三七种植土壤微生物类群动态与根腐病的关系

通过对三七免耕种植定位研究,找出了三七根腐病高发期与土壤微生物类群变化特征的差异,鉴定出了主要病原微生物类群.结果表明:三七根腐病的发生,除已报道的细菌中的假单胞细菌有关外,还与霉菌、放线菌及厌氧生长菌有密切关联,这3类菌群在不同季节存活量的高峰期与三七病害高发期相吻合,并且根腐病株土壤中的霉菌、放线菌及厌氧菌数高于健康植株土壤,分别增加3.89 E 4.cfu/g,0.94 E 4.cfu/g,85.10 E 6.cfu/g,说明这3种细菌也是导致三七根腐病的主要病原菌.     

三七病株根际土壤微生物特征研究

本研究通过对三七病株和正常植株根际土壤微生物作定性和定量分析研究，找出了二者间土壤微生物量变化特征的差异性，界定出了主要病原微生物类群，结果表明：导致三七根腐病的病原菌，除已报道的细菌中的假单胞细菌外，还与霉菌、放线菌及细菌中的厌氧生长菌有密切关联；霉菌和放线菌也是导致三七根腐病的主要病原菌，霉菌中的毛霉、木霉、青霉、曲霉、根霉是病株根际土壤霉菌生物量增加的主要菌群体，占霉菌生物量总数的65．33％。     

豫东不同树龄梨园土壤微生物生态特征

为评估不同树龄梨园中的微生物生态特征,研究了豫东地区不同树龄梨园土壤酶活性和土壤微生物数量变化特征。结果表明,梨园土壤有机质含量随树龄和土壤深度的增加而降低;土壤蔗糖酶和脲酶活性均随土层深度增加而降低,蔗糖酶活性随树龄的增加呈先升高后降低的趋势,10 a梨园较其他树龄梨园高6.42%~24.02%;梨园土壤微生物类群以细菌为主,各梨园细菌数量在3.26×10~7~33.96×10~7cfu/g,且随树龄的增加而减少,真菌表现为壮龄梨园(10、22 a)老龄梨园(53、89 a)幼龄梨园(3、5 a),各梨园土壤真菌数量在3.71×10~3~21.74×10~3cfu/g,放线菌数量分布则表现为老龄梨园最高,89 a梨园为13.27×10~4cfu/g,比其他梨园高2.64×10~4~9.49×10~4cfu/g,不同土层深度细菌、真菌、放线菌数量均随土层深度增加而减少;相关性分析表明,树龄与土壤有机质含量、细菌数量呈显著负相关,与土壤脲酶活性呈极显著负相关,与放线菌数量表现出极显著正相关。梨园土壤微生物分布与树龄存在着必然的联系,欲提高果树的产量和品质,需合理地进行土壤调控管理。     

我省主要土壤微生物数量及其肥力状况分析

本文采用分析对比法测定了土壤中好气性细菌、放线菌、霉菌以及土壤蓝藻的细胞量;还测定了包括好气性固氮菌、纤维素分解菌、硝化细菌和氨化细菌四类群具有生理活性的微生物。同时,对土壤的主要农化性状进行了分析。试验表明,土壤肥力状况同微生物数量呈正相关。土壤肥力差异是灌漠土>黑垆土>黄绵土。亚高山草甸土虽然含有机质较多,微生物总量却较小。各类土中的微生物总数多达一亿个/克干土以上。其中细菌约占95%,放线菌占4%,霉菌和蓝藻较少。灌漠土和黑垆土含有较多的好气性固氮菌、纤维素分解菌,表明了该类土壤具有良好的肥力性状和熟化程度较高。     

转基因落叶松林地土壤微生物类群的生态分布特征

[目的]分析转基因落叶松植株对土壤微生物的影响.[方法]采用稀释平板法研究了转基因落叶松幼龄林土壤微生物数量及其类群分布特征.[结果]转基因落叶松幼龄林土壤微生物数量具有明显的季节变化特征,以夏季最多,秋季次之,春季最少;在夏季达到最大值620.40×106 cfu/g干土,最小值出现在春季,为146.27 × 106 cfu/g干土.转基因落叶松幼龄林土壤微生物组成为细菌数量最多,占99％以上,放线菌数量次之,占0.070％;真菌数量最少,占0.049％.土壤微生物主要集中在O～20 cm的土层,随着土层的加深,微生物数量迅速减少,在深度为0～60 cm的土层中,同一类群的微生物数量变动范围较大,细菌为26.30×107～62.00×107 cfu/g千土,放线菌为0.50×104～ 11.00×104 cfu/g干土,真菌为1.00×104 ～ 29.00×104 cfu/g干土.[结论]落叶松人工林地植被组成和土壤微生物的类群结构均十分复杂,生物种类多样,生态效益良好.     

