杂交兰无菌播种及根状茎培养技术研究

以杂交兰品种台北小姐与小叶虎头兰杂交果荚、台北小姐自交果荚作为材料,比较了不同活性炭浓度对其种子萌发的影响,以及二者种子萌发形成的根状茎在同一种培养基中的增殖与分化情况。结果表明:添加活性炭1.0g·L~(-1)的培养基较适宜台北小姐自交组合种子无菌萌发,而台北小姐与小叶虎头兰杂交组合种子无菌萌发较适宜的培养基则为不添加活性炭;在1/2MS+6-BA 0.5mg·L~(-1)+IBA 0.1mg·L~(-1)+活性炭1.0g·L~(-1)培养基中,台北小姐自交组合根状茎的增殖效果较好,而台北小姐与小叶虎头兰杂交组合根状茎分化较好。     

不同风信子品种杂交亲和性及胚拯救

本研究以21个风信子园艺品种为材料,配置51个杂交组合,以坐果率、平均种子数和有胚率判定不同品种间的杂交亲和性。以‘奥斯塔雷’(‘Ostara’)ב软糖’(‘Fondant’)杂交的杂交种子为试验材料研究胚拯救培养基。结果显示:51个杂交组合中有23个组合杂交亲和性较高,其有胚率大于50%,7个组合未收获种子或杂种胚。对比研究得出,适宜风信子杂种胚拯救的培养基为MS+6-BA1.0 mg·L~(-1)+IBA0.1 mg·L~(-1)+水解酪蛋白150 mg·L~(-1)+谷氨酰胺50 mg·L~(-1)。51个杂交组合中,有23个组合坐果率、有胚率也相当可观,杂交亲和性比较高。其他8个杂交组合有6个杂交组合没有获得杂种胚,说明风信子种子存在胚败育现象。     

春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术研究

为探索春兰与大花蕙兰杂交后代非共生萌发育苗技术提供参考,以♀大花蕙兰‘冰瀑’×♂春兰‘新春梅’杂交所结果荚为试验材料,分别进行基本培养基、GA₃、琼脂、AC 4因素3水平的杂交种子无菌萌发试验,基本培养基、6-BA、NAA 3因素3水平的杂交种原球茎增殖试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的杂交种原球茎分化试验,基本培养基、NAA、AC 3因素3水平的壮苗生根培养试验,筛选适宜的培养基。结果表明：1)适宜杂交种子无菌萌发的培养基为MS+GA₃0.50 mg/L+琼脂4.5 g/L+蔗糖20 g/L+AC0.50 g/L+蛋白胨1 g/L,平均萌发启动时间为50 d,平均萌发率为88.7%。2)适宜杂交种原球茎增殖的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA 0.2 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/L+琼脂4.0 g/L+蛋白胨1.0 g/L,增殖系数达12.5。3)适宜杂交种原球茎分化的培养基为Hyponex 7-6-19 1.5 g+6-BA1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L+蔗糖20 g/...     

建兰与杂交兰杂交亲和性与胚培养研究

以4个建兰品种、8个杂交兰品种为材料,开展了建兰与杂交兰杂交亲和性及杂交幼胚离体萌发的研究。结果表明:不同组合杂交亲和性不同,‘金丝马尾爪’ב绿美人’、‘大凤素’ב绿美人’、‘大凤素’ב金边绿凤凰’3个组合的亲和性较高,结果率均大于50%,‘小桃红’בGZ1’的亲和性较差,结果率仅为2%,其余组合介于两者之间。杂交幼胚离体萌发适宜培养基为1/2 MS+IBA(0.3 mg·L~(-1))+BA(0.03 mg·L~(-1))+AC(1g·L~(-1))+蛋白胨(2g·L~(-1)),杂交胚的平均萌发率达61.4%。     

