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相似文献
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1.
比较了几种霉菌(毛霉、根霉、曲霉和青霉)在对数生长末期和稳定期末期的胞内和胞外甲壳素脱乙酰酶的活力。研究结果表明:(1)各霉菌的胞内和胞外都具有甲壳素脱乙酰酶活力,而且胞外酶的活力普遍大于胞内酶的活力;(2)处于对数生长期末期的毛霉菌株产甲壳素脱乙酰酶活力最高,其胞外酶活力达到了97.2±4.2 U/g干菌丝体。酶学特性研究表明:该酶的最适温度为50℃,最适pH约为7.2,低温保存稳定性较差,每24小时酶活力下降30%以上。  相似文献   

2.
甲壳素脱乙酰酶在壳聚糖制备中的应用进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
作为一种资源极其丰富的天然高分子化合物,甲壳素的研究与开发受到各国的普遍重视,其经脱乙酰化的产物-壳聚糖因具独特的物化及生物学特性而被广泛应用。而采用甲壳素脱乙酰酶能制备出性能独特的壳聚糖。本就甲壳毒脱乙酰酶在壳聚糖制备中的应用及研究进展作一综述。  相似文献   

3.
采用快速扩增cDNA末端(RACE)克隆技术,通过设计甲壳素脱乙酰酶简并引物,从总状毛霉Mucor racemosus菌丝体中克隆了CDA2的基因(EF468349)及其全长cDNA(DQ678929)序列。与已获得的总状毛霉菌 cda1基因相比, cda2基因中不含内含子。总状毛霉 cda2全长cDNA为1 378 bp,包含23-bp 5’端非翻译区、1 254 bp开放阅读框和101-bp 3’端非翻译区,编码一条由418个氨基酸残基组成的多肽链,其N端包含一段21个氨基酸残基组成的信号肽,在150~272氨基酸残基区存在一个多糖脱乙酰酶保守结构域。通过构建pET28a-cda2表达载体和进行原核表达研究,结果显示:原核表达产生的重组蛋白CDA2的分子量约为46 ku,表达形式以包涵体为主,纯化获得的重组蛋白CDA2具有甲壳素脱乙酰酶催化活性。本研究为进一步研究总状毛霉CDA2的结构和功能奠定了基础。  相似文献   

4.
周勇 《安徽农学通报》2021,27(11):27-31,118
壳寡糖是甲壳素脱除乙酰基和降解后的低分子聚合物,因其具有黏度低、水溶性好、保湿性强、吸收能力强及生物相容性好等特性而具有广泛的应用价值.传统生产壳寡糖工艺存在能耗高、污染重且脱乙酰度不均匀等问题,而酶法制备壳寡糖能有效避免上述问题.当前,酶法制备壳寡糖的关键酶在于甲壳素脱乙酰酶.该文介绍了甲壳素脱乙酰酶的来源与酶学性质,结构与催化机理以及其生产菌株的选育,以期为后续产业化应用提供参考.  相似文献   

5.
使用蜗牛酶对水溶性部分脱乙酰化甲壳素进行降解,由粘度降低(△1/[η])对时间的变化曲线确定降解反应初始速率,该降解曲线呈非线性,而且浓盐酸降解的曲线呈现较好的线性。随着甲壳素脱乙酰度的降低,酶降解反应速率迅速增加,表明乙酰基对蜗牛酶降解甲壳素起着重要作用。对蜗牛酶浓度和底物浓度对降解反应速率影响的研究表明该酶反应遵照Michaelis-Menten动力学。  相似文献   

6.
蜗牛酶降解部分乙酰化甲壳素的动力学   总被引:1,自引:0,他引:1  
使用蜗牛酶对水溶性部分脱乙酰化甲壳素进行降解,由粘度降低(△1/[η])对时间的变化曲线确定降解反应初始速率,该降解曲线呈非线性,而且浓盐酸降解的曲线呈现较好的线性。随着甲壳素脱乙酰度的降低,酶降解反应速率迅速增加,表明乙酰基对蜗牛酶降解甲壳素起着重要作用。对蜗牛酶浓度和底物浓度对降解反应速率影响的研究表明该酶反应遵照Michaelis-Menten动力学。  相似文献   

