家蚕感染质型多角体病毒（BmCPV）后中肠组织 差异蛋白质分析

【目的】分析家蚕感染质型多角体病毒（Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus,BmCPV）后中肠组织中蛋白质的差异表达,为从蛋白质分子水平上探索家蚕感染BmCPV后的分子应答机制奠定基础。【方法】通过蛋白质双向凝胶电泳技术（two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis,2-DE）对BmCPV病毒感染组和灭菌水对照组家蚕p50的中肠组织蛋白进行比较,通过基质辅助质量飞行时间质谱技术（MALDI-TOF MS）和家蚕蛋白质数据库检索对所得到的差异蛋白点进行鉴定与分析。【结果】2-DE电泳结果比较分析表明,BmCPV感染组和对照组家蚕的中肠组织有8个差异蛋白斑点,其中对照中肠有3个,感染中肠有5个。经MALDI-TOF MS鉴定结果显示对照家蚕中肠中的3个差异蛋白斑点分别为家蚕的类固醇脱氢酶（Hydroxysteroid dehydrogenase）、线粒体电压依赖的阴离子通道孔蛋白（Voltage-dependent anion-selective channel,VDAC）和1个未知新型蛋白;感染家蚕中肠的5个差异蛋白点分别是家蚕的Ras-鸟嘌呤核苷酸释放因子1（Ras-specific guanine nucleotide- releasing factor 1-like,RASGRF1）、H+转运ATP合成酶亚基、候选肿瘤抑制因子（Putative tumor suppressor protein,PDSS2）、多药耐药蛋白（Multidrug resistance-associated protein,MRP4/ABCC4）、冻坏B样蛋白（Nipped-B-like protein- like,NIPBL）。【结论】BmCPV感染可导致家蚕中肠组织多种蛋白的差异表达,提示家蚕可能通过启动不同的机制来应答病毒的感染,其中VDAC的下调表达以及PDSS2、MRP4/ABCC4和NIPBL的上调表达均与诱导细胞凋亡相关,推测家蚕在BmCPV感染的过程中可能启动了细胞凋亡的抗病毒机制。     

家蚕感染质型多角体病毒相关基因Arylphorin的克隆与鉴定

【目的】克隆家蚕Arylphorin的cDNA全长序列,利用生物信息学对该序列进行分析,检测该基因在家蚕感染质型多角体病毒（Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus, BmCPV）后的表达量变化模式,为进一步研究其生物学功能奠定基础。【方法】以家蚕中肠总RNA为模板反转录合成cDNA,利用cDNA末端快速扩增（RACE）技术克隆家蚕Arylphorin的全长cDNA;通过实时荧光定量PCR（qRT-PCR）分析其组织表达模式和在家蚕感染BmCPV后的表达差异。【结果】克隆得到了家蚕Arylphorin的全长cDNA（命名为BmAryl）,在GenBank登录号为JN581664。该基因的cDNA全长为2 260 bp,包含1个26 bp 5′非翻译区和1个143 bp的3′非翻译区,3′非翻译区包含有终止密码子、多聚腺嘌呤信号AATAAA和poly(A)尾。其最大开放阅读框（ORF）为2 091 bp,编码的蛋白由696个氨基酸组成,预测蛋白分子量为82.8 kD,等电点为6.07。多序列比对和系统进化分析发现,家蚕BmAryl蛋白与家蚕的性别专一贮藏蛋白2相似性最高,为66%。BmAryl主要在家蚕的脂肪体和血淋巴中表达,精巢和卵巢中的表达量无明显差别;而在家蚕感染BmCPV后该基因在中肠的表达量明显下调。【结论】成功克隆获得BmAryl的全长cDNA,其编码的蛋白质属于芳香蛋白家族, BmAryl主要在家蚕的脂肪体和血淋巴中表达,不存在性别专一性,且家蚕感染BmCPV后BmAryl在中肠的表达明显下调。     

家蚕质型多角体病毒苏州株基因组片段2的克隆与分析

为了探讨呼肠孤病毒科依赖RNA的RNA聚合酶(RNA-dependent RNA polymerase,RDRP)基因的遗传与变异,通过RT-PCR对家蚕质型多角体病毒(Bombyx mori cytoplasmic polyhedrosis virus)苏州株(BmCPV-suzhou)的S2片段进行了分段克隆,对各克隆的测序结果进行拼接,获得了S2片段的全长序列.分析显示,BmCPV-suzhou S2片段的全长为3 854 bp(GenBank登录号:CQ924586),含有1个3 678 bp的编码RDRP基因的开放阅读框,并分别在5′和3′端发现了保守序列AGUAA和GUUAGCC.RDRP的氨基酸序列比对分析结果显示,BmCPV-suzhou与BmCPV-china、BmCPV-1、舞毒蛾(Lymantria dispar)CPV-1(LdCPV-1)、马尾松毛虫(Dendrolimus punctatus)CPV-1(DpCPV-1)、舞毒蛾CPV-14(LdCPV-14)、棉铃虫(Heliothis armigera)CPV-14(HaCPV-14)的相似性分别为99%、97%、94%、94%、54%、55%.基于RDRP氨基酸序列的系统进化分析表明,BmCPV的不同株系与LdCPV-1、DpCPV-1聚为一类.     

