人参细胞TTC-脱氢酶活力测定条件的优化

以人参愈伤组织为试材,采用单因子试验和L16(45)正交试验,对2,3,5-氯化三苯基四氮唑(2,3,5-Triphenyltetrazolium Chloride,TTC)-脱氢酶还原法测定人参细胞活力的条件进行优化。选取TTC浓度、p H值、反应温度、反应时间作为试验中的4个因子,以吸光光度值和酶活力值为考察指标,探讨TTC-脱氢酶还原法测定人参细胞活力的最佳条件。结果表明,反应温度对人参细胞活力影响达到极显著水平(P0.01),反应时间对人参细胞活力影响达到显著水平(P0.1),得出人参细胞活力测定的最佳条件为TTC溶液浓度0.4%、p H 7.5、反应温度25℃、反应时间18h。     

广西地不容内生真菌疣孢漆斑菌DBR-11的抑菌活性

为了研究广西地不容内生真菌的抑菌活性,从广西地不容块根中分离纯化出18株内生真菌,采用拮抗试验测定了其对10种植物病原真菌的抑制活性,发现疣孢漆斑菌DBR-11对多数供试菌有很好的抑制活性。进一步测定了DBR-11菌株发酵产物的抑菌活性,发现发酵产物的乙酸乙酯萃取物对病原菌的抑制活性较高,质量浓度为5 g/L时,对10种植物病原真菌的抑菌率均在90%以上,有效中浓度(EC50)为0.007 2~0.446 5 g/L,其中对烟草黑胫病菌的毒力最高,EC50值为0.007 2 g/L;发酵产物的乙酸乙酯萃取物质量浓度为2 g/L时,72 h对15种供试动物病原菌中的7种能完全抑制,最低抑制浓度(MIC)为0.062 5~0.25 g/L,其中对痢疾志贺氏菌的抑制活性最高,MIC值为0.062 5 g/L。DBR-11发酵产物乙酸乙酯萃取物有广谱的抗菌活性,具有潜在的应用价值。     

四唑染色法测定白花前胡种子生活力方法研究

为探讨白花前胡(Peucedanum praeruptorum Dunn.)种子生活力的适宜测定方法,采用四唑(2,3,5-氯化三苯基四氮唑;2,3,5-Triphenyl tetrazolium chloride,TTC)染色法,设置不同浸种时间、不同染色浓度、不同染色时间的正交试验设计,来研究白花前胡种子的生活力测定条件。结果TTC法测定白花前胡种子生活力的最佳条件为在30℃环境下,浸种10 h,采用浓度1 g/L的TTC溶液在35℃环境里染色16 h。此法可作为白花前胡种子生活力测定的标准方法。     

高效液相色谱法测定虎杖中的白藜芦醇含量

[目的]以乙醇为萃取剂,优化提取条件,建立高效液相色谱测定虎杖中的白藜芦醇的方法。[方法]色谱柱为phenomenex C18（250 mm×4.6 mm,5μm）,流动相为无水甲醇-（浓度0.25%）乙酸（65∶35,V/V）等梯度洗脱,流速为0.8 ml/min,检测波长306 nm,以白藜芦醇的提取得率为评价指标,采用单因素试验和L25（5^4）正交试验法筛选最佳工艺条件。[结果]提取白藜芦醇的最佳工艺为：乙醇浓度为60%,料液比为1∶30（g/ml）,萃取温度为55℃,萃取时间为15 min;在此条件下,提取的白藜芦醇的提取得率达到0.826μg/g。[结论]该方法简便、快捷、准确性高,适用于虎杖中的白藜芦醇的测定。     

高效液相色谱法测定大蒜中大蒜素的含量

[目的]通过有机萃取法中萃取剂的选择、用量和萃取时间等条件的优化处理,建立大蒜中大蒜素含量测定的分析方法。[方法]将新鲜大蒜捣碎、酶解后,分别用乙醇和乙酸乙酯作为萃取剂萃取得到大蒜素溶液。用高效液相色谱仪分析样品中大蒜素的含量,确定最佳萃取剂;通过对不同时间段提取物检测对比,确定最佳萃取时间。[结果]以乙醇作为萃取剂提取大蒜素,大蒜素的平均浓度可以达到28.85μg/m L,乙酸乙酯提取组中的大蒜素平均浓度为13.24μg/m L;经对比分析,乙醇提取大蒜素的最佳萃取时间为3.0 h。[结论]乙醇作为实验室常用的化学试剂具有低毒、无污染、高效的提取效果,可为医药、食品等实验室对大蒜素的提取开发和利用提供参考。     

鳜养殖池塘底泥脱氢酶活性测定方法的研究

对鳜养殖池塘底泥脱氢酶活性的测定方法中的反应条件(反应温度、反应时间、萃取剂、萃取时间和缓冲液的pH等)进行了研究.结果表明:在反应时间为30 min,缓冲液pH为8.4,反应温度为37℃,萃取剂为乙酸乙酯,样品萃取时间为1 h的条件下,对4个底泥样品中脱氢酶活性的重复测定结果显示,该方法有较高的精密度(变异系数≤5.89%).     

