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相似文献
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1.
猪体外成熟,受精卵的体外培养研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
用自己改良的发育培养基使3.9% ̄20.1%体外成熟体外受精卵在体外发育过了4-细胞阻滞期,到达8 ̄16-细胞期,个别发育到桑椹期;培养中还观察到葡萄糖对猪胚胎的体外发育没有抑制作用,说明葡萄糖不是猪胚胎体外培养中出现阻滞的原因,在培养基中添加pFF可促进猪胚胎体外发育,使发育至8 ̄16-细胞期的胚胎率从3.9%,提高到102.2%。  相似文献   

2.
以体外培养的1-细胞期、2-细胞期、-8细胞期、桑椹期和囊胚期小鼠胚胎从M16培养液中掺入放射性标记软脂酸,合成胚胎脂以及氧化作用分别进行系统试验。结果证明:不同细胞期鼠胚胎在体外培养过程中程均以捅入外源软脂酸;除1-细胞期外,其余细胞期胚胎掺入量均高高,2-细胞期和桑甚期最高水平。  相似文献   

3.
初情期前母猪胚胎移植试验   总被引:2,自引:0,他引:2  
177枚受精卵或2-细胞期胚胎,手术法移植到8头发情同期化的青年母猪体内,结果有4头妊娠,其中3头受体足月产仔22只,另一头受体在妊娠88天后宰杀,发现有6个发育正常的胎儿。移植受体妊娠率为50%,移植卵成仔(胎)率为15.8%。  相似文献   

4.
家兔胚胎细胞核移植的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
研究改进了兔胚胎细胞核移植的技术体系,并对核移植胚胎的体外培养以及克隆胚胎的体内发育进行了试验。结果表明:卵母细胞去核率为88.9%(8/9),重组胚融合率为76.7%(176/229),将融合的重组胚与兔胎儿成纤维细胞共同培养,其2 ̄4细胞发育率、8 ̄16细胞发育率以及桑椹胚和囊胚的发育率分别为65.7%(23/35)、28.6%(10/35)、22.9%(8/35),显著高于“TCM-199+10%FCS”系统培养的43.3%(13/30)、26.7%(8/30)、16.7%(5/30)。16及32细胞期卵裂球的重组胚可发育到产仔,将111枚重组胚移植给9只同期处理的受体母兔,2只妊娠,其中1只产出2只足月克隆仔兔,1只在产前1周(妊娠22d)流产。  相似文献   

5.
小鼠胚胎切割取样后体外培养发育能力的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
本文对小鼠胚胎切割取样细胞数量的多少,取样后胚胎在室温中停留时间以及透明带存留与否的体外发育情况进行了研究,目的在于为牛胚胎性别鉴定切割取样时供借鉴和探讨。实验中的胚胎依据切割取样的细胞数分10个细胞以内和大于10个细胞以上两个组。其体外培养发育率分别为95.7%(67/70)和76.2%(32/42),两者差异极显著(P<0.01);其中晚期桑椹胚、早期羹胚、扩展囊胚的体外发育率分别为87.7%(64/73)、86.2%(25/29)、100%(10/10),三者之间差异不显著(P>0.05);培养前在室温下停留3~7h和9h的体外培养发育率分别为94.8%(73/77)、57.1%(20/35),两者差异极显著(P<0.01);胚胎取样后透明带存留和脱失的体外培养发育率分别为87.9%(51/58)和83.3%(45/54),两者差异不显著(P>0.05)。  相似文献   

6.
 比较了牛胚胎与小鼠胚胎在体外培养过程中的生长行为,结果表明,牛滋养层细胞与内细胞团(inner cellmass,简称ICM)连接不紧密,其迅速增殖,形成半透明囊腔结构;小鼠胚胎滋养层与ICM密切相连,形成盘状结构,并推移原代小鼠胎儿成纤维细胞(Primary murine embryosfibroblast,PMEF)饲养层。牛ICM形态呈现多样性,表现为团状、条状、网状和混合型;小鼠ICM形态单一,多呈圆盘状。体外培养的牛胚胎发育速度比小鼠胚胎迟缓,牛ICM初次传代时间为胚胎体外培养开始后5~6d,小鼠ICM初次传代时间为胚胎体外培养后3~4d。牛ICM分化程度由小到大依次为团状ICM、条状ICM、混合型正 和网状ICM。牛和小鼠胚胎附着率及ICM克隆率由大到小均依次为孵化胚、囊胚和桑褡胚,但桑褡胚和囊胚附着率和ICM克隆率均无显著差异(P>0.05)。与全胚相比较,牛和小鼠裸胚(无透明带或透明带不完整的胚胎)贴壁时间提前,但ICM形成率和ICM的生长行为均无显著差异;小鼠和牛桑椹胚卵裂球(中、晚期)体外分化抑制培养,形成亚囊胚而不能获得 ES细胞;剥离牛胚胎滋胚层细胞,ICM细胞更易分化。  相似文献   

