接种不同种类病原菌脂多糖对翘嘴鳜细菌性败血症的免疫保护力比较

用柱状嗜纤维菌（Ｃ．ｃｏｌｕｍｎａｒｉｄ）、嗜水气单胞菌（Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）和迟缓爱德华氏菌（Ｅ．ｔａｒｄａ）等３种菌中提取的脂多糖（ＬＰＳ）作为免疫原,分别接种翘嘴鳜后,通过测定受免鱼血清中凝集抗体效价、血液中白细胞的吞噬活性和Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ活菌攻毒的方法,比较了接种３种ＬＰＳ对翘嘴鳜细菌性败血症的免疫保护力（ＲＰＳ）。结果表明,与对照组相比,受免鱼血中均可产生较高的凝集及交叉凝集抗体效价,血液中白细胞的吞噬活性极显著地升高,而且具有较高的交叉ＲＰＳ。推测ＬＰＳ对翘嘴鳜既具有特异性免疫活性,也存在较强的非特异性免疫活性。     

浸泡接种疫苗对翘嘴鳜细菌性烂鳃病的免疫效果

用酚灭活的柱状嗜纤维菌（Ｐ－ＣＣ）疫苗，菌体脂多糖（ＬＰＳ）以及将Ｐ－ＣＣ和ＬＰＳ混合后作为抗原，分别浸泡翘嘴鳜使免疫，并检测了受免鱼体的免疫保护力。结果表明，经３次疫苗浸泡接种后的鱼体血清中凝集抗体效价与对照组鱼没有显著差异（Ｐ〉０．０５）；而经活菌攻毒后的存活率，则是免疫组显著地高于对照组（Ｐ〈０．０５），以ＬＰＳ免疫组的免疫保护力（７１．９％）最强。     

不同血清型柱状嗜纤维菌脂多糖蛋白质成分及其对鳜的免疫原性影响的研究

从３种不同血清型的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖（ＬＰＳ）,测定了其中蛋白质含量及其成分的变化,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜,对ＬＰＳ的免疫原性进行了比较。结果表明,不同血清型的柱状嗜纤维菌菌体ＬＰＳ中蛋白质含量没有明显差别（ｔ检测,Ｐ〉０．０５）,而其中蛋白质成分则有明显的血清型特异性。不同血清型的菌体ＬＰＳ对翘嘴鳜的免疫原性没有明显差别（ｔ测验,Ｐ〉０．０５）。     

甘草素在翘嘴鳜细菌性败血症疫苗中的佐剂效果

从甘草中提取的甘草素（Ｇｌｙ）添加在翘嘴鳜细菌性败血症２种疫苗中的佐剂,即福尔马林知嗜水气单胞菌（ＦＫＣ）菌体脂多糖（ＬＰＳ）中,经添加Ｇｌｙ的疫苗接种后,受免翘嘴鳜头肾中白细胞的吞噬活性和经活菌改毒后的免疫保护率显高于本活加Ｇｌｙ疫苗的免疫组（ｔ测验,Ｐ〈０．０５）,表明了Ｇｌｙ具有佐剂效果,但是受兔鱼的凝集抗体效价和补体活性在全部受兔鱼中则没有明显差别（ｔ检测,Ｐ〉０．０５）。     

细菌性败血症流行后翘嘴鳜血清中抗体特性分析

从细菌性败血症流行后的饲养池中捕捞翘嘴鳜,采集血清,以嗜水气单胞菌的福尔马林灭活菌体,菌体脂多糖,精制ＬＰＳ和胞外产物为反应抗原,对其抗体特性进行了分析。结果表明,受检翘嘴鳜血清中对Ｆ－ＬＰＳ和ＬＰＳ的平均凝集抗体效价分别为１：１９１和１：６９,对ＬＰＳ和Ｐ－ＬＰＳ在琼脂内扩散反应后分别出现４条以上和１条沉降线,而对ＥＣＰ则未出现沉降线;免疫电泳后,对ＬＰＳ和Ｐ－ＬＰＳ分别出现５条以上和２条沉降线     

黄曲霉毒素B1间接竞争抑制ELISA定量分析法的建立和应用

以合成的黄曲霉毒Ｂ１（ＡＦＢ１）－Ｃ３－羧甲基肟－牛血清白蛋为免疫原，制备了高亲和力的多抗血清，建立了简便、灵敏的ＡＦＢ１间接竞争抑制ＥＬＩＳＡ定量分析法。ＡＦ类似物Ｂ１，Ｂ２，Ｇ１，和Ｇ２与ＡＦＢ１抗体的相对交叉反应率分别为１００％，３．４％，９．１％和小于１．３％。本法测定ＡＦＢ１的线性检测范围为１２．５～２５０ｐｇ，批内和批间平均变异系数分别为５．３％和７．９％，大米和混合饲料中测定ＡＦＢ１     

