粉蕉新品种组织培养中的防褐化研究

为降低粉蕉新品种组织培养中的褐化现象,提高组培成功率,以粉蕉新品种的健壮吸芽为外植体,研究不同激素浓度、培养条件、防褐剂种类浓度及转接方式对其外植体启动和继代增殖培养过程中组培苗褐化的影响。结果表明,在外植体启动培养阶段,6-BA浓度为1.0 mg/L时,褐化程度最低,新芽长势较好;继代增殖培养过程中,Tm为32℃,转接后前7 d暗培养、后8 d光照培养条件下,防褐化效果最佳;以培养基中添加0.05 g/L活性炭,对继代苗的防褐化效果较好;将继代丛芽分割切好后,先放到无菌水中浸泡1 h,再取出转接到新的继代培养基中,该转接方式的防褐化效果最明显。     

‘洛阳红’牡丹组织培养快速繁殖技术研究

以"洛阳红"牡丹组培苗为试材,探讨了不同基本培养基、激素配比、培养条件、抗褐化物质对"洛阳红"牡丹继代苗增殖生长、生根及褐化的影响.结果表明:DKW基本培养基适宜"洛阳红"牡丹继代增殖;培养基中附加2.0～3.0mg/L BA与0.5mg/L IAA或0.05mg/L NAA配比有利于继代苗分化、生长,而附加玉米素ZT效果不佳;20～25℃对"洛阳红"继代苗增殖影响不大,30℃下试管苗很快老化、枯死,不宜采用:1/2MS附加0.2mg/LNAA或2.0mg/LIAA与2.0mg/L IBA配比可促进"洛阳红"牡丹试管苗不定根诱导;继代和生根培养基中附加0.5g/L PVP可有效减轻‘洛阳红''牡丹组培苗褐变,促进继代苗分化、生长,但对生根没有明显影响.     

几种药物抑制桑树组培苗褐化的研究

组培苗褐化是桑树组培中的难题。培养基中加入聚乙烯吡咯烷酮(PVP K-90)、L-赖氨酸、活性炭粉和L-抗坏血酸均能抑制组培苗褐化,添加聚乙烯吡咯烷酮(PVP K-90)0.7 g/L可使转接时间延长至25~30天,效果显著,其它药物不明显。     

库拉索芦荟组培中的褐变现象及防止

[目的]研究库拉索芦荟组培中的褐变现象,寻求防止褐变的有效措施。[方法]以库拉索芦荟茎尖、中部茎段和根茎为外植体,以MS为基本培养基,分别附加NAA0.1 mg/L和不同浓度的6-BA(1.0、1.5、2.0、3.0、4.0 mg/L),研究不同外植体类型、激素浓度以及培养温度、活性炭等因素对芦荟组培褐变的影响。[结果]用库拉索芦荟茎尖做外植体,MS+6-BA2.0 mg/L+NAA0.1 mg/L做培养基,芦荟组培褐化程度较轻;培养基中加入活性炭500.0 mg/L,环境温度控制在25℃有利于减轻褐变。[结论]茎尖是最佳的外植体,适宜的6-BA浓度(2.0 mg/L)可抑制褐变,添加活性炭和适宜的培养温度均能防止褐变死亡的发生。     

牡丹愈伤组织增殖及褐化研究

【目的】提高牡丹愈伤组织增殖倍数和质量，减轻增殖过程中的褐化现象，为牡丹愈伤组织增殖 提供途径。【方法】以牡丹胚轴、子叶愈伤组织为材料，对不同添加物组合及浓度、不同预培养时间等方法 手段进行探究。【结果】牡丹胚轴愈伤组织继代增殖最佳培养基组合是 PVP 1.0 g/L+IAA 0.2 mg/L+TDZ 1.0 mg/L+GA3 1.0 mg/L，增殖倍数为 5.75；子叶愈伤组织继代增殖的最佳培养基组合是 PVP 2.0 g/L+IAA 0.5 mg/L+TDZ 0.5 mg/L+GA3 1.0 mg/L，增殖倍数为 5.50。采用预培养 30 d 的外植体，可有效提高增殖倍数并减轻褐化。 1.0 mg/L GA3 有利于抑制愈伤组织增殖过程中的褐化现象，并促进愈伤组织增殖。呈淡黄绿色表面附着絮状物且 质地松软的愈伤组织在继代增殖过程中不易褐化，且中后期体积增殖变化明显。【结论】牡丹愈伤组织增殖中 加入 1.0 mg/L GA3 和采用预培养 30 d 的愈伤组织，可以获得较高的增殖倍数并有效抑制褐化，呈淡黄绿色且质 地松软的愈伤组织是良好的愈伤组织增殖状态。     