7.
 【目的】研究由蜜蜂球囊菌引起的真菌性疾病白垩病的侵染机制,以及蜜蜂球囊菌胞外蛋白酶的种类及其特性。【方法】利用人工合成的培养基,在体外诱导蜜蜂球囊菌分泌胞外蛋白酶,用硫酸铵沉淀和透析,获得初酶液,利用相应的底物对酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶、弹性蛋白酶和胰蛋白酶的活力进行测定。【结果】蜜蜂球囊菌分泌的胞外酶主要有酪蛋白酶、偶氮酪蛋白酶、胶原蛋白酶3种,无弹性蛋白酶和胰蛋白酶。对这3种酶的最适温度、pH值以及热稳定性和酸碱稳定性进行了测定。这3种胞外酶的最适反应温度都在40℃左右,最适pH为7左右,均不耐高温,热稳定性差,在中性的pH环境下比较稳定。【结论】蜜蜂球囊菌可以分泌多种胞外蛋白酶,它们的最适pH和温度与蜜蜂消化道内的环境一致。  相似文献   

8.
【目的】研究美国白蛾(Hyphantria cunea)几丁质脱乙酰酶(chitin deacetylase,CDA)基因的酶学性质,了解其在昆虫生命过程中如何发挥功能,为美国白蛾的生物防治提供新靶标。【方法】对家蚕(Bombyxmori)、棉铃虫(Helicoverpa armigera)和云杉卷夜蛾(Choristoneura fumiferana)3种鳞翅目昆虫的几丁质脱乙酰酶2序列保守域进行分析,采用同源比对方法,设计几丁质脱乙酰酶2基因特异引物,利用PCR扩增该基因全长c DNA序列;构建原核重组表达载体p ET30a-Hc CDA2,克隆获得编码美国白蛾Hc CDA2的基因,IPTG诱导蛋白表达,SDS-PAGE电泳检测;构建重组杆状病毒表达载体p Fast Bac-Hc CDA1和p Fast Bac-Hc CDA2,脂质体转染法转染昆虫细胞Hi5,分别获得P1、P2、P3病毒,收集P3病毒上清,得到美国白蛾Hc CDA1(前期研究所得)和Hc CDA2重组蛋白,Western blot分析;重组蛋白Hc CDA1和Hc CDA2经硫酸铵粗纯化后,以对硝基乙酰苯胺为底物,测定重组几丁质脱乙酰酶Hc CDA12的酶活力,对其最适反应温度、最适p H以及金属离子的影响等酶学性质进行研究。【结果】获得了编码美国白蛾几丁质脱乙酰酶2基因全长c DNA序列,命名为Hc CDA2(Gen Bank登录号:KT781841),基因全长1.6 kb,该基因在大肠杆菌中成功表达61 kD目的蛋白,免疫家兔获得Hc CDA2蛋白的特异性多克隆抗体。Western blot分析结果表明,Hc CDA1和Hc CDA2在昆虫细胞(Hi5)中均成功表达约80 k D蛋白。酶学性质研究表明,昆虫细胞中分泌表达的Hc CDA1和Hc CDA2均具有催化活性,两种酶的最适反应温度均为50℃,当温度达到80℃时,Hc CDA2几乎失去酶活力;Hc CDA1酶促反应适宜的p H范围为7.0—9.0,并且Hc CDA1和Hc CDA2酶促反应的最适p H均为8.0;在最适反应条件下,Hc CDA2蛋白酶活力均高于Hc CDA1蛋白酶活力;Mg~(2+)、Zn~(2+)、Mn~(2+)和Ca~(2+)对Hc CDA1和Hc CDA2酶促反应整体呈抑制趋势,随浓度增大,Zn~(2)+对Hc CDA1抑制作用逐渐增强,而Mg~(2+)对Hc CDA1的抑制作用则呈现先升高后降低的趋势,而且Mg~(2+)和Ca~(2+)对Hc CDA2的抑制作用也是呈现先升高后降低的趋势。Co~(2+)和Fe~(2+)对Hc CDA1和Hc CDA2酶促反应有激活作用,随浓度增大,Fe~(2+)激活作用越强,而Co~(2+)激活作用则呈现先升高后降低的趋势。【结论】克隆了编码美国白蛾几丁质脱乙酰酶2基因(Hc CDA2),在原核细胞中表达61 k D目的蛋白,免疫家兔获得Hc CDA2蛋白的特异性抗体。得到具有活性的美国白蛾几丁质脱乙酰酶Hc CDA1和Hc CDA2,两者在体外均检测到催化活性,两种酶的最适反应温度均为50℃,最适pH均为8.0。  相似文献   

