双酶水解麦胚制备抗氧化肽的工艺优化

以麦胚为原料,制备具有抗氧化活性的麦胚肽。对碱性蛋白酶Alcalase 2.4 L与胰蛋白酶双酶组合酶解麦胚的工艺进行优化。以水解度和1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基清除率为考察指标,探讨酶与底物浓度的比值([E]/[S])、酶降温度和酶解时间对制备麦胚抗氧化肽工艺的影响,采用Box-Behnken中心组合设计和响应面法(RSM)优化了麦胚双酶水解的工艺条件。结果表明:双酶水解麦胚制备抗氧化肽的工艺条件为底物浓度10.0%、碱性蛋白酶与胰蛋白酶酶活比1∶1、[E]/[S]为0.041 3、酶解温度50.3℃、酶解时间2.03 h、pH8.0。验证试验表明,在此条件下,麦胚水解度和抗氧化肽对DPPH自由基清除率分别为16.65%和50.16%;其抗氧化活性小于10 mg/ml VC。     

双酶水解黄粉虫水溶性蛋白制备抗氧化肽的研究

以黄粉虫幼虫的水溶性蛋白为原料,利用碱性蛋白酶和胰蛋白酶水解制备抗氧化肽,并对其水解工艺进行优化。以.OH清除率为指标,在单因素的基础上设计3因素(加酶量、pH和酶解温度)3水平的二次正交旋转组合试验。结果表明,双酶水解的最佳工艺条件为:m(料)∶V(液)=1∶20、水解时间2 h、加酶量17.36 mg/g(碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶活比为1∶1)、pH8.0、温度46.5℃。在此条件下制得的多肽具有较强的还原力,对DPPH.和.OH有较强清除作用。     

象拔蚌酶解制备抗氧化肽的工艺研究

[目的]探讨酶解象拔蚌蛤肉制备抗氧化肽的最佳工艺条件。[方法]采用复合蛋白酶对象拔蚌蛤肉进行酶解获得抗氧化肽,以羟自由基清除率及蛋白水解度为指标,通过单因素试验与响应面分析法对酶解工艺条件进行优化。[结果]象拔蚌蛤肉的最佳酶解工艺条件为料水比1∶11.11,加酶量3 000 U/g,酶解时间1.2 h,酶解温度55℃,pH 7.52;在该条件下,酶解液获得较高的蛋白水解度,同时对羟基自由基和DPPH自由基显示出很好的清除效果,其EC50值分别为11.26和37.75 mg/ml。[结论]该研究为象拔蚌保健食品的开发提供了依据。     

双酶水解鱼鳞蛋白制备ACE抑制肽的工艺优化研究

本试验的原料为脱钙鱼鳞粉,以ACE抑制率为指标,用胃蛋白酶、胰蛋白酶先后水解并进行单因素和正交优化试验,确定制备ACE抑制肽的最佳条件。结果表明,胃蛋白酶水解脱钙鱼鳞粉的最佳酶解条件:当胃蛋白酶的添加量为6%,料液比1∶50(g/ml),水解时间2 h时,鱼鳞蛋白的ACE抑制率为84.89%;胰蛋白酶水解脱钙鱼鳞蛋白的最佳酶解条件:胰蛋白酶的添加量为6%,水解时间2 h,此时ACE抑制率为93.37%。     

响应面法优化酶解海洋低值鱼肉制备抗氧化肽工艺

[目的]优化碱性蛋白酶制备海洋低值鱼抗氧化肽的工艺。[方法]以DPPH自由基清除率为指标,在酶解温度、pH、加酶量、底物浓度等条件下进行单因素试验,在此基础上运用响应面法优化碱性蛋白酶酶解低值鱼肉制备抗氧化肽的工艺条件。[结果]在温度54℃、pH 8.8、底物浓度200 g/L、加酶量2 500 U/g的条件下酶解3 h,得到抗氧化肽的DPPH自由基清除率理论值为62.66%,实际值为61.87%,相对误差为1.26%。[结论]该研究为低值鱼抗氧化肽的开发利用提供理论依据。     