不同品种观赏贝母花粉活力与萌发率比较

贝母是一种极具观赏价值与发展潜力的球根花卉。采用氯化三苯基四氮唑(TTC)、碘-碘化钾(I2-KI)染色法对10个品种(种)观赏贝母的新鲜花粉的生活力进行测定,同时采用离体培养法对各品种花粉的萌发率进行测定。综合2种测定方法发现,伊贝母的花粉活力最高,托里贝母、花格贝母和大白花贝母花粉活力相对较高;在离体培养时,培养基为1g/L硼酸+150g/L蔗糖时,花粉萌发率最高;-20℃干燥环境有利于花粉的贮藏。     

尖孢镰刀菌诱导产酶及同步糖化发酵产纤维素乙醇

以尖孢镰刀菌为研究对象,探究其诱导产酶及同步糖化发酵产纤维素乙醇的影响。选取不同诱导底物、产酶培养基以及发酵时间,通过测定发酵液中羧甲基纤维素酶活性和木聚糖酶活性,确定最佳诱导产酶条件。最佳诱导产酶培养基:底物30 g/L,羧甲基纤维素钠(CMC-Na) 5 g/L,蛋白胨10 g/L,磷酸二氢钾1 g/L,硫酸镁0. 2 g/L,硫酸铵3 g/L,pH值6. 0。最佳诱导产酶的底物为小麦秸秆,发酵4 d羧甲基纤维素酶活性达到12. 40 U/mL,木聚糖酶活性达到930. 9 U/mL。尖孢镰刀菌诱导所产纤维素酶具有较好的pH值稳定性和温度稳定性,在一定程度上能弥补真菌纤维素酶耐碱性差和细菌纤维素酶活性低的不足。将其作为乙醇发酵菌种进行木质纤维素同步糖化发酵,在3%葡聚糖负荷下,96 h生成乙醇12. 23 g/L,乙醇得率为71. 81%。将其与酿酒酵母混菌同步糖化发酵,48 h添加木糖利用率最高,96 h生成乙醇19. 11 g/L,乙醇得率82. 11%。     

蓼子朴提取物对小菜蛾生物活性的初步研究

以小菜蛾为试虫,对蓼子朴(Inula salsoloides Ostenf.)不同部位乙醇提取物进行杀虫活性比较,筛选出活性最高部位,然后采用不同溶剂对其进行萃取分离,得到不同溶剂萃取物,测试各萃取物对小菜蛾的触杀和拒食活性。结果表明,蓼子朴全草提取物活性最高,浓度为50 g/L时,对小菜蛾3龄幼虫72 h的触杀校正死亡率和24 h的非选择性拒食率分别可达96.67%和100.00%;不同溶剂萃取物中,氯仿萃取物的活性最高,对小菜蛾3龄幼虫72 h的触杀校正死亡率和24 h的非选择性拒食率分别达到80.00%和96.46%。     

真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定条件的优化

【目的】探究酶液制备及测定条件对真菌粗酶制剂脱氢酶活性的影响,确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定方法。【方法】采用氯化三苯基四氮唑(TTC)还原法测定真菌粗酶制剂的脱氢酶活性,分析粗酶制剂与去离子水质量比、活化时间、活化温度、振荡速率、搅拌时间、固液分离方法、活化剂种类、过滤介质及显色时间对脱氢酶活性的影响。【结果】1真菌粗酶制剂活化、分离方式及显色时间对真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定有明显影响。2确定真菌粗酶制剂脱氢酶活性测定优化方法为:将粗酶制剂与去离子水按照质量比1∶40装入三角瓶,在28℃、120r/min恒温摇床中振荡15h,用快速滤纸过滤获得酶液;将酶液与TTC-葡萄糖溶液混匀,在40℃恒温水浴锅中反应显色,待反应液出现红色后计时,维持90min完成显色反应,取出后加乙酸乙酯充分摇匀,4℃冰箱中静置5~6h,取上层澄清有机相在波长485nm比色,根据标准曲线计算脱氢酶活性。【结论】获得了测定真菌粗酶制剂脱氢酶活性的测定方法。     