三七连作对土壤微生物的影响

三七在我国西南地区已经种植了400多年,是一种被高度重视的中草药,但它的连作障碍是其发展的最大问题。试验采用云南地区连续种植三七1年、3年、5年的土壤,通过测定土壤中微生物的数量和生理类群变化,探讨三七连作对土壤微生物的影响。研究结果表明,三七连作对土壤中细菌,放线菌数量影响显著,而对真菌数量没有显著影响;三七连作土壤中检测到的亚硝基菌、芳香分解菌、固氮菌、溶钾菌和溶磷菌数量均低于未种植三七的土壤。     

五氯酚钠污染土壤的微生物活性及优势菌群研究

研究了施用五氯酚钠后土壤微生物的数量、主要生化活性以及微生物的优势菌群。结果表明,五氯酚钠对土壤微生物活性有明显的影响,对土壤细菌和好气性自生固氮菌有强烈的刺激效应,而放线菌和霉菌则被严重抑制;土壤呼吸作用强度、氨化作用强度、硝化作用强度、过氧化氢酶活性、多酚氧化酶活性增强,而纤维素分解作用强度减弱;芽孢杆菌B3、B4、B5菌株为污染土壤的优势细菌,青霉属为霉菌的优势属,淡紫灰类群、粉红孢类群、白孢类群、金色类群、烬灰类群、轮生类群、青色类群从污染土壤中发生缺失。     

新疆南部巴楚地区干旱生境土壤放线菌的研究

采用常规方法研究了新疆南部巴楚地区特殊生境土壤放线菌区系、放线菌的拮抗性及耐盐性。结果表明:1供试土壤放线菌的数量与土壤有机质含量呈极显著相关,与土壤pH和全盐量无显著相关性;供试土壤放线菌区系较单一,以链霉菌属为主(占总数的91.8%),小单孢菌属极少;链霉菌可分11个类群,以灰褐类群为优势类群;土壤含盐量愈高,链霉菌属组成愈简单。2148株供试放线菌中,有69株菌对供试靶标菌有拮抗性,其中广谱性拮抗菌很少;有机质含量高的土壤中拮抗性菌株数量多;GA培养基上的拮抗菌多于SDSA培养基上的拮抗菌。3供试放线菌耐盐性较强,这与土壤的全盐量呈显著相关,盐质量浓度在50g/L时,有50%以上的放线菌长势强,盐质量浓度在100g/L时,放线菌长势都较弱;不同培养基上分离的放线菌的耐盐性不同,盐质量浓度为50g/L时,长势强的放线菌大多分离自SDSA培养基上。     

三七连作根际微生物多样性研究

【目的】针对三七土传病害根腐病日益突出的问题,探讨三七根际土壤和根内生微生物多样性、生物群落组成及代谢活性与根腐病发生的相关性。【方法】对连作3年三七和连作4年三七的健康植株和感病植株根际土壤进行Biolog ECO代谢功能多样性分析,对三七根际土和根组织采用多种培养基进行微生物的分离培养,根据细菌16S r DNA序列和真菌ITS区序列的通用引物进行PCR扩增、Blast同源比对及其系统进化树分析。【结果】健康植株组与感病植株组根际土壤微生物群落的丰富度和均匀度存在显著差异(P0.05),健康植株组土壤微生物群落的生理活性高于感病植株组;从根际土壤中培养出172株菌株,其中,健康植株组土壤以芽孢杆菌(Bacillus)、假单胞菌(Pseudomonas)、节杆菌(Arthrobacter)等为优势菌群;感病植株组土壤以黄杆菌(Flavobacterium)、毛霉菌(Mucor)和镰刀菌(Fusarium)等为优势菌群;从根组织中分离出121株菌株,其中,健康植株根部以芽孢杆菌(Bacillus)、假单胞菌(Pseudomonas)为优势菌群,感病植株根部以镰刀菌(Fusarium)、拉恩氏菌(Rahnella)、欧文氏菌(Erwinia)等为优势菌群。【结论】三七土传病害根腐病的发生与植株根际微生物群落结构组成及代谢功能多样性密切相关,为从微生态角度改善三七土壤健康状况及控制三七根腐病的发生提供科学理论依据。     