双酶直接酶解米糠制备短肽的工艺优化

 【目的】建立在中低温度下直接酶解米糠制备短肽的优化工艺。【方法】采用二次回归正交旋转组合设计优化直接酶解米糠制备短肽的工艺条件,其中总糖含量测定采用蒽酮比色法,水解度（degree of hydrolysis,DH）采用pH-stat法,蛋白质回收率采用凯氏定氮法。【结果】确定直接酶解米糠制备短肽最佳工艺条件为：米糠先经糖酶（viscozyme）反应2 h去除糖类杂质,然后用碱性蛋白酶（alcalase）和胰蛋白酶双酶水解,最适pH 8.2,温度45℃,alcalase与胰蛋白酶酶活比59﹕41,总酶活5 750 U/g底物,水解时间3 h。在此条件下,DH为23.04%,蛋白质回收率为84.33%,酸溶性多肽（TCA-SN）为68.40%,短肽分子量主要集中在1 000 D以下。【结论】在中低温和偏中性（pH 8.2）条件下,采用碱性蛋白酶和胰蛋白酶双酶直接酶解米糠制备短肽,与先提取蛋白后酶解制备短肽的方法相比,具有操作步骤简单、蛋白质利用率高等特点,是一种制备米糠肽的新途径。     

响应面法优化猪血浆蛋白制备铁螯合肽的酶解工艺

应用响应面法对猪血浆蛋白酶解制备铁螯合多肽的工艺进行优化,在单因素试验的基础上,选择pH值、温度、时间为影响因素,水解度为指标,进行三因素三水平的Box-gehnken中心组合试验设计,采用响应面法分析3个因素对响应值的影响 结果表明,制备蛋白粉最佳工艺条件为:pH值为7.7,温度为46.3℃c.时间为7.4 h,在该条件下,蛋白水解度的为35.52％,水解物螫合率为79.41％.该]工艺可为猪血浆蛋白开发利用提供新的思路.     

酶法水解非洲鲫鱼蛋白的优化工艺研究

以水解度和感官评价为指标,通过单因素和正交试验筛选酶法水解非洲鲫鱼的最佳工艺.结果表明:鲫鱼蛋白的较优水解酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶,其中,木瓜蛋白酶对鲫鱼蛋白的较优水解条件是:60℃、pH6.0、料液比1∶5(w/v)、酶用量5%(w/w)、水解4.0 h;碱性蛋白酶的较优水解条件是:酶用量5%、料液比1∶3、65℃p、H 8.0、水解4.5 h;而双酶水解的优化工艺是碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶按1∶3(w/w)混合同时水解,酶用量为5%、料液比1∶5、55℃p、H 8.0、水解4.0 h,水解度最高达30.94%,制得的水解液清亮透明,气味较好,基本没有腥味和苦味.     

响应曲面法优化卵白蛋白抗氧化肽制备工艺研究

为优化酶解卵白蛋白制备抗氧化肽的工艺条件.以酶解物羟自由基(HO·)清除率为指标,在单因素实验的基础上选取实验因素和水平,根据Box - Behnken设计原理采用三因素三水平的响应面分析法,研究底物浓度,酶添加量和水解时间工艺的影响,对酶解条件进行优化研究.结果胃蛋白酶酶解卵白蛋白制备抗氧化肽的最优条件为:底物浓度3.24%、胃蛋白酶添加量11 332.12U/g蛋白、水解时间7.8h.酶解液的羟自由基清除率为44.20%,与预测值的相对误差为4.088%,理论值与预测值基本一致,与模型预测具有较好的拟合性.结论建立的模型在实践中进行预测是可行的.     

蛋白副产物资源开发生物活性肽研究进展

综述了农产品加工中产生的蛋白副产物的主要类型,分析了生物活性蛋白肽的生理功能以及化学方法、物理方法、生物酶法和基因工程等技术手段在蛋白副产物改性中的应用及最新进展,其中生物酶法改性技术易于将蛋白改性到所期望的功能值,是提高蛋白副产物附加值的重要途径,并展望了几种蛋白副产物的开发前景。     

海蛰蛋白质酶水解工艺优化研究

以新鲜海蛰为材料进行海蜇蛋白质酶水解试验.结果表明:木瓜蛋白酶为适宜的海蜇蛋白质水解酶,最适条件为:酶用量2.0%、料水比1:2.在60℃、pH7.0条件下水解8 h,水解液中氨基氮含量达到37.2545 mg/100mL;其次为胰蛋白酶,在酶用量3.0%、料水比1:2、55℃、pH7.5条件下水解8 h,水解液中的氨基氮含量为14.8403 mg/100mL.     