9.
[目的]制备高脱乙酰度、高黏度的壳聚糖。[方法]通过正交试验,研究甲壳素品种和粒度、碱液浓度、碱处理方式、温度5个因素对壳聚糖脱乙酰度的影响,利用优化条件制备壳聚糖后,测定其黏度和脱乙酰度。[结果]不同因素对壳聚糖脱乙酰度的影响依次为碱处理方式>碱液浓度>温度>甲壳素粒度>甲壳素的品种。优化的壳聚糖制备条件为碱处理方式1+1+1、碱液浓度50%、温度110℃、甲壳素粒度20、甲壳素的品种为东海小虾壳。制备的壳聚糖的脱乙酰度和黏度分别为94%和2760 mPa.s。[结论]将得到的壳聚糖制成壳聚糖醋酸膜,对活性橙的染料废水有明显脱色效果。  相似文献   

10.
酵母菌C10产菊粉酶酶学性质的研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用菊粉酶活力测定的方法研究了酵母菌C10所产菊粉酶的酶学性质。该酶的最适温度和最适pH分别为50℃,5.5。在此条件下,该酶酶活力达到12.0U/mL,I/S值为14.0,其水解菊粉后低聚糖得率为29%。1.5%菊芋干粉为合成菊粉酶较好的诱导物;Mn2 ,Ca2 ,Mg2 对菊粉酶有激活作用,Zn2 ,Cu2 ,Fe2 有抑制作用。该菊粉酶中胞外酶,胞壁酶,胞内酶分布为7.5∶0.5∶2.0。研究了底物浓度对酶反应的影响,当底物浓度达到20mg/mL时,产物浓度基本不变,反应初速度达到最大值。  相似文献   

11.
利用虾壳和蟹壳制取壳聚糖影响壳聚糖质量的因素有制取时的温度、保温时间、碱液的浓度,实践证明;低于30%的碱液浓度:或高于110℃的温度处理,都不可能获得高粘度的壳聚糖;而碱浓度50%,反应温度100~105℃,保温时间1h可获得条件粘度,(恩氏法)E_505.90的壳聚糖,可用于糖化酶固定化,利用高粘度的亮聚糖载体溶于稀酸的特性,制成均相的胶体溶液,用于糖化酶的固定经凝聚反应做成活性高,稳定性强的固定化酶,其活力可达18500单位/g,活力回收达66%以上,在半年时间内,经常使用,活力保持90%以上。  相似文献   

12.
甲壳素/壳聚糖的研究与应用概况   总被引:7,自引:0,他引:7  
介绍了甲壳素,壳聚糖这种天然高分子多聚糖独特的生理性质和一般制备方法,并对其在医学,食品工业和农业等领域的应用作了概括性综述.  相似文献   

13.
甲壳质及其衍生物的应用   总被引:5,自引:0,他引:5  
综述了甲壳质及其衍生物的理化性质、生物学功能功能及其在生物、医学、工业、农业等领域的应用。  相似文献   

