超声波辅助提取苜蓿皂苷及其纯化研究

苜蓿皂苷是紫花苜蓿中含有的主要生物活性物质之一,已证实其具有降低动物机体及血浆中胆固醇含量的作用,因此,随着人们对苜蓿皂苷生物活性的不断认识,其提取及纯化已经受到越来越广泛的关注。本试验采用超声波辅助进行醇法提取,使用大孔吸附树脂富集纯化苜蓿皂苷。通过试验,确定了超声波辅助醇提的最佳条件为:乙醇浓度70%、提取时间60min、固液比1:10。富集苜蓿皂苷的最适的吸附树脂型号为AB-8,吸附平衡后,洗脱液的最适乙醇浓度为75%。     

大孔树脂纯化地肤子总皂苷的研究

目的:研究大孔树脂富集、纯化地肤子总皂苷的工艺条件及参数,为地肤子总皂苷的工业化生产提供参考。方法:以地肤子总皂苷的洗脱率、得率、总皂苷精制度为指标,考察大孔树脂富集、纯化地肤子总皂苷的吸附性能和洗脱参数。地肤子的70%乙醇提取液260 ml上D-101-Ⅰ大孔树脂柱(1.5 cm×15 cm,生药0.223 8g/ml),体积流量为1.2 ml/min。先用3BV(3倍体积)蒸馏水洗去杂质,然后以3BV50%乙醇溶液洗脱。结果与结论:通过大孔树脂富集与纯化后,地肤子总皂苷洗脱率为90.56%,总皂苷得率为42.59%,总皂苷精制度达261.73%,所用方法可较好地纯化地肤子总皂苷。     

地黄中梓醇的大孔吸附树脂纯化工艺

采用优选大孔吸附树脂纯化梓醇,以分光光度法测定梓醇浓度,对纯化地黄中梓醇的大孔吸附树脂工艺进行了研究.结果表明,H103树脂吸附与纯化梓醇的效果较好,上样液浓度为4.08 mg/mL、上样液体积为7个柱体积、洗脱剂为体积分数10％的乙醇、洗脱剂体积为8个柱体积、静态吸附时间为4h为纯化的最优条件.     

洛龙党参总皂苷提取纯化工艺研究

采用乙醇回流提取法考察不同提取温度、料液比、乙醇浓度、提取时间对洛龙党参总皂苷提取率的影响,对提取工艺条件进行正交试验优化,并筛选合适的大孔吸附树脂纯化总皂苷。结果表明,洛龙党参总皂苷回流提取的最佳工艺条件为:提取温度70℃,料液比1∶25,乙醇浓度70%,提取时间90 min,在此工艺条件下总皂苷提取率为2.15%;HPD-100型大孔吸附树脂对洛龙党参总皂苷吸附性能最佳,最佳纯化条件为:上样液浓度5 mg/mL,洗脱剂为70%乙醇,在此纯化条件下总皂苷的纯度为90.69%。该提取纯化工艺操作简单,所需成本低,可行性强,可为洛龙党参的工业开发提供理论参考。     

大孔树脂对黄芪总皂苷的分离纯化研究

[目的]筛选分离纯化黄芪总皂苷的最佳工艺。[方法]利用动态吸附-解析方法,以紫外分光光度法测定黄芪总皂苷的含量,研究最适大孔树脂分离纯化黄芪总皂苷的条件。[结果]AB-8型大孔树脂富集纯化黄芪总皂苷的最优条件为：采用黄芪提取液浓度为0.1g/ml上柱,上样量为3 BV,流速为1.0 ml/min,解吸时先用4 BV蒸馏水淋洗,再用4 BV50%乙醇解吸,收集50%乙醇洗脱液,得黄芪总皂苷提取物浸膏,黄芪皂苷收率可达52.1%。[结论]该工艺简单可行,能满足大生产的要求。     

大孔吸附树脂纯化辣木叶总皂苷工艺研究

研究大孔吸附树脂纯化辣木叶总皂苷的工艺条件和参数.以洗脱率、精制度等为指标,考察大孔吸附树脂对辣木叶总皂苷的吸附性能和洗脱参数.25mL辣木叶总皂苷样品液上大孔吸附树脂,用蒸馏水,30%、50%乙醇各200mL依次洗脱,辣木叶总皂苷富集于50%乙醇洗脱部位.采用大孔吸附树脂技术富集、纯化辣木叶总皂苷,其洗脱率为(76.3±0.3)%,精制度为124.9%,该法可较好地纯化辣木叶总皂苷.     