山薯组培苗继代培养基配方筛选

以山薯组培苗带腋芽茎段为外植体,以MS为基本培养基,探讨植物生长调节剂6-BA（0.5、1.0、2.0 mg/L）或TDZ（0.01、0.10、0.50、1.00、2.00、4.00 mg/L）、不同培养方式和活性炭对其继代培养的影响。结果表明,添加不同浓度6-BA对山薯组培苗增殖系数、茎长及腋芽点芽球的影响不明显,而随着TDZ浓度的升高,山薯组培苗增殖系数和茎长逐渐降低而芽球显著增加,茎段腋芽生长受到明显抑制。山薯组培苗较优的继代培养基为MS＋1.0 mg/L 6-BA＋0.1 mg/LNAA＋30 g/L蔗糖＋1.5 g/L活性炭的液体培养基。液体培养基利于促进山薯组培苗增殖,其增殖系数、茎长、植株鲜重和干重显著高于固体培养基。活性炭的添加可以减少褐化,促进组培苗的增殖培养。此外,培养方式与活性炭交互作用对组培苗茎长、增殖系数、植株鲜重及干重无显著影响。     

山葵组培中抗褐化剂的筛选及其对增殖和生长的影响

以岛根3号山葵为试验材料,研究活性炭(AC)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、L-半胱氨酸、柠檬酸、抗坏血酸(维生素C)、二硫苏糖醇(DTT)、硝酸银(AgNO_3)、硫代硫酸钠(Na_2S_2O_3)这8种不同浓度抗褐化剂在山葵组培继代培养过程中的抗褐化效果及其对山葵增殖和生长的影响。结果表明,活性炭、AgNO_3抗褐化效果相对较好,活性炭0.200~0.800 g/L、AgNO_30.005~0.025 g/L继代培养3个月时的山葵组培苗褐化指数为0;维生素C抗褐化效果次之,Na_2S_2O_3抗褐化效果相对最差;活性炭处理的植株长势相对最好,但增殖系数相对较低,DTT处理的植株增殖系数相对最高,长势相对较好,但不能完全消除褐化;Na_2S_2O_3处理的植株增殖系数相对最低,且长势最差。0.025 g/L AgNO_3处理的效果相对最好,继代培养3个月时的褐化指数为0,增殖系数为5.22,且植株长势良好,为理想的抗褐化剂。     

蝴蝶兰防褐化技术探讨

兰科植物在组培快繁时 ,存在着易褐变死亡的问题。在培养基中添加1～2g/L活性碳 ,适时切除培养物的褐化部分及时更换新鲜培养基 ,能有效地抑制外植体褐变死亡的发生。培养基中加入10 %椰子水 ,能促进原球茎的生长 ,减少原球茎增殖过程中的褐变     

