内生真菌No051的鉴定及其代谢产物对稻瘟病的诱导抗病研究

为寻找对水稻稻瘟病有诱导抗病作用的有益内生菌及其代谢产物,对从辽宁西北地区采集的根系土壤中分离得到的一株内生真菌No051进行16SrDNA ITS序列分析,同时采用抑菌试验和水稻盆栽试验考察No051代谢产物对稻瘟病菌的诱导抗病效果。结果表明:该菌为镰刀菌属Fusarium sp.,对稻瘟病菌的抑制率为38.75%,对水稻稻瘟病的诱导效果为76.82%。     

湖北贝母活性成分与内生菌次级代谢产物研究

为探究湖北贝母不同组织贝母素乙含量、内生菌组成及其次级代谢产物的抑菌活性,采用气相色谱法测定湖北贝母鳞茎、花、叶的贝母素乙含量,分别利用16S rDNA和ITS测序技术鉴定内生细菌和真菌,并通过琼脂扩散法、微量二倍稀释法研究内生菌次级代谢产物对10株供试菌的抑菌活性。结果表明:湖北贝母叶中贝母素乙含量最高,达(3.99±0.10) mg/g,其含量是鳞茎的1.78倍、花的4.24倍;从湖北贝母中分离鉴定了4株内生菌,分别为Pseudomonas sp. BM-X-6、Arthrinium sp. BM-Z-5、Aspergillus sp. BM-Z-1、Aspergillus sp. BM-Z-3;3株内生真菌次级代谢产物抑菌活性均优于细菌Pseudomonas sp. BM-X-6,其中Arthrinium sp. BM-Z-5的次级代谢产物抑菌谱最广,对肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、鲍曼不动杆菌、耐甲氧西林金黄色葡萄球菌有中度抑制活性。     

西藏龙胆内生真菌Leptosphaeria sp.YY-B4的次级代谢产物研究

研究西藏龙胆内生真菌Leptosphaeria sp.YY-B4的次级代谢产物。采用硅胶、C-18反相硅胶、Sephadex LH-20等柱色谱及高效液相色谱技术对西藏龙胆内生真菌的次级代谢产物进行系统研究,采用波谱分析及与文献比对等方法进行化合物结构鉴定,采用比色法测定α-葡萄糖苷酶抑制活性。从西藏龙胆内生真菌的发酵提取物中分离得到6个化合物,分别鉴定为Tetrahydroaltersolanol E(1)、巨孢子素(2)、Leptosphaerin D(3)、ravenelin(4),5,6,8-三羟基-4-(1′-羟乙基)-异香豆素(5),3,4,5-三羟基甲苯-6-甲基邻苯二甲醛(6)。这些化合物对α-葡萄糖苷酶抑制活性不明显。实验第1次从西藏龙胆内生真菌中分理出Tetrahydroaltersolanol E(1)、巨孢子素(2)、5,6,8-三羟基-4-(1′-羟乙基)-异香豆素(5)和3,4,5-三羟基甲苯-6-甲基邻苯二甲醛(6)等次级代谢产物。     

竹子内生真菌Fusarium oxysporum次级代谢产物的研究

[目的]对竹子内生真菌尖孢镰刀菌Fusarium oxysporum的次级代谢产物进行分离与鉴定。[方法]运用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶色谱、制备液相色谱等方法进行分离纯化,根据理化性质和波谱技术对化合物的结构进行鉴定。[结果]从该菌的次级代谢产物中分离得到9个化合物,分别鉴定为1-(3, 4-二甲氧基苯基)-乙酮(1)、吲哚-3-乙酸乙酯(2)、吲哚-3-乙酸(3)、吲哚-3-乙酮(4)、吲哚-3-乙酸甲酯(5)、latifolicinin C(6)、白僵菌素(7)、1, 3-diamino-1, 3-dimethylurea(8)和2, 3-丁二醇(9)。[结论]除化合物3、7、9外,其余化合物均为首次从竹子内生真菌Fusarium oxysporum中分离得到。     