大孔吸附树脂富集·纯化粟米草总皂苷工艺研究

[目的]研究大孔吸附树脂富集、纯化粟米草总皂苷的工艺。[方法]利用大孔吸附树脂技术，通过对4种不同型号（AB-8、D101、HPD100、HPD600）的树脂进行选择，采用静态吸附方法确定适合的树脂型号；采用动态吸附方法，以总皂苷的得率为指标，考察其纯化富集的工艺条件。[结果]4种树脂型号中，D101型大孔吸附树脂对粟米草总皂苷具有良好的纯化富集作用，对粟米草总皂苷的洗脱率达80．9％，其工艺条件为：洗脱溶剂用体积分数为60％的乙醇，料液质量浓度为0．5g/ml，洗脱速率为2BV／h，树脂药材质量比2：1。[结论]用D101型大孔吸附树脂富集和纯化粟米草总皂苷的工艺具有吸附量较大、洗脱率较高、树脂再生简便等优点，在粟米草皂苷的富集纯化和生产中具有推广应用价值。     

大孔树脂法分离纯化海燕总皂苷的研究

[目的]探讨大孔树脂法分离纯化海燕总皂苷的最佳工艺。[方法]采用优选树脂分离纯化海燕总皂苷，以分光光度法测定海燕总皂苷的含量。[结果]D-101型大孔树脂吸附纯化海燕总皂苷的效果最好，其工艺参数为：饱和吸附量为65．8mg／g，解吸率N97．66％，洗脱时上样原液pH值为6～7，洗脱液为体积分数为70％的乙醇，洗脱液用量为6BV；洗脱液流速为6BV／h。[结论]所建立的分离纯化工艺简单可行，为海燕总皂苷的工业生产提供了依据。     

人参总皂苷提取分离工艺的优选

为研究D-101型大孔吸附树脂富集纯化人参总皂苷的工艺条件，以人参总皂苷得率为考察指标。确定了D-101型大孔吸附树脂富集纯化人参总皂苷的性能和洗脱参数。结果表明；以50%乙醇为洗脱剂效果最佳。人参总皂苷洗脱率在85%以上。纯度约为60%。此工艺简便，无污染，成本低，利于推广。     

大孔吸附树脂分离富集铁筷子总皂苷的研究

对7种大孔吸附树脂的铁筷子总皂苷吸附性能进行了比较筛选试验,并对选定的树脂进行了吸附与解吸优化条件研究。其中LSA-30型大孔吸附树脂具有较佳的吸附能力,其吸附分离铁筷子总皂苷的适宜条件为:上样浓度60 mg/mL,吸附流速2.0 BV/h,洗脱剂为体积分数30%~95%的乙醇,洗脱速度1.0 BV/h,[NaCl]为0.5 mol/mL;95%乙醇洗脱液干燥后总固形物中铁筷子总皂苷含量达到60%以上。     

不同温度型苜蓿产量和品质的动态分析

根据苜蓿干草产量和品质指标的实测值,用非线性函数模拟和分析了冷、暖型苜蓿的干草产量和品质指标的动态变化。结果表明,冷型苜蓿的干草产量和品质指标(除粗脂肪含量外)均优于暖型苜蓿;在快速生长阶段,冷型苜蓿的平均生长速率较暖型苜蓿高40.7%,其累积生长量在03-28以后开始超过暖型苜蓿,盛花期的产草量比暖型苜蓿高出5.3%;冷型苜蓿的粗蛋白含量从分枝期到结荚期均高于暖型苜蓿,盛花期约高出0.8%;冷型苜蓿的粗纤维含量增速较暖型苜蓿慢,盛花期其粗纤维含量较暖型苜蓿低4.3%;冷型苜蓿的粗脂肪含量05-05(初花期)前高于暖型苜蓿,05-05后反而低于暖型苜蓿4.1%。     

