猪金属硫蛋白抗体的制备

以自猪肝提取的金属硫蛋白(MT)与牛备清白蛋白(BSA)偶联物为抗原,免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体。结果表明:加强免疫间隔时间10 d,MT首次免疫量保持在16~32μg/只,加强免疫时用量依次加倍,其免疫效果最佳,可使大部分小鼠抗血清效价达到1∶16以上。随后,将这部分抗血清IgG提纯并达到电泳纯,经直接ELISA鉴定其确为猪MT的特异性抗体,表明可用于酶标记方法检测猪MT。     

猪金属硫蛋白抗体的制备

以自猪肝提取的金属硫蛋白（MT）与牛备清白蛋白（BSA）偶联物为抗原,免疫昆明小鼠以制备多克隆抗体。结果表明：加强免疫间隔时间10d，MT首次免疫量保持在16-32μg／只，加强免疫时用量依次加倍，其免疫效果最佳，可使大部分小鼠抗血清效价达到1：16以上。随后．将这部分抗血清IgG提纯并达到电泳纯，经直接ELISA鉴定其确为猪MT的特异性抗体．表明可用于酶标记方法检测猪MT。     

金属硫蛋白研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类富含巯基、具有金属结合特性的低分子量蛋白质,广泛存在于动物、植物、微生物体内,在个体生长发育及环境适应方面发挥着重要作用。就金属硫蛋白的来源、生理功能、检测方法、应用前景进行综述,为后继的开发应用提供依据。     

金属硫蛋白的检测方法及其应用

金属硫蛋白(MT)是一种普遍存在、富含金属和半胱氨酸的低分子量蛋白质,主要包括Ag、Au、Bi、Cd、Hg、Zn等硫蛋白,MT具有在体内可被金属和其他因素诱导合成的生物学特性。ELISA以其灵敏度高、特异性强且测定相对迅速、方便、无需特殊昂贵的仪器设备、无放射性同位素的污染等特点成为MT定量检测的理想方法。MT在与金属有关的动物机体的生理学研究、某些微量元素营养性缺乏症的诊断、治疗以及保护环境等方面起着重要作用,随着对MT研究的日益深入,不断对ELISA方法的改进,利用ELISA检测MT有着广阔的前景。     

金属硫蛋白的研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类富含半胱氨酸、具有金属结合特性、广泛存在于动物、植物、微生物体内一类低分子量多功能诱导性蛋白。MT具有清除自由基、调节生物体内微量元素浓度、参与重金属的解毒的作用,参与激素的调节、细胞代谢的调节,在细胞增殖分化控制中都有重要作用。就金属硫蛋白的理化性质、提取纯化技术、检测技术、生物学功能等研究进展及应用前景进行综述,以期为其开发应用提供参考依据。     

植物金属硫蛋白的提取及检测

在综合动物金属硫蛋白的提取方法上,摸索了一种用于玉米金属硫蛋白的提取方法.以玉米幼苗叶片为材料,通过本研究所述方法提取了玉米金属硫蛋白(metallothionein,MT)的粗提液,该粗提液的特征吸收峰在290 nm处,且经脱金属处理后其290 nm处特征吸收峰明显降低,经SDS-PAGB检测,在分子量14 Kda附近有单一条带,表明所获粗提液中含有玉米金属硫蛋白.     

镉诱导黄瓜金属硫蛋白的分离、纯化和鉴定

[目的]通过不同浓度Cd2+诱导黄瓜产生金属硫蛋白,探寻植物金属硫蛋白含量与Cd2+浓度关系。[方法]用不同浓度Cd2+诱导黄瓜幼叶组织产生金属硫蛋白,经Sephadex G-50凝胶过滤层析纯化后用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定黄瓜金属硫蛋白的分子量。[结果]1 000 mg/LCd2+诱导黄瓜幼叶产生金属硫蛋白的产量最高,可达2.62μg/g。黄瓜金属硫蛋白的分子量为9.5 kD。[结论]黄瓜是一种对Cd2+敏感的植物。Cd2+诱导的金属硫蛋白含量与Cd2+浓度呈正相关。     

海洋生物金属硫蛋白开发利用研究进展

金属硫蛋白(Metallothionein,MT)是一类普遍存在于生物体内的富含半胱氨酸且可以结合金属的特殊蛋白质。就MT的理化性质、生理功能以及开发利用进行了总结,着重介绍了海洋生物MT的特点以及研究现状,并对其今后的研究方向提出了展望。     