4%乙烯利超低容量液剂对甘蔗调节 生长和品质的影响

2011要2012 年连续2 年使用4%乙烯利超低容量液剂处理甘蔗的田间试验表明,各浓度处理后期施用 不影响甘蔗生长和产量,但能显著增加甘蔗的含糖量和改善甘蔗的品质。施用浓度以每667 m2喷施16~18 g为宜, 在甘蔗收获前1~2 月对甘蔗茎叶喷雾1 次。     

低温污水处理器中耐冷菌脱氢酶活性分析

[目的]为解决我国北方冬季污水处理困难的问题提供技术支持。[方法]运用TTc法分析了pH值、温度和时间对从低温生物膜中分离纯化鉴定得到8株耐冷菌中脱氢酶活性的影响。[结果]菌株S1、S4、S5、S7和S8在最适温度和4℃下的最适pH值都是7．5,其他3株茵在2种温度下的最适pH值不同,但都在7．5—8．5的范围内。菌株S1、S3、S4、S5和S6的最适反应温度为30℃,菌株S2、S7和S8的最适反应温度为20℃。除菌株S3外,其余菌株在4℃下的最适反应时间比最适反应温度下的长。在4℃下,菌株S3、S4和S6的最适pH值和最适反应时间分别为8．5和0．6h、7．5和12．0h、8．0和0．5h,其最高脱氢酶活性分别为7．19、6．73和7．70mg（TF）／g（SS）。[结论]菌株S3、S4和s6的脱氢酶活性较高,适合用于处理低温污水。     

扛板归中大黄素的提取与含量测定

[目的]建立扛板归中大黄素的提取和含量测定方法。[方法]采用反相高效液相色谱法测定扛板归中大黄素的含量。色谱条件：色谱柱为Hypersil C18,流动相为甲醇-水-冰醋酸（V/V/,V 87∶13∶215）,流速为110 m l/m in,检测波长为254 nm,柱温为室温。[结果]在1~40μg/m l范围内,大黄素呈良好的线性关系,线性回归方程为Y=112.89X-8.912（r=0.999 9）。扛板归中的大黄素提取最优工艺条件为乙醇的浓度为80%,乙醇的用量为35 m l,提取时间为2 h。平均加样回收率为99.16%（RSD=1.49%）。[结论]该方法简便、快速、准确,可用于扛板归中大黄素的提取与含量测定。     

凤仙花叶不同提取物对细菌的抑制作用

为研究粉红色凤仙花叶的三种不同提取物对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌黑色变种三种细菌的抑制作用,用水、75%乙醇和75%丙酮分别提取凤仙花鲜花叶,获得凤仙花叶的粗提物。采用平板稀释涂布法对粗提物对三种细菌的抑菌效果进行检测,记录观察菌落数,计算抑菌率。结果表明:凤仙花叶的水提取物对大肠埃希氏杆菌、金黄色葡萄球菌抑制作用比枯草杆菌黑色变种强,且浓度越高,抑制性越强。当浓度为0.2 g/mL时,对三种细菌的抑菌率均达到最大,分别为99.92%、99.99%、99.98%。凤仙花叶的75%丙酮提取物和75%乙醇提取物对三种细菌的最低抑菌浓度(MIC)均为0.05 g/mL。综上所述,同种提取物的不同浓度对同种细菌的抑制作用存在明显的差异性,对三种细菌的抑制作用差异不明显。凤仙花叶不同提取物的抑菌效果存在差异,75%丙酮提取物和75%乙醇提取物均比水提取物作用强。     

辣蓼草提取物对玉米蚜的拒食活性

[目的]探究不同条件下辣蓼草乙醇提取物对玉米蚜的拒食活性。[方法]采用单因素试验和正交试验,研究不同浓度、温度和时间条件下辣蓼草提取物对玉米蚜的拒食率。[结果]提取物浓度为100.00 mg/m L、温度为30℃、时间为48 h时辣蓼草提取物对玉米蚜的拒食活性最高。提取物浓度对辣蓼草拒食活性影响最大,其次为处理时间因素。[结论]该试验结果为开发以辣蓼草为原料的植物性杀虫剂提供了理论依据。     