徐州采煤塌陷区复垦土壤的细菌群落多样性

为探讨江苏省徐州市采煤塌陷区土壤微生物群落多样性及优势种群在复垦前后的变化,利用454焦磷酸测序法,对比分析采煤塌陷地、复垦地以及非塌陷对照地这3个样地的细菌多样性及群落结构。结果表明,变形菌、放线菌、浮霉菌、酸杆菌、绿弯菌、拟杆菌、厚壁菌和芽单胞菌为细菌的主要类群,但其在3个处理区的分布各不相同,即芽单胞菌和硝化螺旋菌在复垦区中分布最广,酸杆菌、放线菌、拟杆菌在对照区中最多,变形菌在塌陷区中分布最广。复垦地土壤的细菌群落多样性水平最高,对照地次之,塌陷地最低。细菌群落多样性指数与土壤有机质、全氮、速效钾的含量呈正相关关系,与土壤盐分呈负相关关系。开采沉陷导致土壤肥力退化和土壤盐渍化现象加重,抑制微生物的繁殖与生长。复垦与植被修复能够改善土壤理化特征,恢复微生物群落结构功能与多样性。     

连作地土壤处理对三七根腐病的控制效果

探索三七连作地根腐病控制技术。应用现有农药按一定比例组配,对连作土壤和三七种苗进行盆栽和田间试验。复配剂Ⅱ型盆栽处理、田间试验和大田示范对三七苗期根腐病的控制效果分别达到80.68%、80.42%和62.28%。复配剂Ⅱ型处理连作土壤对三七苗期根腐病有明显的控制效果。     

嫁接辣椒根际土壤微生物及酶活性与根腐病抗性的关系

【目的】探讨嫁接辣椒的抗病机理,为合理调控根域生态环境,减轻根腐病危害提供理论依据。【方法】以‘卫士’辣椒为砧木,以‘新丰2号’为接穗嫁接,自根辣椒为对照(CK),通过人工接种根腐病菌,研究砧木、嫁接和自根辣椒发病率及病情指数、根系吸收面积与呼吸强度及根际土壤微生物种群数量和酶活性的变化。【结果】接种根腐病菌前,砧木和嫁接辣椒的根系吸收面积、根际土壤放线菌数量和比例及脱氢酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性显著高于CK。接种后嫁接辣椒的发病率和病情指数显著低于CK,但高于砧木;砧木和嫁接辣椒的根系吸收面积与活跃吸收面积、根际土壤微生物数量及放线菌比例均显著大于CK,土壤酶活性也明显高于CK,呼吸强度前期比CK低,后期较CK高。【结论】嫁接辣椒根系吸收面积增大,根际土壤微生物数量、放线菌比例增加及酶活性提高是其根腐病抗性增强的重要原因。     

库拉索芦荟根腐病与土壤—植株养分状况的关系研究

 调查了云南元江芦荟基地施肥状况、根腐病发病率,并采集和测定了叶片和根际土壤样品中营养元素含量。调查分析结果显示,库拉索芦荟根腐病发病率与土壤中速效磷含量呈显著的正相关,与土壤中其它速效养分以及芦荟叶片养分含量无显著的相关性。与海南健康库拉索芦荟叶片及其根际土壤养分状况相比,元江库拉索芦荟病株根际土壤中碱解氮、有机质、速效钾、速效钙、速效镁、速效硼含量,以及叶片中钾、硼含量较低,但其根际土壤中速效磷含量较高。元江库拉索芦荟根腐病可能主要与施肥不合理,大量偏施磷肥和糖泥引起的土壤—植株养分失调、病菌滋生和抵抗力下降有关。     

木霉生防菌对大豆幼苗的促生作用及对根腐病的防治效果

[目的]研究木霉菌对大豆幼苗的促生作用及对根腐病的防治效果。[方法]用6株木霉菌剂处理土壤进行盆栽试验,测定大豆植株的形态指标及根腐病的发生情况。[结果]供试木霉菌株均能促进大豆植株生长,其株高、茎粗、根长、干物质积累均比对照增加。木霉菌株制剂均可减轻根腐病的发生,当浓度为5×108个/g时,防效均在70%以上。不同菌株对大豆植株的促生和对根腐病的防治效果不同。[结论]木霉菌能促进大豆的生长和降低根腐病的发生。     

