人粒细胞—巨噬细胞集落刺激因子（hGM—CSF）在大肠杆菌中的融合表达初步研究

用融合表达质粒载体ＰＧＥＸＫＴ构建了人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭＣＳＦ）的表达质粒ＰＧＥＸＫＴ／ＧＭＣＳＦ。质粒转化大肠杆菌后，经ＩＰＴＧ诱导，超声波裂解，谷胱苷肽琼脂糖亲和胶进一步纯化，表达的ｈＧＭＣＳＦ融合蛋白纯度达到８０％以上，融合蛋白经凝血酶的作用后，再纯化，以ＭＴＴ法测定纯化的ｈＧＭＣＳＦ活性，结果其活性达１．７×１０６单位／升菌液。     

枯萎病菌侵染后棉苗体内超氧物歧化酶和过氧化氢酶活性的变化及与抗病性的关系

分析了枯萎病菌侵染后棉苗叶 片和根茎部组织中超氧物歧化酶（ Ｓ Ｏ Ｄ）和过氧化氢酶 （ Ｃ Ａ Ｔ）活性的变化动态, 结果表明：抗病品种 和感病品种棉苗 中 Ｓ Ｏ Ｄ 和 Ｃ Ａ Ｔ 酶活性无显著 差异;氟乐灵处 理可诱发棉苗对枯萎病的诱导抗性,且氟乐灵处理的棉苗组织中 Ｓ Ｏ Ｄ 和 Ｃ Ａ Ｔ 酶活性无显著变化;枯萎病菌侵染后棉苗叶 片和根茎部组织 中 Ｓ Ｏ Ｄ 和 Ｃ Ａ Ｔ 酶活 性明显提 高,但抗病品 种棉苗组 织中 Ｓ Ｏ Ｄ 和 Ｃ Ａ Ｔ酶活性在前期 增加不显著,后期增 加较慢,而感病品 种棉苗中两种酶活 性在前期就明 显升高,增加 速度快;氟乐灵处理的棉苗,其组织中两种酶活性始终低于未处理棉苗 接种后的水平⒚棉花组织中的 Ｓ Ｏ Ｄ 酶主要是 Ｃｕ, Ｚｎ Ｓ Ｏ Ｄ,受侵后 Ｓ Ｏ Ｄ 酶活性的升高主要来自于 Ｃｕ , Ｚｎ  Ｓ Ｏ Ｄ⒚因此, Ｓ Ｏ Ｄ 和 Ｃ Ａ Ｔ 与棉花对枯萎病的抗性及由氟乐灵诱发的诱导抗性无关⒚     

荧光探针法研究茶多酚与DNA的相互作用

利 用荧光探 针 Ｅ Ｂ（溴 化乙啶）研 究茶多酚 （ Ｔ Ｐ）与 Ｄ Ｎ Ａ 的相 互作用 及顺 铂（ Ｃ Ｄ Ｄ Ｐ）对其 的影响,结果表明：在 Ｅ Ｂ Ｄ Ｎ Ａ 体系中加 入 Ｔ Ｐ 后,荧光光谱 形状和峰位几乎 无变化,而荧光强度 明显下降; Ｔ Ｐ 压低 Ｅ Ｂ Ｄ Ｎ Ａ 荧 光强度的效率 Ｄ 与其浓度成正相关,高浓度 Ｔ Ｐ 可以完全抑制 Ｅ Ｂ Ｄ Ｎ Ａ 荧光强度⒚ Ｔ Ｐ与 Ｃ Ｄ Ｄ Ｐ 对 Ｅ Ｂ Ｄ Ｎ Ａ 荧光压低作用存在叠加现象,表明 Ｔ Ｐ 可增强 Ｃ Ｄ Ｄ Ｐ 的药用效果,又 可降低其副作用⒚ Ｔ Ｐ使 Ｅ Ｂ Ｄ Ｎ Ａ 体系的荧 光偏振度 Ｐ增加,而荧光寿命 τ缩短,这表明 Ｔ Ｐ 与 Ｄ Ｎ Ａ 作用的机理可能是 Ｔ Ｐ 插 入了 Ｄ Ｎ Ａ 分子碱 基对平 面中,影 响了 Ｄ Ｎ Ａ 分子双 链的有 序度,并 使从 Ｄ Ｎ Ａ 分子中 向 Ｅ Ｂ 分子传递的能量减少⒚     

乌米干燥参数的优化

乌米干燥参数的优化校青年基金资助项目收稿日期：１９９５１２０５鲁植雄（南京农业大学农业工程学院，南京２１００３２）ＯＮＤＲＹＩＮＧＰＡＲＡＭＥＴＥＲＳＯＦＢＬＡＣＫＧＬＵＴＩＮＯＵＳＲＩＣＥＬｕＺｈｉｘｉｏｎｇ（ＡｇｒｉｃＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇＣ...     