白桦金属硫蛋白的生物信息学分析（英文）

[目的]分析白桦金属硫蛋白的生物信息学信息,为后续基因重要功能研究奠定基础。[方法]利用生物信息学方法和工具对白桦（Betula platyphylla）金属硫蛋白（metallothionein,MT）的理化性质、跨膜结构、疏水性/亲水性、二级结构、结构功能域、功能分类进行了分析和预测。[结果]金属硫蛋白的分子量为7.75 kD,等电点为5.66,中部有较强疏水区,而其两端为明显亲水区,其可能为非跨膜蛋白,主要构件为卷曲,属于Metallothio_2蛋白家族。[结论]该研究可为白桦金属硫蛋白基因功能研究提供参考。     

金属硫蛋白作为重金属污染生物标志物的研究进展

金属硫蛋白(MT)是一类普遍存在于生物体内的低分子量、富含半胱氨酸、热稳定性、可诱导型非酶蛋白,具有维持生物体内金属含量动态平衡和重金属解毒作用双重机制.大量研究表明,MT可作为重金属污染的生物标志物,用来预测生物体受重金属暴露的状况和重金属污染的压力,且对制定预防性的管理措施、及时监控环境污染皆具有重要的现实意义.本文根据国内外文献资料查阅及综合分析,主要阐述了金属硫蛋白的基本结构、多态性、生理功能及其作为生物标志物在环境污染检测与诊断方面的研究与应用.并展望其今后研究方向.     

铜、钼、硫对肝细胞浆液内咪噻宁代谢的影响(Ⅱ)

本文通过一系列试验指出:1、硫钼酸盐可明显地减少大鼠的肝、肾、肠内与MT结合的铜浓度,尤以肝、肾最明显,而对Zn-MT的结合作用没有明显影响。硫钼酸盐对牛的肝细胞浆液中与MT结合的铜有类似的影响。同时它还有延迟静脉注射的铜进入肝浆与MT结合的作用。2、饲料中添加钼和硫后,于第1个月内,肝内MT浓度在肝铜大量丢失之初,由于肝内可动员铜大量释放,Cu-MT浓度增加,随后则逐渐降低。3、铜可以诱导缺铜牛肝浆内MT的合成,这种合成作用在静脉注射铜后6-10h开始,于24～48h达到峰值浓度。铜诱导了肝浆液中MT合成以后,不仅Cu-MT浓度增加,而且Zn-MT浓度也增加。因而提示MT上可能存在着至少两个结合部位,一个结合铜,另一个结合锌。     

植物细胞的皂苷反应研究进展

天然皂苷具有广泛的药理学性质,细胞毒性和皂苷化学预防的作用由一个信号传导途径来调节,这在动物细胞中的作用十分显著。一氧化氮、锌和金属硫蛋白是机体内重要的生物活性因子,它们之间存在着相互作用,一氧化氮能够与金属硫蛋白形成稳定的化合物,引起蛋白质的构象变化和锌的选择性释放,同时参与细胞氧化应激反应,金属硫蛋白除了在重金属解毒上的作用外,还具有抗氧化作用,锌和一氧化氮可以调控金属硫蛋白的表达。植物细胞和动物细胞在皂苷反应方面有共同特点,但植物细胞对皂苷和相关信号传导通路的反应很少,机制也不明确,有待进一步研究。就一氧化氮、金属硫蛋白和锌在植物细胞皂苷反应中的作用加以论述。     

重铬酸钾对泥鳅鳍细胞系的毒理学研究

为探究重铬酸钾的毒性机制,建立适合监测铬污染的体外检测系统,以体外培养的泥鳅Misgurnus anguillicaudatus鳍细胞系(DIMF)为试验材料,研究了重铬酸钾的毒性效应。结果表明:通过噻唑蓝(MTT)比色法测定重铬酸钾染毒后细胞的24 h半致死浓度为(25.3±1.2)μmol/L;暴露在浓度为0~30μmol/L的重铬酸钾中,细胞超氧化物歧化酶(SOD)活性随着染毒浓度的增加而增大;谷胱甘肽超氧化物酶(GSH-Px)在重铬酸钾浓度为0~20μmol/L时活性升高,当染毒浓度为30 mol/L时,活力开始下降;谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性则随重铬酸钾浓度的升高而降低;微核试验显示,DIMF微核率随染毒浓度的增加呈先升高后降低的趋势,其中最大微核率为0.733%;实时定量PCR结果显示,对照组的金属硫蛋白(MT)基因表达量很低,经重铬酸钾诱导后MT基因表达量显著升高(P0.01)。研究表明,重铬酸钾可对细胞的酶系统和遗传物质造成一定的损伤。     