津岛链霉菌JT-2F对三七根腐病菌的抑制作用

【目的】明确津岛链霉菌JT-2F对三七根腐病菌的抑制作用,为三七根腐病的生物防治提供理论依据。【方法】采用平板拮抗和滤纸条法测定津岛链霉菌（Streptomyces tsukiyonensis）菌株JT-2F对三七根腐病菌和3种三七叶部病害病原菌的的抑制作用,并采用离体块根刺伤接种法测定菌株JT-2F对三七根腐病菌的防治效果;利用酶联免疫分析（ELISA）法测定菌株JT-2F发酵液中蛋白酶、纤维素酶和几丁质酶等酶活性。【结果】菌株JT-2F对三七根腐病菌具有较强的拮抗作用,其抑菌率达76.47%,对3种三七叶部病害病原菌也有明显的抑制效果,抑菌率均超过80.00%。菌株JT-2F的发酵液对病原菌菌丝有明显的抑制作用,使菌丝体畸形、膨大变粗,并呈串珠形状。产酶能力测定结果显示,菌株JT-2F可分泌几丁质酶、蛋白酶和纤维素酶,可破坏病原菌菌丝体,并抑制病原菌生长。离体防效试验结果显示,菌株JT-2F发酵原液对离体三七块根根腐病的防效达78.43%。【结论】津岛链霉菌菌株JT-2F对三七根腐病菌有较好的抑制作用,具有较好的生防开发潜力。     

腈菌唑在三七和土壤中的消解动态与残留分析

腈菌唑(myclobutanil)被认为是防治三七黑斑病和圆斑病等病害应用前景较好的杀菌剂,但其在三七中残留检测和残留消解动态研究尚未见报道。为建立三七中腈菌唑残留检测和残留消解动态的检测方法,利用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)研究40%腈菌唑可湿性粉剂在三七(Panax notoginseng)根、茎、叶和土壤中的消解动态及喷施前后的皂苷含量变化,并对其可能产生的膳食安全风险进行评估。三七样品经丙酮提取,SPE固相萃取柱净化后,再由BEH-C18色谱柱(2.1 mm×50 mm,1.7μm)分离,以体积比为70∶30的乙腈水溶液为流动相进行洗脱,利用正离子扫描,多反应监测进行定量分析,外标法定量;采用高效液相色谱法测定三七块根中主要皂苷成分的含量。结果表明,建立的三七中腈菌唑残留量检测方法在0.1～5.0 mg/kg水平的平均添加回收率为80.9%～91.9%,相对标准偏差为5.05%～9.3%,腈菌唑检测极限为0.1μg/kg。在大棚内喷施135 g/hm2的腈菌唑时,在三七及土壤中的降解过程均符合一级动力学方程,腈菌唑在三七根、茎、叶和土壤中的降解半衰期分别为6.77 d、6.70 d、6.63 d和6.03 d,其风险商值为9.5×10-5,远小于1,风险较低,处于安全水平;随着生育期的增加,三七根中人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1的含量不断增加。因此,建议我国腈菌唑在三七中的最大残留量值可暂定为0.2 mg/kg,安全间隔期为35 d。研究结果表明腈菌唑对三七使用安全,为腈菌唑在三七上的安全合理使用提供科学依据。     

三七根腐病中线虫病原问题的研究

 1989年至1991年,对云南省文山州的文山、砚山、马关、富宁及昆明市晋宁县的三七根腐病病根及根际土壤进行了广泛地调查与采集。分离所得线虫经纯化、鉴定、扩大培养,接种三七根,观察其致病性。结果表明:在文山州未采集鉴定到茎线虫(Ditylenchussp.)和根结线虫(Meloidogyne sp.).说明目前这两种线虫不是文山州三七根腐病病原,过去有关报道有误。经常能大量分离、鉴定到小杆线虫(Rhabditis elegans).活体接种不能侵染三七植株,离体接种对三七根切片表现侵染能力,加快其腐烂速度与腐烂程度,说明在三七根腐病中小杆线虫能起促进根腐作用。     