雷公藤内生真菌的分离及活性菌株的筛选

以传统药用植物雷公藤为试验材料，分离筛选能产抑制作物病原真菌的活性物质的内生真菌。通过组织分离法，从雷公藤组织中分离得到36株内生菌。发酵和抑菌试验结果表明，10号菌株的代谢产物对多种作物病害病原真菌有明显的抑制作用。10号内生真菌发酵代谢产物对水稻纹枯病菌、黄瓜立枯病菌、黄瓜枯萎病菌、葡萄炭疽病菌、菜豆炭疽病菌、西瓜枯萎病菌、番茄早疫病菌、番茄灰霉病菌、柑橘炭疽病菌和香蕉炭疽病菌的抑制率分别为88．89％，100％，72．73％，85．00％，80．00％，60．00％，100％，100％，85．71％，66．67％。     

曼陀罗内生真菌代谢产物抗皮肤致病真菌活性成分研究

[目的]研究曼陀罗植物内生真菌Ym311977菌株代谢产物的抑菌活性及其有效成份。[方法]对Ym311977菌株进行扩大发酵培养,从发酵产物中分离单体化合物,并研究单体化合物对2株皮肤致病真菌的体外抑制活性。[结果]分离到的4种单体化合物中的1种对2株皮肤致病真菌（石膏样小孢子菌、石膏样毛癣菌）的最低抑菌浓度分别为50、200μg/ml;该化合物经1HNMR及13CNMR分析,确定其结构为5-丁基吡啶甲酸,即镰刀菌酸。[结论]该研究首次报道了曼陀罗内生真菌代谢产物镰刀菌酸对2株皮肤致病真菌具有抑制活性。     

大蒜素对三种农作物病原真菌的抑制作用

采用水浸提法和乙醇萃取法制备大蒜素,对稻瘟病菌(Pyricularia oryzae)、小麦纹枯病菌(Rhizocto-nia cerealis)、油菜菌核病菌(Sclerotinia sclerotiorum)进行体外抑制试验,结果表明,水浸提法制备的20mg/mL大蒜素对3种真菌的抑菌效果分别达到70.6%、83.6%、94.3%,乙醇萃取法制备的20 mg/mL大蒜素的抑菌效果分别达到79.7%、89.7%、93.0%,供试最低抑菌浓度5 mg/mL大蒜素的抑菌效果分别达到29.0%、61.0%、93.7%,显示大蒜提取液对稻瘟病菌、小麦纹枯病菌、油菜菌核病菌都有较强的抑制作用,对油菜菌核病菌的抑制作用最强。结果提示,大蒜提取液对植物病原真菌抑制作用的强弱因供试菌、提取方法、作用浓度而异,这为开发农用抗生素对农作物病害进行生物防治提供了实践依据。     

凹叶厚朴内生真菌产厚朴酚及和厚朴酚菌株的筛选

利用现代检验技术对药用植物凹叶厚朴中内生真菌代谢产物进行筛选,通过对凹叶厚朴中分离得到的34株内生真菌进行液体发酵培养,采用紫外-可见分光光度法,高效液相色谱法分析各菌株代谢产厚朴酚及和厚朴酚的能力。经初步检测结果发现,其中有1株菌代谢能够产生厚朴酚;另有1株菌代谢能够产和厚朴酚。为下一步研发凹叶厚朴内生真菌代谢产物提供理论依据,丰富内生真菌菌种资源库。     

杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑菌活性研究

为了研究杜仲内生真菌对植物病原真菌的抑制作用,以苹果腐烂病菌(Cytospora sp.)、番茄灰霉病菌(Botrytis cintrea)、西瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporum f.sp.niveum)、黄瓜枯萎病菌(Fusarium oxysporium f.sp.cucumerinum)、玉米大斑病菌(Helminthos porium turcicum)和白菜黑斑病菌(Alternaria brassicae)为供试菌种,对49株杜仲(Eucommia ulmoides Oliv)内生真菌及其次生代谢物进行了抑菌活性试验。结果表明,有22株内生菌至少对3种测试菌有抑制作用,9株内生菌对6种测试菌都有抑制作用;11株内生菌的次生代谢产物至少对3种测试菌有抑制作用,4株内生菌的次生代谢产物对6种测试菌都有抑制作用。说明从杜仲内生真菌中可以选择出对植物病原真菌具有良好抑制作用的菌种。     

植物内生菌研究进展

现有研究表明植物内生菌及其次级代谢产物具有多种生物学功能,是一种潜在的药物开发的新型资源库。该综述针对近年来有关内生菌分离纯化方法及次级代谢产物的生物活性作用等方面的研究进展进行总结概括,以期为植物内生菌资源的开发和利用提供帮助。