家蚕对核型多角体病毒（NPV）抗性的遗传学研究

】以１０个家蚕原种和２个杂交种为材料,采用机率分析法研究了不同家蚕品种对ＮＰＶ的抗性差异。结果表明,不同家蚕品种对ＮＰＶ的抗性差异极显著。抗性主要受微效多基因控制,并具有偏父遗传现象。日本系统的品种的抗性比中国系统的品种强。     

异源多角体蛋白包装对重组家蚕核型多角体病毒感染性的影响

 将 Ac MNPV的 polh基因克隆到缺失 polh基因的 Bm NPV(API4)基因组中 ,得到被 Ac MNPV多角体蛋白包埋并可表达慈菇蛋白酶抑制剂的重组病毒 Bm NPV(OAc- API4)。发现它的芽生型病毒能感染家蚕细胞和经皮下注射感染家蚕幼虫 ,但包埋型病毒不能经口感染家蚕幼虫。     

家蚕中肠组织感染质型多角体病毒的应答基因分析

 【目的】筛选家蚕（Bombyx mori）中肠感染质型多角体病毒的应答基因,为阐明家蚕感染质型多角体病的分子机制奠定基础。【方法】 应用含有约23 000个家蚕基因组寡核苷酸芯片比较分析感染家蚕质型多角体病毒24、48及72 h的中肠试验组与中肠对照组的差异表达基因;结合生物信息学工具对差异表达基因的功能注释、分类及涉及的信号通路等进行分析;应用实时荧光定量PCR验证17个基因的差异表达。【结果】 在感染24、48及72 h后,分别得到了9、51及258个差异表达基因。KEGG通路分析表明,在感染48及72 h后,大多数涉及到代谢通路的基因的表达水平下调,所有涉及到核糖体通路和蛋白酶体通路的基因的表达水平上调。一些免疫相关基因如丝氨酸蛋白酶抑制剂、脂酶、热激蛋白、细胞色素P450、核糖体P0蛋白等基因的表达水平上调。【结论】经荧光定量PCR验证的差异表达基因可能与家蚕感染质型多角体病毒的应答机制相关,研究结果为从分子水平上阐明家蚕感染质型多角体病毒的致病机理提供了新的研究方向。     

质型多角体病毒防治马尾松毛虫试验

于１９９３年５月，在广东省阳西县程村镇进行质型多角体病毒防治第一代马尾松毛虫试验。示范试验３种处理的病毒用量为１５Ｇ ＰＩＢ／ｈｍ＾２，７５Ｇ ＰＩＢ／ｈｍ＾２，１５０Ｇ ＰＩＢ／ｈｍ＾２，虫口减退率分别为４１．３％，７５．９％，８０．４％，对照区的虫口减退率为１７．１％。大田试验虫口减退率为７５．６％，两种试验结果基本一致。     

木毒蛾质型多角体病毒的研究

<正>木毒蛾(Lymantria xylina Swinhoe)是木麻黄的重要害虫。该虫分布广,蔓延快,食量大,严重危害着我省沿海10多万亩木麻黄防护林。为了多渠道开辟木毒蛾生物防治的途径,我们于1983年5月在福建省平潭县木麻黄林内对各种类型的自然感病死亡的木毒蛾幼虫进行调查,新发现一种质型多角体病毒。通过人工感染试验,证实木毒蛾质型多角体病毒具有较强的感病力。木毒蛾质型多角体病毒(cpv)是国际上首次发现,现将观察试验结果报告如下。     

落叶松毛虫的质型多角体病毒

在对落叶松毛虫进行综合治理研究时，从得病幼虫体内分离出一株质型多角体病毒（ＤｓＣＰＶ）。鉴于该病毒在国内未见报道，对其进行了形态、生物测定、组织病理及林间防治试验，结果质型多角体为０．１６μｍ×１．５７μｍ；病毒粒子为１６．０ｎｍ×５８．１ｎｍ；３龄和５龄落叶松毛虫幼虫的ＬＣ５０分别为２．８１×１０４ＰＩＢ／ｍＬ和７．１７×１０４ＰＩＢ／ｍＬ；该病毒感染幼虫中肠７２ｈ后形成多角体，１４４ｈ后形成大量的多角体。用１．１７×１０８ＰＩＢ／ｍＬ浓度的病毒悬液进行林间防治试验，其死亡率达８２％以上，平均达８４．６２％。     