油菜PEP基因的克隆及PEP反义基因的构建

丙酮酸羧化酶（ Ｐ Ｅ Ｐ）是控制油菜蛋白质／油脂含量比例的一个关键酶⒚本研究用 Ｐ Ｃ Ｒ 法扩增出了 Ｐ Ｅ Ｐ 基因片段,并将其 克隆到 ｐ Ｂ Ｓ Ｓ Ｋ＋ 的 Ｓｍ ａ Ⅰ位点⒚ Ｄ Ｎ Ａ 序列分析表 明克隆片段 的长度为 ５３０ｂｐ,其序列与报道序列相同⒚将该 Ｐ Ｅ Ｐ基因 片段反向插入 ｐ Ｉ Ｇ１２１ 质粒,构建了带 Ｐ Ｅ Ｐ 反义基因的超级双元载体并进行油菜的转化,目前已获得转基因植株⒚     

猪繁殖和呼吸综合征病毒（PRRSV）M和N蛋白基因扩增与克隆

猪繁殖和呼吸综合征病毒（ＰＲＲＳＶ）Ｍ和Ｎ蛋白基因扩增与克隆蔡家利姜平简中友马志勇蔡宝祥（南京农业大学畜禽传染病研究室，南京２１００９５）ＡＭＰＬＩＦＩＣＡＴＩＯＮＡＮＤＣＬＯＮＩＮＧＯＦＭＡＮＤＮＰＲＯＴＥＩＮＧＥＮＥＯＦＰＯＲＣＩＮＥＲＥＰＲＯ...     

桃ACC氧化酶cDNA片段扩增及其克隆和鉴定

采用“富集ＰＣＲ”方法,用单个特异引物和ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）１５从桃伤处理叶片ｃＤＮＡ 中扩增出特异性片段⒚将扩增产物分离并克隆筛选到１３ 个重组克隆,其中有６ 个克隆能与ＡＣＣ氧化酶基因组ＤＮＡ 杂交,对其中一个阳性克隆ｐＧＥＭＡＣ１２ 作酶切分析,发现其酶切图谱与已报道的桃果实成熟相关的ＡＣＣ氧化酶ｃＤＮＡ 基本一致⒚ＤＮＡ 序列分析表明,插入片段两端ＤＮＡ 序列均是 ５＇端特异引物序列,表明是由５＇端特异引物单个引物扩增出来,全序列分析表明插入片段全长８３３ ｂｐ,是ＡＣＣ 氧化酶ｃＤＮＡ 基因编码区的一部分,５＇端缺少启始密码子ＡＴＧ,３＇端缺少部分编码序列和终止密码子ＴＡＡ⒚     

气相色谱法测定萝卜中的MTBGSL

应用气相色谱法测定萝卜中的ＭＴＢＧＳＬ（４甲硫基３丁烯基芥子油葡糖苷）含量。利用萝卜内部的芥子酶，使ＭＴＢＧＳＬ水解脱去葡萄糖，测定水解生成的ＭＴＢＩＴＣ（４甲硫基３丁烯基芥子油），然后通过化学反应式计算得到ＭＴＢＧＳＬ的含量。粉碎的萝卜中添加黑芥子苷，回收率为９２．１％±２．１％（＼％±ＳＤ＼％）。应用该法测定的结果，萝卜皮部ＭＴＢＧＳＬ的含量高于肉质部，肉质部又以尾部含量最高，中部次之，头部最低。     

酶及叶要素荧光对大白菜生长中光合作用的保护功能

以田间生长的鲁白８号大白菜为试材,研究了光下酶及叶绿素荧光对其叶片光合机构的保护作用。结果表明,ＭＤＡ含量一日间随ＰＦＤ的增加而增加,同时ＳＯＤ、ＣＡＴ与ＰＯＤ的活性也随ＰＦＤ的增加而增强,Ｆｖ与Ｆｖ／Ｆｍ却随ＰＦＤ的增加呈明显的低谷曲线,表明光下大白菜叶片发生膜脂过氧化。但ＳＯＤ、ＣＡＴ与ＰＯＤ可积极作用,清除有毒物质ＭＤＡ,同时叶绿素荧光可能耗散部分光能,减轻过强光对膜的破坏作用。     

甘蓝型油菜雄性不育的酶活性和同工酶谱分析

对甘蓝型油菜细胞质雄性不育（ＣＭＳ）系Ｌ１７Ａ及其保持系Ｌ１７Ｂ细胞核雄性不育（ＧＭＳ）的不育株Ｌ１８Ａ和不育株Ｌ１８Ｂ以及细胞核＋细胞质双重不育（ＧＣＤＭＳ）的核不育株ＧＣＤＭＳ－ＨＡ和质不育株ＧＣＤＭＳ－ＢＡ的酶活性和同工酶谱差异研究表明,３种类型不育系都随着花蕾的发育,ＰＯＤ酶活性均无明显变化,ＣＡＴ酶活则显著降低,ＧＣＤＭＳ－ＨＰＡ的ＰＯＤ酶活性与Ｌ１８Ａ相近,极显著高于Ｌ１７Ａ和Ｌ１７Ｂ