福建柏愈伤组织诱导与抗褐化研究

【目的】比较不同抗褐化剂减轻福建柏组织培养过程中褐化现象的效果,以提高福建柏愈伤组织培养的增殖分化能力。【方法】以福建柏鳞叶和茎段为外植体,通过单因素试验,研究0.0～2.5 mg/L NAA和2,4 D及0.0～3.0 mg/L IBA对愈伤组织诱导率与生长状态的影响;以福建柏茎段为外植体,采用单因素和多因素组合试验,研究100～2 000 mg/L聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）、100～1 000 mg/L活性炭（AC）和V_C以及不同质量浓度VC与AC组合,对愈伤组织污染率、死亡或褐化率及诱导率的影响;以诱导的愈伤组织为材料,采用单因素试验,研究100～1 000 mg/L PVPP、100～300 mg/L V_C、200～1 000 mg/L AC、30～100 mg/L V_B对愈伤组织增殖生长量、增殖率、褐化率及PPO、POD活性的影响。【结果】① 不同质量浓度NAA、2,4-D和IBA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率总体高于茎段,各生长素对福建柏鳞叶和茎段愈伤组织的诱导率均表现为NAA＞IBA＞2,4-D,所有处理中以1.0 mg/L NAA对福建柏鳞叶愈伤组织的诱导率最高,为83.33%;以0.5 mg/L NAA对茎段愈伤组织的诱导率最高,为61.11%;愈伤组织生长状态和抗褐化效果优劣依次为NAA、2,4-D、IBA。②仅100 mg/L V_C+200 mg/L AC处理的愈伤组织污染率低于不添加抗褐化剂的对照;死亡或褐化率仅500 mg/L PVPP处理与对照相同,均为0.00%,其余处理均高于对照;诱导率则以不同质量浓度PVPP、1 000 mg/L VC、100 mg/L V_C＋200 mg/L AC处理与对照相当或高于对照,其余处理均低于对照;愈伤组织生长状态总体以PVPP处理表现最优。③仅300 mg/L PVPP、200和400 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率高于对照,增殖生长量仅100和200 mg/L PVPP、100 mg/L V_C、200 mg/L AC处理高于对照;所有处理中以200 mg/L AC处理的愈伤组织增殖率和增殖生长量最高,分别为70.00%和10.07 g;各抗褐化剂对福建柏愈伤组织增殖效果的优劣依次为PVPP、AC、V_C、V_B。④不同抗褐化剂处理的愈伤组织褐变率均呈先增加后趋于稳定的变化趋势,但变化幅度存在显著差异;各抗褐化剂的抗褐化效果优劣依次为AC、PVPP、V_C、V_B。⑤不同质量浓度PVPP、V_C、AC处理对福建柏愈伤组织PPO和POD活性的影响具有显著差异,但各处理PPO活性均与对照无显著差异,POD活性以500 mg/L AC处理显著高于其他处理。【结论】在福建柏愈伤组织诱导阶段,愈伤组织的褐化与生长素种类有关,生长素NAA、2,4-D适用于福建柏愈伤组织的诱导,IBA诱导的愈伤组织容易褐化,添加适量抗褐化剂能减少愈伤组织的褐化情况。在愈伤组织增殖培养阶段,适宜质量浓度的PVPP、AC作为抗褐化剂能有效减缓福建柏愈伤组织的褐化进程,保持愈伤组织的正常增殖生长,但高质量浓度的抗褐化剂会抑制愈伤组织的生长。     

史密斯桉组织培养技术及褐变问题研究

对史密斯桉(Eucalyptus smithii)的组织培养和褐变控制等进行探讨,结果表明:初接种采用MS BA 0.2 mg/L IBA 1 mg/L培养基,芽诱导率为40%;继代采用MS BA 0.2 mg/L IBA 0.8 mg/L培养基,增殖系数可达4,芽抽茎成苗率30.1%;生根采用MS IBA 2 mg/L培养基,根诱导率36.7%,平均生根2.4条.培养基中BA 质量浓度为0.2～1.0 mg/L,有利于芽的生长,但超过1.0 mg/L时反而抑制芽的生长.不同培养基添加物减轻褐变的效果不同,而同种添加物不同浓度的效果也不一样,加入50 mg/L PVP或100 mg/L V-C能显著减轻褐变,褐变率分别降低10%和8.3%.暗培养法虽能有效控制褐变,但严重影响愈伤组织和芽的生长,不宜采用.     