核桃青皮提取物对枸杞蚜虫的触杀和拒食活性研究

研究核桃青皮对枸杞蚜虫的触杀和拒食活性,为开发以核桃青皮为原料的植物杀虫剂提供依据。采用点滴法,测定了核桃青皮乙醇提取物和石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水4种不同极性萃取物对枸杞蚜虫的触杀活性;用载毒叶片法,测定了石油醚、氯仿、乙酸乙酯、水的4种提取物对枸杞蚜虫的拒食活性。结果表明,核桃青皮提取物对枸杞蚜虫有较高的触杀活性,质量浓度为50.00 g/L时,48 h的校正死亡率达86.6%;4种萃取物对枸杞蚜虫的触杀活性和拒食活性的顺序为水萃取物>氯仿萃取物>乙酸乙酯萃取物>石油醚萃取物,其中水萃取物48 h的校正死亡率为93.0%。由此表明,核桃青皮对枸杞蚜虫具有较强的触杀活性,且杀虫活性和拒食活性较强的物质为一类极性较大的化合物。     

银杏壳中类黄酮的提取工艺研究

[目的]研究银杏壳中类黄酮的提取工艺条件。[方法]采用乙醇水溶液作提取溶剂来提取银杏壳中的类黄酮,通过单因素试验考察提取时间、乙醇浓度、料液比和提取温度等主要因素对银杏类黄酮提取的影响,并采用正交试验确定传统醇提取法和微波协同萃取法提取银杏壳中类黄酮的最佳工艺条件。[结果]传统醇提取法的最佳条件为:提取温度为60℃,乙醇浓度为75%,料液比为1∶45(W/V,g/ml,下同),提取时间为2 h;在此条件下,类黄酮的得率为0.503 4%。微波法提取银杏壳中类黄酮的最佳条件为:微波温度为60℃,乙醇浓度45%,料液比1∶30,微波提取时间480 s;在此条件下,类黄酮得率为0.815%。[结论]微波提取法操作极为简便迅速,是一种快速、高效、节能的新型提取工艺,与传统醇提法比较,有一定的优越性。     

表面活性剂辅助提取沙棘叶黄酮工艺优化及其抗氧化活性测定

通过单因素试验优化表面活性剂辅助提取沙棘(Hippophae rhamnoides L.)叶中黄酮的提取工艺,并且对粗提液的抗氧化活性进行测定。结果表明,表面活性剂辅助提取沙棘叶黄酮的最佳提取工艺为选用0.02 g/m L的蔗糖酯作表面活性剂、乙醇体积分数5%、提取温度70℃、料液比1∶70(g∶m L)、提取时间1.5 h,此条件下黄酮提取率为1.6%。黄酮粗提液对超氧阴离子自由基、羟自由基、DPPH自由基有明显的清除作用。     

蛇床子提取物对番茄灰霉病菌的抑制效果

为研究蛇床子提取物对番茄灰霉病的抑菌效果及抑菌活性的稳定性,以番茄灰霉病菌作为供试菌种,用蛇床子提取物作为抑菌剂,采用生长速率法测定其抑菌效果。结果表明,蛇床子不同溶剂提取物对供试菌种均表现出抗菌效果,并筛选出最佳提取溶剂为乙醇(φ=95%),其抑菌率达到76.92%;提取时间和方式是超声提取30min,抑菌率达到78.87%,超声波提取10、60min与震荡1、2、3d变化不大;在不同质量浓度下测定蛇床子抑菌效果,当提取物质量浓度为20g.L-1时,接菌后3.5d菌丝生长抑制率可达到最大值,为77.35%;蛇床子提取物抑菌活性的试验中,蛇床子在-20℃和100℃时抑菌活性低于0～80℃处理;蛇床子的光稳定性在光照超过48h之后抑菌活性有所下降;蛇床子的有效保存时间在0d最大,以后逐渐降低,超过25d抑菌率明显下降。因此,蛇床子提取物对番茄灰霉菌的最佳抑菌条件是用乙醇(φ=95%)提取,超声波提取30min,质量浓度为20g.L-1,避光保存于4℃的冰箱中,保存时间不超过25d。     

青刺果不同部位水提取液的抑菌效果

采用60℃水浴12 h、煮沸10min、20min 3种方式,分别提取青刺果果实、根、茎与叶4个部位中的水溶性成分对8种常见致病菌和食品腐败菌的抑菌作用.结果表明:果实和根在上述3种提取方式下所得的水提液,当浓度达到0.25g/ml时,均显示不同程度的抑菌作用,果实提取液的抑菌效果明显比根的好;该浓度下,60℃水浴12 h处理、煮沸20min的抑菌作用显著强于煮沸10min;提取时间延长可提高抑菌效果;果实经这3种方式处理所得的提取液,最小抑菌浓度为0.125g/ml.