用葡萄球菌甲蛋白协同凝集鉴别猪痢疾密螺旋体的研究

应用猪痢疾蜜螺旋体（Ｔ．Ｈ．）免疫血清结合葡萄球菌甲蛋白（ＳＰＡ）与Ｈ１０，２－５，Ｘ２３，Ｃ１７等Ｔ．Ｈ．菌株进行协同凝集试验，均出现明显凝集反应。而免疫血清结合不含ＳＰＡ的菌株，无特定病原（ＳＰＦ）血清结合含ＳＰＡ的菌株均无凝集反应。免疫血清结合ＳＰＡ与７种肠道菌均无凝集反应。免疫血清用量以０．２ｍｌ为合适。最低用菌量为３０倍稀释，即每个视野Ｔ．Ｈ．约４０个菌体。     

细菌亚单位疫苗免疫小鼠的细胞免疫指标检测

将嗜水气单胞菌的胞外毒素（ＨＥＣ）和胞外蛋白酶（ＥＣＰａｓ）与迟缓爱德华氏菌脂糖（ＬＰＳ）、脱毒多糖（ＰＳ）偶联,制成３种亚单位偶联疫苗（ＨＥＣ－ＰＳ、ＨＥＣ－ＬＰＳ、ＥＣＰａｓｅ－ＰＳ）,分别免疫小鼠。另设这两种细菌的全菌灭活苗免疫及注射生理盐水对照组,每组８只。在第２次免疫后第７天用四甲基偶氮唑盐比色法（ＭＴＴ）,检测脾淋巴细胞转化率与腹腔巨噬细胞吞噬活性,并检测各组小鼠的全菌凝集抗体。结果表     

番鸭细小病毒弱毒疫苗的研究

应用生物技术从番鸭细小病毒菁田株（ＭｕｓｏｖｙＤｕｌｋｉｌｉｎｇＰａｒｖｏｖｉｒｕｓ，ＭＰＶ－Ｐ）选育出对１日龄雏番鸭无致病力的弱毒疫苗株（ＭＰＶ－Ｐ１）。该弱毒株具有良好的兔原性和遗传稳定性；制备成疫苗，免疫注射１日龄雏番鸭，免疫后３ｄ部分鸭血清中出现抗体，７ｄ９８％以上的鸭血清中出现抗体；２１－３０ｄ抗体效价达高峰，有效免疫期在１９０ｄ以上；注苗后７ｄ攻毒，保护率１００％；当ＬＰＡＩ滴度在ｌｏ     

水稻完全显性早熟性的发现和基因定位

 研究发现早釉核不育系６４４２Ｓ－７具有完全显性早熟特性，它与１３个不同类型的中、迟熟品种杂交，Ｆ１抽稳期与６４４２Ｓ－７完全相同或十分相近。对Ｆ２和 Ｂ１Ｆ１遗传分析表明该早熟性主要受２对显性基因控制。利用Ｆ２群体和４种分子标记技术，将６４４２Ｓ－７携带的１个显性早熟基因定位于水稻第３染色体短臂靠近端部一侧，该基因与ＲＡＰＤ标记ＯＰ１１１．５５７、ＳＳＲ标记 ＲＭ２２、ＲＭ２３１、ＲＦＬＰ标记Ｃ５１５和 ＡＦＬＰ标记ＰＴ６７１的遗传距离分别为１．５、３．０、６．７、１０．９和１２．４ｃＭ。该基因系首次发现并定位，暂命名为Ｅｆ－ｃｄ（ｔ）６４４２Ｓ－７作为完全显性早熟性种质资源，对水稻遗传改良具有重要的应用价值。     

嗜水气单胞菌3种疫苗免疫的青鱼外周血免疫指标的变化

将福尔马林灭活的嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、菌体外膜蛋白(OMP)和菌体脂多糖(LPS)作为免疫原,分别免疫健康青鱼。在免疫1、2、4、7、14、21、28d后进行外周血的血细胞计数和白细胞分类计数,测定细胞吞噬活性和抗体效价,结果表明:3种免疫原均可诱导红细胞和白细胞数量增加,并引起各种白细胞分类百分比变化,提高吞噬活性和抗体效价;免疫应答早期(第1周)主要是红细胞、单核细胞和中性粒细胞数量明显增加,吞噬细胞的吞噬活性迅速提高,吞噬百分比(PP)和吞噬指数(PI)第4天达峰值,F-AH组、OMP组和LPS组的PP、PI值依次分别为39.84%、46.53%、41.59%及3.94、4.26、3.77;随后则是淋巴细胞大量增殖,第21天淋巴细胞数量和抗体效价达峰值,F-AH组、OMP组和LPS组的抗体效价分别为1∶426.67、1∶341.33和1∶213.33。免疫28d后活菌攻毒的结果表明,OMP组的免疫保护率为75%;LPS组为67.8%,均明显优于F-AH组(50%)。可见3种免疫原均能通过促进青鱼血细胞增殖、提高吞噬细胞的吞噬活性、产生特异性抗体等方式增强机体的免疫保护力。     

