猪甘露聚糖结合凝集素的遗传特征及研究进展

猪甘露聚糖结合凝集素是一种重要的天然免疫因子，在防御病原体入侵、病毒识别方面有其独特的功能。近年的研究发现，猪体内MBL的水平与其抗病性相关。本文对猪甘露聚糖结合凝集素的遗传特征、生物学功能及与疾病发生相关性方面进行综述。     

牛甘露聚糖结合凝集素的研究进展

文中对牛甘露聚糖结合凝集素(MBL)的遗传特征、功能及MBL与疾病的相关性方面进行了简要论述,为MBL基因在抗病育种方面的应用提供理论铺垫。     

绵羊甘露聚糖结合凝集素的研究

[目的]为了研究绵羊甘露聚糖结合凝集素(MBL)基因。[方法]以陶塞特羊全血基因组DNA为模板,参考GenBank上牛与人的MBL基因序列合成一对特异性引物,进行PCR扩增,并经回收重组到pBS-T载体,筛选阳性克隆。用DNAMAN软件将部分测序结果同已发表的牛和人MBL序列进行同源性比较,并通过Primer Premier5进行蛋白质氨基酸序列预测。[结果]经PCR扩增获得了549bp的特异性片段。部分测序结果同牛和人MBL序列的同源性分别高达97%和86%,且该DNA序列与牛MBL部分序列编码的氨基酸仅一个之差,证实该序列为绵羊MBL基因的部分序列。[结论]绵羊MBL基因序列的获得,不仅为绵羊MBL基因全序列的获得提供了依据,还有助于进一步揭示MBL的生理和病理功能,对绵羊优良品种的选育具有深远意义。     

3种海绵中的甘露聚糖专一性凝集素

在3种海绵(Myxilla incrustans,Codosphaera sp．,Biemrta variantia)中发现了与甘露聚糖结合的专一性凝集素,甘露聚糖的甘露糖残基是通过α(1→2)和α(1→6)相互联接的。对3种海绵凝集素的血凝抑制测试的结果表明,对于海绵Myxilla incrustarts凝集素而言,猪腺体糖蛋白、脱酸猪腺体糖蛋白、胎球蛋白和脱酸胎球蛋白都是比较好的抑制剂;对于海绵Coelosphaera sp．凝集素而言,仅猪腺体糖蛋白是有效的抑制剂;而对海绵Biemna variantia凝集素来说,猪腺体糖蛋白和脱酸猪腺体糖蛋白是有效的抑制剂。这3种凝集素对自然的和用胰蛋白酶消化后的人体红细胞(B型)都有很好的凝集作用,它们的血凝活性不依赖钙离子的存在。     

长白猪甘露聚糖结合凝集素-C基因的克隆与序列分析

探讨猪甘露聚糖结合凝集素-C基因的分子特征,从分子免疫学角度为猪的抗病育种研究提供理论依据.从长白猪肝脏组织中提取总RNA,经RT-PCR技术扩增pMBL-C基因,与pMD18-T载体连接,获得pMBL-C基因.序列测定结果显示该基因编码区为723bp,编码241个氨基酸残基.与已发表的猪MBL-C具有99%同源性;进化树分析显示与哺乳动物的MBL-C基因,尤其是牛的亲缘关系最近,而与MBL-A基因相差较大,与禽类的最远.该研究为进一步研究猪MBL分子的遗传特征提供了依据.     

和美酵素对产蛋后期蛋鸡生产性能的效应研究

１ 前 言 有文献指出，β－甘露聚糖对单胃动物有不良影响。在肉鸡饲料中加 ２％～４％的 β－甘露聚糖，能明显延缓生长和降低饲料利用率（Ａｎｄｅｒｓｏｎｅｔ ａｌ．，１９６４）。营养医学的研究证明，猪饲料中加入β－甘露聚糖，能减低胰岛素的分泌，妨碍糖和水分的吸收与利用（Ｒｎｙ ｅｔ ａｌ，１９８２），导致生长不良及饲料利用效率下降。 β－甘露聚糖是组成豆科植物细胞壁的重要成分，常用的植物蛋白原料都含有β－甘露聚糖，其中以棕榈粕、豆粕、豆皮及芝麻粕含量较高（见表１）。 和美酵素是细菌发酵产品，主要成分为β－甘…     

猕猴桃采后软化过程中β-甘露聚糖酶活性变化

以米良1号猕猴桃果实为研究材料,探讨其在采后常温贮藏过程中果实软化与β-甘露聚糖酶活性变化情况。结果表明,贮藏期间,随着果实硬度的降低,果实中可溶性固形物含量逐渐增加,果皮和果肉中β-甘露聚糖酶活性均表现出先增加后降低的趋势;而果心中β-甘露聚糖酶活性却保持不断增加的趋势。在整个贮藏期间,果皮中β-甘露聚糖酶活性最高,果肉和果心相对较低。与对照相比,乙烯利处理可以加快果实软化的速度,提高果实可溶性固形物含量,增加果皮、果肉和果心中β-甘露聚糖酶活性;而壳聚糖处理则明显延缓了果实软化的进程和果实可溶性固形物含量增加的幅度,降低了果皮、果肉和果心中β-甘露聚糖酶活性。     

长白猪甘露聚糖结合凝集素A基因的 克隆与原核表达

从长白猪肝脏细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增pMBL-A基因,与pMD18-T载体连接进行TA克隆,得到猪甘露聚糖结合凝集素A(poreine mannan-binding lectin A,pMBL-A)基因.再亚克隆到pPROEXHTb表达载体上,构建重组表达质粒.将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌中诱导表达重组pMBL-A蛋白,通过SDS-PAGE检测蛋白的表达情况.结果成功扩增得到包括完整开放读码框长为875bp的全长cDNA片段,并原核表达了重组蛋白,为进一步研究该蛋白的遗传特征以及为猪遗传育种方面的研究提供依据.     