影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的若干因素

对影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的因素进行了分析。结果表明:用营养液、10%次氯酸钠溶液、0.1mol/L NaOH溶液手工振荡对杂交种子进行预处理均能促进种子萌发,其中春兰杂交种子经10%次氯酸钠的预处理培养后萌发率最高,蕙兰杂交种子经营养液振荡预处理培养后萌发率最高;1/2MS基本培养基加2 g/L蛋白胨比较适宜春兰杂交种子萌发,H基本培养基加2 g/L蛋白胨培养基比较适宜蕙兰杂交种子萌发;以葡萄糖为碳源的培养基培养春兰杂交种子萌发率高于以蔗糖为碳源的培养基;培养基中添加NAA、6-BA对提高春兰杂交种子的萌发率无明显影响,但一定浓度配比的NAA、6-BA能促进蕙兰杂交种子的萌发率。     

春兰与大花蕙兰杂交后代根状茎增殖与分化条件

为了筛选适合根状茎增殖分化的条件,以春兰Cymbidium goeringii与大花蕙兰Cymbidium hybridum杂交后代的根状茎为材料进行培养,比较了不同基本培养基、植物生长调节物质和有机添加物等对根状茎增殖与分化的影响。结果表明:1/2MS(Murashige and Skoog)培养基对杂交根状茎增殖与分化效果最适宜;2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)和激动素(KT)对杂交组合春兰与大花蕙兰‘梦境’‘Wanderland’的根状茎分化作用不显著,1/2MS培养基添加1.0mg·L-16-苄基腺嘌呤(6-BA)+1.0 mg·L-1萘乙酸(NAA)对春兰与大花蕙兰‘梦境’的杂交后代增殖分化效果最佳;使用有机添加物对根状茎增殖有显著影响,其中以椰汁增殖效果最好,其次为香蕉泥、土豆汁;添加100 g·L-1香蕉泥+50 mL·L-1椰汁最利于根状茎的增殖与分化。图1表4参16     

春兰杂交种子无菌萌发及植株再生培养技术

研究了春兰种内杂交种和种间杂交种的结实情况,种子无菌萌发和植株再生培养技术。结果发现,春兰种内杂交、春兰与蕙兰种间正反交结果率和种子量都比较正常,春兰种内杂交种萌发率明显高于种间杂交种;春兰种内杂交种第1年杂交种子萌发数大于50的占到11.11%,第2年杂交种子萌发数大于50组合为2.4%,第3年杂交种子萌发数大于50的占到38.27%,春兰品种自交种、种子萌发原球茎出现不同程度的白化变异;春兰和大花蕙兰种间正反交结果率差异较大,蒴果种子量少,但种子萌发数多,种子培养第1年萌发数均大于100;春兰种内杂交种子萌发后根状茎增殖和芽诱导液体培养方式的增殖生长量和形成优势数明显优于固体培养。在"环球荷鼎×九章梅"杂交种组培小苗根诱导试验中,当活性炭浓度为1 g/L,NAA浓度为0.5 mg/L时,组培苗平均新根数和平均新根长数最大。     

素心建兰无菌播种快繁技术研究

以素心建兰种子为外植体,通过基本培养基(1/2MS、花宝1号、改良MS)、植物激素(6-BA、TDZ、NAA)等关键因子对素心建兰种子萌发、根状茎增殖、分化等各培养阶段影响的试验,探讨了素心建兰无菌播种快繁关键技术。结果表明:种子无菌萌发较适宜的培养基配方为1/2MS+6-BA3.0 mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+水解乳蛋白2.0g·L~(-1)+活性碳1.0g·L~(-1)+蔗糖30g·L~(-1);根状茎较适宜的增殖培养基配方为改良1号+TDZ 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖30g·L~(-1),45d增殖系数高达7.3;根状茎接种于改良1号+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+白糖30g·L~(-1)培养基上分化培养45d后,再转入1/2MS+IBA 0.5mg·L~(-1)+活性碳0.5g·L~(-1)+白糖20g·L~(-1)培养基上培养60d,可诱导形成完整植株,芽分化率为86.3%,生根率为100.0%。     