牡丹组织培养若干影响因子研究

以‘太平红’牡丹为材料,研究了不同灭菌方式、抗褐化物质、激素配比、培养基、生根培养条件对牡丹组织培养的影响。结果表明:以0.1%升汞液消毒8 min,再用7%次氯酸钠溶液消毒8 min灭菌效果最佳,鳞芽、土芽和种子的污染率分别为0、4.5%和22.0%;在改良MS培养基中联合添加PVPP 0.5 g/L和AC 0.5 g/L可有效减少牡丹外植体的褐化;改良MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+GA 0.3 mg/L+CH 0.5 g/L+PVPP0.5 g/L+AC 0.5 g/L适宜牡丹鳞芽的诱导;MS+BA 1.5 mg/L+NAA 0.2 mg/L+PVPP 1.0g/L适宜于牡丹芽的增殖;1/2MS+IBA 5 mg/L+AC 0.5 g/L适用于牡丹试管苗生根。     

金线莲组织培养增殖培养基的筛选

[目的]筛选最佳的金线莲增殖培养基。，[方法]以金线莲组培苗的茎段和顶芽为外植体进行增殖培养，在光照时间12h／d，光照强度1200lx，温度（25±2）℃，pH值为5．8培养条件下比较不同基本培养基、细胞分裂素、生长素、添加物等因素对金线莲生长状况的影响。[结果]通过对不同培养基的培养效果进行对比分析后筛选出适宜的培养基分别是：生芽增殖最佳配方为MS＋琼脂7g/L＋蔗糖25g／L＋NAA0．2mg／L＋6-BA2mg／L；壮苗培养基为MS＋琼脂7g/L＋蔗糖25g/L＋蛋白胨2g／L＋花宝1号3g/L＋香蕉100g／L＋活性炭1g／L和1／2MS＋琼脂7g／L＋蔗糖25g／L＋蛋白胨2g／L＋香蕉100g／L＋活性炭1g／L。[结论]添加马铃薯、香蕉、蛋白胨、花宝一号、活性炭等添加物能显著地促进金线莲外植体的分化与生长。     

满天星茎尖试管苗的继代培养基研究

探讨了满天星试管苗继代培养过程中,不同生长调节剂、碳源、水质、活性碳对芽增殖效果的影响.结果表明,NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L的生长调节剂组合下,试管苗增殖效果最好,芽的长势好,增殖倍数达5.0;用40 g/L的市售白糖代替30 g/L的化学纯蔗糖作为培养基的碳源,既可降低配制培养基的成本,又不影响苗的增殖和质量,可用于满天星试管苗的商业化生产;但以自来水代替蒸馏水对试管苗进行继代培养,则不利于苗的生长和增殖;在培养基中加入0.2%的活性碳有利于试管苗株高的增加,但不利于芽的增殖.     

褐变抑制剂对黄芩愈伤组织褐变及次生代谢产物的影响

研究了不同褐变抑制剂对黄芩愈伤组织继代培养中褐变、生长以及黄芩愈伤组织次生代谢产物黄芩苷、黄芩素含量的影响。结果表明：在MS＋0．5mg／L2，4-D＋1．0mg／L6-BA继代培养基中分别添加1．0g/L植酸、10mg／L抗坏血酸、2．0g/L聚乙烯吡咯烷酮能有效抑制黄芩愈伤组织褐变，促进其生长。在综合考虑愈伤组织的褐变率、生长增殖倍数（干重）基础上，以黄芩苷产量为指标，添加10mg／L抗坏血酸＋1．0g/L植酸组合效果最好；以黄芩素产量为指标，添加1．0g/L植酸效果最好。     

不同糖源及蔗糖质量浓度对牡丹愈伤组织褐化的影响

以牡丹品种珊瑚台组培苗的愈伤组织为材料,研究不同糖源及蔗糖质量浓度条件下愈伤组织继代培养的褐化状况。结果表明:同一质量浓度下添加不同糖源的培养基对珊瑚台愈伤组织的继代培养效果以蔗糖、麦芽糖较好,褐化率分别为5.56%和4.76%,适宜培养时间均为30d;不同蔗糖质量浓度的培养基对珊瑚台愈伤组织的继代培养效果以50g/L为最佳,褐化率为4.55%,适宜培养时间为30d。     