杉树林下土壤酚类物质对三七的化感作用

【目的】明确杉树林下三七根系生长不良的原因,为林下三七种植过程中土壤的选择提供理论依据。【方法】以杉树林下三七生长正常区域的土壤为对照,测定生长不正常区域的土壤的电导率、pH和酚类化感物质及三七根系生长指标（须根数量、主根长度、鲜重和干重）;采用滤纸片法,研究不同浓度酚类物质（1、5、10、15、20和30 mg/L）对三七根系活力和相对电导率的影响,以及对生菜根系生长的抑制作用。【结果】三七生长不正常区域的土壤显著降低三七的须根数量、主根长度和根系的鲜重与干重（P<0.05,下同）。三七生长不正常区域的土壤pH显著降低,土壤电导率显著升高,对羟基苯甲酸、香草醛、丁香酸、阿魏酸和香草酸含量升高,且能显著抑制化感指示植物生菜根系的生长。相关分析结果显示,三七的须根数量、鲜重和干重均与土壤pH呈显著或极显著（P<0.01,下同）正相关,与土壤电导率呈显著或极显著负相关;土壤中对羟基苯甲酸和香草酸含量与三七的鲜重和干重呈显著负相关。相比CK,当丁香酸、阿魏酸、香草酸及混配的浓度介于5~30 mg/L时,根系活力显著降低,当香草醛、丁香酸和阿魏酸的浓度达15 mg/L时,根系溶液的相对电导率显著升高。【结论】杉树林下土壤pH的降低和酚类化感物质的累积会对三七生长产生不利影响。     

有机覆盖三七对土壤养分及微生物多样性的影响

为研究有机覆盖物对三七土壤养分以及微生物丰富度和多样性的影响,采用完全随机区组小区试验,将有机覆盖物覆盖于播种三七种子的土壤表面,设置黄花蒿覆盖（HHH）、万寿菊覆盖（WSJ）、金荞麦覆盖（JQM）、松针覆盖（SZ）和无覆盖（CK）共5个处理。覆盖生长10个月后采集土壤样品,利用化学分析和高通量测序检测土壤养分含量及进行微生物物种丰富度和多样性分析。结果显示：①覆盖10个月后,处理HHH和SZ检测的土壤有机质含量显著高于CK,HHH的全氮和水解性氮含量显著高于CK,SZ处理的有效磷和速效钾含量显著高于CK。②全氮含量与水解性氮存在显著正相关（P<0.05）。③对细菌的高通量测序共获得27门64纲131目263科444属。变形菌门（Proteobacteria）、放线菌门（Actinobacteria）和拟杆菌门（Bacteroidetes）是主要共有优势菌门,Acidibacter、芽单胞菌属（Gemmatimonas）、黄杆菌属（Flavobacterium）为主要优势菌属。处理WSJ、JQM、SZ的细菌丰富度和多样性高于CK,HHH细菌丰富度和多样性低于CK。④对真菌的高通量测序共获得12门40纲115目246科510属。子囊菌门（Ascomycota）、担子菌门（Basidiomycota）与接合菌门（Zygomycota）为共有优势菌门,锥盖伞属（Conocybe）、镰刀菌属（Fusarium）、被孢霉属（Mortierella）为主要优势菌属。覆盖处理的真菌丰富度和多样性均低于无覆盖处理。说明黄花蒿和松针覆盖为三七的生长提供了养分,有机覆盖物均能提高三七的抗病原菌能力,SZ覆盖对减轻三七根腐病的发生和解决三七种植过程中的连作障碍有一定作用,结果为三七覆盖种植提供理论依据和配套栽培技术支持。     

广西田七病害及其与生态因子关系调查

【目的】进行广西田七病害调查,为今后广西田七病害防治工作提供参考依据。【方法】2014~2015年于田七病害发生高峰期,采用平行线取样法在广西百色市不同海拔、不同遮光率、不同荫棚类型及不同七龄的田七园开展田七病害种类、分布和为害程度等调查,统计各调查点发病株数,计算发病率和病情指数;同时观察并记录各观测点的海拔、遮荫棚透光率、荫棚类型及七龄等生态因子情况。【结果】广西田七主要真菌性病害7种,分别为圆斑病、黑斑病、根腐病、炭疽病、灰霉病、白粉病和疫病。在广西百色市,田七圆斑病和黑斑病在高海拔区域发生严重;根腐病在低海拔区域发生严重;荫棚透光率越大,叶部病害越严重;避雨荫棚田七叶部病害比普通荫棚轻。【结论】圆斑病、黑斑病和根腐病是目前广西田七生产上危害最严重的病害。通过避免在地势低洼、排水不畅的地方建园,设计避雨荫棚,保持园内通风,可极大降低田七病害的发生程度。