不同培养基对牡丹、芍药杂交种胚培养的研究

目前牡丹、芍药远缘杂交种胚的挽救未能建立起高效稳定的体系,杂交种胚珠和幼胚培养的研究也鲜少报道。本文通过对牡丹、芍药杂交败育前的杂交胚进行培养,研究了不同培养基对杂种胚萌发的影响。以牡丹品种‘凤丹白’(Paeonia suffruticosa ‘Feng dan bai’)、芍药品种‘粉玉奴’(Paeonia lactiflora ‘Fen yu nu’)为亲本,进行远缘杂交。本研究以MS为基本培养基,添加不同浓度的激素组合,对杂交种胚正常生长的初代培养基进行了筛选,认为处理为MS+6-BA 1.0 mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1)+3%蔗糖的膨大率,发芽率及发芽势相对较高,是较好的初代培养基。将初代培养基上的幼苗转移至继代培养基上,30 d后发现,各项指标最优的处理为MS+IBA 0.2 mg·L~(-1)+GA3 0.2 mg·L~(-1)+6-BA 0.2 mg·L~(-1)+3%蔗糖,其次为MS+IBA 0.1 mg·L~(-1)+GA3 0.3 mg·L~(-1)+6-BA 0.2 mg·L~(-1)+3%蔗糖。本试验在生根培养30 d后发现,MS+IBA 0.3 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)+3%蔗糖的培养效果较好,根状突起较多,根数及根长都相对较高。胚培养结果表明:培养基种类不同,对胚的诱导分化也有所不同。     

春兰‘黄梅’ב黄荷’杂交F_1根状茎的组培快繁研究

【目的】筛选春兰组培各阶段的最佳培养条件,建立优良的春兰快繁体系,为春兰大规模生产开发提供科学依据。【方法】以春兰‘黄梅’ב黄荷’F1无菌播种形成的根状茎为试验材料,通过基本培养基(1/2MS、改良1/2MS、HyponexⅡ)和植物生长调节剂(6-BA、NAA、TDZ、IBA)等因子不同组合,围绕增殖、分化、生根等阶段建立其再生体系,并对培育出的组培苗进行移栽练苗。【结果】增殖最适培养基为3.0 g·L~(-1) HyponexⅡ+0.5 mg·L~(-1)6-BA+3.0 mg·L~(-1) NAA+1.0 g·L~(-1)活性炭(AC)+30.0 g·L~(-1)白砂糖(Su)+7.0 g·L~(-1)琼脂(Ag),生长速度和增殖系数分别为7.31和6.02;分化最适培养基为2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.3 mg·L~(-1) NAA+30.0 g·L~(-1) Su+7.0 g·L~(-1) Ag,分化率、芽诱导个数和株高分别为90.00%、 5.44个和2.53 cm;生根最适培养基为1.5 mg·L~(-1) IBA+2.0 g·L~(-1)蛋白胨+1.0 g·L~(-1) AC+25.0 g·L~(-1) Su+7.0 g·L~(-1) Ag,生根率、生根数和平均根长分别为100.00%、8.03条和3.00 cm;春兰组培苗练苗移栽60 d后存活率达96.53%。【结论】新型基本培养基HyponexⅡ(3.0 g·L~(-1))对春兰增殖培养有高效促进作用,高水平的IBA(1.5 mg·L~(-1))有利于春兰组培苗生根壮苗。     

植物激素对大花蕙兰丛生芽增殖与生长的影响

[目的]研究不同种类、浓度及配比的植物激素对大花蕙兰丛生芽增殖与生长的影响。[方法]以大花蕙兰试管苗为外植体,接种于附加不同种类、浓度及配比植物激素的MS培养基中进行培养。[结果]不同浓度6-BA、KT、ZT与同一浓度NAA(0.2mg·L~(-1))配比时,均可诱导大花蕙兰不定芽分化丛生芽,实现增殖,但增殖倍率和苗的生长情况存在差异,其中以培养基为MS+6-BA 3 mg·L~(-1)+NAA 0.2 mg·L~(-1)时,大花蕙兰丛生芽增殖倍率最高,达3.57倍,且丛生芽生长健壮,叶片浓绿;在附加ZT的培养基中,丛生芽增殖倍率低,最高为2.07倍,且丛生芽生长较慢,不够健壮,但试管苗不易褐化。同一浓度BA(3mg·L~(-1))与不同浓度IBA配比时,以IBA 1.0mg·L~(-1)时丛生芽增殖倍率略低,为2.03倍,但苗生长健壮,可直接成苗。[结论]不同植物激素对大花蕙兰丛生芽增殖和生长的影响不同,其最适宜培养基为MS+6-BA 3mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)。     

