盐穗木总生物碱不同提取方法的比较

为确定盐穗木总生物碱最佳提取工艺，采用超声波提取法、索氏提取法、乙醇加热提取法、酸水提取法四种方法提取盐穗木总碱，考察粗提物的提取率，确定最佳的提取方法。结果显示：超声波提取法提取率最高，总碱含量为0．993mg／100mg，总碱质量百分数为0．23％；酸水提取法提取率其次，总碱含量为0．520mg／100mg，总碱质量百分数为0．22％；索氏提取法，总碱含量为0．477mg／100mg，总碱质量百分数为0．04％；乙醇加热提取法，总碱含量为0．404mg／100mg，总碱质量百分数为0．04％。研究表明：以氯仿为溶剂，用超声波提取法提取盐穗木总碱，提取率最高。     

博落回中生物碱的超声提取和分离

运用超声波辅助提取技术,通过L9(3)4正交试验考察了乙醇浓度(A)、液固比(B)和超声时间(C)3个因素对博落回生物碱提取的影响,同时还研究了D101大孔树脂对粗提液中生物碱的吸附和分离效果.结果表明最佳提取工艺为A3B1C3,即用9倍量的90%的乙醇超声提取45 min.D101大孔树脂能从博落回的pH2～3的盐酸提取液中以游离碱形式全部吸附其生物碱,分别采用50%乙醇和丙酮洗脱能有效地将极性和弱极性生物碱分离开来.     

超声波提取醉马草中生物碱的研究

[目的]研究醉马草中生物碱的超声提取工艺。[方法]采用40 kHz超声波水处理醉马草草粉,水提去渣得到滤液后,分别用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,在回收溶剂的情况下用减压蒸馏获取生物碱,经薄层层析和红外鉴定。[结果]正交试验选取各因素的最佳水平组合为A1B2C2D2,即最佳提取工艺条件为以料液比1∶7.5（g/ml）、温度60℃、超声功率250 W,超声时间60 min;在此条件下生物碱的提取率为2.06 mg/g;新草的生物碱的提取率为14.04 mg/g。结构鉴定结果显示,醉马草混合碱中含有苦马豆素。[结论]该方法快速有效,准确度高,可用于醉马草中生物碱的提取。     

白骨壤叶中生物碱的提取及抗氧化活性研究

[目的]确定白骨壤叶中生物碱的提取工艺和初步鉴定该物质的活性。[方法]以生物碱的提取得率为评价指标,采用正交试验法,优选超声提取白骨壤中生物碱的工艺,考察乙醇体积分数、超声提取时间、超声提取温度和溶液pH对提取工艺的影响。采用硫酸亚铁-水杨酸法、DPPH反应法比较体外清除自由基作用,测定白骨壤叶中总生物碱的抗氧化活性。[结果]影响白骨壤叶中生物碱提取率的主要因素是提取溶液pH,最佳提取工艺条件为乙醇体积分数70%、提取时间20 min、提取温度70℃、提取溶液pH=3。优选之后的提取工艺最佳得率为14.12%,方便快捷可行、稳定性好。清除自由基的强弱为DPPH自由基大于羟基自由基。[结论]该研究为生物碱的应用提供理论依据。     

博落回生物碱酸水提取工艺及优化

[目的]探究博落回总碱的酸水提取工艺。[方法]以植物博落回为原料,研究总碱的酸水提取工艺,以血根碱含量为指标进行工艺优化,考察了时间、温度、料液比、pH值4个因素对博落回总生物碱提取得率的影响。[结果]通过正交试验,得出其酸水提取法的最佳工艺条件为提取时间5h,提取温度90℃,料液比1∶50,pH值1.5。[结论]在优化条件下,总生物碱提取得率可达9.10%。     

大豆荚壳总类黄酮提取及纯化研究

以粉碎的大豆荚壳为材料,对总类黄酮提取条件和纯化方法进行研究。采用有机溶剂浸提法,就不同溶剂对类黄酮提取效果进行筛选,确定乙醇水溶液提取效果较好,并通过正交设计对大豆类黄酮提取条件进行了优化,确定了大豆类黄酮的最佳提取条件为φ=80%乙醇,提取温度为70℃,乙醇与大豆荚壳10∶1,回流提取24 h,提取率可达8.85%,显著高于次佳工艺。采用液-液分配分离得到了氯仿、乙酸乙酯、正丁醇类黄酮萃取物,并通过柱层析对萃取物进一步纯化,得到纯度为92.32%的总类黄酮提取液浸膏。因此,该提取与纯化方法对大豆荚壳类总类黄酮工业化生产具有一定的应用价值。     