克隆与原核表达

 从长白猪肝脏细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增pMBL-A基因,与pMD18-T载体连接进行TA克隆,得到猪甘露聚糖结合凝集素A（porcine mannan-binding lectin A,pMBL-A）基因。再亚克隆到pPROEXHTb表达载体上,构建重组表达质粒。将阳性重组表达质粒转化到大肠杆菌中诱导表达重组pMBL-A蛋白,通过SDS-PAGE检测蛋白的表达情况。结果成功扩增得到包括完整开放读码框长为875bp的全长cDNA片段,并原核表达了重组蛋白,为进一步研究该蛋白的遗传特征以及为猪遗传育种方面的研究提供依据。     

同时高产甘露聚糖肽与乳酶生发酵条件的研究

[目的]探索同时高产甘露聚糖肽和乳酶生的最佳发酵条件。[方法]以甲型溶血性链球菌H1S-33号为菌株,进行液体发酵培养,在各个时间段分别取样测定活菌数及甘露聚糖肽含量,确定最佳培养条件。[结果]在液体发酵过程中,28h发酵液中甘露聚糖肽含量最高为69.2μg/ml,活菌数最多为2.38×1016个/ml。[结论]同时高产甘露聚糖肽与乳酶生发酵条件为：培养基由牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、氯化钠组成,发酵温度37℃,最佳发酵时间28h。     

产蛋母鸡血循中记忆B细胞数量与卵黄中I_gY效价的关系

应用细胞化学法和精子凝集反应研究鸡血循中记忆B细胞数量与卵黄中抗鸡精子I_gY效价的关系。鸡血涂片按古德全改良法显示记忆B细胞(MBL)。卵黄I_gY用35％硫酸铵溶液提取。I_gY效价用精子凝集反应法检测。结果发现,随着卵黄I_gY效价的升高,血循中记忆B细胞数量也相应增加。这提示血循中MBL数量的增多可作为判断免疫效果的一个指标。     

豌豆凝集素基因转化单倍体烟草

豆科植物凝集素在对根瘤菌的识别中起重要作用。通过农杆菌介导，采用叶盘法将豌豆凝集素基因转化单倍体烟草，获得了转基因再生植株。对转基因植株进行了GUS检测。该转基因单倍体烟草可用于非豆科植物进凝集素对根瘤菌的识别作用研究。     

不同饲养模式对杂交鹿血清MBL抗菌活性的影响

[目的]探索不同饲养模式对杂交鹿血清中MBL抗菌活性的影响.[方法]采用平板计数法研究双阳梅花鹿和清原马鹿杂交F1代MBL的抗菌活性,探讨MBL作为补体功能候选蛋白的可行性,分析MBL抗化脓感染创伤致病菌的活性.[结果]放养模式试验组抗金黄色葡萄球菌活性和抗大肠杆菌活性都显著高于圈养模式试验组、D-甘露糖试验组和N-乙酰基-D-葡萄糖胺试验组（P＜0.05）.放养模式试验组抗金黄色葡萄球菌活性和抗大肠杆菌活性对动物机体的保护作用具有显著的生物学意义.[结论]该研究可为杂交一代肉用鹿的抗病高产育种工作提供一定的理论依据和基础资料.     

冰冻条件下两种外源植物凝集素对水曲柳幼叶叶绿体外膜的影响

水曲柳是我国东北林区重要的造林树种。在其幼叶展开期间经常受到霜浆的危害，如何提高其幼叶的低温抗性对于延长其生长期具有重要的实际意义。从水曲柳幼叶中分离完整叶绿体，然后使具有半乳糖专一性的花生凝集素和大豆凝集素结合至水曲柳叶绿体外膜，此后经－10℃冰冻处理3h，经测试，它们对外膜膜脂的流动性的影响不同。大豆凝集素的 疏水性小于花生北集素的疏水性。大豆凝集素降低了膜脂酰基链和甘油主链的流动性，而花生凝集素则增强了这两个部位的流动性，这与它们的疏水性大小相关。这表明花生凝集素能在冰冻条件下增加水风柳叶的叶绿体外被膜的流动性。     

转基因抗虫棉凝集素的检测

为探讨外源杀虫基因导入对棉花重要防御物质凝集素的影响,同时建立棉花凝集素的灵敏检测方法,采用血凝法检测转基因(Bt、CpTI和外源凝集素基因)棉花中凝集素的变化,并经胰蛋白酶处理鸡血红细胞、不同温度处理和比色法测定棉花的凝集素活性。结果表明,棉花叶片中凝集素水平随棉花生长而发生变化,不同外源基因的导入使棉花凝集活性升高或降低。采用经胰蛋白酶修饰后的鸡血红细胞检测,棉花凝集活性明显提高,最高是未经处理检测的64倍。棉花凝集素具有一定的抗热性,在45℃以下很稳定,但随温度的升高和处理时间的延长活性下降。血凝反应和比色法均能直观、定量地反映棉株中凝集素活性,但后者精度更高。以上研究结果表明,外源杀虫基因的导入引起棉花凝集素水平发生改变,比色法可以作为检测棉株中自身和外源凝集素基因表达后凝集活性的重要手段。