硫酸多粘菌素E 在鸡蛋内的残留量 检测及药代动力学研究

饲养20 只正处于产蛋旺期的母鸡,单笼饲养,以5 mg/kg 体重的单剂量肌注硫酸多粘菌素耘,早晚给 药,2 次/d,连续注射5 d,其余正常饲喂。建立鸡蛋中硫酸多粘菌素E 的高效液相色谱-三重四级杆串联质谱（HPLCMS/ MS）检测方法,从肌注第1 d开始捡蛋并检测鸡蛋内的药物残留,直至药物残留消除。以Winnonlin 药物动力学参 数计算程序处理鸡蛋中药物浓度-时间数据关系,药动学主要参数为院鸡蛋中药物的达峰浓度（Cmax）为1 411.252(依 578.2536) 滋g/kg,达峰时间（Tmax）为6.425844(依0.666114) d,零阶矩曲线下面积（AUC）为10 647.39(依3159.706) 滋g/kg窑d, 吸收半衰期（K01-HL）为2.173256(依1.115728) d,消除半衰期（K10-HL）为2.237842(依1.072385) d,清除率（CL）为 0.000503(依0.000124) L/kg窑d。     

响应面法优化复合酶提取红花黄色素工艺

[目的]采用响应面法确定复合酶提取红花黄色素的最佳工艺条件,为其开发利用提供技术参考.[方法]以新疆伊犁红花为试验原料,在单因素试验基础上,以酶用量、酶解温度、酶解时间、pH为影响因素,以红花黄色素提取率为响应值,根据Box-Behnken中心组合试验原理设计4因素3水平响应面试验,对红花黄色素提取工艺进行优化.[结果]通过响应面分析建立红花黄色素提取率(Y)对酶用量(X1)、酶解温度(X2)、酶解时间(X3)、pH(X4)的二次回归模型:Y=-1.16333+24.9875X+0.14083X+0.6X+0.375X4-0.06875X1X+0.075X1X3+0.4125X1X+0.013X2X4-0.0075X3X4-18.55208X12-0.0016833X22-0.14833X32-0.13208X42(R2=-0.976),该模型拟合程度较好;其中酶用量对红花黄色素提取率有极显著影响(P＜0.01),pH有显著影响(P＜0.05,下同),pH与酶解温度、酶用量与酶解温度间的交互作用对其有显著影响.复合酶提取红花黄色素的最佳工艺条件为:在酶用量(果胶酶:纤维素酶=1:1)0.64％、酶解温度47℃、pH 4.7的条件下酶解2h,红花黄色素提取率达11.59％,与理论预测值11.65％接近.[结论]采用响应面法优化复合酶提取红花黄色素工艺具有较高的可行性,可在实际生产中推广应用.     

羊乳清蛋白ACE及DPP-IV抑制肽的分离纯化与鉴定

使用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶和木瓜蛋白酶对羊乳清蛋白进行水解,分别在不同时间取样,体外测定其ACE抑制活性和DPP-IV抑制活性。通过中空纤维膜超滤、凝胶过滤层析和反向高效液相色谱（RP-HPLC）的手段对酶解产物进行逐步分离和纯化,评价各级分离产物的生物活性;通过液质联用（LC-MS/MS）的方法鉴定多肽的氨基酸组成,根据质谱结果合成多肽。结果表明：中性蛋白酶水解物具有一定的生物活性,双重活性多肽Pro-Pro-Ala-Ser-Glu-Val-Val-Lys-Pro对ACE和DPP-IV均有抑制作用,其IC₅₀值分别是573.32±4.63和2 065.35±22.30 μmol/L。Ile-Pro-Ala-Val-Phe-Lys-Ile-Asp具有较好的DPP-IV抑制活性,其IC₅₀值为964.14±4.09 μmol/L。羊乳清蛋白水解物可以作为食源性材料用于管理伴有高血压的Ⅱ型糖尿病患者的饮食。     