苜蓿和草木樨腐解及养分释放规律的研究`

秋季将苜蓿、草木樨地上部茎叶(鲜样)剪碎,装入200目尼龙网袋中,水平埋置于土中10 cm深处,第二年春季开始至秋季分12次取样测定其干物质、碳、氮、磷、钾的残留量,得出干物质分解率、碳的矿化率及养分释放率。结果表明:苜蓿干物质的年分解率为75.4%,高于草木樨5.1个百分点;苜蓿碳的年矿化率为73.8%,高于草木樨4.4个百分点;苜蓿氮的年释放率为74.4%,高于草木樨18.6个百分点;苜蓿磷的年释放率为74.7%,高于草木樨23.3个百分点;苜蓿钾的年释放率为96.8%,低于草木樨0.1个百分点;2008年10月~2009年4月苜蓿、草木樨干物质的分解率分别占全年分解率的54.2%和46.4%,钾的释放率分别占全年的94.5%和92.8%。     

苜蓿方捆袋贮饲料品质评价

【目的】方捆袋贮是紫花苜蓿青贮模式之一,具有运输使用方便灵活等优点,然而,草捆青贮袋容易破损,导致青贮饲料内部或表面呈斑块状发霉。通过对青贮袋破损与未破损方捆苜蓿青贮饲料品质的综合评价,为紫花苜蓿青贮模式的选择及其在养殖业中的利用提供理论依据。【方法】取青贮袋破损的草捆中未发霉的青贮饲料以及青贮袋未破损的苜蓿青贮饲料,分别从草捆上、中、下三层取样,比较微生物菌落数、化学成分及p H、有机酸和氨态氮含量,使用V-Score和Kariser两种评价方法,综合评价两者的青贮发酵品质。【结果】苜蓿方捆袋贮饲料的干物质含量为43.86%—45.47%,粗蛋白含量为21%以上,中性洗涤纤维含量为35.87%—37.42%,酸性洗涤纤维含量为30.68%—31.79%,灰分含量为8.37%—8.50%,可溶性碳水化合物含量为0.46%—0.53%。青贮袋破损的未发霉苜蓿青贮饲料除了干物质含量显著低于青贮袋未破损的苜蓿青贮饲料之外,两者的各营养成分无显著差异。苜蓿方捆袋贮饲料p H值为4.63—4.72,乳酸、乙酸、丙酸和丁酸占干物质的百分比分别为6.12%—7.04%、2.41%—3.21%、0.18%—0.20%、0.67%—0.89%,氨态氮占总氮的百分比为5.33%—5.79%。青贮袋破损的未发霉苜蓿青贮饲料除了p H值和乙酸含量高于青贮袋未破损的苜蓿青贮饲料之外,两者的乳酸、丙酸、丁酸和氨态氮含量均无显著差异。未发霉的苜蓿青贮饲料中霉菌酵母菌的数量均在104cfu/FM以下。两者V-Score评分等级均属尚可,Kariser评分等级均为3级。【结论】苜蓿方捆袋贮饲料具有良好的发酵品质,方捆袋贮是较理想的苜蓿青贮模式。去除发霉部分,青贮袋破损的青贮饲料其营养成分与青贮袋未破损的苜蓿青贮饲料相同。     

苜蓿食用叶蛋白的提取及其在曲奇中的应用研究

[目的]为了研究苜蓿食用叶蛋白的提取及其在曲奇中的应用。[方法]以压块苜蓿为原料,采用酸度法和离心法相结合提取苜蓿食用叶蛋白质。[结果]随着苜蓿蛋白添加比例的增加,面粉的吸水率增加,面团的形成时间、稳定时间缩短,弱化度增加,评价值降低,面团的最大拉伸阻力、拉伸能量减少,拉伸长度先增加后减小。随着苜蓿蛋白添加量的增加,曲奇面团的弹性降低,曲奇的黏着性、硬度、弹性、胶着性、咀嚼度、回复性减小,而它的酥脆性增大。添加2%的苜蓿蛋白的曲奇评价值最高。[结论]苜蓿蛋白对曲奇而言,是良好的营养强化剂和面团改良剂(弱筋剂),添加的最佳比例是2%。     