7.
屠宰山羊卵母细胞的体外成熟培养   总被引:3,自引:0,他引:3  
屠宰白山羊卵巢在25~35℃下于2~3小时运回实验室。每个卵巢获可培养卵丘细胞-卵母细胞复合体(COC)042个(193456);可培养COC在M199+hCG1IUml+17-β-雌二醇1μgml+牛血清白蛋白10mgml+庆大霉素50IUml的培养微滴中于5%CO2、空气、饱和湿度或标准气(5%CO2、5%O2、90%N2)、饱和湿度,39℃培养24~26小时,卵母细胞成熟率为903%(186206)。成熟卵母细胞体外受精率为715%(133186)。结果表明此培养系统适合于屠宰白山羊卵母细胞的体外成熟培养  相似文献   

8.
体内外成熟与老化对小鼠卵激活刺激敏感性的影响   总被引:2,自引:0,他引:2  
小鼠体外成熟卵母细胞组的乙醇激活率显著低于体内成熟卵母细胞组水平,在体外成熟过程中(培养液:TCM-199+FCS(20%)+hCG(2IU/ml))卵丘细胞的存在极显著地降低了成熟卵的乙醇激活率,卵激活率由58.7%(裸卵)降为13.8%(卵丘卵母细胞复合体)超排卵子随着卵龄的增加,卵子的乙醇激活率逐渐升高,而且体内卵的激活率高于体外老化同龄组的水平。  相似文献   

9.
小鼠卵母细胞的孤雌激活及体外发育   总被引:10,自引:1,他引:9  
分别用不同条件的电泳冲、酒精浓度刺激不同卵龄的小鼠卵母细胞,进行体外工观察卵母细胞的活化和体外发育情况。结果表明,(1)以场强55V/mm,脉宽160μs的电脉冲刺激卵龄为17h的卵母细胞,活化卵形成二原核率为90%;以场强55%/mm,脉0宽640μs的电脉冲刺激卵龄为15h的卵母细胞2min,活化率最高为72%,激活卵的桑椹胚发育率为22.2%。  相似文献   

10.
猪输卵管上皮细胞对小鼠早期胚胎体外发育的影响   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
研究了不同生殖时期猪输卵管上皮细胞对小鼠早期胚胎体外发育的影响,以此建立了适于早期小鼠转基因胚胎体外培养的猪输卵管上皮细胞共培养体系,并用PCR法对体外培养发育到不同阶段的小鼠转基因胚胎进行了外源基因整合检测。结果表明,在受孕初期的猪输卵管上皮细胞(无论是原代还是传代细胞)上,培养的小鼠1-细胞期胚胎的囊胚率显著高于发情间期的猪输卵管上皮细胞(P<0.01);在相同生殖时期猪输卵管原代和传代上皮细胞上,培养的小鼠1-细胞期胚胎的囊胚率差异不显著;在转基因胚胎不同发育阶段,PCR检测呈阳性的胚胎比率分别为:2-细胞期为96%,4-细胞期为63%,8-细胞期为43%,囊胚期为19%。由此可见,受孕初期的猪输卵管上皮细胞可促进与之体外共培养的小鼠早期胚胎的发育;随着早期小鼠转基因胚胎的发育,PCR检测呈阳性的转基因胚胎的比率逐渐降低。  相似文献   

11.
采用体外分离培养的兔输卵管上皮细胞和子宫内膜细胞构建了序贯共培养体系,并与体外受精得到的受精卵进行共培养。试验结果表明,HTF液受精率显著高于T6液(P<0.05),更适用于卵母细胞的体外受精。序贯共培养体系和输卵管上皮细胞培养组2-细胞率都显著高于单独培养液组和子宫内膜细胞培养组(P<0.05),二者均可克服2-细胞阻滞。序贯共培养体系胚胎的囊胚体外发育率显著高于其他共培养组(P<0.05)。表明序贯共培养体系比单一体细胞共培养体系能更好地模拟体内环境,提高早期胚胎的体外发育率。  相似文献   

12.
用3.5M和2.5M DMSO作冷冻保护剂进行超速冷冻8-细胞鼠胚。用前者作保护剂的鼠胚,无论在体外培养和体內发育的情况都好于后者。前者中的8-细胞鼠胚解冻后的存活率为78.9%;存活胚胎体外发育到囊胚的比率为83.4%,体內附植率为63.9%,胎儿形成率为43.2%。实验证明,超速冷冻保存胚胎是一种省时、省力、省钱的好方法。  相似文献   