采用响应曲面法优化甘草饮片中甘草酸的超声提取工艺

根据Box-B ehnken的中心组合实验设计原理,在单因素试验的基础上,采用三因素三水平的响应曲面分析法,建立了甘草饮片中甘草酸超声提取的二次多项数学模型,并以甘草酸提取率为响应值作响应面和等高线,考察了浸泡时间、超声时间和液固比对甘草酸超声提取的影响。结果表明,甘草酸超声提取的优化工艺条件为:浸泡时间151.3 m in,超声时间48.8 m in,液固比10.2 mL/g;在此工艺条件下,甘草酸提取率为21.06%。     

响应面法优化竹荪菌托多糖的提取工艺

[目的]优化竹荪菌托多糖的提取工艺,为其开发利用提供技术支持.[方法]以竹荪菌托为原料,通过单因素试验分析提取温度、提取时间、液料比、提取次数对竹荪菌托多糖提取率的影响,并在此基础上采用Box-Benhnken响应面法建立以竹荪菌托多糖提取率为响应值的二次回归数学模型.[结果]通过响应面分析建立竹荪菌托多糖提取回归方程为:Y=12.96+0.29A+0.13B+0.17C-0.13AB-0.039AC-0.014BC-0.34A2-0.27B2-0.34C2(A为提取温度,B为提取时间,C为液料比,Y为竹荪菌托多糖提取率,R2=0.9551),该模型拟合度好;并确定竹荪菌托多糖提取的影响因素顺序为:提取温度＞液料比＞提取时间,其中提取温度和液料比对竹荪菌托多糖提取率有极显著影响(P＜0.01),提取时间有显著影响(P＜0.05),但双因素交互作用对竹荪菌托多糖提取率无显著影响(P＞0.05);竹荪菌托多糖最佳提取工艺条件为:在提取温度82℃、液料比62∶1 mL/g的条件下提取3.1h、提取1次,竹荪菌托多糖提取率为13.016％,与模型预测理论值13.040％接近.[结论]采用响应面法优化竹荪菌托多糖提取工艺具有可行性,可用于实际生产.     

风味蛋白酶水解板栗蛋白工艺研究

为了使板栗中的蛋白质能被人体更有效利用,本研究用风味蛋白酶对板栗浆液中的蛋白质进行水解。以水解度为指标,通过单因素试验和正交试验优化,最终确定了制取板栗蛋白水解液的最佳工艺条件为50℃、pH4.0、时间4h、加酶量0.2%。     

基于虚拟响应面分析的水稻插秧机分插机构参数优化与试验

针对现有高速分插机构参数优化方法盲目性较大或计算复杂的问题,以椭圆齿轮三插臂分插机构为例,采用虚拟中心组合响应面试验设计方法,以插秧株距140mm时的插秧穴口宽度、推秧角度和轨迹高度3个指标为目标函数,以椭圆齿轮偏心率、齿数、行星架初始安装角度和插植臂安装角度4个参数为设计变量,构建响应面回归模型,采用优化算法求解响应面近似回归模型,直接求得一组满足多个约束条件的最佳参数组合。以求解的最佳参数组合:椭圆齿轮偏心率0.18、齿数23齿、行星架安装角度15°、插植臂安装角度25°设计并试制三插臂分插机构。通过理论分析和台架试验,回归模型计算的目标函数值与理论计算值和台架试验实测值之间的最大相对误差为0.668%。分析结果表明:采用虚拟响应面法优化可直接求得满足多个约束条件的参数组合,计算精度较高,提高了高速分插机构参数选择的针对性。     

共固定化双酶水解芝麻粕蛋白制备复合氨基酸研究

以海藻酸钠为载体、戊二醛为交联剂共固定化木瓜蛋白酶和中性蛋白酶,选择合适的固定化工艺,研究水解芝麻粕蛋白的优化条件和共固定化双酶的稳定性。结果表明：共固定化双酶的最佳条件为海藻酸钠3 g.dL^-1,戊二醛25 g.L^-1,氯化钙0.2 g.dL^-1,酶活力回收率为51.28%;水解芝麻蛋白的最佳条件为固液比1：25,pH 6.0,温度60℃,时间7 h,加酶量5 g.dL^-1,氨基氮含量最高为20.65 m g.g^-1,共固定化酶重复使用6次,酶活力仍保持50%以上。