镰形棘豆化学成分预试及生物碱成分薄层色谱分析

采用植物化学成分系统预试法、生物碱系统提取法和薄层色谱技术对镰形棘豆地上部分全草的化学成分,特别是生物碱成分进行了薄层色谱分析。结果表明,镰形棘豆地上部分全草中含有生物碱、有机酸、皂甙、黄酮、香豆素、萜类和挥发油等多种化学成分,其中以生物碱沉淀反应最明显;1.50 kg镰形棘豆经95%乙醇回流提取得总浸膏198.10 g,经酸化、碱化所得碱水液依次用氯仿、乙酸乙酯、正丁醇分段萃取,得生物碱氯仿萃取部分0.72 g,乙酸乙酯萃取部分0.97 g,正丁醇萃取部分26.70 g,分别占总生物碱的2.54%、3.42%、94.04%,说明镰形棘豆生物碱主要集中在正丁醇萃取部分以大极性生物碱为主;各部分生物碱经薄层层析分析,发现镰形棘豆中生物碱的种类至少有24种,经与标准样品对照,证明镰形棘豆所含的生物碱主要以苦马豆素及其类似物等吲哚里西啶生物碱为主,同时也含有少量的黄华碱和臭豆碱等喹诺里西啶生物碱。     

洋金花种子中总生物碱提取工艺的研究

为了建立洋金花种子中总生物碱的最佳提取工艺。比较冷浸法、超声法、回流法和索氏提取法的提取率;以乙醇浓度、提取时间、提取次数、料液比及pH为参数进行L16(45)正交试验;使用紫外分光光度法测定总生物碱及阿托品的含量。结果表明:回流法提取率最高;最佳提取工艺为无水乙醇回流提取2次,每次3h,固液比1∶25,pH为5。乙醇浓度、固液比对生物碱的提取有显著影响;优选得到的提取工艺简单易行,稳定性良好。     

博落回生物碱提取工艺研究

以博落回血根碱的提取率为考察指标优化博落回生物碱提取工艺,结果表明:酸性醇提取法比酸水法、醇提法对血根碱的提取效率高。采用正交试验方法对酸性醇提取法进行优化,最佳工艺条件为:在pH值为3的75%乙醇溶液中回流提取2次,每次1 h。此条件下血根碱提取率为5.82 mg/g。对最佳工艺条件稳定性试验的结果表明:其稳定性较好,RSD=1.65%。     

紫金龙总生物碱超声波辅助提取工艺

采用酸性染料比色法测定紫金龙(Dactylicapnos scandens)总生物碱的含量,通过正交设计方法,以总生物碱提取率为评价指标,优化超声波辅助提取工艺。结果表明,超声波辅助提取总生物碱的影响因素大小顺序为乙醇体积分数>提取时间>料液比,用料液比为1∶9(m/V,g∶mL),90%(V/V,下同)的乙醇溶解,超声波辅助提取40 min为最佳提取工艺条件,此工艺条件下,总生物碱提取率为2.69%。     

半仿生法提取细叶小檗总生物碱及抑菌性研究

目的本文通过对细叶小檗果实中生物碱的研究，为细叶小檗的有效合理利用提供参考。方法本实验以细叶小檗总生物碱提取量和抑菌圈直径为考察指标，用10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%的乙醇作为溶剂提取细叶小檗中的总生物碱，得出27%乙醇为较好的提取溶剂。以27%乙醇为提取溶剂，进行液料比、温度和超声时间的单因素试验。在单因素试验基础上，采用Plackett-Burman设计、最速上升试验以及中心复合实验响应面设计建立数学模型。结果实验结果表明，最佳提取条件为:乙醇含量27%(V/V)、液料比32mL/g、温度52℃、超声功率800W，提取液的pH值为2.2时，对应提取时间为50min；提取液的pH值为7.6时，对应提取时间为25min；提取液的pH值为8.5时，对应提取时间为25min。在此条件下，细叶小檗中总生物碱的提取量为(16.24±0.54)mg/g，比单一超声波辅助法的提取量提高了1.31倍；抑菌圈直径为(91.21±0.37)mm。结论采用超声波辅助半仿生法比单一采用超声波法对细叶小檗中总生物碱的提取效果更好，提取量提高了1.31倍；抑菌效果提高了1.07倍。相比较国内目前对于小檗属植物小檗碱的平均提取量(16.6±0.6)mg/g相接近，在抑菌活性上有明显提高。      