13.
小鼠 1-细胞胚胎在含10.8,16.2,21.6和32.4 mM 乳酸钠不同 Whitten's 液中培养时,分别有2.6%,172%,8.5%和0%的胚胎发育到扩展囊胚。在4种培养液中均有60%以上的胚胎完成了第1次卵裂,发育到2-细胞期,但以后的发育则有明显差异。培养液中较高浓度乳酸钠的存在,可能是造成小鼠胚胎体外培养的“2-细胞早期阻断”的原因之一。  相似文献   

14.
为探讨不同培养基及共培养对克服小鼠早期胚胎体外发育阻滞的影响,用不同成分组成的5种常用培养液对小鼠早期胚胎进行体外培养,后以KSOM作为基础培养基,KSOMFBS为对照,分别与小鼠输卵管上皮细胞(MOEC)和卵丘细胞(CC)进行共培养,观察从2细胞发育到4细胞的胚胎数和囊胚数的变化。结果发现5种培养液中从2-细胞发育到4-细胞的胚胎率为30.5%~43.5%,差异不显著。KSOM组囊胚率为40.9%,显著高于其他各组(27.9%~30.0%)。共培养后,各组中克服发育阻滞的胚胎数和囊胚数均有显著提高,其中添加胎牛血清组4细胞胚胎数和囊胚数显著高于不添加组,输卵管上皮细胞组显著高于卵丘细胞组。结果显示共培养对克服小鼠2-细胞发育阻滞作用明显,添加胎牛血清效果明显好于不添加,输卵管上皮细胞共培养效果好于卵丘细胞。  相似文献   

15.
用10单位孕马血清和10单位人绒毛膜促性腺素使小白鼠超数排卵,自然交配后分两组,一组取受精卵,统计受精卵个数,并在CZB培养基微滴内培养78h,统计发育成又桑椹胚的个数。另一组,让受精卵在体内自然发育72h,收集桑椹胚,统计其个数。比较研究受精卵在体内外发育到桑椹胚的能力。实验结果表明,每只鼠的平均冲出受精卵数为28.2枚;受精诳在体外培养时桑椹胚的发育率为88%;因此在体外培养时从每只鼠平均可得  相似文献   

16.
体外培养山羊早期胚胎基因表达的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
用单胚构建的mRNA差异显示技术,对体外培养的山羊早期2、4、8~16细胞期胚胎的基因表达进行研究,并选择1条在8~16细胞期胚胎特异表达的条带进行分析。结果表明:该片段与牛NADH脱氢酶1a亚复合体4基因具有97%的同源性。该基因影响细胞内ATP的合成,可能与羊早期体外培养胚胎的正常发育有关。  相似文献   

17.
本实验通过添加1~4mg/ml牛输卵管蛋白至TCM-199培养液中,对小鼠原核胚进行体外培养,观察原核胚的分裂和发育情况。小鼠原核胚很少分裂,远低于对照组原核胚分裂和发育水平。牛输卵管蛋白对小鼠原核胚的发育起明显的抑制作用,同时这种抑制作用随牛输卵管蛋白浓度的降低.似乎有减轻的趋势,表明牛输卵管蛋白中,存在抑制小鼠胚胎分裂和发育的蛋白质,对小鼠原核胚的抑制作用具有剂量效应。  相似文献   

18.
昆明小鼠单细胞胚胎体外培养的研究   总被引:6,自引:0,他引:6  
本试验研究了葡萄糖、EDTA和小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育的影响.结果发现:不含葡萄糖HECM-1组桑椹率为40.05%,对照组为8.14%;含EDTA的CZB组桑椹率为61.18%,对照组为47.44%;小鼠血清对昆明小鼠单细胞胚体外发育无促进作用。可见,葡萄糖抑制昆明小鼠单细胞胚胎体外发育;在不含葡萄糖的条件下,EDTA支持小鼠早期胚胎体外发育;无论有无葡萄糖小鼠血清对小鼠早期胚体外发育无促进作用。  相似文献   

19.
本试验采用国产化学试药和哈尔滨地区的天然水,制备了 Brinster 化学合成培养液。把160枚通过超数排卵获得的2-细胞期小鼠胚胎放在添加适量牛血清白蛋白或胎牛血清的 Brinster 化学合成培养液内,并在适当湿度、5%CO_2和95%空气的气相环境、37℃温度条件下培养。58小时后,大约67%4小鼠2-细胞期胚胎发育到桑椹胚阶段;大约32%的小鼠桑椹胚发育到囊胚期阶段。试验证明,用国产化学药品和哈尔滨地区水配制的培养液可以对早期小鼠胚胎进行体外培养研究。  相似文献   

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