导入南瓜DNA选育抗枯萎病西瓜新种质的研究

采用子房注射法将南瓜总DNA导入西瓜，企望使西瓜和南瓜实现分子水平上的远缘杂交，从而获得整合有效控制抗病的南瓜DNA片段而不改变 受体西瓜农艺性状的西瓜新种质。用该方法在西瓜自交授粉后24h从子房顶端将15μl 南瓜DNA注射入胚囊中，经病圃田间筛选和6代自交纯化已获得5份稳定西瓜新材料。经苗期人工接种和病圃田间自然抗病鉴定，其抗病性明显提高。所获抗病材料的品质与受体无明显差异。其中2份材料的果皮色泽和花纹是不同于供受体的新变异类型。试验表明，子房注射法将外源DNA导入西瓜是一种简便实用的分子育种方法，是解决西瓜抗病种资源匮乏和遗传基础狭窄的有效途径。     

玉米导入碱蓬DNA后代主要农艺性状和品质性状的变异分析

以外源碱蓬总DNA导入玉米自交系获得的75份稳定导入系和原受体自交系为试验材料,分析了株高、穗长、穗粗等8个主要农艺性状和品质性状遗传变异特点。结果表明:后代导入系各性状平均值和原受体自交系相比均有差异。各受体自交系的后代系变化幅度均较高,既有高于原品种的后代导入系,也有低于原品种的导入系。各性状的变异系数有较大差异,单株粒重、百粒重、轴重和行粒数的变异系数较大;穗粗、出籽率及品质性状变异系数较小。因此,利用花粉管通道法将外源总DNA导入玉米自交系能够产生各种性状变异,出籽率、单株粒重、百粒重、行粒数、籽粒淀粉含量、蛋白质含量和含油量均较受体有一定程度提高,可以通过选择改良玉米种质资源。     

外源DNA导入水稻后代变异性的SSR分析

采用花粉管通道法,将高粱DNA导入水稻,获得了34个稳定的变异品系,从60对SSR引物中筛选出17对,对供体高粱、受体水稻及其外源DNA导入后代稳定材料进行了SSR分析,结果表明,高粱DNA导入水稻可以引起广泛的变异,在分子水平上产生了遗传多样性,聚类分析可将其分为五类,各类有其特有的遗传变异性。接受外源DNA三个片断,两个片断及一个片断的株系分别被聚成一类,与其他类的遗传差异分别为0.467,0.389及0.347,变异程度依次递减;未接受外源DNA两个片断的株系被聚成另一类。因此,接受外源DNA片断的多寡是水稻后代稳定品系变异程度的基础,也是它们分类的标准。     

箭竹DNA导入水稻后其遗传背景、农艺性状及产量分析

【目的】将箭竹DNA导入水稻,并分析其遗传背景、农艺性状及产量,为水稻遗传育种提供技术参考。【方法】利用花粉管通道技术将箭竹DNA导入4个水稻恢复系受体材料(9311、华占、Q7和扬恢22)中,筛选出表型与受体材料存在差异的株系连续自交直至稳定,并利用筛选出的49对多态性SSR引物鉴定变异株系的遗传背景差异。以不同遗传背景的变异株系与不育系3S和6303S配制杂交组合,并比较分析其农艺性状差异。【结果】将箭竹DNA导入水稻后通过连续自交筛选出能稳定遗传的变异株系21个(T1~T21),其中9311、华占、Q7和扬恢22的变异率分别为4.85%、1.30%、2.35%和2.65%。利用SSR标记分析变异株系的遗传背景,发现其与受体材料在49对SSR标记在中存在差异的引物对数为2~24对,其中在24对标准引物中存在差异的对数范围为0~11对,表明通过花粉管通道技术产生的变异具有一定的随机性。不同遗传背景变异株系与不育系组配的杂交组合在农艺性状和产量方面存在明显差异,从中筛选出2个优势组合6303S×T10和6303S×T20,分别比我国长江中下游中籼迟熟组筛选试验对照品种丰两优4号增产10.9%和12.9%。【结论】将箭竹DNA导入水稻可产生稳定遗传的变异株系,从而获得与其组配的优势杂交组合,即通过花粉管通道技术导入外源DNA或基因是水稻种质资源创新及新品种选育的有效途径。     

利用花粉管通道法将外源DNA导入玉米的研究进展

综述了外源DNA通过花粉管通道导入玉米的研究进展.详细阐述了利用花粉管通道法将外源DNA导入玉米中的转化方式、导入后代的变异以及变异机理;介绍了利用花粉管通道法将外源总DNA和目的基因导入到玉米中的研究现状;提出了利用花粉管通道法导入外源DNA应注意的问题,以及今后的研究方向.     