国内外苜蓿种质起始密码子遗传多样性分析

为了对新引进的苜蓿种质亲缘关系进行鉴定,采用起始密码子多态性(SCo T)标记对19份国内外苜蓿种质的分子遗传多样性进行分析。结果显示,14个SCo T引物在供试苜蓿材料中共获得有效扩增条带78个,其中多态性条带72个,多态性条带百分比为92.31%;SCo T引物的有效等位基因数、Nei’s基因多样性指数、Shannon’s信息指数和多态性信息含量平均分别为1.53、0.31、0.46和0.31;供试苜蓿材料间的遗传相似系数介于0.385~0.846,平均为0.657,表明供试苜蓿材料遗传多样性较丰富;聚类分析和主成分分析均表明,供试材料可被划分为2大类,第1类群包括的苜蓿种质数达到16个,占到所有供试苜蓿种质总数的84.21%,第2类群包含的苜蓿种质数只有3个。综合分析表明,新引进的19份苜蓿种质具有较丰富的遗传多样性,其在未来苜蓿育种中具有较好的应用前景。     

Analysis of Amino Acid Composition and Six Native Alfalfa Cultivars

【Objective】 Six domestic alfalfa cultivars (Zhongcao No.3, Gannong No.1, Longmu No. 806, Zhongmu No.2, Xinjiang Big Leaf, Gongnong No.1) were used, amino acid content and the nutrition evaluation of alfalfa were studied, to provide the scientific basis for utilization and further research on native alfalfa germplasm resources or alfalfa resources development and utilization. 【Method】 Randomized block design with three replications was used. Different cultivars were planted in different experimental plot, the experimental plot area was 30 m ². The first year, first cut alfalfa which in the early flower stage were used. After 20 min heated at 105℃ and 48 h heated at 65℃, alfalfa were smashed to pass through a screen of 60 meshes. The samples were hydrolyzed by HCl and analyzed by automatic amino acid analyzer. Amino acid constituents and contents were analyzed. Alfalfa essential amino acid composition were compared with FAO/WHO amino acid pattern spectrum and FAO/WHO ideal protein standards. Ratio of essential amino acid (RAA), ratio coefficient (RC), score of RC (SRC) or essential amino acid index (EAAI) were calculated to evaluate the nutritional value. 【Result】 All of six domestic alfalfa cultivars contained 17 amino acids, 7 essential amino acids and 9 medicinal amino acids. Except Asp, Cys, Pro, F and (S+F)/B were significant difference among six cultivars, other amino acids compositions had no significant differences. The content of total amino acids in alfalfa were ranged from 14.85% to 19.48%, essential amino acids were range from 5.35% to 6.93%, non-essential amino acids were range from 9.50% to 12.55%, medicinal amino acids was greater than 60%. The content of total amino acids, essential amino acids and non-essential amino acids were highest in Xinjiang Big Leaf alfalfa. The ratio of sweet and fresh taste to bitter taste amino acid was above 1.8. Only Met+Cys were lower than FAO/WHO amino acid pattern. E/T was ranged from 35% to 36% and E/N was ranged from 54% to 57%, which were a little lower than FAO/WHO ideal protein standards. SRC was ranged from 73 to 74, and EAAI of all alfalfa was closed to 1. 【Conclusion】 There were abundant species and high content amino acid in alfalfa. The essential amino acids were relatively balanced and reasonable. Alfalfa were good protein sources, which also has medicinal value. The first limiting amino acid was Met+Cys. When used as vegetables, it is recommended that something which has high content of Met+Cys were used as complementary food to improve their nutritional value.     