14.
由于几丁质产品可应用在医药、化工、环保、食品、农业等领域 ,有人认为这种资源可能取代石化工业成为本世纪的重要产业。几丁质类物质目前用途最广的是保健食品领域 ,在各领域之应用全球市场每年至少有 1 9亿美元以上。台湾地区的产品几乎都来自岛外 ,1 995年进口值约为台币 2亿左右 ,营业额推估每年在台币 7~ 9亿元 ,且逐年在快速成长之中 ,目前原料生产厂家有 3家 ,进口业界已超过 2 0家 ,本文仅就台湾几丁质类产业研究发展的现况与展望进行探讨。  相似文献   

15.
人们期望无污染、无残留的绿色水产品。但近年来,随着水产养殖密度和规模迅速扩大,水产动物病害频发,滥用抗生素所导致的菌株耐药性等问题逐渐凸显,这给水产养殖可持续发展、绿色发展带来挑战。而壳寡糖和几丁寡糖由于无毒、无害、无残留,具有多种生物活性功能且来源广泛,逐渐被众多学者重视并研究。壳寡糖是几丁质或者壳聚糖经过酶解法、化学法或者物理法而获得的低聚糖,几丁寡糖是几丁质的降解产物或壳寡糖的乙酰化产物。目前,有关壳寡糖和几丁寡糖作为绿色的饲料添加剂、疫苗佐剂和水产品保水保鲜剂的研究已经开展,其在水产养殖中具有非常广阔的发展空间和应用前景。基于此,对壳寡糖和几丁寡糖的制备方法进行了总结,探讨了壳寡糖和几丁寡糖在水产动物饲料添加剂、疫苗佐剂和水产品保水保鲜中的应用,突出其调节水生动物免疫、促生长、抗氧化、影响鱼类体成分等方面的生物活性,以期为壳寡糖和几丁寡糖在水产上的深入研究和产业化应用提供参考。  相似文献   

16.
昆虫β-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶研究进展   总被引:2,自引:0,他引:2  
β-N-乙酰葡萄糖胺糖苷酶是昆虫几丁质代谢中的一种关键酶,在昆虫的多种生理活动中发挥重要作用。因其能够水解几丁质,从而破坏昆虫体壁和围食膜。可以将此酶导入昆虫的体内来破坏其正常的组织结构,也可以通过调控此酶的活性来影响昆虫的生长发育,并为进一步构建杀虫工程菌以及转基因植物提供基因来源。  相似文献   

17.
甲壳素亲和层析分离纯化稻胚凝集素   总被引:1,自引:0,他引:1  
稻胚凝集素(RGL)能与N-乙酰氨基葡萄糖(GlcNAc)或其聚合物专一性结合。作者利用RGL与GlcNAc的天然多聚物-甲壳素有亲和作用的特性,以甲壳素为亲和层析固相物,从稻胚中分离出一种分子量、糖结合专一性、等电点等与文献报告的RGL性质一致的凝集素。  相似文献   

18.
以小龙虾(Procambarus clarkii)壳为原料,分别采用HCl溶液和NaOH溶液处理脱除小龙虾壳中的矿物质和蛋白质,提取甲壳素,用NaOH溶液处理甲壳素脱乙酰基制备壳聚糖.通过单因素试验优化甲壳素提取过程中的HCl溶液浓度及浸泡时间、NaOH溶液浓度及处理时间,并采用正交设计考察NaOH溶液质量分数、处理温度和时间对壳聚糖脱乙酰度的影响.结果表明,优化的甲壳素提取工艺条件为,在室温下用1.0 mol/L的HCl溶液浸泡24 h后倾去酸液,水洗至中性,然后在90~100℃用2.0 mol/L的NaOH溶液处理4h,甲壳素提取率为16.52%.壳聚糖制备的最佳工艺条件为NaOH溶液质量分数50%、温度90℃、保温时间3h.干燥后的壳聚糖水分含量为3.21%,灰分为0.89%~1.00%,脱乙酰度为75.3%,黏度为18.7 mPa·s.  相似文献   

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