大豆DNA片段导入玉米自交系提高蛋白质含量的研究

采用花粉管通道法把大豆DNA片段导入玉米骨干自交系,对诱变玉米籽粒材料进行了籽粒总蛋白含量及醇溶蛋白和谷蛋白含量的测定。结果表明:(1)处理后的38个材料总蛋白含水量都比较高,与各自的对照相比,除1DA2、1DA6上、1DA3、26DB1、26DA4外差异都达显著或极显著水平;(2)醇溶蛋白含量测定中,选了4个处理材料,其中1DA5、26DB4、26DC6含量都比对照高,5DB2含量较对照降低了8 76%;(3)谷蛋白含量测定中,1DA5、26DB4的含量较对照低,5DB2、26DC6的含量比对照高,其中5DB2的增加比例达到23 7%。上述结果初步证明高蛋白特性是可遗传的,这为选育高蛋白玉米新自交系提供了新材料,也为利用外源DNA直接导入技术创造玉米新种质开辟了新途径。     

外源基因转化在小麦育种中的应用

远缘杂交是创造生物新物种和新种质以及转移遗传物质的有效途径 ,在理论和实践上都有重要意义。外源DNA导入技术以DNA片断杂交技术假说为理论依据 ,直接将带有目的性状的供体遗传物质 (总DNA)或目的基因导入受体植物 ,创造大量的变异材料 ,通过筛选获得具有目的性状的后代 ,达到改良品种的目的。笔者综述了近年来外源基因导入小麦的研究概况 ,阐述了外源基因导入的技术以及检测方法 ,分析了外源基因转化在小麦育种中的发展前景。     

利用花粉管通道法将外源DNA导入水稻之研究进展

外源DNA直接导入技术以DNA片断杂交假说为理论基础,直接将目的基因或带有目的性状供体遗传物质(总DNA)通过花粉管通道法导入水稻植株,创造大量的变异材料,通过筛选获得目的性状的后代和新品种。由于简单、易行、不受受体植物种类的限制,已被越多的育种者所接受,在水稻的抗病、米质、丰产性上等各方面广为应用。介绍了外源DNA导入方法、外源基因导入类型、后代遗传变异特点及影响花粉管通道法导入的因素,优点、局限性进行了分析,同时提出了问题和展望。     

外源DNA导入诱导水稻高蛋白质变异的研究

为探明外源DNA导入水稻,其后代蛋白质含量的变化规律,采用浸种法,将大豆、高梁、玉米的DNA导入水稻品种0146,91-264,对其籽粒蛋白质量含量进行逐代分析。结果发现,后代蛋白质含量出现广泛变异,并分离出度蛋白含量的优良单株,各世代蛋白质含量的变异系数随种植世代的增加而变小,并趋于稳定。研究证实。利用该方法能选育出蛋白质含量高的水稻新品种。     

外源DNA导入水稻的方法及性状变异研究

运用减压渗透法将玉米、小麦、小米、高粱、狼尾草的DNA导入水稻品种紫稻，可产生多种多样的变异类型．性状变异包括：生育期、株型、穗型、粒形、花粉育性等．有的是供体特有性状，有的是新性状。从变异后代中，获得了一批性状优良并能稳定遗传的材料．减压渗透法操作简单，转化率高，为谷类作物导入外源DNA提供了一条新途径．     

渝糯系列玉米杂种遗传纯度的RAPD鉴定

为了建立一套快速准确的玉米杂种纯度鉴定技术,本研究以渝糯系列5个玉米新品种及其亲本为材料,进行RAPD标记分析。从260个随机引物中,筛选出3个扩增带稳定清晰且为双亲互补型的特征引物,可用于渝糯系列杂种纯度的快速鉴定。     

五个鲜食玉米新品种的DNA指纹图谱研究与应用

利用SSR标记技术,对5个鲜食玉米新品种及其亲本的DNA指纹图谱进行了研究。从88对SSR引物中,筛选出37对在鲜食玉米中表现多态性丰富、带型清晰明显且稳定的引物,分析了鲜食玉米自交系的遗传多样性,建立了各品种的特征DNA指纹图谱及数字指纹,可以有效用于种子质量检测。     

大豆DNA对玉米籽粒蛋白质含量的影响

报道了采用花粉管通道法转大豆DNA的玉米在自交选育2-3年后．玉米籽粒中的蛋白质含量变化。结果表明,大豆DNA可影响玉米籽粒的蛋白质含量。3个选出的玉米材料1DA5、5DB2和26DC1的总蛋白含量均比对照提高了3个百分点以上,使玉米籽粒的总蛋白质含量分别达到13．44％、12．84％、13．83％,且材料5DB2的醇溶蛋白在其总蛋白中所占的比例较对照降低了1．7％,而材料1DA5和26DC1的醇溶蛋白在其总蛋白中所占的比例均较对照明显提高。这说明,大豆DNA的转入引起玉米发生了不同的可遗传变异。     

SSR标记技术在玉米品种纯度鉴定上的利用研究

采用玉米单粒种子DNA的提取新方法,对提取的DNA经4.5%PA胶进行电泳检测。结果表明:此法具有快速、DNA分子量大、不降解和纯度高等优点,完全可以满足利用SSR分子标记进行DNA指纹分析的需要,为DNA指纹鉴定技术在玉米种子纯度及玉米分子标记辅助育种中的广泛应用提供了基础。     