辣椒RAPD扩增体系的建立

[目的]为辣椒的品种资源鉴定与遗传多样性分析奠定基础。[方法]采用改良的CTAB法对辣椒叶片基因组DNA进行提取,并采用正交试验设计法对辣椒RAPD-PCR反应进行优化筛选。[结果]采用改良的CTAB法获得了高质量的辣椒基因组DNA,用Tris-平衡酚∶氯仿∶异戊醇（25∶24∶1,V∶V∶V）进行抽提,最后再用氯仿抽提以除去其中含有的酚,避免了对后续PCR扩增的影响。基于一般的RAPD反应程序和调整试验,优化了PCR反应体系。结果表明,在模板20 ng 1.5μl、引物（20μmol/L）1.5μl、dNTPs（2.5 mmol/L）2.2μl、10×Buffer缓冲液（含Mg2＋）2.5μl、Taq（5 U/μl）0.35μl条件下扩增效果较好。[结论]建立了最适的辣椒RAPD扩增体系。     

用于SSR分析的大豆干种子DNA提取条件的优化

[目的]探讨适于SSR分析的大豆干种子DNA提取的最佳方法。[方法]以2个大豆品种的干种子为材料，分别采用改良SDS法和CTAB法提取大豆基因组DNA，用1％琼脂糖凝胶电泳检测DNA质量，用紫外分光光度计分别测定其DNA在A230、A260和A280下的吸光值，根据A260／A230和A260／A280的比值检测DNA的纯度和浓度，并分别以两种DNA为模版进行SSR—PCR扩增。[结果]相同DNA提取条件下，SDS法提取DNA样品的纯度和浓度均高于CTAB法，SDS终浓度为2％（W／V），水浴15min，氯仿／异戊醇抽提2次时所提取大豆种子DNA的纯度及浓度最高，其DNA的0D260／0D280值为1．86，SDS法所提的DNA泳带分布较集中，无拖尾现象，其DNA浓度能够满足SSR扩增模板的需求。[结论]SDS浓度为2％（W／V），水浴15min，氯仿／异戊醇抽提2次时提取大豆干种子DNA的浓度和纯度都较高，可以满足后续的各种分子生物学操作的要求。     

小花棘豆生物碱薄层色谱分析及GC-MS检测

为确定小花棘豆生物碱的种类,建立小花棘豆生物碱指纹图谱,为其毒性作用机理及药理作用研究提供理论依据。用溶剂萃取法提取小花棘豆各极性段生物碱,并通过薄层层析进行初步分析;将萃取量少、小极性的氯仿、乙酸乙酯部分生物碱合并进行硅胶正相柱层析分离,薄层色谱跟踪检测;将洗脱量少、改良碘化铋钾显色明显的洗脱部分合并,应用微量GC-MS进行分析鉴定。结果表明,各萃取段粗碱经不同展开体系薄层展开H2O2/10%醋酐无水乙醇/Ehrlich’s试剂显色较佳,且各显色点呈斑点性强;将氯仿、乙酸乙酯部分生物碱经柱层析分离得到的改良碘化铋钾显色明显的组分合并,经GC-MS分析鉴定出16种生物碱,相对含量大于3%以上的有3种,占总提取物的26.72%,相对含量大于2%的有1种,相对含量大于1%的有5种,皆属首次从此植物中发现。     

青春双歧杆菌工业化培养基以及生长条件的筛选

以廉价的商业化产品作为原材料,以提高发酵液中的青春双歧杆菌活菌数为目的,通过单因素试验筛选并最终确定能够用于规模化生产青春双歧杆菌的廉价工业化培养基成分,即:脱脂乳8%(W/V)、双歧因子A1%(W/V)、双歧因子B1%(W/V)。结果表明,在此培养基基础上,筛选出了青春双歧杆菌的最佳生长条件:最佳接种量为1%(V/V)、最佳培养温度为37℃。在此优化的生长条件下,测定青春双歧杆菌的生长曲线和pH值变化,选取在厌氧条件下培养时间9h为最佳培养时间,此时青春双歧杆菌活菌数最高可达1.16×109cfu·mL-1。     

