降烟碱解淀粉芽孢杆菌和边缘假单胞菌 原生质体融合选育高效降烟碱菌株

获取1株高效降解烟碱的融合子,以解淀粉芽孢杆菌T11和边缘假单胞菌作为亲本菌株,使用溶菌酶破除亲株细胞壁后以40%PEG-6000诱导解淀粉芽孢杆菌T11原生质体和已热力灭活的边缘假单胞菌原生质体进行融合,并检测了融合子的降烟碱能力。对融合子利用青霉素抗性初筛获得了176株再生融合子,利用烟碱降解率为指标进行降烟碱复筛实验后获得5株烟碱降解能力较高的融合子。根据融合子遗传稳定性分析及与亲本菌株烟碱降解效率的对比,获得了1株烟碱降解率比亲本菌株更强的融合子A2。获得的高效降解融合子A2在第5天后其烟碱降解率基本稳定在93%。     

微生物对烤烟叶片烟碱含量的影响

此项研究用微生物菌株培养液喷洒烤烟采收后上、中部烟叶,烘烤结束后测定烟叶化学成分及内在品质的变化情况。结果表明,供试菌株对烟叶化学成分和评吸品质均有一定的影响。各菌株对不同部位的烟碱含量影响显著,中部烟叶1￣6号菌株处理以4号菌株效果最好,烟碱降解率达36.9%;上部烟叶1￣11号菌株处理以9号菌株效果最好,烟碱降解率达37.25%,其次依次为10号、4号菌株,烟碱降解率分别为22.80%、19.86%;就4号、9号、10号菌株处理的烤烟单体烟叶感官质量评吸结果表明,4#、9#菌株处理综合得分均高于CK,处理后香气量有所提高,香气质有改善,劲头明显下降,刺激性明显减弱,杂气明显减轻,余味好于CK。     

高效芽孢杆菌对烤烟生长及产质量的影响

为了改善烤烟生长发育水平,进一步提升烟叶品质,采用田间对比试验,对高效芽孢杆菌在烤烟上的应用效果进行了研究。结果表明：施用高效芽孢杆菌灌根处理烟株田间长势较好,在高浓度水平下上部叶开片优于常规生产,其烤后烟叶均价以及上等烟比例等经济性状较高,B1F和B2F等级烟叶的比例得到了提升,改善了上部叶的等级结构水平。在烟叶质量方面,施用高效芽孢杆菌处理后烟叶油分有增加趋势,上部烟叶烟碱含量有下降趋势,化学成分相对协调,改善了烟叶香气质和香气量感官评吸水平。综合结果表明,高效芽孢杆菌在高浓度水平下(T1和T2)灌根施用较适宜烤烟生产应用。     

一株烟碱降解菌的筛选及改善烟叶品质的研究

从植烟土壤和废弃烟叶中分离筛选出降烟碱能力较高的一株新菌株Y523,并对该菌株培养发酵条件进行优化.结果表明:2％葡萄糖和0.2％( NH4)2SO4作为外加碳氮源可明显促进烟碱降解.适宜的发酵条件为:温度30℃、初始pH值7.0、发酵时间36 h.采用Y523菌液进行烟叶烘烤应用试验,理化指标测定结果显示,烘烤后烟叶中烟碱含量均有不同程度的降低,上部烟叶降烟碱效果最好,烟碱降解率达到28.7％,中部烟叶和下部烟叶烟碱含量分别降低了20.9％和15.8％;烘烤烟叶糖碱比、氮碱比协调,上部烟叶品质得到改善和提高.     