中国李Nubiana离体叶片愈伤组织诱导的研究

以Nubiana叶片为试材,对其愈伤组织的诱导、继代培养及褐变调控进行了研究。结果表明:Nubiana叶片愈伤的诱导及继代培养以WPM附加BA 0.5 mg/L和2.4-D 2.0 mg/L的培养基上效果最好;0.1%的柠檬酸(CA)具有明显地促进愈伤组织生长、抑制褐变的作用,而聚乙烯吡咯烷酮(PVP)的效果最差;3%的葡萄糖(Glu)最适于愈伤组织的诱导及继代。综合以上研究结果,获得较好的愈伤组织的适宜培养条件是:WPM BA 0.5 mg/L 2,4-D 2.0 mg/L Glu 3% CA 0.075%~0.1%,暗培养28~30 d。     

蝴蝶兰组织培养与快速繁殖技术研究

以残败花梗为外植体进行组织培养,建立了蝴蝶兰的无菌繁殖体系,研究了培养基中不同种类植物生长调节物质及其浓度比例对休眠芽的萌发、丛生芽的诱导以及试管苗生根的影响,筛选出了最佳培养基组成;研究了活性炭、PVP、温度、暗培养对培养基褐化的影响。结果表明:在1/2 MS+6-BA 3.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+10%香蕉汁+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上休眠芽的诱导效果最好,诱导率可达87.5%;在1/2 MS+6-BA 6.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+10%香蕉汁+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上丛生芽的诱导效果最好,增殖系数可达3.15;在1/2 MS+NAA 0.5 mg/L+活性炭1 000 mg/L+3%蔗糖+0.6%琼脂的培养基上生根效果最好,生根率可达95%,平均每株生根3.11条左右,炼苗后移植成活率可达90%。     

穿龙薯蓣愈伤组织诱导及其高产系的筛选

以穿龙薯蓣不同外植体为材料诱导愈伤组织并进行高产无性系的筛选,结果表明：种子是诱导愈伤组织的最佳外植体,最佳诱导培养基为MS＋6-BA2.0mg/L＋NAA2.0mg/L＋2,4-D2.0mg/L,诱导率最高可达80.8%,愈伤诱导过程中没有出现褐化,愈伤组织生长迅速,平均每天可以增殖4.7mg。随着继代次数的增加,愈伤组织的生长速度增加,继代4-5次后生长最快,最高可达9.33mg/d。不同无性系及同一系在不同继代过程中都表现出差异,经过筛选,得到稳定的高产无性系8-31121和8-31123。     

邓恩桉继代增殖培养条件研究初报

为提高邓恩桉组培苗的增殖系数,降低组培苗生产成本,获得健壮的邓恩桉组培苗,通过不同基本培养基、谷氨酸、培养基不同pH值以及不同光照强度对邓恩桉继代培养增殖的影响试验,找到了邓恩桉的组织培养中继代增殖的适宜条件。结果表明,基本培养基、谷氨酸、pH值和光照强度对试管苗的继代增殖都会产生不同程度的影响。基本培养基以改良H为好,添加20mg/L的谷氨酸有利于试管苗的生长,pH值6.2最为适合,最合适的光照强度为2500lx。因此,适合邓恩桉继代增殖的培养条件为:改良H BA0.2～0.4mg/L NAA0.1～0.2mg/L IBA0.2mg/L LH500mg/L 谷氨酸20mg/L,pH6.2,光照强度2500lx。     

果桑离体组织培养研究

以果桑为材料,对其进行组织培养,结果表明:基本培养基MS较有利于果桑芽体的萌发与生长;初代培养最佳培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA0.1mg/L;继代培养最佳培养基为MS+BA2.0mg/L+NAA0.20mg/L+GA31.0mg/L;生根培养最佳培养基为1/2MS+NAA0.2mg/L+IBA0.5mg/L。