浸泡免疫预防草鱼细菌性烂鳃病效果的研究

用酚灭活的柱状嗜纤维菌和从该菌体提取的菌体脂多糖浸泡接种２０～２５ｇ的草鱼鱼种，共浸泡２次间隔一周。通过检测受免鱼体血清、肠和体表粘液中凝集抗体效价、血液中吞噬细胞的吞噬活性和采用活菌攻毒的方法，探讨了浸泡免疫接种疫苗对预防草鱼细菌性烂鳃病的效果。结果表明，受免鱼体与对照鱼相比，血清、肠和体表粘液中凝集抗体效价和血液中吞噬细胞的吞噬活性都有明显上升。经活菌攻毒后，酚灭活柱状嗜纤维菌疫苗免疫组免疫保护率达３０％，而脂多糖疫苗免疫组免疫保护率为５５％。     

雏鸡免疫柔嫩艾美耳球虫早熟株和毒株的细胞免疫反应

AA肉鸡雏鸡分别经口免疫柔嫩艾美耳球虫毒株早熟株，用免疫组化ABC法染色检测小肠、盲肠扁桃体、脾脏中CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞动态变化；用淋巴细胞转化实验MTT法检测T淋巴细胞活性。结果表明：球虫免疫鸡后，CD4^ T淋巴细胞在一次免疫后迅速增殖，第6天达到第一峰，免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡盲肠与脾脏中CD4^ T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到38％和44％，免疫早熟株的鸡盲肠与脾脏中CD4^ T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到36％和43％，而二次免疫后和对照相比很少有显著差异。CD8^ T淋巴细胞在一次免疫后比CD4^ T增殖速度慢，第9天达到第一峰。免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡在此日盲肠与脾脏中CD8^ T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到37％和47％，免疫早熟株的鸡在此日盲肠与脾脏中CD8^ T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到36％和48％，二次免疫后迅速大量增殖，免疫柔嫩艾美耳球虫毒株的鸡在二免后第2天盲肠与脾脏中CD8^ T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到39％和50％．免疫柔嫩艾美耳球虫早熟株的鸡在二免后第2天盲肠与脾脏中CD8^ T淋巴细胞占所有淋巴细胞百分率分别达到37％和50％。且CD8^ T淋巴细胞总体水平比CD4^ T淋巴细胞多。盲肠扁桃体中T细胞的增殖速度比其他组织更快。免疫早熟株的鸡与免疫毒株的鸡肠道黏膜中的CD4^ 、CD8^ T淋巴细胞变化基本一致。一次免疫鸡比未免疫对照T淋巴细胞活性显著升高；进行二免的鸡免疫后第一、二、三周T淋巴细胞活性均比未进行二免的鸡显著升高；毒株免疫鸡T淋巴细胞活性大多与早熟株免疫鸡无8显著差异。     

不同方法提取的柱状嗜纤维菌脂多糖对鲤免疫活性的比较

采用不同方法提取的柱状嗜纤维菌脂多糖（ＬＰＳ）作为抗原、对鲤注射免疫后，通过测定受免鲤血清中凝集抗体效价、沉降抗体、白细胞吞噬活性和进行强毒攻击的方法，比较了不同方法提取ＬＰＳ的免疫原性，结果表明，Ｂｏｉｖｉｎ法和Ｐｈｅｎｏｌ－ｗａｔｅｒ法较ＥＤＴＡ法提取ＬＰＳ的免疫原性强，而Ｂｉｏｖｉｎ法和Ｐｈｅｎｏｌ－ｗａｔｅｒ法提取ＬＰＳ的免疫原性则没有明显差别。     

培养时间对柱状嗜纤维菌脂多糖蛋白质成分和免疫原性的影响

从培养不同时间后的柱状嗜纤维菌中提取菌体脂多糖 (LPS) ,测定了其中蛋白质含量及成分的变化 ,并分别作为免疫原接种翘嘴鳜对其免疫原性进行了比较。结果表明 ,培养时间对菌体LPS中蛋白质含量没有明显影响 ,对其蛋白质成分则有一定影响 ,而菌体LPS中蛋白质成分与其免疫原性有关 ,从培养 36h的菌体中提取的菌体LPS的免疫原性最强     

三种鳜对柱状嗜纤维菌脂多糖免疫应答的比较研究

从柱状嗜纤维菌提取菌体脂多糖作为免疫原,分别注射接种翘嘴鳜,斑鳜和大眼鳜后,检测了供试鱼血清中凝集抗体效价和血液中白细胞吞噬活性以及采用直接荧光抗体法测定了受免鳜血液中各种淋巴细胞数量的变化。结果表明,接种ＬＰＳ后,３种受免鳜血清中凝集抗体效价均在第３周达到峰值,血液中蚕噬细胞的吞活性和Ｔ,Ｂ淋巴细胞样细胞的比率均在第２周最高。