萃取法提取甘肃棘豆中的苦马豆素研究初报

将1.5kg甘肃棘豆干粉经水提取,提取液浓缩后用正丁醇萃取,萃取液加入稀硫酸调节pH7.0,回收溶剂,制成浸膏;将浸膏与二氧化硅粉末混匀后用氯仿萃取该浸膏中的小极性杂质。用氨性氯仿萃取,收集氨性氯仿萃取液,挥干后升华得到7.5mg针状结晶,与苦马豆素标准样品对照进行TLC检测,其Rf值及斑点颜色与苦马豆素标准样品一致;通过熔点和IR、MS、1HNMR、13CNMR等鉴定其化学结构,为苦马豆素,计算甘肃棘豆苦马豆素的产率为5mg/kg。     

果胶酶和木瓜蛋白酶复合提取褐藻淀粉工艺的研究

[目的]寻找复合酶法制造褐藻淀粉的最佳工艺条件,以提高海带原料的利用率。[方法]试验组采用酶提法从海带中提取褐藻淀粉,对照组采用水提法。酶提法又分为分步加酶[先加果胶酶（pH4.2,50℃,2h）,然后加木瓜蛋白酶（pH6.0,55℃,2h）]与同步加酶（pH5.5,55℃,4h）2种方法,通过正交试验比较2种方法提取褐藻淀粉的效果。[结果]分步加酶法比同步加酶法褐藻淀粉和总糖的提取率及多糖含量都有显著提高。分步加酶法提取的褐藻淀粉、总糖的提取率分别为1.98%、9.83%,比同步加酶法分别提高了35.33%、32.46%;分步加酶法提取的总糖及褐藻淀粉含量分别为46.26%和51.02%,比同步加酶法分别提高了3.26%和4.38%。分步加酶法的最佳提取条件是用0.10mol/LHCl溶解海带粉,试样与浸提液用量比为1：20（g：ml）,试样与酶用量比为1：30（g：mg）。[结论]复合酶法是提取褐藻淀粉的较好方法,尤其是分步加酶法可以提高褐藻淀粉提取率和含量。     

海南地不容中总生物碱的提取及含量测定

采用正交试验法优选海南地不容的提取工艺并进行含量测定。以提取的总生物碱为考察指标,醇的体积分数、提取功率、提取时间、次数、料液比分别为考察因素,设计正交试验确定超声提取总生物碱的最优工艺。以盐酸小檗碱为对照品,利用分光光度法在418 nm处测定海南地不容中总生物碱的含量。最佳工艺为醇体积分数80%、超声提取30 min、功率160 W、料液体积比1∶20、提取2次。小檗碱在0.0~18.0μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 4)。平均回收率为99.03%,RSD=2.38%(n=6)。总生物碱含量可达到4.67%。确定的提取工艺简单,用时少,提取率高。建立的测量方法简单、灵敏度高、重现性好,适用于海南地不容中总生物碱的含量测定。     

超声集成双水相提取一枝蒿中总生物碱及抗氧化活性

[目的]优化超声提取法和双水相体系相结合提取一枝蒿总生物碱的工艺,对一枝蒿总生物碱抗氧化活性进行研究.[方法]采用丙醇-硫酸铵双水相体系与超声波集成提取一枝蒿中总生物碱,以酸性染料比色法测定含量;通过考察对·OH清除和O2-·抑制能力来评价一枝蒿总生物碱抗氧化能力.[结果]一枝蒿总生物碱最佳的提取条件为：硫酸铵用量8 g,丙醇用量25 ml,醇水比0.60∶1条件下超声提取60 min;在此条件下,一枝蒿中的总生物碱平均提取量0.436 mg/g.当总生物碱浓度为200 μg/ml时,对·OH清除率达到67.65％,对O2-·抑制率达30.92％.[结论]该方法建立了一枝蒿总生物碱提取的最佳工艺,发现总生物碱具有良好的抗氧化活性.