壳聚糖处理对苜蓿幼苗抗旱性的影响

[目的]初步探讨壳聚糖处理对干旱胁迫下苜蓿幼苗抗旱性的影响。[方法]选取饱满度一致的紫花苜蓿种子,置于培养箱(25℃)中培养,待长出3~4片真叶后分装于培养皿,分别用0.1%、0.3%、0.5%、0.7%的壳聚糖喷涂处理,以喷蒸馏水为对照,研究不同浓度的壳聚糖处理对苜蓿幼苗抗旱性的影响。[结果]干旱胁迫下,壳聚糖处理后苜蓿幼苗的脯氨酸含量上升幅度比对照组的缓慢,其中以0.5%处理上升幅度最慢;各处理组苜蓿幼苗POD活性上升幅度明显大于对照组,其上升幅度依次为0.5%>0.7%>0.3%>0.1%,并在断水后第9天时达到最高值后缓慢下降。[结论]壳聚糖处理苜蓿幼苗能调节干旱胁迫下其脯氨酸积累速率,提高和维持其POD活性,从而增强其抗旱性。壳聚糖处理的适宜浓度为0.5%。     

几个紫花苜蓿品种的特性分析

对9个紫花苜蓿品种的生长速度、生育期、产草量、抗寒性、抗旱性等项指标进行了分析和综合评价。结果表明：国内品种抗寒和抗旱性强,返青早,越冬率达100%;日本品种直立性好,利于机械收割;美国品种生长速度快,再生性强,再生草产量高。其中,保定苜蓿、中苜一号和安斯塔综合表现好。     

黄土高原苜蓿草地在不同种植方式下的土壤水分变化

在长期定位试验的基础上,通过田间实地测定0～400 cm土壤含水量,分析和比较了不同种植方式下苜蓿草地土壤水分的变化.结果表明,连作苜蓿地、轮作苜蓿地的400 cm土层平均土壤含水量分别为10.6%和11.4%,均低于土壤稳定湿度,其干燥化指数为24.6%和37.2%,分别属强烈干燥化和严重干燥化,而小麦连作的干燥化指数为86.4%,属轻度干燥化.连作苜蓿地土壤干层最厚,400 cm处仍十分干燥,而轮作苜蓿地和连作小麦地到240 cm以下时,土壤水分开始有所恢复.连作苜蓿地和轮作苜蓿地通过降雨可恢复部分土壤水分,可恢复的土壤深度为40 cm和60 cm,而连作小麦地可达100 cm.不同施肥措施下连作苜蓿地土壤干燥化程度都很严重,施肥措施不是造成土壤干燥化的主要原因.轮作系统中不同轮作年限苜蓿地的土壤水分状况有一定的差异,但是均没有形成深厚的土壤干层.与连作苜蓿相比,轮作苜蓿不会大量消耗土壤深层水分而形成深厚的土壤干层,有利于土壤水分的可持续利用.     

紫花苜蓿抗旱耐盐碱转基因抗性苗耐盐性研究

在紫花苜蓿抗旱、耐盐碱转基因抗性苗和对照苗的组织培养过程中模拟盐胁迫生境,经0%、0.3%、0.5%、0.7%、0.9%、1.1%、1.3%、1.5%、1.7%、1.9%NaCl处理15 d后,苜蓿转化苗和苜蓿对照苗的盐适应性生长性能发生变化.观察统计了转基因抗性苗和无菌苗在盐胁迫下的成活率;测定了这2组苜蓿植株的根长和叶片的电导率.结果表明:转化苗比对照苗耐受盐胁迫的能力要高,转化苗能够耐受1.3%的NaCl盐浓度,在NaCl浓度为1.5%时其生长才开始受到损伤,而对照苗只能在NaCl浓度0.5%以下正常生长,在NaCl浓度为0.7%时其生长即开始受到伤害.同时,在盐胁迫下,转化苗的根生长能力要强于对照苗.在同一盐浓度下转化苗的细胞膜透性比对照苗的细胞膜透性要低,表明苜蓿转基因抗性苗比对照苗耐受盐伤害的能力强.