金线莲的无菌播种和组织培养

金线莲蒴果进行无菌播种成熟期为40~60 d,播种培养基为1/2MS+AC1 g·L~(-1)+香蕉泥100 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1)。增殖培养材料顶芽优于茎段,2个品种间增殖培养基激素最适浓度和配比存在差异。适合金线莲生根壮苗培养基为1/2MS+活性炭1 g·L~(-1)+香蕉泥200 g·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+琼脂5 g·L~(-1)。     

杂交兰的组织培养与快繁技术

以杂交兰的茎尖为外植体进行离体培养,探讨杂交兰的原球茎的诱导、增殖、分化、生根培养,以及练苗移栽等一系列技术措施。结果表明,原球茎诱导的适宜培养基为Hyponex No.1(花宝1号)+6-BA2.0 mg·L~(-1)+IBA 0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎增殖的适宜培养基为花宝1号+6-BA 3.0 mg·L~(-1)+NAA0.1 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);原球茎分化的适宜培养基为1/2MS+6-BA 1.5 mg·L~(-1)+NAA0.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1);生根培养基以1/2MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA1.5 mg·L~(-1)+AC 2.0 g·L~(-1)+香蕉泥20 g·L~(-1)+土豆泥10 g·L~(-1)为佳,移栽基质选用泥炭土∶珍珠岩3∶1成活率高。     

春兰杂交种子无菌萌发及根状茎增殖的研究

研究了杂交塑果的成熟度、植物激素、有机添加物及培养方式对春兰杂交种子无菌萌发和根状茎增殖的影响。结果表明：成熟度为五个月的春兰杂交蒴果萌发率最高,杂交种子高萌发率和中等萌发率的比例也比较高。1/2MS＋0.3 mg/L NAA＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂和1/2MS＋1.5 g/L蛋白胨＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂的培养基配方培养根状茎的增殖系数较高,根状茎生长优良;薄层液体培养有利于根状茎的增殖。     

文心兰杂种胚培养研究

以文心兰‘红狐狸’与‘百万金币’杂种胚为外植体,采用种胚→原球茎→完整植株→移栽的途径,探讨植物生长调节剂、有机添加物等因素对文心兰杂种胚萌发、原球茎分化、生根等各阶段的影响,建立文心兰杂种胚离体培养及植株再生技术。结果表明,适宜萌发的培养基为花宝+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+CM 150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖20g·L~(-1),培养90~100d后相对萌发率为155.6%,原球茎基本不增殖,利于叶的分化;适宜分化的培养基为花宝+6-BA 0.1mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.0g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1),分化率显著最高,为87.8%,添加马铃薯泥能显著提高分化率,促进芽苗的粗壮;将分化的芽苗在花宝+NAA 0.2mg·L~(-1)+马铃薯泥150g·L~(-1)+AC 1.5g·L~(-1)+蔗糖25g·L~(-1)培养基上培养40d后生根率为100%,且根系发达,植株健壮;生根苗炼苗后以水苔作为基质,移栽成活率达91.7%。     

东亚唐棣增殖培养条件的优化

以东亚唐棣(Amelanchier asiatica)无菌试管苗为材料,研究了不同基本培养基、激素组合、蔗糖浓度以及琼脂浓度对东亚唐棣增殖的影响。结果表明:最为适合东亚唐棣增殖的培养基组合为MS+6-BA 1.00mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1)+IBA 0.10mg·L~(-1)+40g·L~(-1)蔗糖+8g·L~(-1)琼脂,增殖系数可达6.83,幼苗叶片生长舒展,苗高和茎的生长量也有了很大提高。试验结果将为东亚唐棣工厂化育苗提供技术指导。     

文心兰离体培养技术研究

应用植物离体培养技术研究文心兰增殖技术。结果表明:文心兰原球茎增殖的最佳培养基为MS+6-BA4mg·L~(-1)+NAA0.4mg·L~(-1)+活性炭1.5g·L~(-1)+蔗糖20.0g·L~(-1);最佳的幼苗分化培养基是1/2MS+6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.5mg·L~(-1)+蔗糖20.0g·L~(-1)+琼脂10.0g·L~(-1)为佳;最佳的壮苗培养基以1/2MS+NAA1.0mg·L~(-1)+蔗糖20 g·L~(-1)+活性炭2.0 g·L~(-1)+黄瓜汁10%为佳。     