亚硒酸钠对镉中毒预防和治疗的研究

大鼠补饲对亚硒酸钠可以减少镉在体内沉着，促进镉的排泄。在镉污染期间补饲亚硒酸钠虽可使粪便镉排泄增多３．６７％～３５．５７％，尿液镉排泄减少９．５８％～１７．０５％，但差异均不显著，在停止镉污染后继续补饲硒，则可大大促进镉的粪、尿排泄，补饲硒越多，排泄镉越多。试验中补饲５，１０，１７ｍｇ／ｋｇ饲料硒，与未补硒的相比，可分别使粪便镉排泄增多５８．４０％，１０５．７８％，１７１．１７％，尿镉排泄分别增多２８．５７％，３３．４２％，１２６．９８％，差异极显著。这一现象可能与硒在体内促使与金属硫蛋白结合的镉向分子量较大的蛋白质转移，并有利于向胆汁或尿液排泄有关。     

Overexpression of metallothionein confers resistance to anticancer drugs

Resistance to antineoplastic agents is the major obstacle to curative therapy of cancer. Tumor cell lines with acquired resistance to the antineoplastic agent cis-diamminedichloroplatinum(II) overexpressed metallothionein and demonstrated cross-resistance to alkylating agents such as chlorambucil and melphalan. Human carcinoma cells that maintained high levels of metallothionein because of chronic exposure to heavy metals were resistant to cis-diamminedichloroplatinum(II), melphalan, and chlorambucil. Furthermore, cells transfected with bovine papilloma virus expression vectors containing DNA encoding human metallothionein-IIA were resistant to cis-diamminedichloroplatinum(II), melphalan, and chlorambucil but not to 5-fluorouracil or vincristine. Thus, overexpression of metallothionein represents one mechanism of resistance to a subset of clinically important anticancer drugs.     

大珠母贝金属硫蛋白cDNA克隆与序列特征分析

[目的]探讨重金属对大珠母贝苗种存活的影响。[方法]对大珠母贝金属硫蛋白基因进行克隆和序列分析。[结果]结果表明,通过构建大珠母贝外套膜全长cDNA文库,首次克隆得到大珠母贝金属硫蛋白（PmMT）全长cDNA序列。该序列全长599 bp,5′UTR（Un-translated region）为75 bp,3′UTR为296 bp,开放阅读框（Open reading frame,ORF）为228 bp,编码75个氨基酸。编码的氨基酸中半胱氨酸含量丰富,达29.3%;赖氨酸和甘氨酸含量也较高,均为9.3%;不含苯丙氨酸、组氨酸、色氨酸和酪氨酸等芳香族氨基酸;含有软体动物等无脊椎动物金属硫蛋白的特征序列。序列特征分析表明,该序列具备金属硫蛋白的典型特征,是金属硫蛋白家族成员。[结论]该研究为海洋贝类金属硫蛋白的进化及功能研究提供基础资料。     

ABC—Dot—ELISA快速检测食品中单核白细胞增多症李氏杆菌

本实验采用ＡＢＣ一Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ检测食品中单核白细胞增多症李氏杆菌。该法可检出在蛋白胨增菌液中接种的单核白细胞增多症李氏杆菌．其敏感性可达１０４个／ｍｌ，比Ｄｏｔ—ＥＬＩＳＡ约高１０—１００倍．特异性检测表明，其不与沙门氏菌、小肠结肠耶氏菌、蜡样芽胞杆菌、副溶血性弧菌发生交叉反应，但与葡萄菌和大肠杆菌有交叉反应．该法在２６ｈ内可报告结果，比常规法快３—５ｄ。对２３１份各种食品进行检测，检出４１份，经生化试验复检，３８份为单核白细胞增多症李氏杆菌，阳性率１６．４５％，假阳性率７．３２％，常规法的检出率１７．３１％。两种方法比较，结果相差不显著（Ｐ＞０．０５）。进行３次重复性试验，结果完全相同。实验结果表明，该法操作简便快速，具有较高的特异性和敏感性，可在２６ｈ报告结果，适于对大批样品进行快速检测，便于基层推广使用．     

作物品种区域试验非平衡资料的分析方法——综合性状的分析

运用混合线性模型的分析原理,提出了作物区域试验非平衡数据的综合分析方法,用MINQUE法估算各性状的方差分量和成对性状的协方差分量,然后对品种效应的综合线性对比作显著性测验。对品种综合性状稳定性分析,用Jackknife数值重复抽样方法计算回归参数的估计值及其标准误,并通过分析回归参数置信区间来综合评价品种稳定性。作为综合分析区域试验非平衡数据的实例,分析了黄河流域棉花区域试验的纤维强度和皮棉产量。