烟碱降解的分子生物学研究进展

介绍了烟碱降解的分子生物学研究进展,阐述了嗜烟碱节杆菌及其新酶,以及假单胞菌属细菌降解烟碱的分子生物学机理。     

茅台酒致香微生物对烟叶致香成分影响

为探明茅台酒致香微生物在烟叶醇化中的应用效果,采用单因素法,进行烟叶不同部位(上部烟叶,中部烟叶,下部烟叶)、不同温度(30℃,40℃,50℃)和不同发酵时间(10d,15d,20d,25d)的单菌液(枯草芽孢杆菌)和混合菌液(枯草芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌和解淀粉酶芽孢杆菌)发酵试验,研究不同处理对烟叶致香成分含量的影响。结果表明:烟叶的致香成分含量上部烟叶以复合菌处理的较高,中部和下部烟叶以单菌处理的较高;发酵温度控制在30~40℃较为适宜,30℃时复合菌处理烟叶的致香成分含量最高,40℃时单菌处理的最高;发酵时间控制在20~25d较为适宜,20d时以单菌处理的致香成分含量最高,25d时复合菌处理的最高。以茅台酒致香微生物对烟叶进行发酵处理,上部烟叶选择复合菌处理,30℃发酵25d致香成分含量较高;中部和下部烟叶选择单菌,40℃发酵20d致香成分含量较高。     

远缘原生质体融合菌株的构建及生防作用研究

研究基于沼泽红假单胞菌PSB-06促生和增强寄主抗病性，苏云金芽孢杆菌KY-1抗逆性强等优点，采用原生质体融合技术获得这2种菌株的融合菌株，测定了融合菌株对生姜根结线虫的防治效果，以期得到综合亲本优良性状的新型高效生防菌株。结果表明：融合菌株显著降低了土壤根结线虫的数量，收获期相对防效达73.68%；融合菌株处理显著提高了生姜的农艺性状、产量和品质，单株姜球数（13.80个）、姜球宽度（33.47 cm）和单株产量（1.29 kg）均优于空白对照；同时提高了生姜收获期叶片的总叶绿素含量、POD和SOD活性。综合来看，沼泽红假单胞菌和苏云金芽孢杆菌融合菌株的促生及生防潜力较亲本沼泽红假单胞菌有所提高，为微生物菌种改良提供了依据。     

节杆菌降烟碱增香作用机理的初步研究

利用节杆菌属细菌(Arthrobacter sp.)降解烟碱是国际研究的热点,Arthrobacter sp.4号菌株和9号菌株是本实验室分离筛选出的具有较佳降碱增香作用的优良微生物菌株。本研究通过节杆菌胞内、胞外分离物进行降解烟碱测试,测试液中均无明显的颜色变化,吸光值也较小,说明其对烟碱的降解机理比较复杂,因此当以降低烟叶烟碱含量为目的时,不能直接使用其无菌滤液。     

一株烟碱降解菌的选育及其应用研究

[目的]寻求有效降低烟草中烟碱含量的方法。[方法]从延安卷烟厂发酵装置的废水中分离纯化出1株高效降解烟碱的细菌,并利用该菌制成的粗酶液作用于某等级烟叶,考察其是否可以降低烟碱含量,改善烟叶品质。[结果]利用含有烟碱的选择培养基共分离纯化出71株能够分解利用烟碱的细菌,其中W9菌分解能力最强,降解试验表明,该菌在烟碱含量1.4%左右的烟碱水提液里经16 h摇床培养,烟碱可被完全降解。将该菌的粗酶液喷施在烟叶上,经数天室内发酵后,评吸结果表明,刺激性、劲头明显降低,抽吸品质得到明显改善。[结论]研究表明,该菌在降烟碱含量及改善烟叶品质方面具有一定的应用前景。     

高烟碱耐受力降解菌Arthrobacter sp. AH14的鉴定及其降解条件的优化

烟碱是烟草生物碱的主要成分,其含量高低直接影响着烟叶的品质,目前我国的卷烟企业面临着因上部烟叶烟碱含量高而难以较多地用于叶组配方的难题。此外,因烟碱具有毒性,如何将其从烟草废弃物中除掉是烟草行业面临的又一大难题,因此寻找一种简单、低耗、环保的方法来降解烟碱十分重要。前期分离保存了一株能够降解烟碱的细菌AH14,从形态结构特征、生理生化特性、16S r DNA序列分析以及构建系统进化树等方面对其进行鉴定,结果表明AH14为节杆菌(Arthrobacter sp)。以6 g/L的烟碱为唯一碳源,对该菌株降烟碱的条件进行了优化研究,得到其降解烟碱的最适条件为:接种量12.5%、p H 6.5、温度34℃、转速120 r/min。在此条件下,该菌能够在120 h内将6 g/L的烟碱完全降解,14 g/L的烟碱降解率为30.22%。说明菌株AH14具有极强的降解烟碱能力,可应用于降解高浓度烟碱。