华南番木瓜病毒病及环斑病毒株系调查鉴定

根据田间调查、病毒粒子和内含体形态，血清反应，寄主范围和症状，昆虫介体，物理性质，潜育期等试验结果，认为华南４省区的番木瓜病毒病只有ＰＲＶ一种，根据在西葫芦上的症状特点，将ＰＲＶ初步区分为４个株系，即Ｙｓ，Ｖｂ，Ｓｍ和Ｌｃ。在３１３份标样中，它们单独所占比例分别为４０．５７％，１０．２２％，０．６４％，４．４７％Ｙｓ＋Ｖｂ（复合侵染）占４４．０８％这表明Ｙｓ为优势株系，Ｖｂ次之，Ｌｃ和Ｓｍ发生少分     

华南番木瓜病毒病及环斑病毒株系的调查鉴定

根据田间调查、病毒粒子和内含体形态、血清反应、寄主范围和症状、昆虫介体、物理性质、潜育期等试验结果、认为华南４省区的番木瓜病毒病只有ＰＲＶ一种。根据在西葫芦上的症状特点，将ＰＲＶ初步区分为４个株系，即Ｙｓ、Ｖｂ、Ｓｍ和Ｌｃ。在３１３份标样中，它们单独所占比例分别为４０．５７％，１０．２２％，０．６４％，４．４７％，Ｙｓ＋Ｖｂ（复合侵染）占４４．０８％，这表明Ｙｓ为优势株系，Ｖｂ次之，Ｌｃ和Ｓｍ发生少分布不广。研究结果还表明，以前有人报道的ＰＭａＬＶ实则是本研究的Ｖｂ，而不是一个新病毒。     

番木瓜环斑病毒研究进展

综述了番木瓜病毒株系、生物学特性、检测及防治方法的最新研究进展。     

番木瓜环斑病毒的提纯研究

详细报道了影响番木瓜环斑病毒（ＰＲＶ）粗提纯效果的几个主要因素（繁殖寄主种类，有机澄清剂，分散剂，病毒浓缩前的去渣离心力，浓缩病毒的超离心力等）的最佳选择，繁殖寄主以角葫瓜最好。该研究综合上述最佳选择而拟定的一次差速离心和一次３０％蔗糖硫酸连续密度梯度离心３ｈ的简单程序较好地提供了ＰＲＶ提纯的病毒有典型核蛋白紫外吸收曲线，Ａ２６０／Ａ２８０＝１．６８，提纯产量为２．５６ｍｇ／１００ｇ西葫芦病叶，所     

华南地区番木瓜环斑病毒和畸型花叶病毒调查鉴定研究

调查鉴定了广州、南宁、厦门和福州市番木瓜病毒病病原种类，发现都是由番木瓜环斑病毒引起的，未发现番木瓜畸型花叶病毒。     

转番木瓜环斑病毒复制酶基因番木瓜的多重定性检测

为监测和管理转基因番木瓜华农1号的商品化生产、销售,建立了相应的转基因定性检测方法.选用木瓜蛋白酶作为番木瓜的内源对照基因,建立对转基因番木瓜PRSV-Rep基因、外源CaMV35S启动子序列、NOS终止子序列和NPTⅡ基因的常规PCR检测体系.退火温度为40～60℃时,都分别扩增出了清晰的目的基因.单基因常规PCR检测转基因模板量的下限为5×10-7g.建立的三重PCR检测技术,检测了包括NPTⅡ、Rep和CaMV35S;NPTⅡ、Rep和Nos;NPTⅡ、Rep和Papain等3个组合.建立了NPTⅡ、ReP、CaMV35S和Nos4个基因的四重PCR检测技术.     

番木瓜环斑病毒病综合防治

结合多年的番木瓜生产种植经验和新近的国内外番木瓜环斑病毒病的防治技术,对番木瓜环斑病毒病的防治进行了综述,提出了防治番木瓜病毒病的综合策略以及"病原—寄主"平衡调控的防治思想。     

番木瓜环斑病毒外壳蛋白基因在大肠杆菌中的表达

番木瓜环斑病毒（PRV）外壳蛋白（CP）基因cDNA克隆到pUC18上构型建成大肠杆菌（Escherichia coli)表达载体，Western blot检测结果表明该表达载体在E.clidDH5α中有两种特异蛋白表达，分子量为34kd的蛋白与推测的表达产物大小相符，且与PRVCP的一个“组分”大小相似；而分子量为16kd的蛋白可能是34kd蛋白的降解物或者是PRV CP基因不完全表达产物。     

番木瓜环斑病毒融合基因植物表达载体的构建

利用PCR重叠延伸技术（gene splicing by overlap extension,SOE）将番木瓜环斑病毒（Papaya ringspot virus,PRSV）Vb株系的外壳蛋白（coat protein,CP）基因和Ys株系的复制酶（replicase protein,RP）基因构建成融合基因VY。同时对常规的SOE法进行了改进,并对改进的SOE的反应体系进行了优化,其中以Pyrobest DNA聚合酶和60℃的退火温度为最佳。将融合基因n’构建在植物表达载体pCAMBIA2300上,测序结果表明,该融合基因的序列与设计相符。融合基因VY植物表达载体的构建,可为进一步获得对PRSV广谱抗性的转基因番木瓜奠定基础。     