哈路比葡萄柚茎段的组培快速繁殖

以成年态葡萄柚的茎段为材料,研究不同激素组合、基本培养基对丛生芽增殖的影响,以及再生苗生根、炼苗与移栽技术。结果表明:(1)WPM+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1)为初代培养的最佳培养基,腋芽诱导率达78.33%;(2)继代增殖的最适培养基为WPM+6-BA 0.75mg·L~(-1)+NAA0.2mg·L~(-1)+蔗糖40g·L~(-1),增殖系数达4.93,芽长达2.62cm;(3)培养基1/2WPM+NAA 0.1mg·L~(-1)+IBA 1.0mg·L~(-1)+蔗糖40g·L-1+AC 0.1%的生根效果最好,生根率达63.33%,株高3.03cm,根粗壮;(4)生根苗移栽成活率达78%以上。     

大花蕙兰原球茎增殖、分化与离体保存的研究

以大花蕙兰原球茎为材料,从培养时间、基本培养基、糖浓度、培养方式及切割方式5个方面探讨了原球茎增殖、分化及离体保存的问题。结果表明,2个月内随着培养时间的延长,原球茎增殖与分化越显著,但培养2个月后,原球茎增殖不明显,分化却持续增加;1/2MS基本培养基利于原球茎增殖与分化,而3MS基本培养基利于原球茎保存;糖浓度的高低对原球茎增殖与分化影响显著,20 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎保存,50 g·L~(-1)蔗糖适于原球茎增殖,而原球茎分化成苗应选用30 g·L~(-1)白糖;在3种培养方式中,固体培养利于原球茎分化,液体振荡培养利于原球茎增殖,液体静置培养利于原球茎离体保存;片状切割法利于原球茎增殖与分化,整体剥离接种法利于原球茎保存。即以2.0 mg·L~(-1) 6-BA+0.1 mg·L~(-1) NAA为激素组合时,以片状切割法接种原球茎于1/2MS+50 g·L~(-1)蔗糖的培养基中并以液体振荡方式培养时利于原球茎增殖;以片状切割法接种原球茎于1/2MS+30 g·L~(-1)白糖的培养基添中并以固体方式培养时利于原球茎分化成试管苗;以整体剥离法接种原球茎于3MS+20 g·L~(-1)蔗糖培养基中并以液体静置方式培养时利于原球茎保存。上述结论为大花蕙兰试管苗快速繁殖与离体保存提供了有效的技术支持。     

郁金香杂交种子萌发和小鳞茎离体形成研究

郁金香(T.gesneriana)为百合科郁金香属多年生球根花卉,颜色绚丽多彩,花型各异,具有极高的观赏价值,在世界范围内广泛的被用在切花、盆栽、绿化等方面。目前,国内用于生产和研究的郁金香品种主要从荷兰等国进口,缺乏具有自主知识产权的郁金香品种已经成为制约我国郁金香产业发展的瓶颈。杂交育种是选育郁金香新品种的主要途径,而杂交种子的萌发和小鳞茎诱导是进行郁金香新品种选育过程中重要环节。目前国内对郁金香栽培品种间的杂交种子萌发及小鳞茎离体诱导的研究尚未见报道。本研究以郁金香栽培品种Aafke为父本,以Eskimo Chief为母本,以杂交后获得的种子为试材,对郁金香种子萌发和小鳞茎形成的影响因素进行研究,以期为郁金香杂交育种工作奠定基础。结果表明:4℃是打破郁金香杂交种子休眠,促进其萌发和小鳞茎形成的最佳温度;0.5%KNO_3处理的种子萌发率最高,达86.7%,且芽长势较强;去除种皮对郁金香杂交种子萌发无明显促进作用;在4℃条件下,培养基1/2MS+蔗糖60g·L~(-1)和1/2MS+蔗糖60g·L~(-1)+琼脂2.8g·L~(-1)是进行小鳞茎诱导的最佳培养基,鳞茎诱导率为40.3%~41.7%,刚形成的小鳞茎近圆形,为乳白色。