育种目标的优良经济性状材料有性杂交，然后进行幼苗期鉴定，淘汰感病株系或感病苗，再对抗性苗进行成株期鉴定及经济性状选择的育种思路，适用于茄子抗青枯病育种。但要获得抗性水平及经济性状均符合育种目标的材料，需要较长的育种时间。对茄子抗青枯病育种研究中发现，经系统选育，虽能筛选出一些高抗青枯病的材料，但经济性状与育种目标尚有一定距离，说明茄子抗青枯病育种是比较困难的。因此，我国茄子抗青枯病育种应采取两步走：第一步进行抗青枯病茄子砧木品种的选育，茄子砧木可以直接利用茄子近缘种或野生种及半栽培种；第二步利用茄子近缘种或野生种及半栽培品种作为青枯病的抗源材料，与具有优良经济性状材料进行远缘杂交，选育高抗青枯病的茄子品种。分两步走，既能解决目前生产上急需茄子抗病品种的问题，又能兼顾长远。