家蚕对核型多角体病毒病抵抗性及遗传规律的研究

用几率值分析法和浓度(对数)—死亡率几率关系曲线法,研究家蚕对NPV病毒经口感染的抵抗性遗传规律。结果显示:家蚕对NPV病毒经口感染的抵抗性遗传方式受一对主效基因和若干微效基因控制;杂交后代(F1、F2)对于该病毒的抵抗性有偏父遗传现象,杂交一代的抗病性表现出杂种优势。     

家蚕的抗氟性及其与数量性状的相关研究

测定家蚕幼虫抗氟中毒的抵抗能力,4龄>3龄>2龄。强抗原种杂变组成的杂种一代,抗性介于两亲之间,弱抗原种杂交组成的杂种一代,其抗性表现出超亲的遗传现象,不同浓度的氟素对品种间的生长发育影响有着显著的差异,说明了品种间的抗氟能力存在着差别;抗氟性与DNV抗性有着显著的相关性;与茧质性状表现为不显著的正相关,抗氟性与蚕血中Ca~(2+)、Mg~(2+)含量无明显的相关关系。     

因子分析及其在作物性状相关研究中的应用

因子分析是一种比较新颖的多元统计方法,国外在许多领域广为应用,但国内农学界尚未引起重视。本文结合春小麦主要农艺性状的相关分析资料对因子分析的原理、方法和步骤进行了较为详尽的讨论。初步认为因子分析的结果可以用来指导育种实践,按单个因子即性状群进行选择比按单个性状选择的效果要好。     

小麦抗赤霉病性与产量性状的相关分析

对1975、1976、1979和1984年小麦品种资源进行了抗赤霉病性与产量性状的简单相关分析,并对1984、1985年小麦中抗—抗赤霉病品种(系)进行了表型相关、遗传相关和环境相关分析。小麦抗赤霉病性与株高、每穗粒数、穗中部最大小穗粒数表现正相关;与穗长关系不密切;与每穗小穗数和单株有效穗数没有相关;与小穗密度及千粒重的相关性较复杂,表现为正相关或负相关。小麦抗赤霉病新品种(系)的丰产性状已有改进,植株高度明显降低,每穗粒数和千粒重有所提高。     

三眠蚕与四眠蚕生长及主要经济性状差异研究

三眠蚕末龄与四眠蚕末龄的生长规律比较相似,三眠蚕末龄与四眠蚕末龄体重饲料效率变化有相似倾向;四眠蚕的生长程度、茧期成绩和卵量比三眠蚕高,但三眠蚕的体重、全茧量和卵量的饲料效率比四眠蚕高。     

陕西家蚕品种资源耐氟性调查初报

用氟每指数法对88个家蚕品种资源的耐氟性进行调查试验及其相关性分析,结果显示：在调查试验的中系品种中,耐氟性强、中、弱、敏感品种数分别为5,7,12,13个;日系品种中,耐氟性强、中、弱、敏感品种数分别为21,9,4,7个;欧系品种中,耐氟性强、中、弱、敏感品种数分别为7,2,0,1个。品种的耐氟性与其虫蛹率呈显著正相关,与体重增长倍数、就眠率呈极显著正相关,而与眠起率、全茧量、茧层量、茧层率无明显直线相关关系。     

与黄瓜早熟性有关的主要农艺性状的相关与通径分析

对与早熟性相关的12个农艺性状进行相关性和通经分析。相关分析表明，采瓜数、座瓜率与前期产量呈极显著正相关；第一雌花花期、始收期与前期产量呈显著负相关。通经分析表明，商品瓜日增克数、座瓜率、采瓜数、第一雌花花期对前期产量有直接效应；始收期对前期产量有间接效应。     

春小麦数量性状的相关和通径分析

为了明确小麦主要数量性状之间的相关关系以及各性状对单穗粒重的贡献大小，本试验选用了２０个小麦品种（系），针对１５个主要数量性状进行了研究．结果表明：单穗粒重、千粒重、每穗粒数、第１节长的遗传力很高；每穗粒数与单穗粒重呈极显著正相关，株高、千粒重、第１节、第２节与单穗粒重呈显著正相关；株高、Ｉ２、每穗小穗数、千粒重对单穗粒重的遗传直接通径为正贡献，每穗粒数、第１节、ＩＬ、第２节通过Ｉ２，穗长通过每穗小穗数对单穗粒重的间接贡献较大。     

菜豆荚和叶对炭疽病(Colletotrichum lindemuthianum)的抗性及其相关性的研究

本文研究了24个菜豆品种和材料的荚和叶对炭疽病的抗性。结果表明,5个品种荚部表现免疫,其中3个品种叶片表现高抗。荚和叶的抗病性具有相关性(r=0.6796)。离体荚喷雾接种法适宜于荚部抗病性鉴定。