番木瓜环斑病的空间分布及流行动态模糊聚类分析

以病样方率、平均样方病株数、扩散系数和聚块性指标等多数分析了番木瓜环斑病病株的田间分布类型，并利用模糊聚类方法初步探讨了此病的流行特征。结果表明病株在田间的分布随着时间的发展而变化。在流行初期，病株呈随机分布，随后呈聚集分布，到后期则趋于均匀分布。     

鸡肾型传染性支气管炎病毒(IBV)的分离和某些生物学特性研究

用鸡胚传代方法从肾脏肿大的病死雏鸡分离到了两株鸡肾型传染性支气管炎病毒,命名为ＭＫ和ＭＧ,并对其某些生物学特性进行了研究。结果分离的两株病毒在电镜下表现为典型的冠状病毒形态;接种易感雏鸡能引起明显的肾脏病变;含病毒的鸡胚尿囊液经１％胰酶处理后能凝集鸡红细胞,且于接种后７２～９６ｈ的活胚尿囊液血凝价较高;能干扰新城疫在鸡胚中的增殖;鸡胚半数感染量ＭＫ－６为１０７７５／ｍｌ、ＭＧ－６为１０７５／ｍｌ。     

菜粉蝶颗粒体病毒与化学杀虫剂混用防治菜青虫及其增效机制研究

菜粉蝶颗粒体病毒(PrGV)与多种低浓度的化学杀虫剂混用,对莱青虫的毒力具有明显的增效作用。PrGV与乙酰甲胺磷混用对菜青虫的防治效果和作物的保护率均优于单用PrGV或乙酰甲胺磷,并且混剂中化学杀虫剂的用量也可减少30％～50％。初步认为PrGV感染对虫体乙酰胆碱酯酶(AChE)。多功能氧化酶(MFO)活性的降低是混剂增效的内在原因之一。经PrGV感染的5龄虫,AChE活性降低了37.94％,MFO活性也下降了55.37～78.78％。病毒感染也影响到杀虫剂对MFO活性的诱导作用。由于MFO活性较低,其对药剂的降解力也随之下降,因此有更多杀虫剂可到达作用靶标AChE,进一步抑制原来活性已较低的感染病毒虫体的AChE的活性。     

抗环斑型花叶病毒病番木瓜新品种选育研究初报

用本地番木瓜品种(类型)与新引进的国外品种哥仑比亚(Colunbia)杂交获得杂交后代(F1),从中选择抗病植株再与抗病株系岭南1号杂交,初步选育出钟村1号等3个具丰产优质果实特性的优良抗病类型。接种试验及田间观察结果表明,钟村1号对3个株系病毒抗性均表现出较高水平,发病轻微,具有较强而稳定的水平抗病性。     

水稻簇矮病毒的提纯及其性质

 采用差速离心和蔗糖密度梯度离心，可获得水稻簇矮病毒（RBSV）提纯制剂。提纯制剂经紫外扫描，呈典型的核蛋白吸收曲线，A260/240=1.18，A260/280=1.61。在电镜下观察提纯病毒，可见大量比较均一的球状粒体，直径为60.0nm。病毒粒体有双层衣壳，蛋白亚基清晰可辨。通过免疫扩散和免疫电镜试验，病毒粒体与自制的RBSV抗血清有明显的血清学反应，而这种抗血清与水稻矮缩病毒(RDV)、水稻瘤矮病毒(RGDV)不起反应。提纯病毒制剂以苯酚-甲基苯酚-SDS方法提取核酸。将其注射到介体昆虫内，具有侵染性。核酸制品有典型的核酸紫外吸收曲线，A260/228=2.27，A260/280=2.02。根据核酸在不同离子强度下对RNase的稳定性等的测定，表明其核酸属双链RNA。根据紫外吸收测定，RNA在RBSV粒体中的含量为17.5%-20.1%。用聚丙烯酰胺凝胶电泳，其RNA的总分子量为16.66×10#+(6)d，含组分分子量为2.70、2.30、1.90、1.70、1.68、1.50、1.38、1.20、1.10、0.60、0.35、和0.25(× 10#+6)。这些结果表明，RBSV是植物呼肠弧病毒亚组Ⅰ的一个新成员。     

白芷花叶病的毒原鉴定

在陕西杨陵地区,从严重受害呈现花叶症状的白芷植株上分离到一种病毒。该病毒通过磨擦接种,能侵染10科25种以上植物;TDP为65℃,DEP为10~(-3),L则为4天;桃蚜及蚕豆蚜不能传播,但能通过种子和汁液进行传播;可与烟草环斑病毒(TRSV)抗血清产生明显的沉淀反应;该病毒粒子呈圆球形,大小30nm。此病毒被鉴定为TRSV。     

大豆花叶病防治研究

对184个大豆品种(品系)进行自然发病和人工接毒抗性鉴定,选出一批抗病良种。药剂试验结果,呋喃丹、涕灭威播种时沟施治蚜效果好,持效期长,但防病效果差;采用以抗病良种为主的综合防治措施,效果显著,病株减少87.2％,种子斑驳率降低82.2％,产量增加53.3％。