氮肥运筹方式对豫单2002产量及品质的影响

【研究目的】该研究旨在为豫单2002的推广应用提供施肥技术支撑,为高产高蛋白夏玉米氮肥合理运筹肥提供理论与技术依据。【方法】在豫北潮土区高产田块上,采用田间试验,设N0(不施氮肥)、N_1(攻杆肥100%)、N_2(攻穗肥100%)、N_3(攻杆肥40% 攻穗肥60%),N_4(攻杆肥30% 攻穗肥50% 攻粒肥20%)五个处理开展研究。【结果】结果表明:氮肥不同运筹方式增产效果差异显著,其中N_3处理增产效果最好,其次是N1处理和N4处理,N_2处理增产效果最小;分次施肥有于提高籽粒粗蛋白含量,且随着施肥次数的增加,籽粒粗蛋白含量呈上升趋势;分次施肥亦有利于提高籽粒蛋白质产量,不同处理以N3最佳,其次为N_4;氮肥不同运筹方式肥料利用率差异显著,其中N_3处理最高,其次为N_4和N_1处理,而N_2最低。【结论】N_3处理由于有效地促进了植株对氮素的吸收利用,增加显著地产量和提高了籽粒蛋白质产量,一定程度上提高了籽粒蛋白质含量,因而为最佳氮肥运筹方式。     

冀豆12遗传背景下3个回交组合高低蛋白含量 后代品系SSR标记分析

【目的】以高蛋白、高产、高配合力大豆品种冀豆12为遗传基础,创造高蛋白含量新种质,分析蛋白含量相关QTL及其连锁标记,挖掘QTL中包含的优异基因,为高蛋白育种提供新种质、新标记。【方法】以冀豆12为轮回亲本,来自东北地区的红丰11、茶秣食豆、绥农14等蛋白质含量不同的育成品种和地方品种为供体亲本,通过有限回交,创造高蛋白新种质。从3个组合的回交后代品系中,选择农艺性状一致、产量与冀豆12无显著差异的4个高蛋白（50%—53%）品系和3个中低蛋白（38%—41%）品系为试验材料,参照大豆公共遗传连锁图谱,分别在20个连锁群上,均匀选取并筛选在双亲间表现多态性的SSR标记,分析冀豆12及其后代品系的遗传相似性与遗传差异,确定与蛋白质含量相关的QTL及其连锁标记。通过对QTL候选区间内的基因功能注释,挖掘与蛋白质含量相关的优异基因。【结果】创制出一批蛋白质含量超过50%的高蛋白新种质。3个组合中分别筛选到209、201和199个双亲间多态性标记;亲本与后代间遗传相似性分析结果表明,同一组合的后代中高蛋白品系的轮回亲本遗传背景回复率高于低蛋白品系遗传背景回复率。3个组合中4个高蛋白品系与轮回亲本冀豆12之间的相似系数平均值为79.58%,显著高于3个低蛋白品系材料与轮回亲本冀豆12之间的相似系数平均值67.81%;轮回亲本冀豆12传递给高蛋白种质的SSR位点数平均为161个,传递给低蛋白材料的SSR位点平均数为135个,二者相差27%。遗传效应分析结果表明,共发掘出位于14个连锁群上的22个与蛋白质含量相关的QTL及其连锁SSR标记,其中,18个QTL的蛋白质含量增效基因来自轮回亲本冀豆12。进一步分析显示,4个共性高蛋白染色体区段对高蛋白含量形成具有关键作用,分别位于C1连锁群（第4染色体）的75.52—80.62 cM、D2连锁群（第17染色体）的67.71—84.18 cM、G连锁群（第18染色体）的80.38—96.57 cM和I连锁群（第20染色体）的46.22—50.11 cM。通过基因功能注释和代谢途径分析,预测了4个区段内20个可能参与7-磷酸景天庚酮糖、半胱氨酸、谷氨酸、丝氨酸、甲硫氨酸、色氨酸等氨基酸的合成与代谢等蛋白质合成相关代谢途径的候选基因。【结论】冀豆12含有较多的高蛋白QTL位点,供体亲本的高蛋白遗传位点可以在以冀豆12为轮回亲本的后代中表现出来,并通过SSR分析检测到。以冀豆12为轮回亲本,通过有限回交,易于创造出高蛋白种质。     

利用种子蛋白聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定玉米种子纯度的研究

利用种子贮存蛋白SDS-PAGE技术,对2份玉米母本种子的蛋白质进行电泳分析,结果表明,它们的母本种子蛋白质电泳图谱差异明显,特征谱带稳定。种子蛋白电泳鉴定与田间小区种植鉴定结果之间纯度达97%以上,该技术可作为玉米杂交种和自交系种子纯度鉴定的一种手段。     

SSR指纹图谱技术在玉米种子鉴定中的应用

随着各种新型DNA分子标记的出现,带动了SSR指纹图谱技术的快速发展.长期以来,玉米种子质量问题成为玉米产业发展的限制因素,随着生物技术的发展,SSK指纹图谱在玉米种子鉴定中的作用成为研究热点.本文着重介绍了指纹图谱的概念、分析方法和作用等几个方面的内容.